高效液相色譜儀驗(yàn)證方案

1、驗(yàn) 證 文 件文件名稱：高效液相色譜儀驗(yàn)證方案設(shè)備名稱：高效液相色譜儀設(shè)備型號(hào)：LC-20AT文件編號(hào)：青島雙鯨藥業(yè)有限公司驗(yàn)證方案審批表確認(rèn)方案名稱高效液相色譜儀驗(yàn)證方案確認(rèn)方案編號(hào)方案起草人起草日期方案審核部門審核人審核日期審核意見茲證明我已審核同意高效液相色譜儀驗(yàn)證按此方案實(shí)施。批準(zhǔn)意見批 準(zhǔn) 人批準(zhǔn)日期執(zhí)行日期目 錄1 概述2 驗(yàn)證目的3 驗(yàn)證依據(jù)及判斷標(biāo)準(zhǔn)4 驗(yàn)證工作小組5. 相關(guān)文件6人員培訓(xùn)7安裝確認(rèn)8運(yùn)行確認(rèn)9性能確認(rèn)10偏差記錄11結(jié)論12. 再驗(yàn)證1. 概述 高效液相色譜法系采用高壓輸液泵將規(guī)定的流動(dòng)相泵入裝有填充劑的色譜柱，對(duì)供試品進(jìn)行分離測(cè)定的色譜法。注入供試品，由流動(dòng)

2、相帶入柱內(nèi)，各組分在柱內(nèi)被分離，并依次進(jìn)入檢測(cè)器，由積分儀或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄和處理色譜信號(hào)，得到測(cè)定結(jié)果。由于應(yīng)用了各種特性的微粒填料和加壓的液體流動(dòng)相，本法具有分離性能高、分析速度快的特點(diǎn)。 島津LC-20AT型高效液相色譜儀是根據(jù)質(zhì)量控制的目的和要求，結(jié)合目前儀器使用的情況，在調(diào)研的基礎(chǔ)上，公司于2015年2月購(gòu)置的精密儀器，其生產(chǎn)廠為島津（中國(guó)）有限公司，由輸液泵、檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱組成。應(yīng)用軟件為L(zhǎng)absolutions工作站。2. 驗(yàn)證目的 通過對(duì)島津LC-20AT高效液相色譜儀的安裝、運(yùn)行、性能確認(rèn)，確認(rèn)新購(gòu)進(jìn)島津LC-20AT高效液相色譜儀是否符合設(shè)計(jì)規(guī)范要求，是否能達(dá)到

3、該儀器所設(shè)置的性能指標(biāo)，是否符合產(chǎn)品檢驗(yàn)需求。3. 驗(yàn)證依據(jù)及判斷標(biāo)準(zhǔn) 3.1 驗(yàn)證依據(jù) 3.1.1 藥品GMP指南2010年版3.1.2 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 26792-20113.1.3 島津LC-20AT型高效液相色譜儀安裝使用說明3.1.4 中國(guó)藥典2010年版二部附錄3.2 驗(yàn)證評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)3.2.1 安裝環(huán)境確認(rèn)判斷標(biāo)準(zhǔn)確認(rèn)安裝符合島津LC-20AT型高效液相色譜儀安裝使用說明要求和公司用戶需求。3.2.2 運(yùn)行確認(rèn)判斷標(biāo)準(zhǔn)安裝確認(rèn)認(rèn)可后，在不使用試樣的條件下，確認(rèn)該儀器運(yùn)行正常。3.2.3 性能確認(rèn)判斷標(biāo)準(zhǔn) 使用樣品檢測(cè)符合中國(guó)藥典2010年版二部附錄要求、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和島津LC-20AT

4、型高效液相色譜儀性能指標(biāo)。4. 驗(yàn)證工作小組姓 名職務(wù)部門職責(zé)與分工王秋菊組長(zhǎng)質(zhì)量保證部全面組織確認(rèn)工作，負(fù)責(zé)小組的協(xié)調(diào)工作。牛兆杰成員質(zhì)量保證部起草確認(rèn)方案，實(shí)施確認(rèn)，確認(rèn)資料的歸檔管理，會(huì)簽確認(rèn)報(bào)告。孫妹成員質(zhì)量保證部起草確認(rèn)方案，會(huì)簽確認(rèn)報(bào)告。徐智成員工程設(shè)備部協(xié)助確認(rèn)，會(huì)簽確認(rèn)報(bào)告。5. 相關(guān)文件文件名稱文件編號(hào)備注高效液相色譜法檢驗(yàn)操作規(guī)程島津高效液相色譜儀操作、維護(hù)規(guī)程6. 人員培訓(xùn)確認(rèn) 方案實(shí)施人員應(yīng)接受相關(guān)培訓(xùn)，確保正確實(shí)施本方案。培訓(xùn)內(nèi)容被培訓(xùn)人培訓(xùn)人日期7. 安裝確認(rèn)7.1 基本資料檢查項(xiàng)目結(jié)果存放地備注齊備缺失使用說明書設(shè)備的合格證書裝箱單保修卡 檢查人： 復(fù)核人： 日期

