第四節(jié) 固相萃取

1、第四節(jié)固相萃取第四節(jié)固相萃取（solid phase extraction, SPEsolid phase extraction, SPE）一、一、 固相萃取的原理與步驟固相萃取的原理與步驟二、二、 固相萃取的裝置固相萃取的裝置1. 1. 固相萃取法的建立固相萃取法的建立2. 2. 固相萃取的應用固相萃取的應用一、一、 固相萃取的原理固相萃取的原理 固相萃取的基本原理與液相色譜分離過程相仿，是固相萃取的基本原理與液相色譜分離過程相仿，是一種吸附劑萃取，主要適用于液體樣品的處理。一種吸附劑萃取，主要適用于液體樣品的處理。 當試樣通過裝有合適的固定相時，被測組分由于與當試樣通過裝有合適的固定相時，

2、被測組分由于與固定相相互作用較強被吸附留在柱上，并因吸附作固定相相互作用較強被吸附留在柱上，并因吸附作用力的不同而彼此分離，樣品基質及其它成分與固用力的不同而彼此分離，樣品基質及其它成分與固定相作用較弱而隨水流出萃取柱。被萃取的組分，定相作用較弱而隨水流出萃取柱。被萃取的組分，用少量選擇性溶劑洗脫。用少量選擇性溶劑洗脫。自動固相萃取裝置：萃取小柱、真空萃取箱和真空泵 二、二、 固相萃取的裝置固相萃取的裝置SPE小柱小柱吸附劑的類型：吸附劑的類型：C18、C8、氰基、苯基、雙醇基、氰基、苯基、雙醇基填料、活性炭、硅膠、氧化鋁、硅酸鎂、高分子填料、活性炭、硅膠、氧化鋁、硅酸鎂、高分子聚合物、離子交

3、換樹脂、排阻色譜吸附劑、親和聚合物、離子交換樹脂、排阻色譜吸附劑、親和色譜吸附劑等。色譜吸附劑等。 柱型：柱型：容積為容積為16 mL的柱體的柱體（通常是醫(yī)用級聚丙烯（通常是醫(yī)用級聚丙烯管），在兩片聚乙烯篩板之管），在兩片聚乙烯篩板之間填充間填充0.1 2 g吸附劑。吸附劑。三、三、 固相萃取法的建立固相萃取法的建立 1 柱預處理（活化）柱預處理（活化） 2 上樣上樣 3 除去干擾雜質（淋洗）除去干擾雜質（淋洗） 4 分析物的洗脫和收集（洗脫）分析物的洗脫和收集（洗脫）活化活化上樣上樣淋洗淋洗洗脫洗脫三、三、 固相萃取法的建立固相萃取法的建立1 柱預處理柱預處理以以C18固相萃取柱為例：先使數(shù)

4、毫固相萃取柱為例：先使數(shù)毫升的甲醇通過萃取柱，再用水或緩升的甲醇通過萃取柱，再用水或緩沖液頂替滯留在柱中的甲醇。沖液頂替滯留在柱中的甲醇。柱預處理的目的是柱預處理的目的是除去填料中可除去填料中可能存在的雜質；能存在的雜質；使填料溶劑化。使填料溶劑化。三、三、 固相萃取法的建立固相萃取法的建立2 加樣加樣試樣溶液被加至并通過固相萃取試樣溶液被加至并通過固相萃取柱。其間，分析物被保留在吸附劑柱。其間，分析物被保留在吸附劑上。上。加到萃取柱上的試樣量取決于加到萃取柱上的試樣量取決于萃取萃取柱的尺寸（填料量）和類型柱的尺寸（填料量）和類型、在試樣在試樣溶劑中試樣組分的保留性質和試樣分溶劑中試樣組分的保

5、留性質和試樣分析物及基質組分濃度析物及基質組分濃度等因素。等因素。三、三、 固相萃取法的建立固相萃取法的建立注意：注意：為防止分析物流失，試樣溶液強度為防止分析物流失，試樣溶液強度應適當。應適當。固相萃取柱選定后，應進行固相萃取柱選定后，應進行穿透實穿透實驗，驗，確確定的試樣體積定的試樣體積。穿透:在上樣過程部分或全部目標化合物未被保留即流出小柱的現(xiàn)象。三、三、 固相萃取法的建立固相萃取法的建立3 除去干擾雜質除去干擾雜質u 用中等強度的溶劑，將干擾組分洗用中等強度的溶劑，將干擾組分洗脫下來，同時保持分析物仍留在柱脫下來，同時保持分析物仍留在柱上。上。u 對于反相萃取柱，清洗溶劑應為含對于反相

6、萃取柱，清洗溶劑應為含適當濃度有機溶劑的水或緩沖溶液。適當濃度有機溶劑的水或緩沖溶液。u 通過調節(jié)清洗溶劑的強度和體積，通過調節(jié)清洗溶劑的強度和體積，盡可能除去能被洗脫的雜質。盡可能除去能被洗脫的雜質。三、固相萃取法的建立三、固相萃取法的建立4 分析物的洗脫和收集分析物的洗脫和收集 將分析物完全洗脫并收集在最小體將分析物完全洗脫并收集在最小體積的級分中積的級分中。比分析物更強保留的雜質盡可能仍留在固相比分析物更強保留的雜質盡可能仍留在固相萃取柱上。萃取柱上。選擇合適的洗脫溶劑強度和體積。選擇合適的洗脫溶劑強度和體積。三、固相萃取法的建立三、固相萃取法的建立提高重現(xiàn)性的方法：提高重現(xiàn)性的方法：

