關(guān)于體外診斷試劑校準(zhǔn)品溯源和質(zhì)控品賦值的溯源性說(shuō)明-2

1、天津市體外診斷試劑校準(zhǔn)品和質(zhì)控品技術(shù)審查要點(diǎn)1 范圍本文規(guī)定了對(duì)建立或確認(rèn)測(cè)量正確度為目的的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品賦值的計(jì)量學(xué)溯源性進(jìn)行確認(rèn)的方法，校準(zhǔn)品和質(zhì)控品由生產(chǎn)企業(yè)提供，作為體外診斷試劑的一部分或與其一起使用。適用于體外診斷試劑校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的技術(shù)審查。2 規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過(guò)本說(shuō)明的引用而成為本說(shuō)明的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本說(shuō)明，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本說(shuō)凡是注日期的引用文件， 其最新生物樣品中量的測(cè)量校準(zhǔn)品和控制生物源性樣品中量的測(cè)量 參考測(cè)量生物源性樣品中量的測(cè)量 參考物質(zhì)明達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可以使用這些文件的最新版

2、本。 版本適用于本說(shuō)明。GB/T 21415 - 2008/ISO 17511: 2003 體外診斷醫(yī)療器械 物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源GB/T 19702 - 2005/ISO 15193: 2002 體外診斷醫(yī)療器械 程序的說(shuō)明GB/T 19703 - 2005/ISO 15194: 2002 體外診斷醫(yī)療器械 的說(shuō)明3 術(shù)語(yǔ)與定義下列術(shù)語(yǔ)與定義適用于本說(shuō)明3.1 計(jì)量學(xué)溯源性 metrological traceability通過(guò)一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈，使測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)的值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)，通常與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來(lái)的特性。3.2 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品具有最高的計(jì)量學(xué)特性，其值不必參考

3、相同量的其他標(biāo)準(zhǔn)，被指定或普遍承認(rèn)的測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)。3.3 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)定的，或我國(guó)自行研制的（尚無(wú)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品者）用于微生物（或其產(chǎn)物）的定性鑒定或疾病診斷的生物試劑、生物材料或特異性抗血清。3.4 企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品通過(guò)與相同量的國(guó)際（國(guó)家）標(biāo)準(zhǔn)品和/或進(jìn)口（國(guó)產(chǎn)）試劑比對(duì)而定值的測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)。3.5 濃儲(chǔ)液使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品和/或企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品賦值，作為企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品和或校準(zhǔn)品配制過(guò)程中的母液。3.6 校準(zhǔn)品 Calibritaor具有在校準(zhǔn)函數(shù)中用作獨(dú)立變量值的參考物質(zhì)。3.7 質(zhì)控品用于控制結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性的物質(zhì)。3.8 測(cè)量準(zhǔn)確度 accuracy of measurement測(cè)量結(jié)果與被測(cè)量真值

4、之間的一致程度。4 要求應(yīng)提供校準(zhǔn)品的溯源性資料， 計(jì)量學(xué)溯源鏈的說(shuō)明應(yīng)始于該產(chǎn)品的值，止于計(jì)量上最高參考標(biāo)準(zhǔn)。校準(zhǔn)品如有互換性，應(yīng)提供互換性研究資料。應(yīng)至少提供一批校準(zhǔn)品靶值的賦值 程序及測(cè)量不確定度資料，校準(zhǔn)品如有互換性，應(yīng)提供互換性驗(yàn)證時(shí)對(duì)其賦值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理、修訂的研究資料。質(zhì)控品需提供質(zhì)控品賦值的詳細(xì)資料，包括來(lái)源、賦值、性能測(cè)定等。根據(jù)計(jì)量學(xué)溯源至 SI的可能性及測(cè)量程序和校準(zhǔn)品的不同計(jì)量水平的可獲得性，將計(jì) 量學(xué)溯源鏈的上端分為以下幾種：4.1 測(cè)量結(jié)果可以在計(jì)量上溯源至國(guó)家（國(guó)際）標(biāo)準(zhǔn)品的量。有可用的國(guó)家（國(guó)際）標(biāo)準(zhǔn)品作為參考物質(zhì)，校準(zhǔn)品配制過(guò)程中使用國(guó)家（國(guó)際）標(biāo)準(zhǔn) 品作為參

