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1、第五章第五章 微生物的營(yíng)養(yǎng)微生物的營(yíng)養(yǎng)微生物的營(yíng)養(yǎng)微生物的營(yíng)養(yǎng) 那些能夠滿(mǎn)足機(jī)體生長(zhǎng)、繁殖和完那些能夠滿(mǎn)足機(jī)體生長(zhǎng)、繁殖和完成各種生理活動(dòng)所需要的物質(zhì)稱(chēng)為成各種生理活動(dòng)所需要的物質(zhì)稱(chēng)為營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。物質(zhì)。 微生物從環(huán)境中吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并加以微生物從環(huán)境中吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并加以利用的過(guò)程即稱(chēng)為利用的過(guò)程即稱(chēng)為營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)(nutritionnutrition)。本章主要內(nèi)容本章主要內(nèi)容n微生物的六大營(yíng)養(yǎng)要素微生物的六大營(yíng)養(yǎng)要素n微生物的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型微生物的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型n微生物吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的方式微生物吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的方式n培養(yǎng)基配制的原則培養(yǎng)基配制的原則n培養(yǎng)基的類(lèi)型培養(yǎng)基的類(lèi)型一、微生物細(xì)胞的化學(xué)組成一、微生物細(xì)胞
2、的化學(xué)組成第一節(jié)第一節(jié) 微生物的營(yíng)養(yǎng)要求微生物的營(yíng)養(yǎng)要求 微生物細(xì)胞化學(xué)組成成分析表明,與其他高微生物細(xì)胞化學(xué)組成成分析表明,與其他高等動(dòng)植物細(xì)胞一樣,細(xì)胞也是由等動(dòng)植物細(xì)胞一樣,細(xì)胞也是由主要元素主要元素: :碳、碳、氫、氧、氮、磷、硫(占細(xì)菌細(xì)胞干重的氫、氧、氮、磷、硫(占細(xì)菌細(xì)胞干重的9797)和和微量元素微量元素: :銅、錳、鋅等構(gòu)成。銅、錳、鋅等構(gòu)成。 微生物細(xì)胞中這些元素主要以蛋白質(zhì)、糖、微生物細(xì)胞中這些元素主要以蛋白質(zhì)、糖、脂類(lèi)、核酸、維生素及它們的降解產(chǎn)物、代謝產(chǎn)脂類(lèi)、核酸、維生素及它們的降解產(chǎn)物、代謝產(chǎn)物等物等有機(jī)物,水有機(jī)物,水和和無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)鹽等等無(wú)機(jī)物無(wú)機(jī)物的形式存在。的
3、形式存在。 元素元素 細(xì)菌細(xì)菌 酵母菌酵母菌 霉菌霉菌 碳碳 50 49.8 47.9 氮氮 15 12.4 5.2 氫氫 8 6.7 6.7 氧氧 20 31.1 40.2 磷磷 3 硫硫 1 微生物細(xì)胞中幾種主要元素的含量微生物細(xì)胞中幾種主要元素的含量(干重的百分?jǐn)?shù))(干重的百分?jǐn)?shù)) 主要成分主要成分 細(xì)菌細(xì)菌 酵母菌酵母菌 霉菌霉菌 水分水分 7585 7080 8590(占細(xì)胞鮮重的(占細(xì)胞鮮重的%) 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 5080 3275 1415 占占 細(xì)細(xì) 碳水化合物碳水化合物 1228 2763 740 胞胞 干干 脂肪脂肪 520 215 440 重重 的的 核酸核酸 1020 6
