西地蘭洋地黃類對心肌收縮力的影響改動版1精編版

1、醫(yī)藥資料推薦西地蘭（洋地黃類藥物）對心 肌收縮力的影響實驗人員：張臨雪、張雅潔、張杰、張杰、趙晶晶、張瀟元、趙遠(yuǎn)卓院系：2014級口腔醫(yī)學(xué)院班級：1班第一實驗室第三小組指導(dǎo)老師：段萍1醫(yī)藥資料推薦西地蘭對心肌收縮力的影響【原理】西地蘭，又名毛花苷C,是治療急性心力衰竭時最常用的洋地黃類 強(qiáng)心藥之一。1. 洋地黃類藥物包括：地高辛、西地蘭、毒毛旋花子甙K等。洋地黃類藥物的藥理作用主要是正性肌力和負(fù)性頻率，所以常用于治療心力衰竭和房顫。2. 洋地黃類藥物的共同特點是有效治療量、中毒量和致死量三者相當(dāng)接近。3. 洋地黃藥物的作用機(jī)制：1. 正性肌力作用：三方面因素決定著心肌收縮過程，它們是收縮蛋白及

2、其調(diào)節(jié)蛋白；物質(zhì)代謝 與能量供應(yīng)；興奮-收縮偶聯(lián)的關(guān)鍵物質(zhì)Ca2+。洋地黃與細(xì)胞膜上Na+-K+-ATP酶相結(jié)合并抑制其活性。體內(nèi)條件下，治療 量強(qiáng)心甙抑制Na+-K+-ATP酶活性約20%使鈉泵失靈，結(jié)果是細(xì)胞內(nèi)Na+量增多， K+量減少。胞內(nèi)Na+量增多后，再通過Na+-Ca2+雙向交換機(jī)制，或使Na+內(nèi)流減 少，Ca2+外流減少，或使Na+外流增加，Ca2吶流增加。對Ca2+而言，結(jié)果是細(xì) 胞內(nèi)Ca2+量增加，肌漿網(wǎng)攝取Ca2+也增加，儲存增多。另也證實，細(xì)胞內(nèi) Ca2+ 少量增加時，還能增強(qiáng)Ca2+離子流，使每一動作電位2相內(nèi)流的Ca2+增多，此 Ca2+又能促使肌漿網(wǎng)釋放出Ca2+即

3、“以鈣釋鈣”的過程。這樣，在強(qiáng)心甙作用 下，心肌興奮時，有較多的 Ca2+釋放；心肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增高，激動心肌收 縮蛋白從而增加心肌收縮力。i醫(yī)藥資料推薦在多種條件下，強(qiáng)心甙的正性肌力與 Na+-K+-ATP酶的抑制之間顯示了平行 關(guān)系：如細(xì)胞內(nèi)Na+增加，能使兩種作用的發(fā)生速率都加快；細(xì)胞外 K+增加則降 低兩作用的發(fā)生速率；減少細(xì)胞外K+使兩種作用都能延長；另見強(qiáng)心甙對不同種 類動物的這兩種作用在強(qiáng)度上也有差異，然二種作用的差異也是相符的。這些平 行關(guān)系為上述作用機(jī)制提供了有力的支持。2. 負(fù)性頻率作用：即減慢竇性頻率，對CHF而竇律較快者尤為明顯。這一作用由強(qiáng)心甙增強(qiáng)迷 走神經(jīng)傳出

4、沖動所引起，也有交感神經(jīng)活性反射性降低的因素參與。這主要是增 敏竇弓壓力感受器的結(jié)果。因 CHF寸感受器細(xì)胞Na+-K+-ATP酶活性增高，使胞 內(nèi)多K+,呈超極化，細(xì)胞敏感性降低，竇弓反射失靈，乃使交感神經(jīng)及RAAS功能提高。強(qiáng)心甙直接抑制感受器 Na+-K+-ATP酶，敏化感受器，恢復(fù)竇弓反射。 得以增強(qiáng)迷走神經(jīng)活性，并降低交感神經(jīng)活性。3. 心臟電生理作用：通過對心肌電活動的直接作用和對迷走神經(jīng)的間接作用，降低竇房結(jié)自律 性；提高普肯野纖維自律性；減慢房室結(jié)傳導(dǎo)速度，延長其有效不應(yīng)期，導(dǎo)致房 室結(jié)隱匿性傳導(dǎo)增加，可減慢心房纖顫或心房撲動的心室率；由于本藥縮短心房 有效不應(yīng)期，當(dāng)用于房性心

