農(nóng)業(yè)生物技術(shù)資料歸類考試題

1、一、名詞解釋1 .生物技術(shù)：以現(xiàn)代生命科學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合先進(jìn)的科學(xué)技術(shù)手段和其它自然學(xué)科原理，按照預(yù)先設(shè)計(jì)的改造生物體或加工生物原料，為人類產(chǎn)生出所需要產(chǎn)品或達(dá)到某種目的的技術(shù)2 .植物組織培養(yǎng)：在無菌和人為控制的條件下，培養(yǎng)、研究植物組織器官，進(jìn)而從中分化發(fā)育出整體植株的技術(shù)。3 .細(xì)胞全能性：具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞，在適宜的條件下能夠分化成完整植株的潛在能力。4 .愈傷組織：具有分裂能力的一團(tuán)細(xì)胞5 .脫分化：回復(fù)分裂能力的過程。6 .再分化：生長由無序重新進(jìn)入有序。7 .培養(yǎng)基：供微生物、動(dòng)植物組織生長、產(chǎn)生代謝產(chǎn)物或維持用的人工配置的營養(yǎng)基質(zhì)。8 .植物離體快繁：利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，在離

2、體條件下，對(duì)植物進(jìn)行營養(yǎng)繁殖，使其在短期內(nèi)獲得遺傳性一致的大量再生植株的方法。9 .增殖系數(shù)：接種一個(gè)芽或一塊增殖的培養(yǎng)物，經(jīng)過一個(gè)生產(chǎn)年的培養(yǎng)后得到的芽和苗的數(shù)量10 .褐變：在組織培養(yǎng)的過程中，由于培養(yǎng)材料向培養(yǎng)基中釋放褐色物質(zhì)導(dǎo)致培養(yǎng)基逐漸變?yōu)楹稚囵B(yǎng)材料也隨之慢慢變褐而死亡的現(xiàn)象。11 .污染：是指在培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基或培養(yǎng)材料上滋生真菌、細(xì)菌等微生物，使培養(yǎng)材料不能正常生長和發(fā)育的現(xiàn)象。12 .玻璃化：細(xì)胞分裂與體積增大的速度超過了干物質(zhì)產(chǎn)生和積累的速度，植物只能吸收水分來充漲自己的體積。13 .莖尖培養(yǎng)脫毒：采取莖尖分生組織離體培養(yǎng)獲得無毒幼苗的方法。14 .外植體：植物組織培養(yǎng)

3、中作為離體培養(yǎng)材料的器官或組織片段。15 .植物體細(xì)胞胚：植物離體培養(yǎng)的細(xì)胞、組織、器官產(chǎn)生類似胚的結(jié)構(gòu)，其形成也經(jīng)歷了一個(gè)類似合子胚胎發(fā)生和發(fā)育過程。16 .繼代培養(yǎng)：愈傷組織培養(yǎng)一段時(shí)間后必須轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上以保持培養(yǎng)物質(zhì)的正常生長，更換一次培養(yǎng)基的過程。17 .原生質(zhì)體：除細(xì)胞壁以外細(xì)胞膜包被的物質(zhì)。18 .單倍體：體細(xì)胞數(shù)等于配子染色體數(shù)的個(gè)體。19 .花藥培養(yǎng)：用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，把發(fā)育到一定階段的花藥，通過無菌操作技術(shù)，接種在人工培養(yǎng)基上，形成愈傷組織或胚狀體，隨后使愈傷組織分化成完整的植株。（花藥培養(yǎng)形成二倍體，花粉培養(yǎng)形成單倍體和二倍體）20 .單倍體的鑒定：莖尖或根尖細(xì)胞

4、染色體計(jì)數(shù)、流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞核DN*量、測(cè)量葉片保衛(wèi)細(xì)胞長度21 .共培養(yǎng)：植物細(xì)胞、組織、器官與農(nóng)桿菌一起培養(yǎng)一段時(shí)間，獲得轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物的方法。22 .基因工程：人們按照預(yù)先設(shè)計(jì)的生物施工藍(lán)圖，把需要的目的基因經(jīng)過體外切割、拼接與重新組合，然后引入受體細(xì)胞，并使其在受體內(nèi)進(jìn)行復(fù)制、表達(dá)，按要求改變受體細(xì)胞的遺傳特性，然后由轉(zhuǎn)化細(xì)胞再分化成具有預(yù)期新性狀的工程植株23 .質(zhì)粒：是一種廣泛存在于細(xì)菌細(xì)胞中染色體以外能夠自主復(fù)制的裸露的環(huán)狀DN的子。24 .限制性內(nèi)切酶：是一類能夠識(shí)別雙鏈DN砌子中某種特定的核甘酸序列，并能精確特異的切割雙鏈DNA分子的核酸內(nèi)切酶。（DNA純度、甲基化程度、甘油的