4、 8 1 % 無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)鹽 230 3.87 612微生物細(xì)胞的化學(xué)組成微生物細(xì)胞的化學(xué)組成二、微生物的六大種營(yíng)養(yǎng)要素二、微生物的六大種營(yíng)養(yǎng)要素碳源碳源 (carbon source) 氮源氮源 (nitrogen source) 生長(zhǎng)因子生長(zhǎng)因子(growth factor) 無(wú)機(jī)鹽(無(wú)機(jī)鹽(mineral salts) 水(水(water) 能源能源(energy source)碳源功能:碳源功能:uC C素構(gòu)成細(xì)胞及代謝產(chǎn)物的骨架素構(gòu)成細(xì)胞及代謝產(chǎn)物的骨架uC C素是大多數(shù)微生物代謝所需的能量來(lái)源素是大多數(shù)微生物代謝所需的能量來(lái)源 (一)碳源(一)碳源 凡能夠提供微生物營(yíng)養(yǎng)所需的碳元素的
5、凡能夠提供微生物營(yíng)養(yǎng)所需的碳元素的營(yíng)養(yǎng)源叫營(yíng)養(yǎng)源叫碳源碳源。(1 1)無(wú)機(jī)態(tài)的碳源:)無(wú)機(jī)態(tài)的碳源:COCO2 2、碳酸鹽。自養(yǎng)型微生物利、碳酸鹽。自養(yǎng)型微生物利用用COCO2 2合成碳水化合物。合成碳水化合物。(2 2)有機(jī)態(tài)的碳源(有機(jī)碳源):)有機(jī)態(tài)的碳源(有機(jī)碳源):糖類(lèi)、有機(jī)酸、糖類(lèi)、有機(jī)酸、醇、脂、烴等。其中糖類(lèi)是較好的碳源。特別是單醇、脂、烴等。其中糖類(lèi)是較好的碳源。特別是單糖(果糖和葡萄糖),其次是雙糖(蔗糖)、多糖。糖(果糖和葡萄糖),其次是雙糖(蔗糖)、多糖。異養(yǎng)微生物利用有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物利用有機(jī)碳源。 碳源的種類(lèi)碳源的種類(lèi)u實(shí)驗(yàn)室中:實(shí)驗(yàn)室中:葡萄糖、蔗糖、馬鈴薯、玉
6、米粉等。葡萄糖、蔗糖、馬鈴薯、玉米粉等。u工業(yè)發(fā)酵上:工業(yè)發(fā)酵上:常利用各種單糖、糖蜜及農(nóng)副產(chǎn)品,常利用各種單糖、糖蜜及農(nóng)副產(chǎn)品,如玉米粉、米糠、麥麩、馬鈴薯、甘薯等作為微生如玉米粉、米糠、麥麩、馬鈴薯、甘薯等作為微生物的碳源。物的碳源。 碳源有碳源有速效速效碳源和碳源和遲效遲效碳源之分。碳源之分。氮源功能:氮源功能:u是微生物細(xì)胞蛋白質(zhì)和核酸的重要成分是微生物細(xì)胞蛋白質(zhì)和核酸的重要成分u氮源一般不做能源。氮源一般不做能源。 (二)氮源(二)氮源 凡能提供微生物生長(zhǎng)繁殖所需氮元素的營(yíng)養(yǎng)源凡能提供微生物生長(zhǎng)繁殖所需氮元素的營(yíng)養(yǎng)源稱(chēng)稱(chēng)氮源氮源。 只有硝化細(xì)菌既可利用銨鹽、亞硝酸鹽作氮源只有硝化細(xì)菌
7、既可利用銨鹽、亞硝酸鹽作氮源, ,同時(shí)也可作能源。同時(shí)也可作能源。 某些厭氧細(xì)菌在厭氧與糖類(lèi)物質(zhì)缺乏的條件下,某些厭氧細(xì)菌在厭氧與糖類(lèi)物質(zhì)缺乏的條件下,也可以利用氨基酸作為能源物質(zhì)。也可以利用氨基酸作為能源物質(zhì)。(1 1)空氣中分子態(tài)的氮:)空氣中分子態(tài)的氮:固氮菌、根瘤菌;固氮菌、根瘤菌;(2 2)無(wú)機(jī)氮化合物:)無(wú)機(jī)氮化合物:銨鹽、硝酸鹽、亞硝酸鹽,銨鹽、硝酸鹽、亞硝酸鹽,大多數(shù)微生物均能利用;大多數(shù)微生物均能利用;(3 3)有機(jī)氮化合物:)有機(jī)氮化合物:蛋白質(zhì)及其降解物,大多寄蛋白質(zhì)及其降解物,大多寄生性微生物和一部分腐生性微生物能利用。生性微生物和一部分腐生性微生物能利用。氮源的種類(lèi)氮
8、源的種類(lèi)u實(shí)驗(yàn)室常用:實(shí)驗(yàn)室常用:碳酸銨、硝酸鹽、硫酸銨、尿素、碳酸銨、硝酸鹽、硫酸銨、尿素、牛肉膏、蛋白胨、酵母膏等作氮源。牛肉膏、蛋白胨、酵母膏等作氮源。 u生產(chǎn)常用:生產(chǎn)常用:硝酸鹽、銨鹽、尿素、氨以及蛋白含硝酸鹽、銨鹽、尿素、氨以及蛋白含量較高的魚(yú)粉、蠶蛹粉、黃豆餅粉、花生餅份、玉量較高的魚(yú)粉、蠶蛹粉、黃豆餅粉、花生餅份、玉米漿等。米漿等。 速效氮源:速效氮源:通常是有利于機(jī)體的生長(zhǎng);通常是有利于機(jī)體的生長(zhǎng);遲效氮源:遲效氮源:則有利于代謝產(chǎn)物的形成。生產(chǎn)中一般則有利于代謝產(chǎn)物的形成。生產(chǎn)中一般將二者按一定比例混合使用。將二者按一定比例混合使用。 凡能為微生物的生命活動(dòng)提供最初能量來(lái)源
