生物分離工程

1、 在電子顯微鏡下，可觀察到革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁較厚，具有2080 nm的肽聚糖層，約占細(xì)胞壁干重的50。而革蘭陰性菌的肽聚糖層較薄，僅23 nm，占細(xì)胞壁干重的10左右。 在肽聚糖層外還有一較厚的外壁層，約810 nm，主要為脂蛋白、脂多糖和其他脂類(lèi)，含量為細(xì)胞壁干重的80。革蘭氏革蘭氏染色法染色法革蘭氏染色法 用革蘭氏染色劑進(jìn)行染色破壁的酵母呈粉紅色，而未破壁的酵母呈蘭紫色，分別計(jì)數(shù)，并采用相同的稀釋度用血球記數(shù)板進(jìn)行鏡檢記數(shù)，計(jì)算破壁率。-破壁率（破壁率（100%）C-破壁前的細(xì)胞數(shù)（相同稀釋倍數(shù)）破壁前的細(xì)胞數(shù)（相同稀釋倍數(shù)）C-破壁后的細(xì)胞數(shù)（相同稀釋倍數(shù)）破壁后的細(xì)胞數(shù)（相同稀釋倍數(shù)）n

2、1-染色后呈紫色細(xì)胞數(shù)染色后呈紫色細(xì)胞數(shù)n2-染色后呈粉紅色細(xì)胞數(shù)染色后呈粉紅色細(xì)胞數(shù)細(xì)胞破碎方式細(xì)胞破碎方式高壓勻漿高壓勻漿 高速珠磨高速珠磨 納米磨破碎納米磨破碎撞擊破碎撞擊破碎 滲透壓沖擊滲透壓沖擊超聲破碎超聲破碎凍融法凍融法低溫玻璃化低溫玻璃化酶溶法酶溶法-溶菌酶、纖維素酶等溶菌酶、纖維素酶等機(jī)械法機(jī)械法化學(xué)法化學(xué)法-化學(xué)滲透化學(xué)滲透物理法物理法從高壓室(幾十兆帕)壓出的細(xì)胞懸浮液經(jīng)過(guò)閥座D的中心孔道，從D和閥C之間的小環(huán)隙中噴出，速度可達(dá)每秒幾百米。這種高速?lài)姵龅臐{液又射到靜止的撞擊環(huán)E上，被迫改變方向從出口管流出。細(xì)胞在這一系列過(guò)程中經(jīng)歷了高速造成的剪切、碰撞以及由高壓到常壓的變化

3、，從而造成細(xì)胞的破碎。高高壓壓細(xì)細(xì)胞胞破破碎碎機(jī)機(jī)如：株磨式組織研磨器（圖）；小型株磨器（圖） 微生物細(xì)胞懸浮液與極細(xì)的研磨劑(通常是直徑1 mm的無(wú)鉛玻璃珠)在攪拌槳作用下充分混合，珠子之間以及珠子和細(xì)胞之間的互相剪切、碰撞促進(jìn)細(xì)胞壁破裂，釋出內(nèi)含物。在珠液分離器的協(xié)助下，珠子被滯留在破碎室內(nèi)，漿液流出，從而實(shí)現(xiàn)連續(xù)操作。破碎中產(chǎn)生的熱量由夾套中的冷卻液帶走 利用微細(xì)玻璃珠，在高速運(yùn)轉(zhuǎn)下的相互碰撞，造成組織細(xì)胞的破裂與分散。適合珍貴樣品液的研磨，例如蛋白質(zhì)、酶及細(xì)胞液等。微細(xì)玻璃珠可回收使用。樣品處理量，含玻璃珠可達(dá)350ml。 樣品量可達(dá)樣品量可達(dá)80 小型珠磨器小型珠磨器l 密閉容器可容

4、納1至1.5ml的組織液或是一些細(xì)胞懸濁液，通過(guò)1至3分鐘的劇烈攪拌，能使細(xì)胞徹底的破裂，甚至一些骨頭、微生物的孢子通過(guò)玻璃珠的研磨也能有效的磨碎。l玻璃珠適用性：玻璃珠適用性： 細(xì)菌用0.1mm的玻璃珠 酵母、藻類(lèi)和組織培養(yǎng)細(xì)胞用0.5mm的玻璃珠 動(dòng)植物的組織用1mm的玻璃珠1 1、基本、基本原理原理2 2、影響因素影響因素 3 3、實(shí)驗(yàn)室、實(shí)驗(yàn)室連續(xù)破碎池連續(xù)破碎池結(jié)構(gòu)示意圖結(jié)構(gòu)示意圖型號(hào)L50L65L80L80FL100乳化細(xì)度(um)2 222調(diào)節(jié)范圍(mm)1-0.01 1-0.011-0.011-1.01產(chǎn)量(T/h)0.01-0.05 0.01-0.050.5-10.5-3電機(jī)功率(KW)1.11.53.04.05.5電壓(V)380 380380380轉(zhuǎn)速(r/min)29002900 29002900磨片直徑(mm)506580100出口直徑(寸)5