5、照。溯源至國(guó)家（國(guó)際）標(biāo)準(zhǔn)品，需詳細(xì)提供國(guó)家（國(guó)際）標(biāo)準(zhǔn)品相關(guān)信息，如使用說(shuō)明書、 批號(hào)、質(zhì)量要求、有效期和裝量等。確保校準(zhǔn)品準(zhǔn)確性、精密性、穩(wěn)定性。4.2 測(cè)量結(jié)果不能在計(jì)量上溯源至國(guó)家（國(guó)際）標(biāo)準(zhǔn)品的量。無(wú)可用的國(guó)家（國(guó)際）標(biāo)準(zhǔn)品作為參考物質(zhì)，生產(chǎn)企業(yè)需建立自用的標(biāo)準(zhǔn)品，即企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品，校準(zhǔn)品配制過(guò)程以企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品為參照，確保校準(zhǔn)品準(zhǔn)確性、精密性、穩(wěn)定性。企業(yè)標(biāo) 準(zhǔn)品溯源至目前已有批文的進(jìn)口（國(guó)家）試劑或者得到行業(yè)內(nèi)普遍認(rèn)可的試劑。生產(chǎn)企業(yè)提供該試劑的詳細(xì)資料，包括廠商、來(lái)源、注冊(cè)證號(hào)、相關(guān)性能指標(biāo)等。溯源至企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品，生產(chǎn)企業(yè)提供企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品溯源及制備過(guò)程，包括具體溯源鏈、實(shí)驗(yàn)方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計(jì)

6、分析等詳細(xì)資料。生產(chǎn)企業(yè)需提供校準(zhǔn)品的制備方法，包括原料的選擇、校準(zhǔn)品制備、定值過(guò)程及試驗(yàn)資料，涉及的主要原料應(yīng)進(jìn)行列舉，對(duì)于外購(gòu)的主要原材料，詳述外購(gòu)原材料的名稱及來(lái)源（生 物學(xué)、化學(xué)等），外購(gòu)方名稱，提交外購(gòu)方提供的該原材料的性能指標(biāo)及檢驗(yàn)證書（如有） ， 詳述生產(chǎn)企業(yè)對(duì)該原材料技術(shù)指標(biāo)的要求以及生產(chǎn)企業(yè)確定該原材料為主要原材料的依據(jù)， 如驗(yàn)證試驗(yàn)方案、結(jié)果及結(jié)論。4.3 準(zhǔn)確性準(zhǔn)確性的評(píng)價(jià)包括與國(guó)家（國(guó)際）標(biāo)準(zhǔn)品（和或企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品）的偏差分析、回收試驗(yàn)和 方法學(xué)比對(duì)，企業(yè)可根據(jù)實(shí)際情況選擇合理方法進(jìn)行研究。其中相對(duì)偏差應(yīng)在±10%范圍內(nèi)，回收率應(yīng)在 85%115%范圍內(nèi)。4.4

7、精密性校準(zhǔn)品的精密性應(yīng)滿足瓶?jī)?nèi)、瓶間CV<10%。4.5 穩(wěn)定性效期穩(wěn)定性：生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)規(guī)定產(chǎn)品的有效期，到效期后的校準(zhǔn)品檢測(cè)準(zhǔn)確性和精密性， 應(yīng)符合4.34.4的要求。熱穩(wěn)定性：檢測(cè)校準(zhǔn)品準(zhǔn)確性和精密性，應(yīng)符合 4.34.4的要求。5 試驗(yàn)方法5.1 校準(zhǔn)品溯源性5.1.1 主要原材料的選擇選擇抗原（抗體）或純品，按照 4.2提供原料選擇資料。選用由生產(chǎn)企業(yè)推薦或經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明可使用的緩沖液作為稀釋液，如可采用牛血清、人血清、5%牛血清白蛋白或人白蛋白溶液。詳述緩沖液選擇的試驗(yàn)資料。5.1.2 企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品的建立5.1.2.1 濃儲(chǔ)液的配制將抗原（抗體）或純品按照說(shuō)明書要求操作，獲得溶液。操作

8、過(guò)程確保準(zhǔn)確。根據(jù)實(shí)際 需要可將其配制成一定濃度的溶液作為濃儲(chǔ)液。用緩沖液將濃儲(chǔ)液按照一定比例稀釋，按照4.1 要求使用國(guó)家（國(guó)際）標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行標(biāo)定。濃度乘以稀釋倍數(shù)為濃儲(chǔ)液濃度，重復(fù)測(cè)定3次，平均值為濃儲(chǔ)液最終濃度。如無(wú)國(guó)家（國(guó)際）標(biāo)準(zhǔn)品，則按照4.2要求選擇進(jìn)口 （國(guó)產(chǎn)）試劑進(jìn)行標(biāo)定，濃儲(chǔ)液溯源至國(guó)家（國(guó)際）標(biāo)準(zhǔn)品或進(jìn)口（國(guó)產(chǎn)）試劑。5.1.2.2 企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品配制根據(jù)產(chǎn)品的測(cè)定范圍，確定企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品濃度，使用稀釋液將抗原（抗體） 、純品或濃儲(chǔ) 液稀釋到所需濃度，按照4.1、4.2對(duì)企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行標(biāo)定。如需要可通過(guò)添加稀釋液和濃儲(chǔ)液調(diào)整企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品濃度，經(jīng)3次及以上反復(fù)測(cè)定，確定企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品濃度。

