第九章二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物分析

1、天津醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院天津醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院藥物分析藥物分析第第 九章九章二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物的分析的分析本本 章章 主主 要要 內(nèi)內(nèi) 容容 n學(xué)學(xué) 習(xí)習(xí) 要要 求求n 一、掌握一、掌握 二氫吡啶類藥物的基本結(jié)構(gòu)及主要的二氫吡啶類藥物的基本結(jié)構(gòu)及主要的理化性質(zhì)；結(jié)構(gòu)、性質(zhì)與分析方法間的關(guān)系；以理化性質(zhì)；結(jié)構(gòu)、性質(zhì)與分析方法間的關(guān)系；以及鈰量法測定該類藥物含量的原理、方法以及注及鈰量法測定該類藥物含量的原理、方法以及注意事項。意事項。n 二、熟悉二、熟悉 二氫吡啶類藥物的化學(xué)鑒別反應(yīng)及有二氫吡啶類藥物的化學(xué)鑒別反應(yīng)及有關(guān)物質(zhì)檢查的方法。關(guān)物質(zhì)檢查的方法。n 三、了解三、了解

2、二氫吡啶類藥物其他的鑒別試驗及含二氫吡啶類藥物其他的鑒別試驗及含量測定的方法。量測定的方法。n二氫吡啶是農(nóng)業(yè)部首次批準(zhǔn)在我國使用的獸藥類促生二氫吡啶是農(nóng)業(yè)部首次批準(zhǔn)在我國使用的獸藥類促生長添加劑，現(xiàn)列入農(nóng)業(yè)部長添加劑，現(xiàn)列入農(nóng)業(yè)部獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)20032003年版中年版中。 n二氫吡啶是一種具有天然抗氧化劑二氫吡啶是一種具有天然抗氧化劑VEVE的某些作用的新的某些作用的新型多功能添加劑，可抑制脂類化合物的過氧化過程，型多功能添加劑，可抑制脂類化合物的過氧化過程，形成肝保護(hù)層；具有抗氧化作用。改變血清中的某些形成肝保護(hù)層；具有抗氧化作用。改變血清中的某些激素水平，促進(jìn)生長發(fā)育、增強(qiáng)免疫

3、功能，而且其代激素水平，促進(jìn)生長發(fā)育、增強(qiáng)免疫功能，而且其代謝完全、幾乎無殘留。謝完全、幾乎無殘留。二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物，也稱二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物，也稱 “ “鈣拮抗鈣拮抗藥藥”（calcium channel blockercalcium channel blocker） 。L L亞型鈣通道最重要。分布于心肌，血管平滑亞型鈣通道最重要。分布于心肌，血管平滑肌和其他組織。是細(xì)胞興奮時鈣內(nèi)流的重肌和其他組織。是細(xì)胞興奮時鈣內(nèi)流的重要途徑。要途徑。L L亞型鈣亞型鈣通道的特殊選擇性，又稱為通道的特殊選擇性，又稱為解除痙解除痙攣，又減弱心肌收縮力，減慢心率，適用攣，又減弱心肌收縮力，減慢心率

4、，適用于各型心絞痛。于各型心絞痛。依其結(jié)構(gòu)可以分成：選擇性鈣離子通道阻滯劑：二氫吡啶類(Dihydropyridines)苯烷胺類(phenylalkylamines)苯并硫氮雜卓類(benzothiozepines)選擇性選擇性n吡啶的結(jié)構(gòu)：吡啶的結(jié)構(gòu)：NHHHHH二氫吡啶類藥物的母核結(jié)構(gòu)：二氫吡啶類藥物的母核結(jié)構(gòu)：本類藥物均含有苯基本類藥物均含有苯基-1,4二氫吡啶的母核二氫吡啶的母核.HN123456CH3COOR3R2OOCR1R4R5第一節(jié)第一節(jié) 二氫吡啶類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)二氫吡啶類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、結(jié)構(gòu)一、結(jié)構(gòu)第九章第九章 二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物的分析二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物的