5、：部件設(shè)備型號(hào)設(shè)備編號(hào)結(jié)論應(yīng)為實(shí)為輸液泵自動(dòng)進(jìn)樣器柱溫箱檢測(cè)器 檢查人： 復(fù)核人： 日期：7.2 公用設(shè)施確認(rèn)項(xiàng)目設(shè)計(jì)要求實(shí)際情況結(jié)論電壓220V±22V頻率50Hz±0.5Hz電源適配三孔插座、接地良好 檢查人： 復(fù)核人： 日期：7.3 硬件環(huán)境與安裝確認(rèn)項(xiàng) 目實(shí)際情況結(jié) 論儀器安裝于精密儀器室室內(nèi)應(yīng)避免易燃易爆和強(qiáng)腐蝕性氣體及強(qiáng)烈的震動(dòng)、電磁干擾和空氣對(duì)流等安放的工作臺(tái)應(yīng)水平環(huán)境溫度：1535環(huán)境濕度：35%75%外表光潔平整、字跡清晰、色澤均勻，不應(yīng)有劃傷、露底、裂紋、起泡等現(xiàn)象。各調(diào)節(jié)旋鈕、按鍵、開關(guān)等工作正常，無松動(dòng)；指示、顯示清晰完整檢測(cè)器、輸液泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、

6、柱溫箱、計(jì)算機(jī)、打印機(jī)和電源之間線路連接正確檢測(cè)器、輸液泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱等管路連接正確 檢查人： 復(fù)核人： 日期：7.4 軟件配置確認(rèn)項(xiàng) 目實(shí)際情況結(jié) 論打開電源開關(guān)，啟動(dòng)Windows XP，電腦開機(jī)正常打開高效液相色譜儀各部件電源開關(guān)，各部件面板顯示正常在桌面上雙擊LC solution Lite圖標(biāo)，進(jìn)入軟件操作系統(tǒng)，啟動(dòng)正常打開檢測(cè)器，有信號(hào)出現(xiàn)單擊 LC 所對(duì)應(yīng)的分析圖標(biāo)，聽見LC 發(fā)出“嗶”的聲音，表示工作站與LC 聯(lián)機(jī)正常 檢查人： 復(fù)核人： 日期：8. 運(yùn)行確認(rèn)8.1 軟件運(yùn)行確認(rèn)的內(nèi)容項(xiàng) 目實(shí)際情況結(jié) 論雙擊LC solution Lite圖標(biāo)，單擊 LC 所對(duì)應(yīng)的分析

7、圖標(biāo)，進(jìn)入軟件操作系統(tǒng)，設(shè)定儀器流速為 ml/min，柱溫為 ，波長(zhǎng) nm，分析時(shí)間 min，點(diǎn)擊“下載”，檢查是否按設(shè)定運(yùn)行。重新設(shè)定儀器流速為 ml/min，柱溫為 ，波長(zhǎng) nm，分析時(shí)間 min，及批處理等，點(diǎn)擊“下載”，檢查是否按設(shè)定運(yùn)行。在再分析下處理色譜圖，手動(dòng)積分、參數(shù)調(diào)整等設(shè)置變化后的圖譜顯示是否正常。 檢查人： 復(fù)核人： 日期：8.2 硬件運(yùn)行確認(rèn)內(nèi)容8.2.1 工具名稱型號(hào)/編號(hào)校驗(yàn)期/有效期秒表電子天平數(shù)字探針溫度計(jì) 檢查人： 復(fù)核人： 日期：8.2.2 流量確認(rèn)先將準(zhǔn)備好的5ml容量瓶在電子天平上精密稱定（W1），以水為流動(dòng)相，設(shè)定泵A流量為0.5ml/min，泵B流量

8、為0ml/min，待流速穩(wěn)定后，用秒表計(jì)時(shí)10min，將流出的流動(dòng)相用容量瓶接收，計(jì)時(shí)結(jié)束后將容量瓶進(jìn)行第二次稱重（W2），（W2-W1）即為接收到的水重量，折算出體積即為（W2-W1）/ ，流量即為流出體積/時(shí)間。同法測(cè)定泵B，設(shè)置流量5.0ml/min，計(jì)時(shí)為1min，每個(gè)流量測(cè)定6次，計(jì)算6次流量及流量的SD%與RSD%值，并計(jì)算流量輸出誤差及穩(wěn)定性。SS流量輸出誤差=流量平均值-設(shè)定值×100%流量設(shè)定值SR流量穩(wěn)定性=流量最大值-最小值×100%流量平均值流速(ml/min)重量（g）0.5W1W25.0W1W2設(shè)定流速(ml/min)測(cè)定流量（ml/min）SD

