溶菌酶溶液配制及應(yīng)用

1、溶菌酶溶液簡(jiǎn)介:華越洋溶菌酶溶液是濃度別離為10mg/ml的蛋清型溶菌酶溶液,能夠用于以下分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn):1 .核酸純化2 .包涵體蛋白純化3 .質(zhì)粒DA純化4 .幾丁質(zhì)的水解5 .細(xì)胞壁的水解運(yùn)輸及保低溫運(yùn)輸，-20C保留，有效期一年。溶菌酶存在于卵清、唾液等生物分泌液中，催化細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖N-乙酰氨基葡糖與。乙酰胞壁酸之間的1,4-B-糖昔鍵水解的酶。溶菌酶(lysozyme)乂稱胞壁質(zhì)酶(muramidase)或N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶(X-acetylmuramideglycanohydrlase),是一種能水解致病菌中黏多糖的堿性酶。要緊通過(guò)破壞細(xì)胞壁中的N-乙酰胞壁酸和乙酰氨基葡

2、糖之間的B-1,4糖苔鍵，使細(xì)胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，致使細(xì)胞壁破裂內(nèi)容物逸出而使細(xì)菌溶解。溶菌酶還可與帶負(fù)電荷的病毒蛋白直接結(jié)合，與DNA、RNA、脫輔基蛋白形成復(fù)鹽，使病毒失活。因此，該酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。用途用于生化研究，臨床上用于急慢性咽喉炎、扁平苔癬、扁平疣等疾病的醫(yī)治。生產(chǎn)以蛋清為原料,在PH6.5條件下用弱酸性陽(yáng)離子互換樹脂732吸附后，再用硫酸鉉洗脫,經(jīng)透析后冷凍干燥得產(chǎn)品。制備溶菌酶是采納生物工程技術(shù)進(jìn)行克隆、提取而制取，它是一種天然酶，平安綠色的添加劑，無(wú)抗藥性。該酶普遍存在于人體多種組織中，鳥類和家禽的蛋清、哺乳動(dòng)物的淚、血漿、尿、乳汁等體液和微生物

3、中也含此酶，其中以蛋清含量最為豐碩。從雞蛋清中提取分離的溶菌酶是由18種129個(gè)級(jí)基酸殘基組成的單一肽鏈。它富含堿性氨基酸，有4對(duì)二硫鍵維持酶構(gòu)型，是一種堿性蛋白質(zhì)，其N端為賴氨酸，C端為亮然酸。可分解溶壁微球菌、龐大芽抱桿菌、黃色八疊球菌等革蘭陽(yáng)性菌。優(yōu)勢(shì)1 .溶菌酶是很穩(wěn)固的蛋白質(zhì)，有較強(qiáng)的抗熱性。蛋清溶菌酶是C型，是已知的最耐熱的酶：2.溶菌酶可不能因?yàn)橛袡C(jī)溶劑的處置而失活，當(dāng)轉(zhuǎn)移到水溶液中時(shí)，溶菌酶的活力可全數(shù)恢復(fù)；3.溶菌酶可被冷凍或干燥處置，且活力穩(wěn)固：4.溶菌酶適宜pH5.36.4,可用于低酸性食物防腐；5.溶菌酶生產(chǎn)本錢較低；6.溶菌酶的抗菌譜較廣，不僅局限于G+菌，對(duì)部份G&

4、amp;shy;菌也有抑制成效；7.溶菌酶作為平安性高。溶菌酶是一種天然蛋白質(zhì)，1992年FAO/WTO的食物添加劑協(xié)會(huì)已經(jīng)認(rèn)定溶菌酶在食物中應(yīng)用是平安的。應(yīng)用醫(yī)學(xué)應(yīng)用可作為一種具有殺菌作用的天然抗感染物質(zhì)。有抗菌、抗病毒、止血、消腫止痛及加速組織恢復(fù)功能等作用。臨床用于慢性鼻炎、急慢性咽喉炎、水痘、帶狀皰疹和扁平疣等。也可與抗菌藥物合用醫(yī)治各類細(xì)菌和病毒感染?？诜图∽⒕行??？诜?5片/次（腸溶片含lOmg）,3次/日。口含，1片/次（口含片含20mg）,46次/日。外用：以1%2$溶液滴注、涂擦或直接噴粉。肌注，50mglOOmg/次，12次/日。滴眼：用2%溶液。副作用偶有較輕的過(guò)敏