5、含量、反應(yīng)體系PH值、反應(yīng)溫度、酶切時(shí)間等影響酶的活性）25 .DNA聚合酶：以DNAJ復(fù)制模板，從將DNAi5端點(diǎn)開始復(fù)制到3端的酶。（具有耐高溫的特點(diǎn)）26 .感受態(tài)細(xì)胞：經(jīng)過氯化鈣溶液處理過的細(xì)胞處于容易接受外源DNA犬態(tài)。27 .基因組文庫：將某一生物的基因組DN服切后插入特定載體中而形成的克隆集合。（基因組文庫包括cDNAC庫）28 .cDNAC庫：將某一生物特定發(fā)育時(shí)期或環(huán)境條件下轉(zhuǎn)錄的全部mRN反轉(zhuǎn)錄成cDNAf段后插入特定載體中而形成的克隆集合。29.轉(zhuǎn)座子：是一類在基因組中能夠發(fā)生跳躍的DNAff列。30 .圖位克隆：也稱定位克隆，依據(jù)目的基因在染色體上的位置，通過分子標(biāo)記、

6、基因組文庫篩選，克隆得到目的基因然后進(jìn)行最終鑒定。31 .分子標(biāo)記：在分子水平上可標(biāo)識(shí)的遺傳多樣性。32 .葉圓法：用打孔器取得葉圓片，在過夜培養(yǎng)的龍桿菌菌液中侵染數(shù)分鐘，接種于一定培養(yǎng)基上共培養(yǎng)2-3天，再轉(zhuǎn)移到含有抑菌劑或抗生素和選擇劑的培養(yǎng)基上，除菌和使轉(zhuǎn)化細(xì)胞生長并再生植株。二、填空題1 .植物組織培養(yǎng)的類型：按培養(yǎng)材料不同可劃分為：完整植株培養(yǎng)、胚胎培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、組織培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)。按培養(yǎng)基類型分為:固體培養(yǎng)、液體培養(yǎng)、半_夜半固體培養(yǎng)。2 .植物組織培養(yǎng)的原理：細(xì)胞全能性3 .全能性體現(xiàn)的兩個(gè)條件：（1）離體狀態(tài)（2）一定的外界條件（生長素和細(xì)胞分裂素比值高利于生根

7、，比值低利于長芽）。4 .組織培養(yǎng)流程脫分化再分化外植體J愈傷組織組織器官植株5 .標(biāo)準(zhǔn)的植物培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)包括：洗滌室、培養(yǎng)基室、接種室、培養(yǎng)室、細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室。6 .滅菌種類：物理滅菌（高溫高壓滅菌、干熱滅菌、射線滅菌、過濾滅菌）、化學(xué)滅菌（熏蒸滅菌、消毒液滅菌）7 .高溫高壓滅菌：121c高壓和每平方厘米1個(gè)大氣壓下持續(xù)15-20分鐘。8 .過濾滅菌：孔徑小于0.45微米微孔濾器裝置。9 .射線滅菌：波長為200納米-300納米的紫外線,其中以260nm最強(qiáng)。10 .培養(yǎng)基的主要成分（1）無機(jī)鹽：大量元素（CHONPKMgSCa）:濃度大于0.5mol/L微量元素（FeMnCuMoCoZn）

8、（2）有機(jī)化合物：碳水化合物（蔗糖、葡萄糖、果糖）、維生素（VB。、肌醇、氨基酸、植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)、瓊脂。11 .培養(yǎng)基配置的四個(gè)原則：目的明確、營養(yǎng)協(xié)調(diào)、理化適官、經(jīng)濟(jì)節(jié)約12 .培養(yǎng)基的配置過程：配料一溶解一調(diào)節(jié)PH-過濾一分裝一包扎一滅菌13 .母液配置的方法：單配法、混配法（激素一般不溶于水、需要添加助溶劑（95%酉精、酸、堿均可）14 .植物快繁的四個(gè)程序包括：無菌（初代）培養(yǎng)的建立、繁殖體增殖、芽苗生根、小植株的移栽馴化。15 .培養(yǎng)材料的增殖方式：頂芽和腋芽增殖、不定芽增殖、體細(xì)胞胚增殖、原球莖發(fā)生型。16 .試管馴化的目的：培養(yǎng)壯苗、提高成活力。17 .移栽的目的：防止菌類滋生

