血液凝固和影響血液凝固的因素

1、血液凝固和影響血液凝固的因素浙江中醫(yī)藥大學(xué) 14級(jí)臨床醫(yī)學(xué)本部三班 張伊娜【摘要】目的： 通過測(cè)定某些條件下的血液凝固時(shí)間,探究各種因 素對(duì)血液凝固的影響及機(jī)制.方法：取家兔新鮮血液分別置于室溫、 低溫、涂石蠟于試管壁的試管,加棉花、 NaCk肝素、草酸鉀、肺組 織浸液,用竹簽攪拌處理,觀察記錄其凝血時(shí)間并與不做任何處理的 血液凝固時(shí)間進(jìn)行比照,分析凝血時(shí)間的變化.結(jié)果： 經(jīng)棉花、肺 組織浸液處理的血凝時(shí)間較室溫短,經(jīng)NaCk涂石蠟于試管壁處理的 血凝時(shí)間較室溫長,經(jīng)肝素、草酸鉀、低溫處理的血液不凝,經(jīng)竹簽 攪拌的血液不凝且竹簽上纏有乳白色絲狀物.結(jié)論：增加粗糙面、組織因子促進(jìn)血液凝固；稀釋血

2、液、涂石蠟于試管壁可延長凝血時(shí)間； 肝素、草酸鉀、低溫抑制血液凝固.纖維蛋白是血液凝固所必需的.【關(guān)鍵詞】 血液凝固；凝血因子；肝素；纖維蛋白1實(shí)驗(yàn)材料和方法家兔.和器械棉花,石蠟油,碎冰塊,氯化鈉,肝素,草酸鉀,肺組織浸液,氨基甲酸乙酯；試管8支,小燒杯2支,竹簽,兔手術(shù)臺(tái),手術(shù)器械,注射器,動(dòng)脈夾,動(dòng)脈插管,恒溫水浴梢,秒表本實(shí)驗(yàn)用秒表功能.實(shí)驗(yàn)方法1.2.1 家兔稱重后,按5mL/kg體重劑量給家兔耳緣靜脈注射 200g/L 的氨基甲酸乙酯使之麻醉,將兔仰臥并固定于兔手術(shù)臺(tái)上.1.2.2 切開頸部皮膚、肌肉后,使兩側(cè)頸總動(dòng)脈暴露,用玻璃分針別 離一側(cè)頸總動(dòng)脈,頭端用線結(jié)扎,向心端夾上動(dòng)脈

3、夾.用眼科剪在近 結(jié)扎線處的血管壁剪一 “ V形小口,向心方向插入動(dòng)脈插管,用線 結(jié)扎固定.以備取血之用.取8支試管,并編號(hào).按下表實(shí)驗(yàn)條件準(zhǔn)備完畢其中4號(hào)試管14 組加 0.5mLNaCl而 58 組加 2mL NaCl編號(hào)實(shí)驗(yàn)條件1空白對(duì)照2棉花少許3石蠟油潤滑整個(gè)試管外表4浸在盛啟碎冰塊的燒杯中52mL NaCl61mL肝素70.1mL單酸鉀80.1mL肺組織浸液圖示：促凝與抗凝試驗(yàn)1.2.4 放開動(dòng)脈夾,先放一管血后再 18號(hào)管每管參加血液1mL約 試管的1/8,立即用秒表 秒表功能計(jì)時(shí),每隔30s將試管傾 斜一次,觀察血液是否凝固,至血液成為凝膠狀時(shí),記下所歷時(shí)間.其中58號(hào)管需搖晃

4、試管使血液和液體混勻.1.2.5 由頸總動(dòng)脈插管放血,分別注入兩個(gè)小燒杯內(nèi)各10mL, 一杯靜置；另一杯用竹簽不斷地進(jìn)行攪拌 5min,觀察血液的凝固現(xiàn)象.取 出竹簽,用水洗凈,觀察纏繞在竹簽上的物質(zhì).1.2.6 記錄各管的凝血時(shí)間1.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.1 與空白對(duì)照組凝血時(shí)間1號(hào)試管相比：12、8號(hào)試管凝血時(shí)間縮短,且8號(hào)試管凝血最快,2號(hào)其次.23、5號(hào)試管凝血時(shí)間延長,但3號(hào)試管中血凝較5號(hào)快.34號(hào)試管未凝理論上浸在0c冰水混合物中血液不會(huì)凝固,但 實(shí)驗(yàn)條件下冰塊逐漸溶解導(dǎo)致其溫度上升,可能會(huì)出現(xiàn)使4號(hào)管血液凝固的現(xiàn)象4待結(jié)束實(shí)驗(yàn),6、7號(hào)管血液始終不凝.詳見下表:編號(hào)實(shí)驗(yàn)條件凝血時(shí)間mi