5、反映。氯化溶菌酶醫(yī)療成效更廣，有濃痰分散、出血抑制、組織修復(fù)、消炎鎮(zhèn)痛、抗過(guò)濾性病毒等作用，因此用氯化溶菌酶的制藥有消炎消痔、治傷風(fēng)、皮膚病及眼、鼻、喉等用藥.食物應(yīng)用可作為防腐劑，它的要緊功用是水解，在細(xì)胞內(nèi)，那么對(duì)吞噬后的病原菌起破壞作用.該酶對(duì)中的枯草桿菌、耐輻射微球菌有分解作用。對(duì)大腸桿菌、一般變形菌和副溶血性弧菌等革蘭氏陰性菌也有必然程度溶解作用，其最有效濃度為0.05$。與植酸、聚合磷酸鹽、甘亞酸等配合利用，可提高其防腐成效。應(yīng)用領(lǐng)域1.溶菌酶是一種無(wú)毒、無(wú)副作用的蛋白質(zhì)，又具有必然的溶菌作用，因此可用作天然的食物防腐劑?，F(xiàn)已普遍應(yīng)用于水產(chǎn)品、肉食物、蛋糕、清酒、料酒及飲料中的防腐

6、；還能夠添入乳粉中，使牛乳人乳化，以抑制腸道中腐敗微生物的生存，同時(shí)直接或間接地增進(jìn)腸道中雙歧桿菌的增殖。2.溶菌酶作為一種存在于人體正常體液及組織中的非特異性免疫因素，具有多種藥理作用，它具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤的功效，目前醫(yī)用溶菌酶其適應(yīng)癥為出血、血尿、血痰和鼻炎等。3.溶菌酶具有破壞細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的功能，以此酶處置G+細(xì)菌取得原生質(zhì)體，因此，溶菌酶是基因工程、細(xì)胞工程中細(xì)胞融合操作必不可少的工具酶。機(jī)理溶菌酶能有效地水解細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖，其水解位點(diǎn)是N-乙酰胞壁酸(XAM)的1位碳原子和N-乙酰葡萄糖胺(NAG)的4位碳原子間的B-1.4糖昔鍵。肽聚糖是細(xì)菌細(xì)胞壁的要緊成份，它是由NA

7、M、NAG和肽“尾”(一樣是4個(gè)額基酸)組成，NAM與NAG通過(guò)BT.4糖昔鍵相連，肽“尾”那么是通過(guò)D-乳酰竣基連在NAM的第3位碳原子上，肽尾之間通過(guò)肽“橋”(肽鍵或少數(shù)幾個(gè)氨基酸)連接，NAM、NAG、肽“尾”與肽“橋”一起組成了肽聚糖的多層網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，作為細(xì)胞壁的竹架，上述結(jié)構(gòu)中的任何化學(xué)鍵斷裂，皆能致使細(xì)菌細(xì)胞壁的損傷。關(guān)于革蘭氏陽(yáng)性菌(G+),如藤黃微球菌、枯草桿菌或溶壁微球菌等，與革蘭氏陰性菌(G-),如大腸桿菌、變形桿菌、痢疾桿菌、肺炎桿菌等，其細(xì)胞壁中肽聚糖含量不同，G+細(xì)菌細(xì)胞壁幾乎全數(shù)由肽聚糖組成，而G-細(xì)菌只有內(nèi)壁層為肽聚糖，因此，溶菌酶關(guān)于破壞G+細(xì)菌的細(xì)胞壁較G-細(xì)菌強(qiáng)。利用雞蛋清溶菌酶作為溶菌酶類的典型代表，是一種穩(wěn)固的蛋白質(zhì)，其最適pH