9、企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品溯源至至國(guó)家（國(guó)際）標(biāo)準(zhǔn)品或進(jìn)口（國(guó)產(chǎn)）試劑。5.1.3 校準(zhǔn)品的配制根據(jù)校準(zhǔn)品理論濃度及配制體積，計(jì)算確定稀釋液及抗原（抗體）、純品或濃儲(chǔ)液所需量。準(zhǔn)確移取稀釋液和抗原（抗體） 、純品或濃儲(chǔ)液配制成校準(zhǔn)品，按照 4.1、4.2對(duì)校準(zhǔn)品 進(jìn)行標(biāo)定。如需要可通過(guò)添加稀釋液和濃儲(chǔ)液調(diào)整校準(zhǔn)品濃度，經(jīng)3次及以上反復(fù)測(cè)定，確保校準(zhǔn)品性能符合 4.3、4.4、4.5要求，校準(zhǔn)品溯源至國(guó)家（國(guó)際）標(biāo)準(zhǔn)品或企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品。5.1.4 準(zhǔn)確性5.1.4.1 與國(guó)家（國(guó)際）標(biāo)準(zhǔn)品或企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品的比對(duì)研究確定參考物質(zhì)，配制校準(zhǔn)品，以參考物質(zhì)測(cè)定校準(zhǔn)品濃度，計(jì)算相對(duì)偏差，根據(jù)公式： 相對(duì)偏差=（測(cè)定濃度-理論濃

10、度）X100%,結(jié)果應(yīng)符合4.3的要求。5.1.4.2 回收試驗(yàn)選擇一定濃度的檢測(cè)樣本，分為體積相同的3-4份，在其中的2-3份中加入不同量的待測(cè)物，配制成2-3個(gè)不同加入濃度的回收樣本，計(jì)算加入的待測(cè)物的濃度。在領(lǐng)一份樣本中 加入同樣兩的無(wú)被測(cè)物的溶劑，制成基礎(chǔ)樣本。對(duì)回收樣本和基礎(chǔ)樣本進(jìn)行測(cè)定，通常對(duì)樣本進(jìn)行2-3次重復(fù)分析，取其均值進(jìn)行計(jì)算。計(jì)算回收率：回收率 1 =回收樣本濃度1-基礎(chǔ)樣本濃度加入濃度1X100%計(jì)算平均回收率：(回收率1+回收率2+回收率3)dnno/ , _X IIFUtij平均回收率=:回收率應(yīng)符合4.3的要求。注：加入的標(biāo)準(zhǔn)液體積一般在樣本體積的10%以內(nèi)；并且

11、保證在加樣過(guò)程中的取樣準(zhǔn)確度。加入待測(cè)物的濃度：在保證總濃度在方法分析測(cè)量范圍內(nèi)，盡量使加入標(biāo)準(zhǔn)液后樣本中的被測(cè)物濃度達(dá)到醫(yī)學(xué)決定水平。標(biāo)準(zhǔn)物濃度：因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)物溶液加入體積不到10%,為保證得到不同濃度的回收樣本，標(biāo)準(zhǔn)物的濃度應(yīng)該足夠高。5.1.4.3 方法學(xué)比對(duì)采用參考方法或國(guó)內(nèi)/國(guó)際普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類試劑作為參比方法，與生產(chǎn)企業(yè)試 劑同時(shí)檢測(cè)一批病人樣品，從測(cè)定結(jié)果間的差異了解生產(chǎn)企業(yè)試劑與參比方法間的偏倚。如偏倚很小或在允許的誤差范圍內(nèi)，說(shuō)明兩檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)病人標(biāo)本測(cè)定結(jié)果基本相符，對(duì)同一份臨床樣本的醫(yī)學(xué)解釋，生產(chǎn)企業(yè)試劑與參比方法相比不會(huì)產(chǎn)生差異結(jié)果。在實(shí)施方法學(xué)比對(duì)前， 應(yīng)分別對(duì)生產(chǎn)企

