他克林對(duì)急性胰腺炎大鼠血清細(xì)胞因子的影響研究

1、他克林對(duì)急性胰腺炎大鼠血清細(xì)胞因子的影響研究         11-03-09 15:33:00     編輯：studa20            作者：汪建初，浦澗，潘小炎，韋忠恒，陸濤，馬燕飛，韋邦寧，馬日海  【摘要】  目的 探討靜脈注射他克林對(duì)急性胰腺炎大鼠細(xì)胞因子的影響。方法 健康Wistar大鼠108只，隨機(jī)分為假手術(shù)組、

2、對(duì)照組、他克林組各36只，分別測(cè)定三組動(dòng)物模型建立成功后1 h、12 h、24 h、36 h、48 h、72 h血清中TNF、 IL6、IL10的含量變化。結(jié)果 假手術(shù)組各細(xì)胞因子均處于較低水平，對(duì)照組較假手術(shù)組各個(gè)時(shí)段細(xì)胞因子水平都明顯升高（P0.05），而他克林組大鼠細(xì)胞因子TNF、IL6在1 h、12 h、24 h、36 h、48 h、72 h時(shí)也明顯較假手術(shù)組升高（P0.05），但是其升高幅度與對(duì)照組相比明顯降低(P0.05)。他克林組保護(hù)性細(xì)胞因子IL10在發(fā)病初1小時(shí)有升高，與對(duì)照組相比P=0.933；而在1272 h，IL10升高明顯，并逐步達(dá)到一定高度，與對(duì)照組相比有顯著性差異

3、（P0.05）。結(jié)論 靜脈注射他克林能夠降低胰腺炎大鼠血清損傷性細(xì)胞因子TNF、IL6的釋放，升高保護(hù)性細(xì)胞因子IL10水平。 【關(guān)鍵詞】  膽堿能抗炎通路 細(xì)胞因子 急性胰腺炎【Abstract】  Objective  To investigate how the cholinergic antiinflammatory pathway influncing the cytokine level in laboratory rats with pancreatitis. Methods  108 Wistar rats were randomly d

4、ivided into sham group (SG),control group (CG) and tacrine injection group(TG),serum cytokines content variation of  TNF,IL6,IL10 in different period were determined.Results  Serum concentrate of cytokines in SG keep a low level,but what in CG were higher than that in SG, which is signiffi

5、cant statistically(P0.05).The concentrate of TNF,IL6 in TG were higher than that in SG,in each period（P0.05）.But much lower than that  in CG (P0.05). Serum level of IL10 in TG start rising in 1 hour,but it has no signifficance comparing to control group（P=0.933）.At 1272h,the IL10 level rised to

6、 a high level in TG,which was higher than in CG (P0.05).Conclusion  Tacrine intravenous injection could increased serum protective cytokine IL10 level, but decreased injury cytokines TNF,IL6 content in laboratory rats with pancreatitis.【Key words】  cholingeric antiinflammatory pathway；cyto

7、kine；acute pancreatitis細(xì)胞因子在重癥急性胰腺炎（SAP）發(fā)病中起著重要的作用，抗細(xì)胞因子是治療SAP一個(gè)重要的方向。新近研究發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)之間存在著一定的關(guān)系，即膽堿能抗炎系統(tǒng)，神經(jīng)系統(tǒng)通過(guò)膽堿能系統(tǒng)對(duì)機(jī)體的炎癥反應(yīng)起著調(diào)控作用。本研究通過(guò)制作急性胰腺炎動(dòng)物模型，靜脈注射膽堿酯酶抑制劑他克林（tacrine），從而觀察興奮膽堿能通路對(duì)急性胰腺炎大鼠血清中細(xì)胞因子水平影響。材料和方法    1.實(shí)驗(yàn)分組 Wistar大鼠108只，由右江民族醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供，重300350 g，根據(jù)實(shí)驗(yàn)方法分為假手術(shù)組、對(duì)照組、他克林組各36只。假

8、手術(shù)組行開腹髂內(nèi)靜脈插管術(shù)，對(duì)照組制作胰腺炎動(dòng)物模型并行髂內(nèi)靜脈插管，他克林組行胰腺炎模型制作及髂內(nèi)靜脈分離插管并經(jīng)髂內(nèi)靜脈注射他克林（1.5 mg·kg-1·次-1,每6小時(shí)注射一次）。    2.試劑和議器  大鼠TNF、IL6、IL10酶聯(lián)免疫吸附試劑盒由深圳精美公司提供；牛黃膽酸鈉由美國(guó)SIGMA公司提供；配超低溫冰箱等。    3.模型制作  胰腺炎模型：術(shù)前禁食12小時(shí),自由飲水,用氯氨酮腹腔注射麻醉(100 mg/ kg)成功后,剪去腹部毛發(fā),消毒,鋪無(wú)菌巾。經(jīng)上腹部正中切口進(jìn)入腹

9、腔,提起胃、十二指腸,顯露出胰腺,確認(rèn)膽胰管,在其近端和遠(yuǎn)端均以動(dòng)脈夾或一號(hào)絲線暫時(shí)結(jié)扎,將帶有四號(hào)針頭的1 ml 注射器沿十二指腸壁漿肌層穿刺距離膽胰管開口0.30.4 cm處的膽管,注入4%的硫磺膽酸鈉0.1 ml/100 g，以0.2 ml/min 的速度注射畢,停留4 分鐘,去除結(jié)扎線,指壓穿刺點(diǎn),查無(wú)漏膽,逐層關(guān)腹。    4.細(xì)胞因子測(cè)定  分別在模型制作完成后1 h、12 h、24 h、36 h、48 h、72 h取各組大鼠髂內(nèi)靜脈血,取上清液離心15分鐘后用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清中TNF、IL6、IL10含量。5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析  所有數(shù)據(jù)均以-±s表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包，作重復(fù)測(cè)量方差分析。結(jié)果   假手術(shù)組各細(xì)胞因子均處于較低水平，對(duì)照組較假手術(shù)組各個(gè)時(shí)段細(xì)胞因子水平都明顯升高，TNF和IL6水平在48 h時(shí)達(dá)到高峰，72 h時(shí)均有所降低，而保護(hù)性細(xì)胞因子IL10呈逐步增高走勢(shì)，在4872小時(shí)時(shí)仍然維持在較高水平。他克林組大鼠，細(xì)胞因子TNF，IL6在1 h、12 h、24 h、36 h、48 h、72 h時(shí)明顯較假手術(shù)組升高（P0.05），但是其升高幅度與對(duì)照組相比較明顯降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。他克林組保護(hù)性細(xì)胞因子IL10在發(fā)病初1小時(shí)