9、、保持小苗水分供給平衡、移栽時(shí)選擇合理的種植基質(zhì)，為小苗提供充足的養(yǎng)分。18 .細(xì)菌污染的特點(diǎn)：粘液狀菌斑，一般接種1-2天發(fā)現(xiàn)。19 .真菌污染的特點(diǎn)：出現(xiàn)菌絲、菌霉，一般3天后出現(xiàn)。20 .玻璃化的原因：激素、瓊脂、PH營養(yǎng)、光照、溫度21 .病毒的侵染途徑：（1）農(nóng)業(yè)操作時(shí)的機(jī)械損傷（2）通過微傷口進(jìn)行侵染（3）通過嫁接、寄主性植物傳播。22 .病毒在植物體內(nèi)的運(yùn)輸方式：細(xì)胞間短距離通過胞間連絲、長距離則通過韌皮部的輸導(dǎo)組織。23 .植物脫毒的方法：莖尖培養(yǎng)脫毒、愈傷組織培養(yǎng)法、溫?zé)岑煼ā⒗鋬霪煼摱?4 .檢測(cè)脫毒是否成功的方法：直接觀察、嫁接指示植物、電鏡觀察、PCR25 .愈傷組織

10、的形成經(jīng)歷：誘導(dǎo)、細(xì)胞分裂、細(xì)胞分化三個(gè)時(shí)期。26 .器官發(fā)生的兩種模式：不經(jīng)過愈傷組織、經(jīng)過愈傷組織形成。27 .影響器官分化的因素：（1）起始材料（2）外植體類型（3）培養(yǎng)條件28 .植物體細(xì)胞胚發(fā)生的途徑：（1）直接途徑（直接由外植體發(fā)育而來）（2）間接途徑（不從外植體發(fā)育而來）29 .影響體細(xì)胞胚發(fā)生的因素：激素、培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件30 .體細(xì)胞胚發(fā)生的過程：胚性細(xì)胞時(shí)期、球形胚時(shí)期、心形胚時(shí)期、魚雷形胚時(shí)期，子葉形胚時(shí)期、胚胎成熟期。31 .再生植株的途徑有：器官發(fā)生途徑（培養(yǎng)的是細(xì)胞）和體細(xì)胞胚發(fā)生途徑（培養(yǎng)的是體細(xì)胞胚）32 .原生質(zhì)體分離的方法：機(jī)械分離法（獲得原生質(zhì)體的量少、局

11、限性強(qiáng)）、酶解分離法（果膠酶、纖維素酶、半纖維素酶）33 .原生質(zhì)體純化的方法為：漂浮法、界面法34 .原生質(zhì)體融合的方法：NaNOfe理、高PH/S濃度鈣處理、PEGfe理、電融合35 .原生質(zhì)體融合的類型：自發(fā)融合、誘發(fā)融合、化學(xué)誘導(dǎo)融合。36 .原生質(zhì)體活力檢測(cè)的方法：觀察細(xì)胞質(zhì)環(huán)流、氧氣攝入法、光合作用活性和活體染色法。37 .原生質(zhì)體培養(yǎng)的方法：液體培養(yǎng)法、固體包埋培養(yǎng)、固液雙層培養(yǎng)。38 .體細(xì)胞雜交的應(yīng)用：培育新品種、合成新材料。39 .單倍體產(chǎn)生的途徑：誘發(fā)單倍體途徑（雄核不育、雌核不育）、自發(fā)單倍體途徑（半受精、多胚、染色體消除、雄核發(fā)育、雌核發(fā)育）40 .白化苗形成的原因：

12、核基因變異、質(zhì)體DN儆失、小抱子發(fā)育過程中質(zhì)體變態(tài)（對(duì)花粉預(yù)處理可以適當(dāng)降低白化苗）41 .染色體加倍的方法：秋水仙素處理42 .外源基因?qū)氲姆椒ǎ荷锝閷?dǎo)（農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化）、物理方法（基因槍）、化學(xué)方法（聚乙二醇）43 .農(nóng)桿菌介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移方法：葉圓法、共培養(yǎng)法、直接接種法44 .基因直接轉(zhuǎn)移方法：化學(xué)方法（PEGB導(dǎo)、脂質(zhì)體導(dǎo)入法）、物理方法（基因槍、點(diǎn)擊法、顯微注射法）、農(nóng)桿菌微彈法（基因槍與龍桿菌轉(zhuǎn)化結(jié)合）45 .常見的選擇標(biāo)記基因：卡那霉素、鏈霉素、青霉素46 .植物基因的結(jié)構(gòu)分為：轉(zhuǎn)錄區(qū)（起始密碼子、外顯子、內(nèi)含子、終止密碼子、3端非編碼區(qū)、5端非翻譯區(qū)）和非轉(zhuǎn)錄區(qū)（啟動(dòng)子、終止子

