植物產(chǎn)油內(nèi)生真菌的篩選

1、信陽師范學(xué)院大學(xué)生科研項(xiàng)目申請書項(xiàng)目類別（在相應(yīng)序號上劃）1.人文社會科學(xué)研究項(xiàng)目 . 自然科學(xué)研究項(xiàng)目所屬學(xué)科：植物學(xué)課題名稱：植物產(chǎn)油內(nèi)生真菌的篩選申請者：所學(xué)專業(yè)：生物科學(xué)系 （ 院）名稱：生命科學(xué)學(xué)院申請日期：2009 年 10 月信陽師范學(xué)院制項(xiàng)目名稱項(xiàng)目所屬學(xué)科領(lǐng)域成果形式植物產(chǎn)油內(nèi)生真菌的篩選植物學(xué)研究類別AA. 基礎(chǔ)研究B.應(yīng)用研究調(diào)研報(bào)告4 文藝作品5 科技制作6、其他1 學(xué)術(shù)論文2 著作3申請經(jīng)費(fèi)總額800起止時間2009 年 10 月至 2010 年 2 月項(xiàng)目主持人及成員情況類別姓 名主持人項(xiàng)目組其他成員姓 名指導(dǎo)教師所學(xué)專業(yè)生物科學(xué)生物科學(xué)生物科學(xué)生物科學(xué)生物科學(xué)生物

2、科學(xué)生物科學(xué)生物科學(xué)專業(yè)植物學(xué)科研特長真菌的分離培養(yǎng)分子生物學(xué)分析植物分類學(xué)植物生理學(xué)植物生理學(xué)微生物植物分類學(xué)植物學(xué)科研方向植物微生態(tài)學(xué)系（院）名稱生命科學(xué)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院系（院）名稱生命科學(xué)學(xué)院班級7 級生科二班7 級生科二班7 級生科一班7 級生科二班7 級生科二班7 級生科二班7 級生科二班7 級生科二班職稱教授科研分工內(nèi)生菌提取菌株 DNA鑒定植物分類植物生理植物生理內(nèi)生菌培養(yǎng)菌株生理反應(yīng)植物生理簽名項(xiàng)目主要研究內(nèi)容和目標(biāo)(200 字以內(nèi) )：深入野外廣泛采集不同類群植物器官標(biāo)樣，通過室內(nèi)組織分離法收集保存各種植

3、物內(nèi)生真菌不同菌株。對不同植物內(nèi)生真菌菌株進(jìn)行純培養(yǎng)。用試劑檢測顯微鑒定法篩選能產(chǎn)油的真菌菌株。進(jìn)一步研究菌株產(chǎn)油特性，找到高產(chǎn)菌株，運(yùn)用形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方法對高產(chǎn)植株進(jìn)行物種鑒定。論證報(bào)告一、本課題研究的實(shí)際意義和理論意義隨著人類對石油的開發(fā)和利用，石油作為一種不可再生資源而面臨枯竭，近年來，我國的石油產(chǎn)量在增加，但難以滿足工業(yè)發(fā)展以及經(jīng)濟(jì)建設(shè)的需要。面對這些問題，開發(fā)新的產(chǎn)油途徑成為當(dāng)前改變油料缺乏的很好方式，本課題旨在開發(fā)油脂高產(chǎn)真菌，可以為開發(fā)新型能源創(chuàng)造可能，符合可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略，對緩解甚至解決原油產(chǎn)量不足帶來的問題有著很強(qiáng)的現(xiàn)實(shí)性意義。信陽地處溫帶向亞熱帶過渡地區(qū)，動植物資源非常豐

4、富，本課題將對信陽地區(qū)的多種植物的內(nèi)生真菌進(jìn)行培育和篩選，希望得到油脂高產(chǎn)菌株，為進(jìn)一步誘變開發(fā)產(chǎn)油生物提供依據(jù)。二、本課題的研究內(nèi)容、特色和創(chuàng)新之處，預(yù)計(jì)突破哪些難題本課題將對部分植物如十字花科、樟科、唇形科和山茶科的內(nèi)生真菌進(jìn)行分離鑒定篩選和檢測，從中找出油脂高產(chǎn)菌株。真菌屬微生物，有著繁殖力強(qiáng)，生長迅速，適應(yīng)能力強(qiáng)，分布廣等特點(diǎn)，非常適合擴(kuò)大培養(yǎng)，豫南地區(qū)的動植物資源非常豐富，有著很高的開發(fā)潛力，但此類的研究很少。本課題對該地區(qū)的植物內(nèi)生真菌進(jìn)行選擇性研究，大大增加了開發(fā)出新型油脂高產(chǎn)菌株的可能性，這樣即可以以較低的成本獲得較高的收益又可以為進(jìn)一步開發(fā)潔凈新型無污染的新型能源創(chuàng)造條件。由