12、業(yè)試劑和參比試劑進(jìn)行初步評(píng)估，只有在確認(rèn)兩者都分別符合各自相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)后方可進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)。方法學(xué)比對(duì)時(shí)應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對(duì)結(jié)果進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。5.1.5 精密性隨機(jī)抽取校準(zhǔn)品進(jìn)行精密性測(cè)定，每個(gè)濃度的校準(zhǔn)品隨機(jī)抽取10支，用生產(chǎn)企業(yè)試劑進(jìn)行檢測(cè)。每支校準(zhǔn)品測(cè)試1次，計(jì)算平均濃度值 Xi和標(biāo)準(zhǔn)差Si；另外隨機(jī)選取1支測(cè)試10次，計(jì)算平均濃度值 X2和標(biāo)準(zhǔn)差S2。根據(jù)公式CV (%) = (S12-S22) 0.5/ X1 X100,計(jì)算 校準(zhǔn)品的瓶?jī)?nèi)、瓶間重復(fù)性。應(yīng)符合4.4的要求。5.1.6 穩(wěn)定性效期穩(wěn)定性：到效期后的校準(zhǔn)品按照5.1.4、5.1.5方法進(jìn)行試驗(yàn)

13、，應(yīng)符合4.34.4的要求。熱穩(wěn)定性：取有效期內(nèi)校準(zhǔn)品按照37c放置1天相當(dāng)于28c存放1.6個(gè)月，由剩余效期計(jì)算37c放置天數(shù)，將校準(zhǔn)品于 37c放置，按照5.1.4、5.1.5方法進(jìn)行檢測(cè)，校準(zhǔn)品準(zhǔn)確 性和精密性，應(yīng)符合 4.34.4的要求。 5.2質(zhì)控品的建立如試劑盒有相應(yīng)的國(guó)家參考品，則企業(yè)內(nèi)部陽(yáng)性/陰性參考品應(yīng)參考國(guó)家參考品的項(xiàng)目設(shè)置。在不低于國(guó)家參考品要求的前提下，可以結(jié)合實(shí)際情況設(shè)置合理的內(nèi)部陽(yáng)性/陰性參考品。對(duì)于沒有國(guó)家參考品的產(chǎn)品，申請(qǐng)人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品性能驗(yàn)證的實(shí)際情況自行設(shè)定企業(yè)內(nèi)部參考品，陽(yáng)性參考品應(yīng)著重考慮抗體滴度要求，陰性參考品則主要涉及對(duì)分析特異性(交叉反應(yīng))的驗(yàn)證情況

14、。陽(yáng)性參考品一般應(yīng)含有高、中、低值?？蓪⑻禺愋再|(zhì)控血清歸入陰性 參考品。建立質(zhì)控血清時(shí)，陽(yáng)性/陰性參考品的數(shù)量應(yīng)以能充分說(shuō)明試劑盒性能為準(zhǔn)，可根據(jù)試劑盒的實(shí)際性能指標(biāo)規(guī)定質(zhì)控血清的檢出程度，如：陽(yáng)性/陰性參考品符合率最低限度。應(yīng)對(duì)陽(yáng)性/陰性參考品中具體的參考品進(jìn)行必要說(shuō)明，包括必須檢出的陽(yáng)性參考品編號(hào)和必須 不被檢出的陰性參考品編號(hào)，以及可以檢出陰性參考品編號(hào)和可以不檢出的陽(yáng)性參考品編 號(hào)，如：特異性血清應(yīng)歸入必須不被檢出的參考品，高值陽(yáng)性參考品應(yīng)歸入必須被檢出的參考品等。5.2.1 質(zhì)控品的配制可選擇臨床樣本，或經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證的基質(zhì)控品的成分應(yīng)為與檢測(cè)樣本的基質(zhì)相似或一樣, 質(zhì)作為質(zhì)控品配制的原

15、料進(jìn)行質(zhì)控品的配制。臨床樣本的選擇：用于質(zhì)控品配制的樣本應(yīng)為去除溶血、黃疸、脂血、染菌的樣本，為 臨床陰性和陽(yáng)性血清和/或血漿樣本。樣本預(yù)處理：樣本經(jīng)過(guò)預(yù)處理后用于質(zhì)控品的配制，包括滅活處理、離心處理等。根據(jù)所需質(zhì)控品濃度添使用基質(zhì)配制質(zhì)控品過(guò)質(zhì)控品配制：將預(yù)處理后的臨床樣本進(jìn)行定值，記錄檢測(cè)結(jié)果,加稀釋液或濃儲(chǔ)液， 調(diào)整質(zhì)控品濃度，直至濃度達(dá)到生產(chǎn)企業(yè)要求。 程可與此相同。5.2.2 質(zhì)控品的賦值對(duì)質(zhì)控品進(jìn)行3次檢測(cè)，每次各測(cè)定10孔，計(jì)算平均濃度值（X）和標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）, 根據(jù)質(zhì)控要求，可選擇 X 土 3SD作為質(zhì)控范圍。5.2.3 質(zhì)控品性能測(cè)定按照5.1.4、5.1.5方法進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)符合 4.34.4要求。6參考文獻(xiàn)生物樣品中量的測(cè)量校準(zhǔn)品和生物源性樣品中量的測(cè)