5、動過速和房撲時，可能導(dǎo)致心房率的加速和心房撲動 轉(zhuǎn)為心房纖顫；縮短普肯野纖維有效不應(yīng)期。二、洋地黃中毒最嚴(yán)重的是心毒性反應(yīng)，可出現(xiàn)各種心律失常，多見早見的是室性早搏，約 占心反應(yīng)的33%次為房室阻滯約為18%房室結(jié)性心動過速17%房室結(jié)代節(jié)律 12%房性過速兼房室阻滯10%室性過速8%竇性停搏2%這些心律失常由三 方面毒性作用所引起：由浦肯野纖維自律性增高及遲后除極觸發(fā)活動所致的異位 節(jié)律的出現(xiàn)；房室結(jié)傳導(dǎo)性的抑制；竇房結(jié)自律性的降低。本實驗是利用離體蛙心灌流的方法， 來觀察西地蘭的強(qiáng)心作用和過量后的中 毒癥狀?！灸康摹?、觀察藥物西地蘭對離體蛙心收縮力的影響（強(qiáng)心作用和中毒癥狀）2、掌握離體

6、蛙心的實驗操作過程?！緦嶒瀸ο蟆可頎顩r差不多的成年牛蛙2只【實驗器材】蛙類手術(shù)器械若干。生物信號采集處理系統(tǒng)。張力換能器，鐵 支架，雙凹夾，試管夾，蛙心插管，蛙心夾，注射器（無需針頭），滴管，絲線。【藥品】西地蘭（0.02mg/ml）、任氏液【實驗方法】、離體蛙心的準(zhǔn)備1儀器的準(zhǔn)備打開計算機(jī)采集系統(tǒng)、接通張力傳感器輸入通道。從顯示器的“設(shè)置”菜單, 彈出“設(shè)計實驗標(biāo)記”對話框，選擇“蛙心灌流”后，再從“實驗項目”的“循 環(huán)實驗”中，選定“蛙心灌流”實驗（用以標(biāo)記實驗）。所用儀器若無此設(shè)置，可以用通用標(biāo)記作實驗標(biāo)記。2離體蛙心的制備方法1、蛙心的暴露：取一只蛙或蟾蜍，雙毀髓后背部置于蛙板中，一

7、手持手術(shù) 鑷提起胸骨后方的皮膚，另一只手持金冠剪剪開一個小口，然后將剪刀由開口處 伸入皮下，向左、右兩側(cè)下頜角方向剪開皮膚。將皮膚掀向頭端，再用手術(shù)鑷提 起胸骨后方的腹肌，在腹肌上剪一口，將金冠剪緊貼體壁向前伸入（注意勿傷及 心臟和血管），并沿皮膚切口方向剪開體壁，剪斷左右烏喙骨和鎖骨，使創(chuàng)口呈 一倒三角形。然后，一手持眼科鑷，提起心包膜，另一只手用眼科剪剪開心包膜， 暴露心臟。2、蛙心插管：如下圖所示，仔細(xì)識別心臟周圍的大血管，在左主動脈下方穿一線，于動脈圓錐處結(jié)扎（動物個體小時，結(jié)扎位置可靠上些），再從左右兩主動脈下方穿一線，并打一活結(jié)備用。左手提起主動脈上的結(jié)扎線，右手用眼科剪在結(jié)扎線下

8、方、沿向心方向?qū)用}上壁剪一斜口，選擇大小適宜的蛙心套管， 然后將盛有少量（套管內(nèi)23cm高度）任氏液（內(nèi)加入一滴肝素溶液）的斯氏蛙 心套管，由開口處插入動脈圓錐內(nèi)。當(dāng)套管尖端到達(dá)動脈圓錐基部時，應(yīng)將套管 稍稍后退，使尖端向動脈圓錐的背部后下方及心尖方向推進(jìn)，經(jīng)主動脈瓣插入心 室腔內(nèi)（于心室收縮時插入，但不可插得過深，以免心室壁堵住套管下口）。此時可見套管中血液沖出套管，并使液面隨心臟搏動而上下移動，表明操作成功（否 則需退回并重新插入）。用滴管吸去套管中的血液，更換新鮮的任氏液。3、游離心臟提起插管：在結(jié)扎線遠(yuǎn)端分別剪斷主動脈左右分支，剪斷左右 肺動脈和前后腔靜脈，將心臟游離。用滴管吸進(jìn)插管

