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1、第36講基因工程1. (2013 大綱全國高考)下列實踐活動包含基因工程技術(shù)的是()A.水稻Fi花藥經(jīng)培養(yǎng)和染色體加倍,獲得基因型純合新品種B.抗蟲小麥與矮稈小麥雜交,通過基因重組獲得抗蟲矮稈小麥C.將含抗病基因的重組 DNA導(dǎo)入玉米細胞,經(jīng)組織培養(yǎng)獲得抗病植株D.用射線照射大豆使其基因結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,獲得種子性狀發(fā)生變異的大豆解析:選C A項屬于單倍體育種,原理是染色體變異,不包含基因工程技術(shù);B項屬于雜交育種,原理是基因重組,不包含基因工程技術(shù); C項中將含有目的基因的重組 DNA#入受體細胞,屬于基因工 程,原理是基因重組,包含基因工程技術(shù);D項屬于誘變育種,原理是基因突變,不包含基因工程
2、技術(shù)。2. (2013 廣東.高考)從某海洋動物中獲得一基因,其表達產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強的多 肽Pio目前在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強但溶血性弱的多肽藥物,首先要做的是()A.合成編碼目的肽的 DNA段B.構(gòu)建含目的肽 DNA片段的表達載體C.依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計多條模擬肽D.篩選出具有優(yōu)良活性的模擬肽作為目的肽解析:選C由題意可知,已經(jīng)獲得.該目的基因片段,不需要合成編碼目的肽的DNA段;需要構(gòu)建含目的肽DNA片段的表達載體,但這不是第一步;蛋白質(zhì)工程的第一步是根據(jù)蛋白質(zhì)的功能,設(shè)計P1氨基酸序列,從而推出其基因序列;該基因表達產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強的多肽P1,而目的肽是抗
3、菌性強但溶血性弱的藥物,所以必須對其進行改造,保持其抗菌性,抑制其溶血性。3. (2013 安徽高考)下圖為通過DN6子雜交鑒定含有某特定DNA勺細菌克隆示意圖。下列敘述正確的是()將膜唯光放射門皿影結(jié)果在顯影膠膠片培推帷中包含無如 質(zhì)敕的細的萌落A.根據(jù)培養(yǎng)皿中菌落數(shù)可以準確計算樣品中含有的活菌實際數(shù)目B.外源DNA必須位于重組質(zhì)粒的.啟動子和終止子之間才能進行復(fù)制C.重組質(zhì)粒與探針能進彳T分子雜交是因為DN肪子脫氧核糖和磷酸交替連接D.放射自顯影結(jié)果可以顯示原培養(yǎng)皿中含有特定DNA勺細菌菌落位置解析:選D通過菌落數(shù)只能大約推測出活菌數(shù),不能準確計算活菌數(shù); 外源DNA可以隨質(zhì) 粒復(fù)制而復(fù)制
4、,依賴于質(zhì)粒上的復(fù)制原點,而啟動子和終止子與基因表達有關(guān);DNA雜交是利用堿基互補配對原則進行的;因為放射性標記的DNA探針能與相應(yīng)的 DNA雜交,產(chǎn)生放射自顯影,而只有特定的DNA才與探針相結(jié)合,所以可以顯示原培養(yǎng)皿中含有特定DNA的細菌菌落位置。4. (201 .2 江蘇高考)圖1表示含有目的基因 D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?,F(xiàn)有Mspl、BamH、Mbo I、Sma1 4種限制性核酸內(nèi)切酶,它們識別的堿基序列和酶切位點分別為Ccgg Ggatcc 'gatc ccCGGG請回答下列問題。目的基閑D 1 r 11 i&qu
5、ot;-1 r i-i'i iiii,*i tit ii lT'tti i i t i iGCATCC中 jCGCGCCCGGGGCATCCCITTAGGGGGCCC GGGCCCCCTAGG 中;1 iJI I L L I 丁 1_s_i_i_i 1 1 11 J'I534bp| *796hp* * 65Mp(XiATCX: CCTAGC圖1息曲子碩粒圖NCATC CTAG抗生素H 抗性基因抗生素A 抗性基因CCGGGCCC(1)圖1的一條脫氧核甘酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由 連接。(2)若用限制酶Sma I完全切割圖1中DNA片段,產(chǎn)生的末端是 末端,其產(chǎn)物長度為
6、。(3)若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被 T- A堿基對替換,那么基因 D就突變?yōu)榛騞o從雜合子中分 離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段,用限制酶 Sma I完全切割,產(chǎn)物中共有 種不同長度的 DNA 片段。(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因 D通過同種限制酶處理后進行連接,形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的 限制酶是 。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后, 為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌,一般需要用添加 的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 經(jīng)檢測,部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達,其最可能的原因是解析:本題考查基因工程的操作過程,意在考查考生的識圖能力和分析推理能力。(1) 一條脫氧核甘酸鏈中相鄰的兩個堿基之間是通過“一脫
7、氧核糖一磷酸一脫氧核糖一”相連的。(2)從Smal的識別序列和酶切位點可知,其切割后產(chǎn)生的是平末端,圖 1中DNA片段有兩個Smal的識別序列,故切割后 產(chǎn)生的產(chǎn)物長度為 534+3= 537(bp)、79633 = 790(bp)和658 + 3= 661(bp)的三個片段。(3)圖示方 框內(nèi)發(fā)生堿基的替換后,形成的 d基因失去了 1個Snal的識別序列,故 D基因、d基因用Sma!完全 切割所得產(chǎn)物中,除原有D基因切割后形成的3種長度的DNM段外,還增加一種d基因被切割后出現(xiàn) 的長度為537+790= 1 327(bp)的DNA片段。(4)目的基因的兩端都有 BamH的識別序列,質(zhì)粒的啟動 子后抗生素A抗性基因上也有 BamH的識別序列,故應(yīng)選用的限制酶是BamH ,此時將抗生素 B抗性基因作為標記基因, 故篩選時培養(yǎng)基中要添加抗生素 Bo因為經(jīng)同種限制酶切割后目的基因和質(zhì)粒有正 反兩種連接方式,若重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細胞卻不能正確表達,很可能是由于導(dǎo)
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