5、分析二氫吡啶類藥物的基本二氫吡啶類藥物的基本骨架：骨架：HNCH3R1R2OOCCOOR3R4R5123456為活性必需，為活性必需，變成吡啶環(huán)變成吡啶環(huán)或六氫吡啶或六氫吡啶環(huán)活性消失環(huán)活性消失為活性必需，為活性必需，若為乙?；魹橐阴；蚯杌钚曰蚯杌钚越档?，若為降低，若為硝基則激活硝基則激活鈣通道鈣通道鄰、間位有吸電子鄰、間位有吸電子基團(tuán)活性較佳，對基團(tuán)活性較佳，對位取代活性下降位取代活性下降取代基與活性關(guān)系次序：取代基與活性關(guān)系次序：H 甲基環(huán)烷基苯基或取代苯甲基環(huán)烷基苯基或取代苯基基影響作用部位，影響作用部位，5,6位取代酯基不同，位取代酯基不同，為手性中心。為手性中心。二氫吡啶類藥

6、物的特點n口服經(jīng)胃腸道吸收完全，口服經(jīng)胃腸道吸收完全，1-2h達(dá)到血藥濃度最大達(dá)到血藥濃度最大峰值峰值n有效時間持續(xù)長有效時間持續(xù)長n經(jīng)肝臟代謝對熱穩(wěn)定經(jīng)肝臟代謝對熱穩(wěn)定n特異性高特異性高n有很強(qiáng)的擴(kuò)血管作用有很強(qiáng)的擴(kuò)血管作用-在整體條件下不抑制心臟在整體條件下不抑制心臟n用于冠脈痙攣、高血壓、心肌梗塞等用于冠脈痙攣、高血壓、心肌梗塞等n可與可與beta受體阻滯劑、強(qiáng)心苷合用受體阻滯劑、強(qiáng)心苷合用 二氫吡啶類 DHP類是目前臨床上特異性最高，作用最強(qiáng)的一類鈣拮抗劑。第一代代表藥物硝苯地平(Nifedipine),松弛血管平滑肌和擴(kuò)張血管的作用強(qiáng)，作用時間長，對L亞型鈣通道具有特殊選擇性。尤其適

7、合冠脈痙攣所致心絞痛。硝苯地平（硝苯地平（nifedipine)合成合成 鄰硝基苯甲酸，二分子乙酰乙酸鄰硝基苯甲酸，二分子乙酰乙酸甲酯，過量氨水，在甲醇中回流即可甲酯，過量氨水，在甲醇中回流即可HNCH3H3COOOONO2ONO2OOO2NH4OHCH3OH+代謝：代謝：1 1 脫氫脫氫 二氫吡啶芳構(gòu)化。二氫吡啶芳構(gòu)化。2 2 酯鍵水解成羧酸（經(jīng)常水解一酯鍵水解成羧酸（經(jīng)常水解一個）。個）。3 3側(cè)鏈氧化成羥基。側(cè)鏈氧化成羥基。4 4形成內(nèi)酯。形成內(nèi)酯。HNCH3H3COOOONO2NCH3H3COOOONO2NCH3H3COHOOONO2NH3COHOOONO2OHNH3COOOONO2尼

8、莫地平尼莫地平(Nimodipine)(Nimodipine)。在。在選擇性作用于腦血管平滑肌，用選擇性作用于腦血管平滑肌，用于缺血性腦血管疾患。并且開辟了于缺血性腦血管疾患。并且開辟了新型的鈣通道拮抗劑。新型的鈣通道拮抗劑。HNCH3COOCH3H3CH2COOCH3CNO2n尼群地平（尼群地平（nitrendipine)n能降低心肌耗氧量，對缺血性心肌有保護(hù)能降低心肌耗氧量，對缺血性心肌有保護(hù)作用。作用。HNCH3COO(CH2)2OCH3(H3C)2HCOOCH3CNO2尼莫地平（尼莫地平（nimodipine)擴(kuò)張冠狀動脈作用更強(qiáng)大，擴(kuò)張冠狀動脈作用更強(qiáng)大，且作用持續(xù)時間且作用持續(xù)時間

