試驗(yàn)五-離體小腸平滑肌的生理特性及藥物作用的觀察-

1、文檔收集于互聯(lián)網(wǎng)，已重新整理排版.word版本可編輯歡迎下載支持.實(shí)驗(yàn)五離體小腸平滑肌的生理特性及藥物作用的觀察【實(shí)驗(yàn)口的】學(xué)習(xí)一種離體組織器官實(shí)驗(yàn)方法;觀察離子成分、酸堿度、溫度、乙酰膽堿、 去屮腎上腺素對(duì)離體家兔小腸平滑肌的作用；分析平滑肌活動(dòng)的某些生理特性及 理化環(huán)境改變對(duì)它的影響?！緦?shí)驗(yàn)原理】消化道平滑肌具有自動(dòng)節(jié)律性、較大的伸展性，對(duì)化學(xué)物質(zhì)、溫度及牽張刺 激較為敬感等生理特性?！緦?shí)驗(yàn)材料】實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：家兔，2. 0-2. 5kg實(shí)驗(yàn)藥品：臺(tái)式液、0.01%去甲腎上腺素溶液、0.01%乙酰膽堿溶液、0.01%阿托 品溶液、1.0%氯化鈣溶液、lmol/1鹽酸溶液、lmol/1氫氧化鈉溶

2、液。實(shí)驗(yàn)器材：恒溫平滑肌槽、小燒杯、污物杯、張力換能器、雙凹夾、溫度計(jì)、BL-420 生物信號(hào)系統(tǒng)、絲線等?！緦?shí)驗(yàn)步驟】1. 恒溫浴槽的準(zhǔn)備工作；2. 標(biāo)本制備；3. 儀器連接與設(shè)置；4. 啟動(dòng)計(jì)算機(jī)，打開BL-420生物信號(hào)系統(tǒng)，調(diào)節(jié)參數(shù)，開始記錄。觀察項(xiàng)目1. 自動(dòng)節(jié)律性收縮，描記一段離體小腸平滑肌的收縮曲線，觀察其節(jié)律性 收縮及張力水平。2. 觀察膽堿能受體激動(dòng)劑對(duì)腸斷收縮的影響及阻斷劑的作用。（1）乙酰膽堿的作用：向浴槽標(biāo)本管中加入0. 01%的乙酰膽堿溶液1'2 滴，觀察腸管張力和收縮有何變化。作用產(chǎn)生后，洗滌三次，進(jìn) 行下一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。（2）阿托品的作用：向浴槽標(biāo)本管中加入0.

3、01%的阿托品溶液23滴, 兩分鐘后，再加入0.01%的乙酰膽堿溶液廣2滴，觀察腸管張力和收縮 有何變化。與（1）比較結(jié)果后，洗滌三次，待其活動(dòng)穩(wěn)定后，進(jìn)行下一 項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。3. 觀察腎上腺素能受體激動(dòng)劑對(duì)腸斷收縮的影響及阻斷劑的作用。去甲腎上腺素的作用：向浴槽標(biāo)本管中加入0.01%的去屮腎上腺素23 滴，觀察腸管張力和收縮有何變化。然后洗滌三次，待其活動(dòng)穩(wěn)定后， 進(jìn)行下一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。4. 觀察鈣離子對(duì)腸斷收縮的影響向浴槽標(biāo)本管中加入瑰的氯化鈣洛液2飛滴，觀察腸管平滑肌的反 應(yīng)。然后洗滌三次，待其活動(dòng)穩(wěn)定后，進(jìn)行下一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。5. 觀察酸堿度對(duì)腸斷收縮的影響向浴槽標(biāo)本管中加入lmol/1的鹽酸溶液廣2滴

4、,觀察平滑肌的反應(yīng), 待作用出現(xiàn)明顯后，在此基礎(chǔ)上，加入lmol/1的N&OH溶液廣2滴，觀察平滑肌 的反應(yīng)。【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】1. 乙酰膽堿對(duì)腸斷收縮的影響：小腸平滑肌收縮活動(dòng)加強(qiáng)。2. 阿托品和乙酰膽堿對(duì)腸斷收縮的影響：小腸平滑肌收縮活動(dòng)不受影響。3. 去甲腎上腺素對(duì)腸斷收縮的影響：小腸平滑肌收縮活動(dòng)減弱。4. 鈣離子對(duì)腸斷收縮的影響：小腸平滑肌收縮活動(dòng)加強(qiáng)。5. 酸堿度對(duì)腸斷收縮的影響：小腸平滑肌收縮活動(dòng)先減弱后恢復(fù)。【注意事項(xiàng)】1. 腸管勿牽拉過緊或過松，且連線必須垂直，且不得與浴槽的管壁等接觸，以 免摩擦。2. 浴槽中的液體的量應(yīng)以高過腸斷為準(zhǔn)，并保持液面高度一致。3. 藥物應(yīng)滴在

