分析方法驗(yàn)證方案

1、下載可編輯異煙肺含量測(cè)定分析方法驗(yàn)證方案.專業(yè).整理.驗(yàn)證原因:新項(xiàng)目驗(yàn)證再驗(yàn)證V 其它驗(yàn)證類型:I預(yù)驗(yàn)證回顧性驗(yàn)證轉(zhuǎn)移驗(yàn)證方法描述:本分析方法為中國(guó)藥典 2010版二部方法。為確保其檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，對(duì)該分析方法的專屬性、精密度（系統(tǒng)精密度、方法精密度、中間精密度） 、線性和范圍、準(zhǔn)確度、耐用 性進(jìn)行評(píng)價(jià)。驗(yàn)證依據(jù):中國(guó)藥典2010年版分析方法（295頁(yè)）驗(yàn)證時(shí)間:2010年07月09日2010年07月10日驗(yàn)證項(xiàng)目組成員及職責(zé)：部門成員職責(zé)QC儀器設(shè)備的確認(rèn)QC分析方法編寫QC分析測(cè)試QC數(shù)據(jù)評(píng)估質(zhì)量部審核批準(zhǔn)驗(yàn)證內(nèi)容:-序列號(hào)確認(rèn)測(cè)試項(xiàng)目可接受標(biāo)準(zhǔn)01儀器設(shè)備的確認(rèn)01.1高效液相色譜儀的確

2、認(rèn)符合儀器設(shè)備的確認(rèn)要求01.2天平的確認(rèn)符合儀器設(shè)備的確認(rèn)要求02具體測(cè)試內(nèi)容異煙肌峰面積RS慶2.0%,02.1系統(tǒng)精密度保留時(shí)間RS改2.0%。異配置1份異煙肥工作標(biāo)準(zhǔn)溶液，連續(xù)進(jìn)針 6次，記錄煙冊(cè)理論塔板數(shù)大于異煙肌峰面積、保留時(shí)間。4000,拖尾因子在 0.9 1.4之間。02.2方法精密度平行配制同一批樣品的6份樣品溶液，每份溶液進(jìn)樣2針，計(jì)算樣品含量及其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。樣品含量的RS52.0%。02.3線性和范圍以異煙肥工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為 100%配制20% 60% 100% 140% 180麻度的工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液，每個(gè) 濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)樣1次，計(jì)算出回歸方程和相關(guān) 系數(shù)R。R

3、>0.99902.4準(zhǔn)確度該定量方法的回收率應(yīng)為以異煙肥工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為 100%取同一批樣 品，配制濃度為80% 100%口 120%勺樣品溶液各3份， 每份進(jìn)樣2針。計(jì)算具回收率。98.0% 102.0%。02.5耐用性理論塔板數(shù)大于4000,拖配制異煙酸和異煙肌混合溶液，JTT取條件改變方法，尾因子在0.91.4之間，穩(wěn)定后按順序進(jìn)樣，計(jì)算異煙冊(cè)的理論塔板數(shù)，混合分離度R> 1.5 ,相對(duì)保留溶液中異煙酸和異煙肌的相對(duì)保留時(shí)間 RRT時(shí)間RRT®差絕對(duì)值不大a.改變流速為 0.9ml/min 和 1.1ml/min 。b.改變柱溫為23c和27Coc.改變流動(dòng)

4、相緩沖液與甲醇配比為 83:17和87:13。d.同一填料/、同色譜柱。于 20%。03程序及文件03.1液相色譜儀校正規(guī)程符合要求03.2液相色譜儀操作規(guī)程符合要求03.3分析天平校正規(guī)程符合要求03.4分析天平操作規(guī)程符合要求驗(yàn)證前準(zhǔn)備:a）人員培訓(xùn):培訓(xùn)人姓名培訓(xùn)時(shí)間培訓(xùn)內(nèi)容b）儀器設(shè)備、標(biāo)準(zhǔn)品和試劑:儀器設(shè)備儀器名稱型號(hào)編號(hào)校驗(yàn)后效期圖效液相色譜儀MODEL200標(biāo)準(zhǔn)品和試劑名稱級(jí)別廠家批號(hào)c）樣品名稱廠家批號(hào)驗(yàn)證過程:色譜條件色譜條件色譜柱：agilent ODS-2 長(zhǎng)度：250cm,內(nèi)徑：4.6mm,填料C18 ,填料粒度：5m 檢測(cè)波長(zhǎng)：262nm帶寬30柱溫：25 C進(jìn)樣量：

5、20 口流速：1.0ml/min流動(dòng)相A: 0.02mol/l磷酸氫二鈉溶液（用磷酸調(diào) pH至6.0）,流動(dòng)相B:甲醇A:B=85:15停止時(shí)間：12min1 .系統(tǒng)精密度1.1 .溶液配制系統(tǒng)精密度溶液：取異煙肌10mg置100ml容量瓶中，精密稱量，用水溶解并稀釋至刻度。1.2 驗(yàn)證過程及結(jié)果系統(tǒng)精密度溶液連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄其異煙肌峰面積、保留時(shí)間?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：異煙肌峰面積 RS改2.0%,保留時(shí)間RS改2.0%。廳P保留時(shí)間（min）峰面積123456RSD%結(jié)論:2 .重現(xiàn)性試驗(yàn)（方法精密度）2.1 溶液配制2.1.1. 對(duì)照溶液：取異煙肥工作標(biāo)準(zhǔn)品10mg精密稱量，置100ml容量瓶