9、長，耐受長，耐受性良好。有明顯的血管及性良好。有明顯的血管及腦血管擴(kuò)張作用。腦血管擴(kuò)張作用。HNCH3COOCH3(H3C)2HCH2COOCH3CNO2尼索地平（尼索地平（nisoldipine)為當(dāng)前作用最強(qiáng)的鈣拮抗為當(dāng)前作用最強(qiáng)的鈣拮抗劑，能選擇性擴(kuò)張冠狀動劑，能選擇性擴(kuò)張冠狀動脈，脈， 降低心肌降低心肌氧耗量，用氧耗量，用于缺血性心臟病。于缺血性心臟病。HNCH3COOCH3H3CH2COOCH3CClCl非洛地平（非洛地平（Felodipine)HNCH3COOCH2CH3H3CH2COOCH3CCOOC(CH3)3拉西地平（拉西地平（Lacidipine)尼伐地平（尼伐地平（Nil

10、vadipine)HNCH3COOCH3(H3C)2HCOOCH3CNON伊拉地平（伊拉地平（Isradipine)苯磺酸氨氯地平苯磺酸氨氯地平（Amlodipine Besylate）起效慢，持續(xù)時間長，適用于心絞痛。起效慢，持續(xù)時間長，適用于心絞痛。n二、主要理化性質(zhì)二、主要理化性質(zhì)n1. 1. 二氫吡啶環(huán)的還原性二氫吡啶環(huán)的還原性 n 二氫吡啶環(huán)，具有還原性，可用氧化還二氫吡啶環(huán)，具有還原性，可用氧化還原反應(yīng)鑒別和氧化還原滴定法進(jìn)行含量測原反應(yīng)鑒別和氧化還原滴定法進(jìn)行含量測定。定。n2. 2. 硝基的氧化性硝基的氧化性n 苯環(huán)上大多有硝基，具有氧化性，可被苯環(huán)上大多有硝基，具有氧化性，可

11、被還原劑還原為芳伯氨基，可用重氮化還原劑還原為芳伯氨基，可用重氮化- -偶合偶合反應(yīng)鑒別。反應(yīng)鑒別。HN123456CH3COOR3R2OOCR1R4R53. 3. 二氫吡啶環(huán)氨基質(zhì)子解離性二氫吡啶環(huán)氨基質(zhì)子解離性 二氫吡啶類藥物與堿作用后，二氫吡二氫吡啶類藥物與堿作用后，二氫吡啶環(huán)啶環(huán)1,4-1,4-位氫可以發(fā)生解離，形成共軛環(huán)位氫可以發(fā)生解離，形成共軛環(huán)發(fā)生顏色變化，可以進(jìn)行鑒別。發(fā)生顏色變化，可以進(jìn)行鑒別。n4. 4. 穩(wěn)定性穩(wěn)定性n 二氫吡啶類藥物遇光極不穩(wěn)定，易發(fā)生二氫吡啶類藥物遇光極不穩(wěn)定，易發(fā)生光化學(xué)反應(yīng)，因光化學(xué)反應(yīng)，因n此要避光保存此類藥物。此要避光保存此類藥物。n5. 5.

12、 旋光性旋光性n 本類藥物的本類藥物的C4C4位多為手性碳原子，具有位多為手性碳原子，具有旋光性。旋光性。n6. 6. 吸收光譜特性吸收光譜特性n 本類藥物具有芳環(huán)，有明顯的紫外吸收本類藥物具有芳環(huán)，有明顯的紫外吸收特征和紅外特征。特征和紅外特征。藥物藥物溶劑溶劑濃度（濃度（g/ml）max/min(nm)吸光度比值吸光度比值硝苯地平硝苯地平無水乙醇無水乙醇15237,320-335寬吸寬吸收收尼群地平尼群地平無水乙醇無水乙醇20236,353/303A353/A302=2.1-2.3尼莫地平尼莫地平乙醇乙醇10237尼索地平尼索地平無水乙醇無水乙醇10237非洛地平非洛地平乙醇乙醇20238

