動物遺傳試驗果蠅誘變試驗報告

1、綜合實驗：果蠅的誘變目的意義：1采用物理法、化學法等多種實驗手段，使果蠅發(fā)生誘發(fā)突變，通過其遺傳現(xiàn)象找出突變的 規(guī)律和特點。2學會自主設計實驗，培養(yǎng)獨立思考和團隊合作精神，培養(yǎng)嚴謹的科學態(tài)度實驗材料（主要）：果蠅 物理誘變劑（紫外線燈）化學誘變劑（方便面防腐劑）實驗原理：1實驗證明，紫外線的生物學效應主要是通過直接或間接作用引起DNA變化而造成的DNA結構形式的變化很多，如 DNA鏈的斷裂、DNA分子內和分子間的交聯(lián)、 DNA與蛋 白質的交聯(lián)、胞嘧啶的水合以及嘧啶二聚體的形成等，都是引起突變的原因，而主要原因是胸腺嘧啶二聚體的形成。DNA雙鏈之間胸腺嘧啶二聚體的形成會阻礙雙鏈的分開和下一步 復

2、制，而同一鏈上相鄰胸腺嘧啶間二聚體的形成則會阻礙堿基的正常配對，破壞腺嘌呤的正常摻入作用，因此復制將在這一點上停止或錯誤地進行，使新形成的鏈上有1個改變的堿基順序，在隨后的復制過程中便產生 1個在兩條鏈上堿基順序都改變了的分子，于是引起了突 變。2在制作培養(yǎng)基時各培養(yǎng)基添加不同劑量的防腐劑，可以觀察不同劑量防腐劑對果蠅生活狀況的影響甚至會觀察到果蠅的變異。實驗操作：（一）果蠅的飼養(yǎng)【3月26日】I 制作培養(yǎng)基果蠅以酵母菌為食常采用發(fā)酵的培養(yǎng)基繁殖酵母菌飼養(yǎng)果蠅1培養(yǎng)基配方：水100ml 瓊脂1.2g 葡萄糖 10g 玉米粉12g 酵母膏1.4g2培養(yǎng)瓶的滅菌：將飼養(yǎng)瓶放入高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌

3、。（當高壓鍋達到100 C時進行第一次放氣； 溫度達到121 C時，保持15min，拔掉電源，自然冷卻后取出飼養(yǎng)瓶）3酒己制培養(yǎng)基：量取75ml水倒入大燒杯中進行加熱，另取 25ml水倒入下燒杯中，加入玉米粉 12g，拌 勻。將瓊脂倒入大燒杯中，充分煮溶后，加入葡萄糖10g和攪拌均勻的玉米粉煮沸。稍冷后加入酵母膏，再滴加2滴丙酸。4培養(yǎng)基的分裝：充分調勻后將其分入到兩個已經滅菌的飼養(yǎng)瓶中，勿使飼料粘附瓶壁。待冷卻后，用酒精棉球將瓶壁上的水汽擦凈，賽上棉塞。II 原種的培養(yǎng)將野生型果蠅與*果蠅分別接種到兩個培養(yǎng)基上，各品種分別培育。將輕度麻醉的果蠅 用毛筆刷刷如傾斜的培養(yǎng)瓶瓶壁上，待其蘇醒后再將

4、瓶立起，以免國蠅粘附培養(yǎng)基上不能動彈而死亡。置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（二）紫外線誘變【4月9號】I .紫外線操作原理：1通過查閱資料，紫外線有效波長誘變果蠅半致死時間約為15min。于是我們設置誘變的梯度分別為 5min , 10min , 15min , 20min,25min。2誘變所用的雌果蠅必須為處女蠅。誘變的前幾天放出親本瓶中的所有果蠅，每隔10-12小時收集一次羽化的成蠅，并將雌雄蠅分開培養(yǎng)I .誘變操作【4月 9號】1處理前需將紫外線燈穩(wěn)定三十分鐘。2準備6個培養(yǎng)瓶分別編號1、2、3、4、5、6備用3各取雌雄果蠅10只分別置于兩空瓶中， 置于紫外燈下，距燈管28.5cm處照射5mi