13、、增強(qiáng)子）47 .載體分為：質(zhì)粒載體、噬菌體載體、黏粒載體、人工染色體載體四種。48 .限制性內(nèi)切酶的命名：EcoRI屬名（第一個(gè)字用大寫）+種名（前兩個(gè)字母小寫）+菌株類型（大寫）+（羅馬字母表示發(fā)現(xiàn)的順序）49 .II型限制酶的基本特性：識(shí)別位點(diǎn)具有特異性、識(shí)別序列具有特異性、切割位點(diǎn)具有規(guī)范性（回文結(jié)構(gòu)）50 .DNA連接酶：EcoliDNA連接酶,來源于大腸桿菌，可用于連接粘性末端；T4DNA1接酶,來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率低。51 .DNA連接反應(yīng)條件：溫度（通常為16攝氏度）、ATP濃度、連接酶的濃度、連接反應(yīng)的時(shí)間、連接片段的長度。52 .目標(biāo)DN

14、A片段獲得的方法：（1）化學(xué)直接合成（2）從基因文庫中獲?。?）通過PCR擴(kuò)增53 .目的DNA片段和載體的連接：（1）互補(bǔ)黏性末端連接，該連接方法簡單（2）非互補(bǔ)黏性末端連接（3）平末端連接54 .重組載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞的方法：氯化鈣處理、電穿孔法、熱激法55 .重組克隆的篩選：（1）表型篩選法（2）酶切鑒定篩選（3）PCRffi選法（4）分子雜交篩選法。56 .基因文庫分為：基因組文庫和cDNAt庫57 .從基因文庫中篩選目的基因的方法：核酸雜交法、免疫學(xué)檢測(cè)法、PCR$選法。58 .分子標(biāo)記的分類：（1）基于DNA-DN煤交：RFLP（2）基于PCRISSRSSRSTSSCARXRAP（3

15、）基于PC存口RE酶切：AFLP（4）基于DNAW序：SNPES應(yīng)用最普遍的是RFLPRAPDSSR（共顯Tt）和AFLR59 .PCR反應(yīng)組分：DN頗板、一對(duì)引物、dNTPTaq酶、Mc2+、緩沖液、ddH2O60 .常用的顯色劑：瓊脂糖凝膠一EB染色；聚丙烯酰胺凝膠一硝酸銀染色；帶熒光分子的引物一熒光捕獲61 .PCRK術(shù)的原理：（1）高溫變性95C；（2）引物與模板退火TmiC;（3）冷卻延伸72cTm=4（G+C+2（A+T三、簡答論述題1. 植物組織培養(yǎng)的主要特征？（1）在培養(yǎng)容器中進(jìn)行（2）無菌環(huán)境，排除了微生物及害蟲等的侵入（3）各種環(huán)境因子如營養(yǎng)因子、激素因子以及光照溫度等物理

16、因子處于人工控制條件下，達(dá)到最適條件。（4）通常打破了正常植株的發(fā)育過程和格局。2. 植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用？（1）脫毒快繁（2）用于植物遺傳育種：種質(zhì)資源離題保存、花粉花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體、胚乳培養(yǎng)產(chǎn)生三倍體、體細(xì)胞雜交、克服遠(yuǎn)緣雜交困難（3）大規(guī)模植物細(xì)胞、組織和器官培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物（4）用于植物研究：生理學(xué)、病理學(xué)、胚胎學(xué)等。3. 凝固劑必須具有的特點(diǎn)？（1）在微生物生長范圍內(nèi)保持凝固（2）不被微生物分解利用（3）不因消毒高溫處理而破壞（4）對(duì)微生物無害（5）配置方便（6）透明度好，粘著力強(qiáng)。4. 外植體的選擇的要求？（1）選擇優(yōu)良的種質(zhì)及母株（母株性狀穩(wěn)定、健壯、無病蟲害）。（2）選擇適

