細(xì)胞生物學(xué) - 顯微測(cè)量和細(xì)胞化學(xué)成分ppt課件

1、 目的要求 用品資料 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 實(shí)驗(yàn)報(bào)告 復(fù)習(xí)預(yù)習(xí)細(xì)胞的顯微丈量與化學(xué)成分v 掌握細(xì)胞顯微丈量的方法；v 掌握生物大分子在細(xì)胞內(nèi)的存在部位；v 熟習(xí)細(xì)胞顯微丈量的原理；v 熟習(xí)細(xì)胞化學(xué)成分的顯示原理；v 了解細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成分的檢測(cè)方法。細(xì)胞的顯微丈量與化學(xué)成分v實(shí)驗(yàn)器材v 顯微鏡、目鏡測(cè)微尺、鏡臺(tái)測(cè)微尺、載玻片、蓋玻片、酒v 精燈、火柴、刀片、小燒杯、剪刀、鑷子、吸管、吸水紙v實(shí)驗(yàn)試劑v 碘液、乙醚、95%乙醇、甲基綠-派洛寧液、2 %過氧化氫v 液、5 %三氯醋酸液、聯(lián)苯胺混合液、1 %番紅液、0.1 %v 酸性固綠液、0.1 %堿性固綠液、0.5 %硫酸銅液v實(shí)驗(yàn)資料v 蛙血涂片、動(dòng)物肝糖原

2、切片、馬鈴薯、蟾蜍、小鼠v 細(xì)胞的顯微丈量v 細(xì)胞的化學(xué)成分細(xì)胞的顯微丈量與化學(xué)成分細(xì)胞的顯微丈量與化學(xué)成分第一部分第一部分細(xì)細(xì)胞的胞的顯顯微丈量微丈量前往上一層前往上一層 細(xì)胞的顯微丈量需求以目鏡測(cè)微尺來進(jìn)展，但其分度值隨著放大倍數(shù)的變化而變化，長(zhǎng)度也不一樣，因此需求事先進(jìn)展標(biāo)定。而鏡臺(tái)測(cè)微尺的長(zhǎng)度是知的，目鏡測(cè)微尺的標(biāo)定是經(jīng)過鏡臺(tái)測(cè)微尺來進(jìn)展的。0.01mm01234012345678目鏡測(cè)微尺(長(zhǎng)度隨放大倍數(shù)發(fā)生改動(dòng))鏡臺(tái)測(cè)微尺(每一大刻度值為0.1mm，小刻度值為0.01mm)放鏡臺(tái)測(cè)微尺于載物臺(tái)調(diào)理使鏡臺(tái)測(cè)微尺與目鏡測(cè)微尺平行取下鏡臺(tái)測(cè)微尺*裝入目鏡測(cè)微尺記錄二者在重合線之間的刻度計(jì)

3、算標(biāo)定值如在低倍鏡下重合線之間目鏡測(cè)微尺的長(zhǎng)度為50格 鏡臺(tái)測(cè)微尺的長(zhǎng)度為68格那么： 50:68=1:x x=1.36格，即目鏡測(cè)微尺的1小格相當(dāng)于鏡臺(tái)測(cè)微尺的1.36格，而鏡臺(tái)測(cè)微尺每1小格的長(zhǎng)度為10um，那么目鏡測(cè)微尺每1小格的長(zhǎng)度為13.6um。 標(biāo)定時(shí)必需嚴(yán)厲按照操作規(guī)程，以免損壞測(cè)微尺； 重合線的判別應(yīng)在二者刻度線完全重合； 比例式的計(jì)算； 標(biāo)定值只能在同一放大倍數(shù)下進(jìn)展丈量。目鏡測(cè)微尺短軸長(zhǎng)軸轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡鏡筒細(xì)胞的顯微丈量與化學(xué)成分第二部分第二部分細(xì)細(xì)胞的化學(xué)成分胞的化學(xué)成分前往上一層前往上一層v 細(xì)胞內(nèi)多糖物質(zhì)的察看v 細(xì)胞內(nèi)DNA/RNA的顯示v 酸性、堿性蛋白的顯示v 細(xì)胞內(nèi)