13、, 361n第二節(jié)第二節(jié) 鑒別試驗鑒別試驗一、化學(xué)鑒別法一、化學(xué)鑒別法n（一）與亞鐵鹽的反應(yīng)（一）與亞鐵鹽的反應(yīng)n如尼莫地平（如尼莫地平（ChP2010ChP2010）的鑒別：）的鑒別：n取本品取本品20mg20mg，加乙醇，加乙醇2ml2ml溶解后，加新制的溶解后，加新制的5%5%硫酸亞鐵銨溶液硫酸亞鐵銨溶液2ml2ml，1.5mol/L1.5mol/L硫酸硫酸1 1滴與滴與0.5mol/L0.5mol/L氫氧化鉀溶液氫氧化鉀溶液1ml1ml，強(qiáng)烈振搖，強(qiáng)烈振搖，1 1分分鐘內(nèi)沉淀由灰綠色變?yōu)榧t棕色。鐘內(nèi)沉淀由灰綠色變?yōu)榧t棕色。苯環(huán)硝基的氧化性，可將苯環(huán)硝基的氧化性，可將Fe(OH)Fe(O

14、H)2 2氧化成氧化成Fe(OH)Fe(OH)3 3( (紅色沉淀）紅色沉淀）n（二）與（二）與NaOHNaOH試液反應(yīng)試液反應(yīng)丙酮溶液丙酮溶液+NaOH+NaOH如：硝苯地平，尼群地平，尼索地平（硝苯地平，尼群地平，尼索地平（ChP2010ChP2010）橙紅色溶液橙紅色溶液藥物被堿水解后，水解后的苯基藥物被堿水解后，水解后的苯基-1,4-1,4二氫吡啶二氫吡啶基團(tuán)溶于丙酮呈現(xiàn)橙紅色?；鶊F(tuán)溶于丙酮呈現(xiàn)橙紅色。ChP2010硝硝苯地平的鑒別：苯地平的鑒別： 取本品約取本品約25mg，加丙酮，加丙酮1ml溶解，加溶解，加20%氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液35滴，振搖，溶液滴，振搖，溶液顯橙紅色顯橙紅

15、色。n（三）沉淀反應(yīng)（三）沉淀反應(yīng)n本類藥物含有本類藥物含有1,4-1,4-二氫吡啶結(jié)構(gòu)，可與重二氫吡啶結(jié)構(gòu)，可與重金屬鹽類形成沉淀。金屬鹽類形成沉淀。 尼莫地平尼莫地平+HgCl+HgCl2 2白色沉淀白色沉淀 尼群地平尼群地平+KBiI+KBiI4 4橙紅色沉淀橙紅色沉淀ChP2010尼莫地平注射液的鑒別：尼莫地平注射液的鑒別： 取本品適量（約相當(dāng)于尼莫地平取本品適量（約相當(dāng)于尼莫地平20mg），置分液漏斗中，），置分液漏斗中，加加乙醚乙醚30ml振搖提取，靜置，分取乙醚層，置水浴上蒸干，放振搖提取，靜置，分取乙醚層，置水浴上蒸干，放冷，殘渣加冷，殘渣加乙醇乙醇2ml，攪拌使溶解，移至試管

16、中，加，攪拌使溶解，移至試管中，加1%氯化汞氯化汞溶液溶液3ml，即發(fā)生，即發(fā)生白色沉淀白色沉淀。n（四）重氮化（四）重氮化- -偶合反應(yīng)偶合反應(yīng)n如硝苯地平（如硝苯地平（BP2010BP2010）的鑒別：）的鑒別：n取本品取本品25mg,25mg,加加10ml-10ml-水水- -乙醇混合溶液（乙醇混合溶液（1.51.5：3.53.5：5 5），溫?zé)?，加入鋅粒），溫?zé)幔尤脘\粒0.5g0.5g，放，放置置5 5分鐘，濾過，濾液加亞硝酸鈉試液（分鐘，濾過，濾液加亞硝酸鈉試液（10g/L10g/L）5ml,5ml,放置放置2 2分鐘，再加入氨基磺酸分鐘，再加入氨基磺酸胺溶液（胺溶液（5g/L5g