7、使用內標法，加入適當?shù)膬葮宋镒鲄⒈?；使用內標法，加入適當?shù)膬葮宋镒鲄⒈龋?加入樣品的量適當，不超過穿透量；加入樣品的量適當，不超過穿透量； 選擇合適的選擇合適的清洗清洗劑和洗脫劑，避免待測組分劑和洗脫劑，避免待測組分流失。流失。 了解試樣基質和待測組分的性質，如結了解試樣基質和待測組分的性質，如結構、極性、酸堿性、溶解度、大致的濃度范圍構、極性、酸堿性、溶解度、大致的濃度范圍等，對選擇和確定與處理方法和條件都是有幫助等，對選擇和確定與處理方法和條件都是有幫助的。的。固相萃取法的步驟固相萃取法的步驟活化活化上樣上樣淋洗淋洗洗脫洗脫全自動固相萃取固相萃取的用途：固相萃取的用途： 從試樣中除去對以后

8、分析有干擾的物質從試樣中除去對以后分析有干擾的物質 富集痕量組分，提高分析靈敏度富集痕量組分，提高分析靈敏度 變換試樣溶劑，使之與分析方法相匹配變換試樣溶劑，使之與分析方法相匹配 原位衍生原位衍生 試樣脫鹽試樣脫鹽 便于試樣的存儲和運送便于試樣的存儲和運送四、固相萃取的應用四、固相萃取的應用四、固相萃取的應用四、固相萃取的應用動物源食品中的氯霉素殘留量的測定動物源食品中的氯霉素殘留量的測定牛奶中青霉素類藥物殘留量的測定高效液相色譜法牛奶中青霉素類藥物殘留量的測定高效液相色譜法土壤中土壤中9種磺酰脲類除草劑殘留量的測定種磺酰脲類除草劑殘留量的測定-液相色譜液相色譜質譜法質譜法水果、蔬菜及茶葉中吡

9、蟲啉殘留的測定水果、蔬菜及茶葉中吡蟲啉殘留的測定-高效液相色譜法高效液相色譜法雞肉和雞肝中己烯雌酚殘留檢測氣相色譜雞肉和雞肝中己烯雌酚殘留檢測氣相色譜-質譜法質譜法動物源性食品中糖皮質激素類藥物多殘留檢測液相色譜串聯(lián)質譜法動物源性食品中糖皮質激素類藥物多殘留檢測液相色譜串聯(lián)質譜法蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定畜禽肉中保泰松殘留量的測定畜禽肉中保泰松殘留量的測定-液相色譜液相色譜-紫外檢測法紫外檢測法食品中蘇丹紅染料的檢測方法食品中蘇丹紅染料的檢測方法-高效液相色譜法高效液相色譜法動物源性食

10、品中四環(huán)素動物源性食品中四環(huán)素類獸藥類獸藥殘留量檢測殘留量檢測 .農獸藥殘留、食品添加劑的檢測等農獸藥殘留、食品添加劑的檢測等五、五、 固相微萃取固相微萃?。╯olid phase microextraction, SPME） 固相微萃取是在固相微萃取是在SPE基礎上發(fā)展起來的基礎上發(fā)展起來的新的萃取分離技術。新的萃取分離技術。 20世紀世紀90年代初發(fā)展起來的。年代初發(fā)展起來的。 適用于氣體和液體樣品的新穎的樣品前適用于氣體和液體樣品的新穎的樣品前處理技術具有快速、靈敏、方便、樣處理技術具有快速、靈敏、方便、樣品需要量小、無需萃取溶劑、易于自動品需要量小、無需萃取溶劑、易于自動化的優(yōu)點?；?/p>

11、優(yōu)點。1 固相微萃取裝置構造與萃取過程固相微萃取裝置構造與萃取過程萃取頭固定在不銹鋼的活塞（注射芯）上萃取頭固定在不銹鋼的活塞（注射芯）上平時萃取頭收縮在手柄內，當萃取樣品時，露出萃取頭平時萃取頭收縮在手柄內，當萃取樣品時，露出萃取頭浸在樣品中，或置于樣品上空進行定空萃取，有機物就浸在樣品中，或置于樣品上空進行定空萃取，有機物就會吸附在萃取頭上，經(jīng)會吸附在萃取頭上，經(jīng)230 min后吸附達平衡，萃取后吸附達平衡，萃取頭收縮回鞘內，把固相微萃取裝置撤離樣品，完成萃取頭收縮回鞘內，把固相微萃取裝置撤離樣品，完成萃取過程。過程。將固相微萃取裝置直接引入氣相色將固相微萃取裝置直接引入氣相色譜儀的進樣口，推出萃取頭，吸附譜儀的進樣口，推出萃取頭，吸附在萃取頭上的有機物就再進樣口進在萃取頭上的有機物就再進樣口進行解吸，而后被載氣送入毛細管柱行解吸，而后被載氣送入毛細管柱進行分析測定。進行分析測定。1 固相微萃取裝置構造與萃取過程固相微萃取裝置構造與萃取過程1 固相微萃取裝置構造與萃取過程固相微萃取裝置構造與萃取過程2. 固相微萃取法的應用固相微萃取法的應用固相微萃取裝置既可用于液體樣品的預處理（浸漬萃取固相微萃