5、腸管附近，藥物作用若不明顯，可以不加藥物，但不可一次過多。4. 每次加藥出現(xiàn)反應(yīng)后，應(yīng)必須立即更換浴槽內(nèi)的臺(tái)式液至少三次，待腸管恢 復(fù)穩(wěn)定活動(dòng)后，再觀察下一個(gè)項(xiàng)目。【實(shí)驗(yàn)思考】1哺乳動(dòng)物離體器官或組織在灌流液中保持良好狀態(tài)應(yīng)具備的條件？溫度：本實(shí)驗(yàn)控制恒定溫度37度；濕度：要時(shí)刻記住用相應(yīng)的潤(rùn)濕液潤(rùn)濕， 本次試驗(yàn)用哺乳動(dòng)物的臺(tái)氏液；PH：要與哺乳動(dòng)物體液相似：避免不必要的刺激: 不要用手或者是金屬觸碰；離子成分與濃度：要與相關(guān)的動(dòng)物體液相似，本實(shí)驗(yàn) 是臺(tái)氏液。2. 每一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析及原因解釋：滴加乙酰膽堿后小腸平滑肌收縮明顯增強(qiáng)，這是因?yàn)橐阴Ｄ憠A與小腸平滑肌 肌膜上的M受體結(jié)合后，可以在膜

6、去極化未達(dá)到一定的電位時(shí)提前激活更多的慢 鈣通道，使大量的鈣離子內(nèi)流，進(jìn)而使動(dòng)作電位產(chǎn)生的頻率增加，所以小腸的平 滑肌收縮增強(qiáng)；先加阿托品再加乙酰膽堿后對(duì)小腸平滑肌的收縮不影響。因?yàn)?阿托品是乙酰膽堿的抑制劑，故先加阿托品再加乙酰膽堿，乙酰膽堿對(duì)小腸平滑 肌的收縮不影響；加入去甲腎上腺素后，可見離體腸管活動(dòng)減弱，去中腎上腺 素，主要有a和B腎上腺素能受體，去甲腎上腺素與0 2腎上腺素受體結(jié)合占優(yōu) 勢(shì)，引起平滑肌的舒張，故平滑肌收縮活動(dòng)減弱。加入C&C12后，離體腸管活 動(dòng)增強(qiáng)。這是因?yàn)榧尤肼然}后，細(xì)胞外液C&2+濃度升高，則Cd2+內(nèi)流增加， 使得細(xì)胞內(nèi)液中C&2+濃

7、度升高，82+與鈣調(diào)蛋白結(jié)合增加，促進(jìn)了橫橋的激活, 因而收縮力增加。滴加鹽酸后小腸平滑肌收縮明顯減弱，因?yàn)榧尤臌}酸后，小 腸所處環(huán)境的氫離子濃度升高，氫離子可以影響慢鈣通道的開放，是鈣離子內(nèi)流 減少，進(jìn)而影響動(dòng)作電位產(chǎn)生的頻率，另外氫離子能與鈣離子競(jìng)爭(zhēng)鈣調(diào)蛋白結(jié)合 的位點(diǎn)，使肌凝蛋白ATP酶活性下降、和肌絲滑行的生化過程，以小腸的平滑 肌收縮顯著減弱。兒秒后加入氫氧化鈉后中和了氫離子，使小腸所處的環(huán)境恢復(fù) 正常，所以其收縮慢慢趨于正常。3. 維持哺乳動(dòng)物離體小腸平滑肌活動(dòng)和維持離體蛙心活動(dòng)所需的條件的不同：心臟使用的是任氏液，而小腸使用的是臺(tái)式液，心臟可以直接暴露在空氣中， 而小腸需要浸泡再臺(tái)式液中，心臟可以在普通室溫下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，而小腸需要在接 近37°C的水溫下且要不斷通氣才有較為強(qiáng)烈的收縮活動(dòng)。4. 鈣離子在平滑肌收縮中起的作用：當(dāng)平滑肌細(xì)胞受刺激而興奮時(shí)，鈣離子山膜外進(jìn)入膜內(nèi)，并在胞內(nèi)基質(zhì)一種磷 酸激酶的作用下，使肌凝蛋口磷酸化，從而誘發(fā)肌漿網(wǎng)中的鈣離子進(jìn)一步釋放， 肌鈣蛋白分子的C亞單位與鈣離子結(jié)合，導(dǎo)致肌凝蛋白和肌動(dòng)蛋口相結(jié)合，造成 平滑肌收縮。5. 去中腎上腺素、乙酰膽堿對(duì)小腸平滑肌和心肌的作