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1、v概念:用生化的方法來(lái)檢測(cè)細(xì)菌對(duì)各種基質(zhì)的概念:用生化的方法來(lái)檢測(cè)細(xì)菌對(duì)各種基質(zhì)的代謝作用及代謝產(chǎn)物,借以鑒別細(xì)菌種類,這代謝作用及代謝產(chǎn)物,借以鑒別細(xì)菌種類,這種生化實(shí)驗(yàn)稱為細(xì)菌的生化反響實(shí)驗(yàn)。種生化實(shí)驗(yàn)稱為細(xì)菌的生化反響實(shí)驗(yàn)。v意義:是鑒別細(xì)菌的重要根據(jù)。意義:是鑒別細(xì)菌的重要根據(jù)。細(xì)菌的生化反響細(xì)菌的生化反響生化反響生化反響碳水化合物碳水化合物代謝實(shí)驗(yàn)代謝實(shí)驗(yàn)各種酶類實(shí)驗(yàn)各種酶類實(shí)驗(yàn)抑菌實(shí)驗(yàn)抑菌實(shí)驗(yàn)糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)甲基紅實(shí)驗(yàn)甲基紅實(shí)驗(yàn)V-P實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)蛋白質(zhì)和氨基蛋白質(zhì)和氨基酸代謝實(shí)驗(yàn)酸代謝實(shí)驗(yàn)硫化氫實(shí)驗(yàn)硫化氫實(shí)驗(yàn)吲哚實(shí)驗(yàn)吲哚實(shí)驗(yàn)碳源和氮源碳源和氮源利用實(shí)驗(yàn)利用實(shí)驗(yàn)枸櫞酸鹽利用實(shí)驗(yàn)枸櫞酸
2、鹽利用實(shí)驗(yàn)IMViC實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)甲基紅實(shí)驗(yàn)甲基紅實(shí)驗(yàn)v大腸桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸后進(jìn)展混合酸發(fā)酵,產(chǎn)生乳大腸桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸后進(jìn)展混合酸發(fā)酵,產(chǎn)生乳酸、甲酸、乙酸、琥珀酸等多種有機(jī)酸,使培育液酸、甲酸、乙酸、琥珀酸等多種有機(jī)酸,使培育液pH小于小于4.5,甲基紅指示劑呈紅色,為甲基紅實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性。,甲基紅指示劑呈紅色,為甲基紅實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性。v產(chǎn)氣桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,經(jīng)脫羧后生成中性乙酰甲產(chǎn)氣桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,經(jīng)脫羧后生成中性乙酰甲基甲醇,培育液的基甲醇,培育液的pH大于大于5.4,甲基紅指示劑呈橘黃色,為,甲基紅指示劑呈橘黃色,為甲基紅實(shí)驗(yàn)陰性。甲基紅實(shí)驗(yàn)陰性。原理原理葡萄糖葡萄糖
3、丙酮酸丙酮酸大量混合酸大量混合酸pH降至降至4.4以下以下甲基紅試劑甲基紅試劑培育基變紅培育基變紅甲基紅實(shí)驗(yàn)甲基紅實(shí)驗(yàn)乙酰甲基甲醇中性乙酰甲基甲醇中性pH5.4 甲基紅試劑甲基紅試劑培育基橘黃色培育基橘黃色方法方法滴加甲基紅指示劑數(shù)滴,立刻察看結(jié)果滴加甲基紅指示劑數(shù)滴,立刻察看結(jié)果結(jié)果結(jié)果紅色為陽(yáng)性,紅色為陽(yáng)性,+不出現(xiàn)紅色為陰性,不出現(xiàn)紅色為陰性,-VP實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)v產(chǎn)氣桿菌利用葡萄糖時(shí)產(chǎn)生中性物質(zhì)之一就是乙酰甲基甲醇,產(chǎn)氣桿菌利用葡萄糖時(shí)產(chǎn)生中性物質(zhì)之一就是乙酰甲基甲醇,它在堿性溶液中被空氣中的分子氧氧化生成二乙酰,二乙酰它在堿性溶液中被空氣中的分子氧氧化生成二乙酰,二乙酰與培育基中的含胍基的
4、化合物反響,生成紅色化合物,是與培育基中的含胍基的化合物反響,生成紅色化合物,是VPVP實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性;而大腸桿菌不能產(chǎn)生乙酰甲基甲醇,為陰性。實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性;而大腸桿菌不能產(chǎn)生乙酰甲基甲醇,為陰性。原理原理葡萄糖葡萄糖丙酮酸丙酮酸乙酰甲基甲醇乙酰甲基甲醇二乙酰二乙酰V-P試劑試劑培育基變紅培育基變紅VP實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)與蛋白胨培育基精氨酸中的胍基與蛋白胨培育基精氨酸中的胍基反響生成紅色化合物反響生成紅色化合物方法方法取出試管培育物,參與等量的李氏試劑,搖勻后取出試管培育物,參與等量的李氏試劑,搖勻后不加塞,靜置不加塞,靜置3030分鐘察看結(jié)果。分鐘察看結(jié)果。結(jié)果結(jié)果紅色為陽(yáng)性,紅色為陽(yáng)性,+ +無(wú)紅色為陰性,無(wú)紅色為陰性,- -枸櫞酸鹽利用實(shí)驗(yàn)枸櫞酸鹽利用實(shí)驗(yàn) 某些細(xì)菌才干利用培育基中的枸櫞酸鹽作為獨(dú)一的碳源,也能利用其中的銨鹽作為獨(dú)一氮源,細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中分解枸櫞酸鹽產(chǎn)生碳酸鹽和分解銨鹽生成的氨,使培育基變堿性,使指示劑呈堿性反響,指示劑由綠色變?yōu)樯钏{(lán)色是枸櫞酸鹽利用實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性產(chǎn)氣桿菌,反之培育基不變色是為陰性大腸桿菌。原理原理枸櫞酸鹽枸櫞酸鹽銨鹽銨鹽碳酸鹽碳酸鹽氨氨培育基培育基pH下降下降溴麝香草酚藍(lán)溴麝香草
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