17、/L） 2ml,2ml,搖勻，加入鹽酸萘乙搖勻，加入鹽酸萘乙二胺溶液（二胺溶液（5g/L5g/L） 2ml,2ml,即顯紅色。即顯紅色。苯環(huán)硝基具有氧化性，在酸性條件下可被鋅苯環(huán)硝基具有氧化性，在酸性條件下可被鋅粉還原成芳伯胺基，可用重氮化粉還原成芳伯胺基，可用重氮化- -偶合反應(yīng)進(jìn)偶合反應(yīng)進(jìn)行鑒別。行鑒別。二、分光光度法二、分光光度法（一）紫外分光光度法：本類藥物具有芳香（一）紫外分光光度法：本類藥物具有芳香環(huán)，有強(qiáng)烈的紫外吸收。因此可用環(huán)，有強(qiáng)烈的紫外吸收。因此可用UVUV進(jìn)行進(jìn)行鑒別。鑒別。如尼群地平軟膠囊的鑒別：取本品的內(nèi)容物如尼群地平軟膠囊的鑒別：取本品的內(nèi)容物約約1g1g，置，置1

18、00ml100ml量瓶中，用無水乙醇稀釋置量瓶中，用無水乙醇稀釋置刻度，搖勻，取刻度，搖勻，取10ml,10ml,置置100100量瓶中，用無量瓶中，用無水乙醇稀釋置刻度，在水乙醇稀釋置刻度，在353nm353nm與與303nm303nm的波的波長處分別測定吸光度，在長處分別測定吸光度，在353nm353nm與與303nm303nm的的吸光度比值應(yīng)為吸光度比值應(yīng)為2.1-2.32.1-2.3。（二）紅外分光光度法（二）紅外分光光度法如尼群地平片的紅外鑒別試驗如尼群地平片的紅外鑒別試驗n三、色譜法：三、色譜法：n基于二氫吡啶類藥物具有不同的分子結(jié)構(gòu)，基于二氫吡啶類藥物具有不同的分子結(jié)構(gòu)，其色譜行

19、為有所差別，可用于分離鑒別。其色譜行為有所差別，可用于分離鑒別。n（一）、（一）、HPLCHPLCn尼群地平片的鑒別：供試品溶液主峰的保留尼群地平片的鑒別：供試品溶液主峰的保留時間與對照品溶液主峰的保留時間一致。時間與對照品溶液主峰的保留時間一致。n（二）、（二）、TLCTLCn如硝苯地平的鑒別：如硝苯地平的鑒別：n對照品和供試品對照品和供試品n固定相：硅膠固定相：硅膠F254F254薄層板上薄層板上n流動相：乙酸乙酯流動相：乙酸乙酯- -環(huán)己烷（環(huán)己烷（4040：6060） 檢查：紫外光燈（檢查：紫外光燈（254nm254nm）下檢查。）下檢查。BP2010硝苯地平的鑒別：硝苯地平的鑒別：

20、取本品加取本品加甲醇甲醇制成每制成每1ml 中約含中約含1mg的溶液，作為供試品溶液；另取硝的溶液，作為供試品溶液；另取硝苯地平對照品適量，加甲醇制成每苯地平對照品適量，加甲醇制成每1ml 約含約含1mg的溶液，作為對照品溶液。的溶液，作為對照品溶液。吸取上述兩種溶液各吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一硅膠，分別點于同一硅膠F254薄層板上，以薄層板上，以乙酸乙酯乙酸乙酯-環(huán)環(huán)己烷己烷（40 60）為展開劑，展開，晾干，置紫外光燈（）為展開劑，展開，晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視，）下檢視，供供試品溶液所顯主斑點的位置和顏色應(yīng)與對照品溶液的主斑點一致。試品溶液所顯主斑點的位置和顏色應(yīng)