4、過氧化氫酶顯示 植物淀粉有直鏈淀粉和支鏈淀粉之分，遇碘液顯示藍(lán)色反響，加熱時(shí)藍(lán)色消逝，冷卻時(shí)藍(lán)色又重新出現(xiàn)。藍(lán)色的產(chǎn)生是由于直鏈淀粉遇碘構(gòu)成不穩(wěn)定的藍(lán)色化合物碘化淀粉的緣故。 取載玻片 徒手切片 碘液染色 蓋蓋玻片 鏡檢察看馬鈴薯塊莖內(nèi)淀粉顯示(表示圖)(藍(lán)色或藍(lán)紫色，顆粒大小不一)小鼠細(xì)胞內(nèi)的肝糖原(紫紅色，PAS反響) 細(xì)胞化學(xué)方法顯示細(xì)胞內(nèi)的DNA和RNA有兩種方法：Bratchet反響和Feulgen反響。本實(shí)驗(yàn)主要引見Bratchet反響。Bratchet反響顯示細(xì)胞內(nèi)的DNA和RNA是經(jīng)過Unna試劑來實(shí)現(xiàn)的。Unna試劑甲基綠甲基綠(綠色綠色)派洛寧派洛寧(紅色紅色) DNARN

5、A 以酸性氨基酸為主要成分的蛋白質(zhì)為酸性蛋白；以堿性氨基酸為主要成分的蛋白質(zhì)為堿性蛋白。細(xì)胞核內(nèi)有組蛋白(堿性蛋白)及少量酸性蛋白，細(xì)胞質(zhì)中主要為酸性蛋白，標(biāo)本經(jīng)三氯醋酸處置抽提掉核酸后，用不同pH值的固綠分別染色，使細(xì)胞內(nèi)的酸性蛋白和堿性蛋白顯示出來。蟾蜍細(xì)胞內(nèi)酸性蛋白的顯示(pH2.2固綠染色)蟾蜍細(xì)胞內(nèi)堿性蛋白的顯示(pH8.0固綠染色) 在生物體內(nèi)，細(xì)胞代謝過程會(huì)產(chǎn)生對(duì)機(jī)體有害的過氧化氫。存在于動(dòng)、植物組織細(xì)胞中的過氧化氫酶，能使過氧化氫分解，構(gòu)成水和氧氣，對(duì)機(jī)體起維護(hù)作用。過氧化氫酶系還能把許多胺類物質(zhì)氧化為有色化合物。假設(shè)用聯(lián)苯胺混合液處置標(biāo)本，細(xì)胞內(nèi)的過氧化氫酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍(lán)

6、色的聯(lián)苯胺藍(lán)，后者不穩(wěn)定，可迅速轉(zhuǎn)變成棕色的聯(lián)苯胺棕。 取 載 玻 片 血涂片 自 然 枯 燥 硫酸銅固定 聯(lián)苯胺染色 番 紅 復(fù) 染 水 洗 晾 干 鏡 檢 察 看人血細(xì)胞(紅箭頭示白細(xì)胞，藍(lán)箭頭示紅細(xì)胞)小鼠骨髓細(xì)胞(箭頭棕色物質(zhì)示過氧化氫存在部位)細(xì)胞的顯微丈量與化學(xué)成分? 記錄蛙紅細(xì)胞顯微丈量的結(jié)果? 繪圖表示蛙紅細(xì)胞內(nèi)酸性蛋白的顯示分別記錄5個(gè)蛙紅細(xì)胞的長(zhǎng)徑和短徑，并計(jì)算平均值。蛙紅細(xì)胞丈量結(jié)果單位：m12345平均長(zhǎng)徑短徑生物學(xué)繪圖的要求和方法生物學(xué)繪圖根本工具：鉛筆(HB或2B)、直尺、橡皮、實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙；生物學(xué)繪圖必需真實(shí)、客觀，應(yīng)選擇有代表性的標(biāo)本，按照實(shí)踐察看到的外形、比例、位置和毗鄰關(guān)系等進(jìn)展繪制；留意比例、規(guī)劃，大小適中，圖下方標(biāo)注圖的稱號(hào)；圖的注釋應(yīng)以程度直線引出，構(gòu)造稱號(hào)寫于引示線末端；圖的明