6、中，用水溶解 并稀釋至刻度。2.1.2. 方法精密度溶液：取異煙肥樣品10mg置100ml容量瓶中，精密稱定，用水溶解并 稀釋至刻度。用此方法配置同一批號(hào)的樣品溶液6份。2.2 驗(yàn)證程序及結(jié)果工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)2針，樣品溶液各進(jìn)2針。記錄異煙肌峰面積，計(jì)算樣品含量?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：異煙肌含量的RS氏2.0%。樣品批號(hào)：稱樣里（mg峰面積含量%RS陰12平均值結(jié)論:3 .線性和范圍3.1 溶液配制3.1.1. a供試品溶液：取異煙肌50mg置100ml容量瓶中，精密稱量，用水溶解并稀釋 至刻度，混勻，即得。3.1.2. 線性點(diǎn)溶液：精密移取a供試品溶液5ml、2ml、1ml、分別置10ml容量瓶中，用

7、 水稀釋至刻度，得到濃度約為50ug/ml （d供試品溶液）、100ug/ml （c供試品溶液）、 250ug/ml （b供試品溶液）、500ug/ml （a供試品溶液）的線性點(diǎn)溶液，再精密移取 1ml b供試品溶液1ml置100ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，得到濃度約為2.5ug/ml （e供試品溶液）。3.2 驗(yàn)證程序及結(jié)果按色譜條件分別對(duì)線性點(diǎn)溶液進(jìn)行分析，每個(gè)溶液進(jìn)樣1次。以濃度為X軸，主峰峰面積平均值為Y軸，畫出線性圖，求出回歸方程，計(jì)算線性相關(guān)系數(shù)R?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：R> 0.999項(xiàng)目(X)(X0(X3)X4)(%)線性點(diǎn)溶液濃度（ug/ml）異煙肌峰面積線性范圍（ug/ml）

8、線性回歸方程相關(guān)系數(shù)R結(jié)論:4 .準(zhǔn)確度4.1 溶液配制4.1.1. 對(duì)照溶液：取異煙肌10mg置100ml容量瓶中，精密稱量，用水溶解并稀釋至刻 度，混勻，即得。4.1.2. 準(zhǔn)確度溶液：以對(duì)照溶液濃度為100%配置80% 100120麻度的準(zhǔn)確度溶液。 即分別取同一批異煙肥樣品8mg 10mg 12mg至100ml容量瓶中，精密稱量，用水 溶解并稀釋至刻度。每個(gè)濃度的準(zhǔn)確度溶液配制3份。4.2 驗(yàn)證程序及結(jié)果按照色譜條件分別對(duì)對(duì)照溶液和準(zhǔn)確度溶液進(jìn)行分析，每個(gè)溶液各進(jìn)2針，按外標(biāo)法計(jì)算準(zhǔn)確度溶液中異煙肥含量，計(jì)算其回收率?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：該定量方法的回收率應(yīng)為 98.0%102.0%?；厥章蔙

9、SDX2.0%。樣品批號(hào)相應(yīng)含量稱樣量(mg峰面積實(shí)測(cè)量(mg)回收率12平均值80%100%120%結(jié)論:5 .耐用性5.1 溶液配制5.1.1. 混合溶液：精密稱取10mg異煙酸和10mg異煙冊(cè)樣品置100ml容量瓶中，用水溶 解并稀釋至刻度，混勻，即得。5.2 驗(yàn)證過程及結(jié)果按下列條件改變方法，原條件溶液和改變色譜條件的順序進(jìn)樣，計(jì)算異煙冊(cè)的理論塔板數(shù)，拖尾因子。計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間 RRT®差絕對(duì)值。a.改變柱溫為23c和27cb.改變流速為 0.9ml/min 和 1.1ml/min 。c.改變0.02mol/l磷酸氫二鈉溶液（磷酸調(diào)pH至6.0）與甲醇配比為87:13和83:

10、17。d.選用同一填料的兩個(gè)不同色譜柱比較可接受標(biāo)準(zhǔn)：理論塔板數(shù)大于 4000,拖尾因子在0.91.4之間。分離度R> 1.5,相對(duì)保留時(shí)間RRT偏差絕對(duì)值不大于20%條件異煙肌理論塔板數(shù)異煙肌拖尾因子原條件a0.9ml/min1.1ml/minb23 c27 cc87:1383:17d色譜柱1色譜柱2條件異煙酸RRT偏差絕對(duì)值%原條件a23 c27 cb0.9ml/min1.1ml/minc87:1383:17d色譜柱1色譜柱2結(jié)論:驗(yàn)證結(jié)論:驗(yàn)證結(jié)果見表驗(yàn)證項(xiàng)目可接受標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證結(jié)果判定系統(tǒng)精密度異煙肌的峰面積及保留時(shí) 間的RSD%均不大于 2.0%。異煙肌理論塔板數(shù) 大于4000。方法精密度RS陰不大于2.0 %線性和范圍線性回歸系數(shù)R