5、n，然 后從各瓶中挑選各5只,接種到2號瓶中；分別取果蠅以相同的處理方法處理 10、15、20、25min 以同樣的方法接種到3、4、5、6,號瓶中。1號瓶接種未作任何處理雌雄果蠅各 5只作對照組。（各組雌果蠅必須為處女蠅）4確定每組均完全存活后將以上各瓶置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。5培養(yǎng)10天后觀察果蠅并記錄每瓶果蠅中果蠅數目及是否有變異個體，做好記錄；然后 將成蟲全部倒掉繼續(xù)培養(yǎng) 2天后在觀察果蠅數目和誘變個體，記錄。以相同的方式每隔兩天觀察記錄一次連續(xù)觀察四次。m .根據第一次觀察結果縮小梯度重復實驗。【4月20號】我們的結果是15、25min照射各有一只殘翅突變個體，根據結果我們確定重復試驗

6、的梯度為15、17、19、21、23、25min，其他操作同II .誘變操作（三）化學誘變（防腐劑）【4月9號】I .誘變原理：在制作培養(yǎng)基時各培養(yǎng)基添加不同劑量的防腐劑，觀察不同劑量防腐劑對果蠅的生長狀況的影響及有可能會引起性狀變異。I .操作步驟：1隨機買方便面一包，放入常溫水中浸泡 10分鐘，去上層濁液（主要成分為防腐劑）備用2取空培養(yǎng)瓶6個編號1-6,其中1號作為空白對照3配制培養(yǎng)基（）在溶解混合各營養(yǎng)物質時在2-6號培養(yǎng)基中依次加入該濁液 10滴，20滴，30滴，40滴，50滴。其他操作不變4從培養(yǎng)箱中取出野生型果蠅培養(yǎng)瓶（雌蠅為處女蠅），取空瓶一個，同時打開蓋子，迅速接口，將果蠅趕

7、到空瓶中，蓋上培養(yǎng)瓶，滴4滴乙醚到棉塞上，塞在空瓶上，一手拿底部，一手拿瓶口，上下輕輕搖晃，直到所有果蠅躺在瓶底，無活動跡象5隨機選出5組果蠅，每組雌雄各 5只接種到1-6號培養(yǎng)基中6確定每組均完全存活后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，觀察后代變異情況并記錄【具體操作見（二）誘變操作4】注意事項1制備培養(yǎng)基，待冷卻后，用酒精棉球將瓶壁上的水汽擦凈，賽上棉塞。2. 麻醉過硬的時候使用的麻醉劑要適量，并且處死麻醉多余的果蠅防止影響果蠅純度。3. 將輕度麻醉的果蠅用毛筆刷刷如傾斜的培養(yǎng)瓶瓶壁上，待其蘇醒后再將瓶立起，以免國蠅 粘附培養(yǎng)基上不能動彈而死亡。4. 誘變所用的雌果蠅必須為處女蠅。從接種到觀察后放生時間要

8、充足，否則會導致子代數量 過少，影響實驗結果甚至導致實驗失敗。5. 紫外線照射時注意自身安全，防止照傷眼睛。同時在每次處理實驗組時，照射方式及距離 應保持一致，盡量控制單一變量。實驗結果I .紫外線誘變1對不同照射時間的果蠅培養(yǎng)瓶進行培養(yǎng)、觀察統(tǒng)計，結果見表照射時間成蟲數觀察時間變異個體數及其性狀表現(xiàn)4月20日4月22日4月24日4月26日0min5137413005min0000010mi n45312832015mi n373428311,小翅不明顯20mi n35293432025mi n293429361,小翅明顯2根據結果一進行了第二次試驗，縮小了梯度，結果如下X 照射時間成蟲數觀察

9、時間變異個體數及 其性狀表現(xiàn)5月1日5月3日5月5日15mi n462426017mi n353528019mi n412924021mi n3422241小翅23mi n302125025mi n4225231,殘翅3誘變結論:經紫外線照射的成蠅，當代表現(xiàn)為行動不穩(wěn)、動作的準確性明顯降低、明顯失去方向的準確性，嚴重者腹部膨脹，長時間紫外線照射后很快所有成蠅都明顯地行動遲緩、不停地跌倒，并在短時間內身體弓起、翅直立，呈死亡狀態(tài)紫外線照射不僅直接傷害當代成蠅，而且對子代也有影響。紫外線照射果蠅能夠引起果蠅行為上、生理上、遺傳上的變化紫外線照射極顯著地降低了果蠅的壽命，使果蠅成蠅的存活時間明顯縮短