9、%(5%)RSD%(0.5%)SS(±3%)SR(±1.5%)1234560.55.0檢查人： 復(fù)核人： 日期：8.2.3 柱溫的準(zhǔn)確性與穩(wěn)定性確認(rèn)將數(shù)字探針溫度計(jì)固定在色譜柱恒溫箱放置色譜柱處，選擇室溫加10和最高可控溫度的90%兩點(diǎn)進(jìn)行測(cè)量。按溫度從低到高順序升溫，當(dāng)溫度顯示值穩(wěn)定后，每隔5min記錄一次溫度計(jì)顯示溫度，共七次。平均值與設(shè)定值之差為該溫度下的設(shè)定值誤差（T），七次中最大值與最小值之差為控溫穩(wěn)定性TC。設(shè)定溫度()測(cè)定溫度（）RSD%(1.0%)T（±2）TC（1.0）1234567檢查人： 復(fù)核人： 日期：8.2.4 檢測(cè)器波長(zhǎng)的確認(rèn) 紫外波長(zhǎng)

10、標(biāo)準(zhǔn)空白溶液：0.05mol/L硫酸溶液 紫外波長(zhǎng)標(biāo)準(zhǔn)溶液：將重鉻酸鉀放在110烘箱內(nèi)烘約2小時(shí)至恒重，取出后于干燥器內(nèi)冷卻半小時(shí)，準(zhǔn)確稱取0.0600g，放入1000ml容量瓶中，用0.05mol/L硫酸溶液溶解并定容，即得。 打開檢測(cè)器和工作站，開機(jī)預(yù)熱穩(wěn)定后，選取合適帶寬，用1ml注射器向檢測(cè)池內(nèi)注入空白溶液（充滿檢測(cè)池），待檢測(cè)器示數(shù)穩(wěn)定后，在（235±5）nm、（257±5）nm、（313±5）nm、（350±5）nm的各波長(zhǎng)下均將檢測(cè)器示數(shù)歸零。之后再用1ml注射器向檢測(cè)池內(nèi)注入標(biāo)準(zhǔn)溶液（充滿檢測(cè)池）至示數(shù)穩(wěn)定，例如檢定257nm時(shí)，從252

11、nm開始到262nm。每0.5min改變1nm，得到最高（或最低）值對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)與標(biāo)準(zhǔn)溶液特征波長(zhǎng)示值之差，即為波長(zhǎng)示值誤差。特征吸收波長(zhǎng)測(cè)定波長(zhǎng)波長(zhǎng)示值誤差（±2nm）235nm257nm313nm350nm 檢查人： 復(fù)核人： 日期：8.2.5 基線噪音和漂移的確認(rèn)選用阻尼管（2000×0.12nm）代替柱子，以正己烷-正戊醇（997:3）為流動(dòng)相，流速為2.0ml/min，波長(zhǎng)254nm，開機(jī)預(yù)熱，待穩(wěn)定后記錄基線65min，測(cè)得3min至23min內(nèi)基線波動(dòng)幅度作為基線噪音，用檢測(cè)器自身的物理量（mAU）作單位表示，基線漂移用1小時(shí)內(nèi)基線偏離原點(diǎn)的值（mAU /h）作

12、單位表示。 項(xiàng)目測(cè)定結(jié)果結(jié)論可接受標(biāo)準(zhǔn)基線噪音0.1mAU基線漂移 0.5mAU/h檢查人： 復(fù)核人： 日期：8.2.6 前后進(jìn)樣殘留量的確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)溶液：0.0025mg/ml維生素D3溶液空白溶液：流動(dòng)相選用阻尼管（2000×0.12nm）代替柱子，以正己烷-正戊醇（997:3）為流動(dòng)相，流速為2.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為254mn，進(jìn)樣量100µl，按下列樣品進(jìn)樣。項(xiàng)目測(cè)定結(jié)果空白/標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)溶液空白溶液計(jì)算結(jié)果可接受標(biāo)準(zhǔn)峰面積0.2%峰高0.4%檢查人： 復(fù)核人： 日期：9. 性能確認(rèn)9.1 重現(xiàn)性確認(rèn)使用一根阻尼管（2000×0.12nm）代替柱子，以正

13、己烷-正戊醇（997:3）為流動(dòng)相，流速為2.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，進(jìn)樣量100µl，待柱子充分平衡且檢測(cè)器基線穩(wěn)定，噪音和基線符合規(guī)定要求后，取0.0025mg/ml維生素D3溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算6針峰高與峰面積的重現(xiàn)性，即RSD%值。項(xiàng)目123456RSD%(1.5%)峰面積 峰高檢查人： 復(fù)核人： 日期：9.2 線性確認(rèn)使用一根阻尼管（2000×0.12nm）代替柱子，以正己烷-正戊醇（997:3）為流動(dòng)相，流速為2.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，進(jìn)樣量100µl，待柱子充分平衡且檢測(cè)器基線穩(wěn)定，噪音和基線符合規(guī)定要求后，進(jìn)維生素D3溶液0.0015mg/ml、0.0020mg/ml、0.0025mg/ml、0.0030mg/ml、0.0035mg/ml，每個(gè)樣品進(jìn)樣1次，求各濃度樣品的響