17、當(dāng)?shù)臅r(shí)期，春季和夏季采樣比較適合（3）取材的大小適宜（4）來源要豐富（5）易于消毒（6）選擇合適的取材部位（莖尖、花粉、花藥、葉片均可）5. 無菌（初代）培養(yǎng)的消毒？（1）消毒流程：材料預(yù)處理一75%酉精消毒20s一無菌水沖洗2-3次一0.1%升汞處理15分鐘左右一無菌水沖洗6次一瀝干一接種（2）常用消毒劑：升汞、次氯酸鈉、酒精（3）消毒過程中的注意事項(xiàng)：植物材料、消毒藥劑及其濃度、消毒時(shí)間（三者需實(shí)際考慮）。6. 外植體的接種步驟？（1）無菌操作：接種室的滅菌、超凈工作臺(tái)滅菌、接種器皿用具滅菌、試驗(yàn)人員滅菌（2）材料的分離、切取和接種（接種時(shí)防治空氣、操作、器皿帶來的污染）7. 影響褐變的因

18、素及克服辦法？（1）植物基因型（2）材料的生理狀態(tài)（3）取材的時(shí)間和部位（4）培養(yǎng)基（5）光照（6）溫度（7）培養(yǎng)時(shí)間克服褐變的方法：（1）選擇適宜的外植體（2）改善營養(yǎng)條件（3）在培養(yǎng)基中加入一些附加物，如活性炭、PVP（4）加強(qiáng)生長素含量，降低細(xì)胞分裂素含量8. 植物離體快速繁殖造成污染的原因？（1）外植體滅菌不徹底（2）實(shí)驗(yàn)器皿及培養(yǎng)基滅菌不徹底（3）超凈工作臺(tái)被污染（4）環(huán)境不清潔（5）人為因素9. 離體快繁的利用？（1）用于無菌苗快繁（2）用于無法用種子繁殖或難以保持后代一致性材料的繁殖（3）瀕危植物的拯救（4）用于種質(zhì)資源的拯救和保存10. 植物患病后的主要癥狀有哪些？（1）因葉綠

19、素遭到破壞引起花葉、黃葉；（2）植物發(fā)生矮化然后畸形；（3）形成枯斑或壞死。11. 病毒的特征？（1）結(jié)構(gòu)簡單，僅由蛋白質(zhì)和核酸組成，無細(xì)胞結(jié)構(gòu)（2）不能進(jìn)行獨(dú)立的代謝活動(dòng)，需要依靠寄主才能存活（3）病毒有核酸，依靠寄主細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制（4）具有侵染力，能夠從一種寄主細(xì)胞轉(zhuǎn)移到其它細(xì)胞。12. 植物脫毒的意義？（1）防止品種的退化，保持優(yōu)良的種性（2）提高產(chǎn)量，改善品質(zhì)（3）降低成本，保護(hù)環(huán)境。13. 原生質(zhì)體的特性？（1）去壁的原生質(zhì)體容易實(shí)現(xiàn)外源遺傳物質(zhì)的導(dǎo)入和吸收（2）不同來源的原生質(zhì)體具有彼此融合的能力（3）原生質(zhì)體具有細(xì)胞全能性。14. 花藥培養(yǎng)的流程？（1）確定取樣時(shí)期（2）預(yù)處理（熱

20、處理、秋水仙素處理）（3）花藥表面消毒和接種培養(yǎng)（常用MSN6FHC培養(yǎng)基）（4）白化苗15. 影響花粉、花藥培養(yǎng)的因素有哪些？供體植株的基因型、花藥壁因子、培養(yǎng)基與培養(yǎng)密度、小孢子或花粉的發(fā)育階段、溫度與光照影響、供體植株的生理狀態(tài)。16. 質(zhì)粒載體的特征？（1）能在宿主細(xì)胞中獨(dú)立復(fù)制和表達(dá)（2）具有1-2個(gè)選擇標(biāo)記（3）具備多克隆位點(diǎn)（4）自身相對(duì)分子量小、拷貝數(shù)高（5）易于操作和DNA勺制備。17. DNA聚合酶的種類及功能？（1）大腸桿菌DNAIK合酶I,是一種多功能酶，具有由5到3聚合酶活性、5到3外切酶活性、3到5外切酶活性等功能（2）Klenow片段，填補(bǔ)或者標(biāo)記DN6子的3隱縮末端，具有由5到3聚合酶活性、3到5外切酶活性等功能（3）T4DNAK合酶，外切酶活性高于大腸桿菌DN咪合酶I,具有由5到3聚合酶活性、3到5外切酶活性等功能（4）反轉(zhuǎn)錄酶，用于cDNAfr段合成。18. 修飾性工具酶的種類？（1）末端轉(zhuǎn)移酶：不依賴于DNA真板的DNA聚合酶，可以在沒有模板