人教版高中生物 選修1專題2課題3　分解纖維素的微生物的分離ppt課件

1、;2 霧霾天氣是一種大氣污染形狀，飄浮的顆粒物可直接經(jīng)過呼吸系統(tǒng)進(jìn)入支氣管，呵斥呼吸道、腦血管、鼻腔炎等疾病。PM2.5被以為是呵斥霧霾天氣的“元兇。南方的水稻收割后，許多秸稈丟棄在田野里直接熄滅，熄滅大量秸稈與汽車尾氣、工業(yè)排氣、建筑揚(yáng)塵等，多種污染源可以混合催生霧霾天氣。討論：“秸稈的主要成分是什么？分析熄滅大量秸稈會(huì)呵斥哪些問題，他可以想到哪些無污染降解秸稈的方法嗎？;地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。一、根底知識(shí)一、根底知識(shí)1、纖維素葡萄糖根本單位：;思索：纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)，植物每年產(chǎn)生的纖維素超越70億噸，但卻不會(huì)在地球上大量的積累，為什么？纖維素能被土壤中的某些微生

2、物分解利用，這是由于它們可以產(chǎn)生纖維素酶。2、纖維素酶水解纖維素生成纖維二糖和葡萄糖的一類酶的總稱。1定義;纖維素酶不是單一酶，是復(fù)合酶。纖維素酶不是單一酶，是復(fù)合酶。C1酶：(外切酶) 從糖鏈的末端開場(chǎng)切掉兩個(gè)葡萄糖分子，產(chǎn)生纖維二糖葡萄糖苷酶：將纖維二糖分解為葡萄糖CX酶：(內(nèi)切酶) 作用于糖鏈的內(nèi)部使之?dāng)嗔殉商擎溒?組成：3酶反響原理：CX CX 酶、酶、C1C1酶酶萄糖苷酶萄糖苷酶;6曾經(jīng)發(fā)現(xiàn)并用于消費(fèi)纖維素酶的菌種有綠色木霉、變異青霉、黑曲霉和根霉等。;7實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：纖維素酶水解濾紙實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：纖維素酶水解濾紙實(shí)驗(yàn)3 3、纖維素酶的分解實(shí)驗(yàn)：、纖維素酶的分解實(shí)驗(yàn)：酶活力單位：酶活力

3、單位：1U1U表示表示1 1個(gè)酶活力單位。個(gè)酶活力單位。;8討論：根據(jù)他所掌握的微生物培育技術(shù)，假設(shè)要察看土壤中微生物分解纖維素的效果，應(yīng)該如何設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)？并預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。實(shí)驗(yàn)組別 實(shí)驗(yàn)組 對(duì)照組實(shí)驗(yàn)內(nèi)容預(yù)期結(jié)果卷煙紙消逝卷煙紙不消逝3組1組一樣大小的3條卷煙紙+不經(jīng)滅菌土樣一樣大小的3條卷煙紙+滅菌土樣;9土壤中的微生物分解了卷煙紙，用什么方法可以將這些微生物從土壤中分別出來？有什么方法可以鑒別這些微生物就是纖維素分解菌？請(qǐng)說出實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)思緒。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思緒：配制“以纖維素為 獨(dú)一碳源 的選擇培育基，并利用 剛果紅染料 來挑選和鑒別土壤中的纖維素分解菌。提示：選擇培育基和鑒別培育基提示：選

4、擇培育基和鑒別培育基;3 3、纖維素分解菌的挑選、纖維素分解菌的挑選2 2挑選原理：挑選原理：1 1挑選方法：剛果紅染色法挑選方法：剛果紅染色法 剛果紅CR是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)構(gòu)成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反響。纖維素被分解后無法構(gòu)成剛果紅纖維素復(fù)合物，構(gòu)成透明圈。;12二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)土壤取樣選擇培育 *梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培育基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落;13討論：1卷煙紙消逝的土壤中纖維素分解菌數(shù)量能夠比校園某些角落土壤中的要多，這是為什么？1、土壤取樣2假照實(shí)驗(yàn)室的土壤樣本數(shù)量太少，他會(huì)選擇到教室外怎樣的環(huán)境中取樣，

5、他選擇的理由是什么呢？3假設(shè)從校園某些角落的土壤直接取樣，纖維素分解菌能夠含量比較少，他將采取什么樣的方法添加它們的數(shù)量？;2、選擇培育1、選擇培育的目的：選擇培育基可以添加纖維素分解菌的濃度，以確?？梢詮臉悠愤x擇培育基可以添加纖維素分解菌的濃度，以確?？梢詮臉悠分蟹謩e到所需求的微生物。中分別到所需求的微生物。2、制備選擇培育基思索：旁欄中的配方是液體培育基還是固體培育基？為什么？思索：這個(gè)培育基對(duì)微生物能否具有選擇作用？假設(shè)具有，是如何進(jìn)展選擇的？思索：他能否設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，闡明選擇培育基的作用？是液體培育基，緣由是配方中無凝固劑。有選擇作用，培育基“以纖維素為獨(dú)一的碳源，只需能分解纖維素