5、n與空白組實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)照平均數(shù)X標(biāo)準(zhǔn)差SX+S1空白對(duì)照+2棉花少許+縮短3石蠟油潤滑整個(gè)試管外表+延長4浸在盛啟碎冰塊的燒杯中未凝延長52.0mL NaCl+延長61.0mL肝素不凝延長始終不凝70.1mL單酸不凝延長始終鉀不凝80.1mL肺組織浸液+縮短圖示：促凝與抗凝試驗(yàn)2.2 與對(duì)照組相比,經(jīng)竹簽攪拌過的血液不凝固,竹簽洗凈后上面纏 繞著乳白色絲狀物質(zhì).3實(shí)驗(yàn)討論血液由流動(dòng)的液體狀態(tài)轉(zhuǎn)為不流動(dòng)的凝膠狀態(tài)稱為血液凝固.血液 凝固是生理性止血功能的重要組成局部.3.1.1 凝血因子特性包括12個(gè)經(jīng)典的凝血因子,即FIXin 其中因子V I已被廢除 以及激肽系統(tǒng)的2個(gè)因子,即激肽釋放酶原和高分

6、子量激肽原.除FIV為金屬離子外,其他均為蛋白質(zhì)；除組織因子外,其他均 存在于血漿中2.3.1.2 凝血途徑血液凝固過程是由許多凝血因子參加的酶促反響. 根據(jù)血液凝固過 程中凝血酶原激活途徑不同,可將血液凝固分為內(nèi)源性激活途徑和外 源性激活途徑.1內(nèi)源性凝血途徑：內(nèi)源性凝血途徑是指參與凝血的因子全部 來自血液,通常因血液與帶負(fù)電荷的異物外表如玻璃、白陶土、硫酸酯、膠原等接觸而啟動(dòng).當(dāng)血液與帶負(fù)電荷的異物外表接 觸時(shí),首先是F刈結(jié)合到異物外表,并被激活為F刈a.F刈a的主要功能是激活FXI成為FXIa,從而啟動(dòng)內(nèi)源性凝血途徑.2外源性凝血途徑：由來自于血液之外的組織因子暴露于血液 而啟動(dòng)的凝血過

7、程,成為外源性凝血途徑,又稱組織因子途徑.組織因子是一種跨膜糖蛋白,存在于大多數(shù)組織細(xì)胞.在生理情 況下,直接與循環(huán)血液接觸的血細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞不表達(dá)組織因子, 但約有0.5%的FVH處于活化狀態(tài)FVHab當(dāng)血管損傷時(shí),暴露出組織因子,后者與 FVHa結(jié)合而形成FVH a一組織因子復(fù)合物,后者在磷脂和Ca2+存在的情況下迅速激活 FX生成FXa.由內(nèi)源性和外源性凝血途徑所生成的 FXa,在CsT存在的情況 下可與FVa在磷脂膜外表形成 FXa FVa Ca2+磷脂復(fù)合物,即 凝血酶原復(fù)合物,進(jìn)而激活凝血酶原.凝血酶原的激活和纖維蛋白的生成凝血酶原在凝血酶原復(fù)合物的作用下激活成為凝血酶 3.本實(shí)驗(yàn)

8、采用動(dòng)物頸動(dòng)脈放血取血,血液幾乎未與組織因子接觸.因 此,凝血過程主要是內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的作用. 肺組織浸液中含豐富的 組織因子,參加試管觀察外源性凝血系統(tǒng)的作用.3.2對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果本質(zhì)探究3.實(shí)驗(yàn)中參加棉花后血液凝固時(shí)間較室溫縮短.棉花給血液凝固提供 了一個(gè)粗糙的外表,容易使血小板發(fā)生黏著、聚集,然后釋放許多凝 血因子和血小板因子；另外棉花含許多帶負(fù)電荷的植物纖維, 也能激 活凝血因子xn ,啟動(dòng)內(nèi)源性凝血途徑.3.實(shí)驗(yàn)中涂石蠟油于試管壁血液凝固時(shí)間較室溫延長.由于石蠟油外表光滑,不易引起血小板黏著,即不易使血小板發(fā)揮促進(jìn)凝血的作用.另外石蠟油為絕緣體,其把試管外表所帶的負(fù)電荷覆蓋,不利于凝血

