實驗一普通光學顯微鏡的使用及細菌三形觀察

1、一、目的要求一、目的要求了解顯微鏡的構造和各部分的作用，掌握了解顯微鏡的構造和各部分的作用，掌握顯微鏡的使用方法顯微鏡的使用方法學習并掌握油鏡的原理和使用方法學習并掌握油鏡的原理和使用方法了解細菌的三種基本形態(tài)了解細菌的三種基本形態(tài)u 普通光學顯微鏡的基本結(jié)構普通光學顯微鏡的構造可分為兩部分：一為機械裝置，二為光學系統(tǒng) 。機械裝置由鏡座、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物鏡座、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、推動器、粗動螺旋臺、推動器、粗動螺旋和微動螺旋微動螺旋等部件組成。光學系統(tǒng)由目鏡、物鏡、聚光器、光源、濾目鏡、物鏡、聚光器、光源、濾光片、虹彩光圈光片、虹彩光圈等組成 普通光學顯微鏡基本構造u 油鏡的工作原

2、理油鏡的工作原理 滴加鏡油的作用滴加鏡油的作用 （1） 增加照明亮度增加照明亮度 （2） 增加顯微鏡的分辨率增加顯微鏡的分辨率 分辨率（最小可分辨距離）分辨率（最小可分辨距離）=/2NA 式中式中=光波波長光波波長 ； NA=物鏡的數(shù)值孔徑值物鏡的數(shù)值孔徑值 NA= nsin(/2 ) n:n: 物鏡和被檢標本間介質(zhì)的折射率物鏡和被檢標本間介質(zhì)的折射率 ：鏡口角（即入射角）鏡口角（即入射角） 油鏡，即油浸接物鏡。油鏡，即油浸接物鏡。當光線通過玻片與鏡當光線通過玻片與鏡頭之間的空氣時，由頭之間的空氣時，由于空氣與玻片的密度于空氣與玻片的密度不同，使光線受到曲不同，使光線受到曲折，發(fā)生散射，降低折

3、，發(fā)生散射，降低了視野的照明度。若了視野的照明度。若中間的介質(zhì)是一層油中間的介質(zhì)是一層油（其折射率與玻片的其折射率與玻片的相近相近），則幾乎不發(fā)），則幾乎不發(fā)生折射，增加了視野生折射，增加了視野的進光量，從而使物的進光量，從而使物象更加清晰。象更加清晰。三、實驗器材 顯微鏡、擦鏡紙、雙層瓶（香柏油、二甲顯微鏡、擦鏡紙、雙層瓶（香柏油、二甲苯）等。苯）等。 細菌三型標本片（球菌、桿菌、螺旋菌）細菌三型標本片（球菌、桿菌、螺旋菌）四、操作步驟四、操作步驟 （一）觀察前的準備（一）觀察前的準備1.1.取鏡和安放取鏡和安放 置顯微鏡于平穩(wěn)的實驗臺上，鏡座距實驗臺邊沿約為置顯微鏡于平穩(wěn)的實驗臺上，鏡座距

4、實驗臺邊沿約為34cm。鏡。鏡檢者姿勢要端正。檢者姿勢要端正。2.2.光源調(diào)節(jié)光源調(diào)節(jié) 安裝在鏡座內(nèi)的光源燈可通過調(diào)節(jié)電流或電壓來獲得適當?shù)恼彰靼惭b在鏡座內(nèi)的光源燈可通過調(diào)節(jié)電流或電壓來獲得適當?shù)恼彰髁炼?，使視野?nèi)的光線均勻，亮度適宜。亮度，使視野內(nèi)的光線均勻，亮度適宜。3.3.根據(jù)使用者個人情況，調(diào)節(jié)雙目顯微鏡的目鏡根據(jù)使用者個人情況，調(diào)節(jié)雙目顯微鏡的目鏡 雙目顯微鏡的目鏡間距可以適當調(diào)節(jié)，使其與觀察者兩個眼睛瞳雙目顯微鏡的目鏡間距可以適當調(diào)節(jié)，使其與觀察者兩個眼睛瞳孔的距離相符?？椎木嚯x相符。 （二）顯微觀察（二）顯微觀察1.1.低倍鏡觀察低倍鏡觀察將標本片放在載物臺上，用標本夾夾住，調(diào)節(jié)

5、標將標本片放在載物臺上，用標本夾夾住，調(diào)節(jié)標本移動螺旋，使目的物處于物鏡的正下方。本移動螺旋，使目的物處于物鏡的正下方。調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋，使物鏡（調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋，使物鏡（1010）與標本靠近，眼）與標本靠近，眼睛在側(cè)向注視物鏡，防止物鏡和載玻片相碰。睛在側(cè)向注視物鏡，防止物鏡和載玻片相碰。張開雙眼向物鏡里觀察，如果見到目的物，但不張開雙眼向物鏡里觀察，如果見到目的物，但不十分清楚，可用細調(diào)螺旋，至目的物清晰為止。十分清楚，可用細調(diào)螺旋，至目的物清晰為止。 2. .高倍鏡觀察高倍鏡觀察使用高倍鏡前，必須先用低倍鏡觀察，發(fā)現(xiàn)使用高倍鏡前，必須先用低倍鏡觀察，發(fā)現(xiàn)目的物后將它移至視野正中處。目的物后將它移