6、的 微生物才可以大量繁衍，起到“濃縮的作用。用牛肉膏蛋白胨培育基與之對(duì)照;3、梯度稀釋按照課題1的稀釋操作方法，將選擇培育后的培育基進(jìn)展等比稀釋，稀釋最大倍數(shù)到106 。4、將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培育基上1、制備鑒別培育基：2、涂布平板：將稀釋度為104106的菌懸液各取0.1ml涂布在培育基上，30倒置培育。稀釋涂布平板法，每個(gè)稀釋度下需涂布3個(gè)平板，設(shè)置1組不涂布。無菌水稀釋;5、挑選產(chǎn)生透明圈的菌落利用剛果紅染色法，挑選產(chǎn)生透明圈的菌落，普通即為分解纖維素的菌落。方法一：先培育微生物，再參與剛果紅進(jìn)展顏色反響方法一：先培育微生物，再參與剛果紅進(jìn)展顏色反響方法二：在倒平板時(shí)就參與剛

7、果紅方法二：在倒平板時(shí)就參與剛果紅能夠參與剛果紅時(shí)會(huì)使菌落混雜，優(yōu)點(diǎn)是顏色反響即為分解菌的作用。培育基含有淀粉時(shí)可以使可以產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反響透時(shí)圈較模糊，有些生物能夠存在降解色素的才干，不易區(qū)分。;175、挑選產(chǎn)生透明圈的菌落討論：利用上述菌種高效降解秸稈廢棄物，他會(huì)從培育基上挑選哪個(gè)菌落運(yùn)用于消費(fèi)？理由是什么？選擇菌落3，菌落3的透明圈最大，闡明該微生物對(duì)纖維素的分解才干最強(qiáng)，其所分泌的纖維素酶數(shù)量多或活性高。;6、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析和課題延伸1、菌種的進(jìn)一步分別純化和保管挑選透明圈最大的菌落，用平板劃線法進(jìn)一步分別純化培育。2、菌種的進(jìn)一步鑒定發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)和纖維素酶的測(cè)定普

8、通是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)展定普通是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)展定量的測(cè)定量的測(cè)定葡萄糖的測(cè)定：葡萄糖的測(cè)定： 斐林試劑檢驗(yàn)斐林試劑檢驗(yàn)磚紅色沉淀。磚紅色沉淀。酶活力的表示方法：?jiǎn)挝粫r(shí)間內(nèi)、單位體積中底物的耗費(fèi)量或產(chǎn)酶活力的表示方法：?jiǎn)挝粫r(shí)間內(nèi)、單位體積中底物的耗費(fèi)量或產(chǎn)物的生成量。物的生成量。;分別微生物的普通方法：分別微生物的普通方法：菌種取樣菌種取樣選擇培育此步能否需求，應(yīng)根據(jù)選擇培育此步能否需求，應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定梯度稀釋梯度稀釋將樣品涂布到有特將樣品涂布到有特定鑒別作用的培育定鑒別作用的培育基上基

9、上挑選單菌落挑選單菌落發(fā)酵培育發(fā)酵培育;20討論：經(jīng)過學(xué)習(xí)，他以為可以怎樣無污染、有效利用秸稈？;練習(xí)：某課題組擬從牛瘤胃中分別出纖維素分解菌，實(shí)驗(yàn)流程如下：從屠宰場(chǎng)獲取新穎瘤胃液，短暫離心后過濾。將濾液接種到含有羧甲基纖維素鈉和染色劑A的培育基上進(jìn)展培育。將從步驟獲取的目的菌落接種到以濾紙條為獨(dú)一碳源的培育基中，搖床懸浮培育5天，察看濾紙的崩解效果。取崩解效果最好的幾片濾紙，將上面的菌種接種到固體培育基上，察看菌落生長(zhǎng)情況。請(qǐng)回答以下問題：1染色劑A為 。步驟的培育目的是 。2步驟中，應(yīng)選擇步驟中 的菌落進(jìn)展接種，適宜的培育溫度應(yīng)該接近于 。從基質(zhì)形狀上劃分，步驟所運(yùn)用的培育基是 。剛果紅剛果紅鑒別纖維素分解菌鑒別纖維素分解菌透明圈最大透明圈最大37/牛的體溫牛的體溫液體培育基液體培育基;實(shí)驗(yàn)流程：從屠宰場(chǎng)獲取新穎瘤胃液，短暫離心后過濾。將濾液接種到含有羧甲基纖維素鈉和染色劑A的培育基上進(jìn)展培育。將從步驟獲取的目的菌落接種到以濾紙條為獨(dú)一碳源的培育基中，搖床懸浮培育5天，察看濾紙的崩解效果。取崩解效果最好的幾片濾紙，將上面的菌種接種到固體培育基上，察看菌落生長(zhǎng)情況。請(qǐng)回答以下問題：3根據(jù)步驟的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，課題組得出牛瘤胃中有多種纖維素分解菌的結(jié)論，支持他們結(jié)論的實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)該是 。4步驟得到多種纖維素分解菌后，如何進(jìn)一