5、于真菌有分布廣、種類多的特點(diǎn)，本課題必須從大量植物中分離出內(nèi)生真菌并進(jìn)行分離培養(yǎng)，然后用生化方式對其生長產(chǎn)油特性進(jìn)行研究并進(jìn)行廣泛的篩選以發(fā)現(xiàn)油脂高產(chǎn)菌株，為進(jìn)一步開發(fā)提供基礎(chǔ)。三、本課題的研究方法、步驟、可行性論證，研究工作總體安排及進(jìn)度和預(yù)期成果1 研究方法及步驟本課題將對植物用次氯酸鈉、乙醇進(jìn)行處理，并用鏈霉素等抗生素抑制細(xì)菌的生長來獲得真物的內(nèi)生真菌，用普通培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)并進(jìn)一步進(jìn)行分離純培養(yǎng)，達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康?。本課題將按以下六個步驟進(jìn)行：1 1 植物的選擇，以一些產(chǎn)油的植物為主，如樟科、十字花科、唇形科和山茶科，由于此類植物在長期進(jìn)化中和與之共生的真菌之間形成了穩(wěn)定的生態(tài)學(xué)關(guān)系，在此過程

6、中存在著一定的基因漂移，使一些產(chǎn)油基因轉(zhuǎn)入真菌內(nèi)，對這些真菌進(jìn)行研究可以提高選擇效率。1 2 內(nèi)生真菌的提取，采用室內(nèi)組織分離的方法獲得。通過用藥物（次氯酸鈉、酒精等）殺滅病原真菌和其它雜菌，以減少污染，用抗生素處理抑制細(xì)菌的生長，排除干擾從而獲得內(nèi)生真菌菌株。1 3 內(nèi)生真菌的選擇性分離，構(gòu)成植物體的微生物是一個完整的微生態(tài)系統(tǒng)，所以植物體內(nèi)可能有很多種內(nèi)生真菌，所以必須對其進(jìn)行分離以排除種間的干擾。1 4 內(nèi)生真菌的純培養(yǎng)，對分離開的不同內(nèi)生菌株進(jìn)行純培養(yǎng)。1 5 對內(nèi)生真菌進(jìn)行選擇，用生化方法如蘇丹試劑和顯微鑒定的方法進(jìn)行分析選育，以得到產(chǎn)油菌株。1 6 研究產(chǎn)油菌株的生活特性和產(chǎn)油特性

7、，并進(jìn)一步選擇出油脂高產(chǎn)菌株。1 7 對油脂高產(chǎn)菌株進(jìn)行分子生物學(xué)DNA 鑒定，對其進(jìn)行分類。1 8 總結(jié)分析。2 可行性論證由于植物和其內(nèi)生真菌在長期進(jìn)化過程中形成了非常穩(wěn)定的生態(tài)學(xué)關(guān)系，所以植物和真菌之間存在著基因漂移，所以增加了真菌變異的定向性。在植物體內(nèi)大量的內(nèi)生菌中，特別是一些產(chǎn)油植物體內(nèi)很可能存在著個別油脂高產(chǎn)菌株，所以本課題的研究是可行的。3 研究工作的總體安排由于涉及到微生物培養(yǎng)以及選擇的以及鑒定的內(nèi)容，預(yù)計(jì)實(shí)驗(yàn)將需要10 個月的時間，其中在真菌培養(yǎng)階段 20 天為一個實(shí)驗(yàn)周期以獲得植物真菌，選擇鑒定工作約要兩個月的時間。3 預(yù)期成果預(yù)期將獲得2-3 株油脂高產(chǎn)菌株，兩到3-4 篇學(xué)術(shù)論文，并提交一份研究報(bào)告。并使參于研究的本科學(xué)生明顯提高動手實(shí)驗(yàn)的能力，并初步獲得科學(xué)研究的能力。四、研究工作的資料、設(shè)備等準(zhǔn)備情況參加本課題的同學(xué)對植物學(xué)研究有著濃厚的興趣，進(jìn)行了長期的關(guān)注，以信陽師范學(xué)院圖書館以及信陽師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院圖書室的圖書、期刊以及電子期刊雜志為依托集累了大量參考文獻(xiàn)。本課題的實(shí)驗(yàn)，將在信陽師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院的植物微生態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，本實(shí)驗(yàn)室有整套培養(yǎng)、研究、分析植物內(nèi)生真菌的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和儀器，可以完全滿足課題的實(shí)驗(yàn)要求。指導(dǎo)教師意見：產(chǎn)油脂真菌的篩選及產(chǎn)油特性研究是尋找油脂再生資源的途徑之一，為相關(guān)研究者廣