21、與對照品溶液的主斑點一致。n第三節(jié)、有關(guān)物質(zhì)的檢查第三節(jié)、有關(guān)物質(zhì)的檢查 二氫吡啶類藥物遇光極不穩(wěn)定，易發(fā)生光二氫吡啶類藥物遇光極不穩(wěn)定，易發(fā)生光化學(xué)歧化作用，引入雜質(zhì)，因此各國藥典化學(xué)歧化作用，引入雜質(zhì)，因此各國藥典標(biāo)準(zhǔn)中均規(guī)定在標(biāo)準(zhǔn)中均規(guī)定在避光條件避光條件下進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)下進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢查，大多采用檢查，大多采用HPLCHPLC法。法。第九章第九章 二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物的分析二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物的分析HNCH3CH3CH3OOCCOOCH3NO2NCH3CH3CH3OOCCOOCH3NO2O或光NCH3CH3CH3OOCCOOCH3NO光 硝苯地平在光照和氧化劑存在條件下分別生成兩

22、種降解硝苯地平在光照和氧化劑存在條件下分別生成兩種降解氧化產(chǎn)物：氧化產(chǎn)物：雜質(zhì)雜質(zhì)I I：2,6-2,6-二甲基二甲基-4-(2-4-(2-硝基苯基硝基苯基)-3,5-)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯吡啶二甲酸二甲酯雜質(zhì)雜質(zhì)IIII：2,6-2,6-二甲基二甲基-4-(2-4-(2-亞硝基苯基亞硝基苯基)-3,5-)-3,5-吡啶二甲酸二吡啶二甲酸二甲酯甲酯 具體方法（具體方法（P259-260P259-260） 1 1. .供試液供試液和和的制備的制備 2 2. .有關(guān)雜質(zhì)對照品液有關(guān)雜質(zhì)對照品液和和的制備的制備 3 3. .色譜條件色譜條件 填充劑：填充劑：十八烷基硅烷鍵合硅膠十八烷基硅烷鍵合

23、硅膠; ; 流動相：流動相：甲醇甲醇- -水（水（3 3 ：2 2）；）； 檢測波長：檢測波長：235235nmnm。結(jié)果：按外標(biāo)法以峰面積計算，均不得超過結(jié)果：按外標(biāo)法以峰面積計算，均不得超過0.1%0.1%，其他單個雜質(zhì)的峰面積不得大于對，其他單個雜質(zhì)的峰面積不得大于對照品溶液中硝苯地平峰面積，雜質(zhì)總量不照品溶液中硝苯地平峰面積，雜質(zhì)總量不得過得過0.5%0.5%。n第四節(jié)、含量測定第四節(jié)、含量測定n一、鈰量法一、鈰量法n二氫吡啶類藥物具有還原性，可用鈰量法二氫吡啶類藥物具有還原性，可用鈰量法測定該類藥物的含量。測定該類藥物的含量。n鈰量法簡介：也稱為硫酸鈰法，是以鈰量法簡介：也稱為硫酸鈰

24、法，是以Ce(SOCe(SO4 4) )2 2為標(biāo)準(zhǔn)溶液的氧化還原滴定法。為標(biāo)準(zhǔn)溶液的氧化還原滴定法。優(yōu)點：優(yōu)點：以以Ce(SO4)2標(biāo)準(zhǔn)溶液穩(wěn)定，長時間放置、標(biāo)準(zhǔn)溶液穩(wěn)定，長時間放置、曝光、加熱不會引起濃度的變化。曝光、加熱不會引起濃度的變化。Ce4+還原為還原為Ce3+是單電子轉(zhuǎn)移，不是生是單電子轉(zhuǎn)移，不是生成中間價態(tài)，反應(yīng)簡單，副反應(yīng)少。成中間價態(tài)，反應(yīng)簡單，副反應(yīng)少。大部分有機(jī)物不與大部分有機(jī)物不與Ce(SO4)2作用，不干擾作用，不干擾測定。測定。特別適用于糖漿劑以及片劑等制劑藥物的特別適用于糖漿劑以及片劑等制劑藥物的測定。測定。n終點指示：終點指示：nCe4+為黃色，為黃色，Ce3