9、內(nèi)的余血，加入新鮮任氏液， 如此反復(fù)沖洗數(shù)次，直至任氏液完全澄清。保持灌流液面高度恒定（1-2cm）,即可進(jìn)行實驗。動脈十溝 房圖示：蛙心插管法4、儀器鏈接：將插好離體心臟的套管固定在支架上，用蛙心夾夾住少許心 尖肌肉（不可夾得過多，以免因夾破心室而漏液）。再將蛙心夾上的系線繞過一 個滑輪與張力傳感器相連。注意：勿使灌流液滴到傳感器上。調(diào)節(jié)顯示器上心臟 收縮曲線的幅度適中。二、觀察項目1、分別描記A、B兩個離體蛙心未用西地蘭處理的蛙心收縮曲線2、觀察西地蘭的影響（1）對A蛙心1. 改用準(zhǔn)備的西地蘭溶液灌流，并作好加藥標(biāo)記，觀察心搏變化。待曲線 出現(xiàn)明顯變化時，立即吸取套管中的灌流液，同時作好沖

10、洗標(biāo)記，并用新鮮任氏 液清洗23次，待心搏恢復(fù)正常。注意：換液時切勿碰套管，以免影響描記曲線的基線，同時保持灌流液面一 致。以下同2. 然后分別以0.01ml為梯度依次遞增西地蘭溶液的滴加量并與任氏液混合 以保持灌流液總量不變并重復(fù)上述操作，直至出現(xiàn)重度癥狀（心跳曲線規(guī)律性喪 失）3. 對B蛙心1. 用等量任氏液灌流，觀察心搏變化。2. 在A更換灌流液的同時，為B更換等量的任氏液。對比觀察全部心跳曲線，討論分析結(jié)果。注意：觀察A牛蛙每次灌流西地蘭時的蛙心收縮曲線，若出現(xiàn)一定次數(shù)的 室性早搏、竇性心動過緩可視為中毒先兆。并注意觀察隨著灌流量的增大 是否出現(xiàn)期前收縮或出現(xiàn)三聯(lián)律（在兩次正常波形后立

11、即出現(xiàn)一個早搏波 形），若出現(xiàn)則為嚴(yán)重中毒現(xiàn)象。觀察曲線的幅度，定點水平以及基線，同時關(guān)注曲線的疏密程度及其規(guī) 律性?！炯夹g(shù)路線】【預(yù)期結(jié)果】在牛蛙中毒前，隨著灌流西地蘭劑量的增加，心肌收縮力不斷增強(qiáng)。當(dāng)出現(xiàn) 中毒癥狀時蛙心收縮曲線異常?！緦嶒灧治觥?、在蛙心插管時可能會插入肌肉組織中，造成組織水腫解決辦法：操作時小心， 若在插入時感受到阻力，貝y立即拔出，更換方向 插管。2、由于牛蛙自身素質(zhì)有所不同，故測出的中毒劑量可能會有所不同解決辦法：選擇體型相似、生理狀況健康的成年牛蛙以減少實驗誤差。3、與以往各相關(guān)科研實驗對比可知，從疾病治療層面出發(fā)，其實驗對象 大多為哺乳類動物（如大鼠），相關(guān)數(shù)據(jù)也是基于哺乳類動，物的生理狀況 得出，以便更加接近人體條件。所以在牛蛙（變溫動物）實驗中結(jié)果可能與 哺乳類動物實驗有所差別?！咀⒁馐马棥?縮短制備標(biāo)本的時間，保持標(biāo)本活性2插管時切忌用力過大和插管過深。3切勿損傷靜脈竇在心臟背面靜脈竇下方與腔靜脈交界處用線結(jié)扎，在 結(jié)扎線下剪斷靜脈血管，使心臟與蛙體分離。 注意勿傷及靜脈竇，以免影響離 體心搏。4保持蛙心插管內(nèi)液面恒定 保持插管內(nèi)液面恒定，以固定前負(fù)荷，排除 負(fù)荷改變對心臟活動的影響。5保持離體心臟外部濕潤經(jīng)常滴加任