6、至視野正中處。旋動轉(zhuǎn)換器換高倍鏡。如果高倍鏡觸及載玻旋動轉(zhuǎn)換器換高倍鏡。如果高倍鏡觸及載玻片立即停止旋動，這說明原來低倍鏡并沒有片立即停止旋動，這說明原來低倍鏡并沒有調(diào)準，目的物并沒有真正找到，必須用低倍調(diào)準，目的物并沒有真正找到，必須用低倍鏡重新調(diào)節(jié)。鏡重新調(diào)節(jié)。（物鏡的同焦現(xiàn)象）物鏡的同焦現(xiàn)象）如果高倍鏡下觀察目的物有點模糊，調(diào)節(jié)細如果高倍鏡下觀察目的物有點模糊，調(diào)節(jié)細調(diào)螺旋，直到視野清晰。調(diào)螺旋，直到視野清晰。3.3.油鏡觀察油鏡觀察先用低倍鏡和高倍鏡檢查標本片，將目的物移到視野先用低倍鏡和高倍鏡檢查標本片，將目的物移到視野正中。用粗調(diào)螺旋下降載物臺。正中。用粗調(diào)螺旋下降載物臺。在載玻片

7、上滴一滴香柏油，將油鏡移至正中，緩慢調(diào)在載玻片上滴一滴香柏油，將油鏡移至正中，緩慢調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋使油鏡頭浸沒在油中，盡量貼近載玻片。節(jié)粗調(diào)螺旋使油鏡頭浸沒在油中，盡量貼近載玻片。然后再用細調(diào)螺旋微微向上調(diào)（切忌用粗調(diào)螺旋）。然后再用細調(diào)螺旋微微向上調(diào)（切忌用粗調(diào)螺旋）。油鏡觀察完畢，用油鏡紙將鏡頭上的油揩凈，另用擦油鏡觀察完畢，用油鏡紙將鏡頭上的油揩凈，另用擦鏡紙蘸少許二甲苯揩拭鏡頭，再用擦鏡紙揩干。鏡紙蘸少許二甲苯揩拭鏡頭，再用擦鏡紙揩干。（應特別注意不要因在下降鏡頭時用力過猛，或者調(diào)焦（應特別注意不要因在下降鏡頭時用力過猛，或者調(diào)焦時誤將粗調(diào)節(jié)螺旋向反方向轉(zhuǎn)動而損壞鏡頭及載玻片）時誤將粗調(diào)節(jié)

8、螺旋向反方向轉(zhuǎn)動而損壞鏡頭及載玻片） 實驗結(jié)束時實驗結(jié)束時 請確保油鏡頭擦拭干凈！請確保油鏡頭擦拭干凈！1.不準擅自拆卸顯微鏡的任何部件不準擅自拆卸顯微鏡的任何部件, ,以免損壞。以免損壞。2.鏡面只能用擦鏡紙擦，不能用手指或粗布，鏡面只能用擦鏡紙擦，不能用手指或粗布，以保證光潔度以保證光潔度3.觀察標本時，必須依次用低、高倍鏡，最后觀察標本時，必須依次用低、高倍鏡，最后用油鏡。當目視接目鏡時，特別在使用油鏡用油鏡。當目視接目鏡時，特別在使用油鏡時，切不可使用粗調(diào)節(jié)器，以免壓碎玻片或時，切不可使用粗調(diào)節(jié)器，以免壓碎玻片或損傷鏡面。損傷鏡面。4.觀察時，兩眼睜開，養(yǎng)成兩眼能夠輪換觀察觀察時，兩眼睜開，養(yǎng)成兩眼能夠輪換觀察的習慣，以免眼睛疲勞，并且能夠在左眼觀的習慣，以免眼睛疲勞，并且能夠在左眼觀察時，右眼注視繪圖。察時，右眼注視繪圖。5.拿顯微鏡時，一定要右手拿鏡臂，左手托鏡拿顯微鏡時，一定要右手拿鏡臂，左手托鏡座，不可單手拿，更不可傾斜拿。座，不可單手拿，更不可傾斜拿。顯微鏡保養(yǎng)和使用中的注意事項顯微鏡保養(yǎng)和使用中的注意事項五、實驗結(jié)果繪圖，記錄所觀察到的細菌三種繪圖，記錄所觀察到的細菌三種基本形態(tài)?；拘螒B(tài)。六、問題與討論六、問題與討論 1 1、使用高倍鏡與油鏡調(diào)焦時應注意什么？、使用高倍鏡與油鏡調(diào)焦時應注意什么？ 2 2、使用油鏡時，在載