25、+為無色，為無色， Ce4+可自可自身作為指示劑，但不夠靈敏。身作為指示劑，但不夠靈敏。n常用鄰二氮菲作為指示劑，即稍過量的常用鄰二氮菲作為指示劑，即稍過量的Ce4+將指示液中的將指示液中的Fe2+氧化成氧化成Fe3+，使使橙紅色配合物離子呈無色，以指示終點的橙紅色配合物離子呈無色，以指示終點的到達(dá)。到達(dá)。n鄰二氮菲指示液：鄰二氮菲指示液：n鄰二氮菲鄰二氮菲-Fe(II)-Fe(II)指示劑：指示劑：n配置方法：將配置方法：將1.485g1.485g一水合鄰二氮菲和一水合鄰二氮菲和0.695gFeSO0.695gFeSO4 47H2O7H2O溶于溶于100mL100mL水中來配制水中來配制。n

26、如硝苯地平的測定如硝苯地平的測定測定原理：可用下列反應(yīng)式表示：測定原理：可用下列反應(yīng)式表示：NHNO2CO2CH3CH3CH3H3COO2Ce(SO4)26HClO4NNO2CO2CH3CH3CH3H3COO2Ce(ClO4)34H2SO4 終點時終點時（鄰二氮菲（鄰二氮菲-Fe(II)-Fe(II)指示劑）指示劑）: :微過量的微過量的CeCe4+4+將指示劑中的將指示劑中的FeFe2+2+氧化成氧化成FeFe3+3+，使橙紅色配合物離使橙紅色配合物離子呈無色，以指示終點的到達(dá)。子呈無色，以指示終點的到達(dá)。 如：尼莫地平，尼群地平，非洛地平，硝苯地平采用該法如：尼莫地平，尼群地平，非洛地平，

27、硝苯地平采用該法定量。（定量。（ChP2010）nChP2010ChP2010硝苯地平的含量測定：硝苯地平的含量測定：n取本品約取本品約0.4g0.4g（0.4053g0.4053g），精密稱定，加無水），精密稱定，加無水乙醇乙醇50ml50ml，微熱使溶解，微熱使溶解，加高氯酸加高氯酸溶液（取溶液（取70%70%高氯酸高氯酸8.5ml8.5ml，加水至，加水至100ml100ml）50ml50ml、鄰二氮菲鄰二氮菲指指示液示液3 3滴，立即用硫酸鈰滴定液（滴，立即用硫酸鈰滴定液（0.1mol/L0.1mol/L）滴）滴定（實際濃度為定（實際濃度為0.1012M0.1012M），至近終點時，在

28、水），至近終點時，在水浴中加熱至浴中加熱至5050左右，繼續(xù)緩緩左右，繼續(xù)緩緩滴定至橙紅色滴定至橙紅色消消失，消耗滴定液失，消耗滴定液23.37mL;23.37mL;并將滴定的結(jié)果用空白并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正試驗校正, ,消耗滴定液消耗滴定液0.14mL0.14mL。每。每1ml1ml硫酸鈰滴定硫酸鈰滴定液（液（0.1mol/L0.1mol/L）相當(dāng)于）相當(dāng)于17.32mg17.32mg的的C C1 17H7H1818N N2 2O O6 6。0(V - V ) FT含量% =100%W含量計算公式：含量計算公式：二、紫外二、紫外- -可見分光光度法可見分光光度法nChP2010ChP2