10、，照射時間越長，對果蠅成蠅的壽命影響就越大。紫外線照射能夠抑制果蠅的產卵量，并且能夠降低卵的成活率； 經過紫外線照射果蠅成蠅后對子二代個體的生長發(fā)育有明顯的抑制作用，而且出現(xiàn)了變異后代。H防腐劑誘變除對照組外，其他組果蠅均死亡 .實驗總結此實驗主要包括三部分： 果蠅培養(yǎng)，紫外線誘變，防腐劑誘變。在果蠅培養(yǎng)過程在子代 中意外的發(fā)現(xiàn)與親代性狀不同的個體一只，可能是由于品種不純或者是接種時混雜；紫外線誘變實驗總體上來說是成功的，但是2號培養(yǎng)瓶果蠅全部死亡， 我們猜測可能是因為培養(yǎng)基制作失敗導致的；防腐劑誘變可能是實驗設計方面的錯誤，除對照組外，其他培養(yǎng)基上果蠅全部死亡，實驗失敗。為了提高實驗的成功率

11、， 我們在接種過程中要避免果蠅混雜，每次麻醉后沒有用完的果蠅應該全部處死。接種注意正確的操作方法，確保每次接種果蠅成活后再放入恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。在進行誘變的過程中， 雌蠅要選用處女蠅， 并且誘變后培養(yǎng)的時間要足夠長，防止子代數目過少。為了得到更加準確的結果，要不斷的縮小誘變時間梯度，以便更好的確定最適合的誘變時間，得到大量誘變個體。防腐劑誘變實驗設計方面存在嚴重的問題，存在太多的不確定性而且沒有先關資料參考查閱。比如不同的方便面含防腐劑量不同，或或者由于我們處理方法處理時間不同，得到的提取液中防腐劑濃度不確定。 而且提取液中很有可能里面含有其他致死物質，這些都是需要試驗驗證的。我們的實驗缺

12、少最初的試驗，無法排除其他一些相關因素的影響，也無法確定我們需要在哪一個范圍內設計方案。心得體會果蠅誘變實驗感想通過果蠅誘變這個綜合實驗，我們能更容易去理解和接受遺傳學的抽象概念和原理，這不僅僅是一個探索生物遺傳奧秘的過程，更是一個發(fā)現(xiàn)問題、分析問題、解決問題的過程。根據這個課題我們自己去思考問題，自主設計實驗，動手操作，這能讓我們學會進行科學研究的方法，為今后參加科學研究工作打下堅實的基礎，可以說對我們的意義重大。所以我們小組都很珍惜這個鍛煉動手能力和思維創(chuàng)新能力的好機會，通過七個人組成的團隊合作與分工合作，大家一起努力，達到了實驗預期的效果。當中經歷，非三言兩語可以盡訴，其間收 獲，更是我

13、們不可多得的一份豐厚財富。應該說，我們的實驗題目開放性還是很大的，因為可以用來誘變的誘變的物理因素化學因素有很多，但是由于實驗室條件的限制，很多實驗我們也沒法去做。本次試驗我們主要以紫外線和方便面防腐齊頒個因素作為誘變因素。實驗的每一個流程都要考慮的細致全面， 每一步操作都要進行的合理到位。從制作培養(yǎng)基到果蠅的接種、誘變等看似簡單但其間一步操作不好或者實驗設計不當考慮不周都有可能會導致實驗的失敗。比如我們誘變時紫外線照我們通過努力順利地解決問題，這種增強分析解決問題能力， 也同時拓更重要的是能給我們帶來一些啟示,射5min的實驗組，果蠅誘變后接種最終全部死亡，與其他組對比分析，我們估計可能由于 培養(yǎng)基制作出現(xiàn)問題，導致該組最終失敗。從最初培養(yǎng)基的制作到最后看到成功誘變出果蠅,開放的自主實驗使得我們可以更深入的理解實驗的原理, 寬了我們的思維創(chuàng)新能力，為以后的科研工作做好鋪墊。比如通過這個綜合實驗，我發(fā)現(xiàn)我們能力的欠缺，動手實踐、分析問題等方面存在的不足。