9、因子XII的激活,因而延長凝血時(shí)間.3.實(shí)驗(yàn)中置于低溫后血液凝固時(shí)間較室溫延長. 凝血酶發(fā)揮作用需要 適宜的溫度,當(dāng)溫度降低時(shí),酶的活性就減弱甚至喪失,因此放置于 冰水中的試管血液不凝固.3.我們小組的實(shí)驗(yàn)中參加2mLNaCl血液凝固時(shí)間較室溫延長.原因是 參加的生理鹽水稀釋了血液,使凝血酶的濃度降低,延長了血液凝固 的時(shí)間.而14組參加0.5mLNaCl血液凝固時(shí)間較室溫縮短,可能 不同濃度的NaCl產(chǎn)生效果不同,亦有可能是凝血酶發(fā)揮作用有一個(gè) 最適濃度,越接近最適濃度,凝血時(shí)間越短.3.實(shí)驗(yàn)中參加肝素后血液不會(huì)凝固.肝素是機(jī)體內(nèi)外重要的抗凝物質(zhì). 抗凝血酶與凝血酶等多種凝血因子的活性中央一

10、一絲氨酸殘基結(jié)合, 使這些凝血因子的活性受到抑制或失活, 從而到達(dá)抗凝的作用.肝素 那么主要通過與血漿中的的一些抗凝蛋白, 如抗凝血酶m結(jié)合,增強(qiáng) 后者的抗凝作用.此外肝素還能使血管內(nèi)壁細(xì)胞釋放凝血抑制物和纖 溶酶原激活物,增強(qiáng)纖溶作用.因此在試管內(nèi)放入肝素時(shí)血液不會(huì)發(fā) 生凝固.3.實(shí)驗(yàn)中參加草酸鉀后血液不會(huì)凝固. 凝血過程中cf是重要的凝血 因子,其參與了血液凝固的許多環(huán)節(jié),當(dāng)血液中沒有cf時(shí)血液就不 會(huì)發(fā)生凝固.在試管中參加草酸鉀,由于草酸鉀與 cf發(fā)生反響,生 成草酸鈣沉淀,使血液中沒有 CaT,故血液不會(huì)發(fā)生凝固.3.肺組織浸出液對(duì)血液凝固的影響實(shí)驗(yàn)中參加肺組織浸出液后血液不會(huì)凝固.

11、肺組織浸出液中含有豐 富的組織因子凝血因子田,易通過外源性途徑迅速發(fā)生凝血反響, 因此加肺組織浸出液的試管血液凝固發(fā)生最快.3.實(shí)驗(yàn)中經(jīng)竹簽攪拌實(shí)驗(yàn)后血液不再凝固. 在竹簽上可見乳白色絲狀 物,該物質(zhì)為不溶性的纖維蛋白.血液凝固的實(shí)質(zhì)就是血漿中的可溶 性纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成不溶性的纖維蛋白的過程.纖維蛋白交織成網(wǎng), 把血細(xì)胞和血液的其他成分網(wǎng)羅在內(nèi), 從而形成血凝塊.用竹簽攪動(dòng) 后不溶性的纖維蛋白被粘附在竹簽上,血液中可溶性纖維蛋白原被完 全消耗,不再產(chǎn)生不溶性的纖維蛋白,血液自然無法凝固.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論經(jīng)棉花、肺組織浸液處理的血凝時(shí)間較室溫短, 而涂石蠟于試管壁 處理的血凝時(shí)間較室溫長,說明與粗糙面、負(fù)離子接觸能夠啟動(dòng)內(nèi)源 性凝血途徑使凝血加快,組織因子易通過外源性途徑迅速發(fā)生凝血反 響；經(jīng)2mLNaCl處理的血凝時(shí)間較室溫長,原因是參加的生理鹽水稀 釋了血液,使凝血酶的濃度降低,延長了血液凝固的時(shí)間.但經(jīng) 0.5mLNaCl處理的血液凝固時(shí)間較室溫短,其機(jī)制尚不清；經(jīng)肝素、 草酸鉀、低溫處理的血液不凝,肝素、草酸鉀是較強(qiáng)的