29、010尼群地平軟膠囊（尼群地平軟膠囊（10mg/10mg/粒）的含量測定：粒）的含量測定：n避光操作，取本品避光操作，取本品1010粒置小燒杯中，用粒置小燒杯中，用剪刀剪刀剪破嚢殼剪破嚢殼，加無水乙醇少量，振搖使溶解后，加無水乙醇少量，振搖使溶解后，將，將內(nèi)容物與嚢殼全部轉(zhuǎn)移至具塞錐形瓶中內(nèi)容物與嚢殼全部轉(zhuǎn)移至具塞錐形瓶中，用，用無水乙醇反復(fù)沖洗剪刀及小燒杯無水乙醇反復(fù)沖洗剪刀及小燒杯，洗液，洗液并入并入錐形瓶錐形瓶中，將錐形瓶密塞，置中，將錐形瓶密塞，置4040水浴水浴中中加熱加熱1515分鐘，并時時振搖，將內(nèi)容物移入分鐘，并時時振搖，將內(nèi)容物移入100ml100ml量瓶中，用無水乙醇量瓶中

30、，用無水乙醇反復(fù)沖洗反復(fù)沖洗嚢殼和錐嚢殼和錐形瓶，洗液并入量瓶中，用無水乙醇稀釋至形瓶，洗液并入量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取刻度，搖勻，精密量取2ml2ml，置，置100ml100ml量瓶中量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，在，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，在353nm353nm的的波長波長處測定吸光度處測定吸光度0.6320.632；n另精密稱定另精密稱定尼群地平對照品尼群地平對照品10.04mg10.04mg，置置50mL50mL量瓶中，流動相溶解并稀釋至量瓶中，流動相溶解并稀釋至刻度，精密量取刻度，精密量取1mL,1mL,流動相溶解并稀流動相溶解并稀釋至釋至10mL10m

31、L，( (制成制成1ml1ml中約含中約含20g20g的溶的溶液液) )，同法測定吸光度為，同法測定吸光度為0.6480.648，計算，計算即得本品含量。即得本品含量。三、高效液相色譜法三、高效液相色譜法nChP2010ChP2010尼莫地平分散片（尼莫地平分散片（2mg/2mg/片）的含量片）的含量測定：測定：n色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇甲醇- -乙腈乙腈- -水水（353538382727）為流動相；檢測波長為流動相；檢測波長為為235nm235nm。理論板數(shù)按尼莫地平峰計算不低于。理論板數(shù)按尼

32、莫地平峰計算不低于80008000，尼莫地平峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度，尼莫地平峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。應(yīng)符合要求。測定法：測定法： 避光操作避光操作。取本品。取本品2020片，精密稱定為片，精密稱定為3.9882g3.9882g，研細(xì)，精密稱取研細(xì)，精密稱取1.0012g(1.0012g(約相當(dāng)于尼莫地平約相當(dāng)于尼莫地平10mg)10mg)，置，置50ml50ml量瓶中，量瓶中，加流動相適量加流動相適量，超聲處理超聲處理1515分分鐘鐘使尼莫地平溶解，放冷；用使尼莫地平溶解，放冷；用流動相流動相稀釋至刻度稀釋至刻度，搖勻，搖勻，離心離心1010分鐘分鐘( (每分鐘每分鐘30003000

33、轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)) )，精密量取，精密量取上清液上清液5ml5ml，置，置50ml50ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取，搖勻，精密量取10l10l注入液相色譜儀，記錄色注入液相色譜儀，記錄色譜圖，尼莫地平面積為譜圖，尼莫地平面積為794356794356； 另精密稱定另精密稱定尼莫地平對照品尼莫地平對照品10.02mg10.02mg，置，置50mL50mL量瓶量瓶中，流動相溶解并稀釋至刻度，精密量取中，流動相溶解并稀釋至刻度，精密量取1mL,1mL,流流動相溶解并稀釋至動相溶解并稀釋至10mL10mL，( (制成制成1ml1ml中約含中約含20g20g的的溶液溶液) )，同