9、的凡能為微生物的生命活動(dòng)提供最初能量來(lái)源的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或輻射能稱(chēng)為能源。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或輻射能稱(chēng)為能源。(三)能(三)能 源源p調(diào)解微生物細(xì)胞的滲透壓,調(diào)解微生物細(xì)胞的滲透壓,pHpH值和氧化還原電值和氧化還原電位位(如(如NaNa+ +、POPO4 42-2-、NONO3 3- -、SOSO4 42-2-)(四)無(wú)機(jī)鹽(四)無(wú)機(jī)鹽 亦是微生物生長(zhǎng)必不可少的一類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物,它亦是微生物生長(zhǎng)必不可少的一類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物,它為機(jī)體提供必需的金屬元素。為機(jī)體提供必需的金屬元素。無(wú)機(jī)鹽功能:無(wú)機(jī)鹽功能:p構(gòu)成微生物細(xì)胞的組成成分構(gòu)成微生物細(xì)胞的組成成分( (如如P P、S S、MgMg、FeFe、K K、CaCa等等) )
10、p有些無(wú)機(jī)鹽還可做為自養(yǎng)微生物的能源有些無(wú)機(jī)鹽還可做為自養(yǎng)微生物的能源(如(如S S、FeFe)p構(gòu)成酶活性基的組成成分,維持酶活性。構(gòu)成酶活性基的組成成分,維持酶活性。(Cu2+、Mn2+、Zn2+、Mg、Ca、K是多種酶的激活劑)是多種酶的激活劑) 根據(jù)微生物生長(zhǎng)所需的無(wú)機(jī)元素量的不同,可根據(jù)微生物生長(zhǎng)所需的無(wú)機(jī)元素量的不同,可將其分為:將其分為:無(wú)機(jī)鹽的種類(lèi)無(wú)機(jī)鹽的種類(lèi) 一般微生物生長(zhǎng)所需要的無(wú)機(jī)鹽有:硫酸鹽、一般微生物生長(zhǎng)所需要的無(wú)機(jī)鹽有:硫酸鹽、磷酸鹽、氯化物以及含有鈉、鉀、鎂、鐵等金屬元磷酸鹽、氯化物以及含有鈉、鉀、鎂、鐵等金屬元素的化合物。素的化合物。u常量元素:常量元素:101
11、0-4-41010-3-3mol/Lmol/L范圍內(nèi),例:范圍內(nèi),例:磷、硫、磷、硫、鉀、鎂、鈣、鈉、鐵。鉀、鎂、鈣、鈉、鐵。以無(wú)機(jī)鹽離子形式被吸收,以無(wú)機(jī)鹽離子形式被吸收,配培養(yǎng)基時(shí)要另外添加。配培養(yǎng)基時(shí)要另外添加。u微量元素:微量元素:1010-8-81010-6-6mol/Lmol/L范圍內(nèi),例:范圍內(nèi),例:銅、鋅、銅、鋅、鉬、鈷等鉬、鈷等。一般培養(yǎng)基中不需另加,還要控制在正。一般培養(yǎng)基中不需另加,還要控制在正常水平,如過(guò)量會(huì)產(chǎn)生毒害作用。常水平,如過(guò)量會(huì)產(chǎn)生毒害作用。根據(jù)生長(zhǎng)因子結(jié)構(gòu)和功能不同,可分為三類(lèi):根據(jù)生長(zhǎng)因子結(jié)構(gòu)和功能不同,可分為三類(lèi):維生素:維生素:構(gòu)成酶的輔酶或輔基構(gòu)成酶
12、的輔酶或輔基氨基酸:氨基酸:針對(duì)氨基酸缺陷型微生物針對(duì)氨基酸缺陷型微生物堿堿 基:基:嘌呤、嘧啶,嘌呤、嘧啶,構(gòu)成酶的輔酶或輔基構(gòu)成酶的輔酶或輔基 (五)生長(zhǎng)因子(五)生長(zhǎng)因子 通常指那些微生物生長(zhǎng)所必需而且需要量很通常指那些微生物生長(zhǎng)所必需而且需要量很小,但微生物自身不能合成或合成量不足以滿(mǎn)足小,但微生物自身不能合成或合成量不足以滿(mǎn)足機(jī)體需要的有機(jī)化合物。機(jī)體需要的有機(jī)化合物。注意:注意:并非每種微生物生長(zhǎng)時(shí)都需要提供生長(zhǎng)因子。并非每種微生物生長(zhǎng)時(shí)都需要提供生長(zhǎng)因子。水的功能:水的功能:(六)水(六)水 水是微生物生長(zhǎng)所必不可少的,微生物細(xì)胞平水是微生物生長(zhǎng)所必不可少的,微生物細(xì)胞平均含水量
13、均含水量80%80%左右。左右。 大多數(shù)微生物不是把水作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),少數(shù)微大多數(shù)微生物不是把水作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),少數(shù)微生物用水作為營(yíng)養(yǎng)源(如藍(lán)細(xì)菌)。生物用水作為營(yíng)養(yǎng)源(如藍(lán)細(xì)菌)。l起到溶劑與運(yùn)輸介質(zhì)的作用;起到溶劑與運(yùn)輸介質(zhì)的作用;l參與細(xì)胞內(nèi)一系列化學(xué)反應(yīng);參與細(xì)胞內(nèi)一系列化學(xué)反應(yīng);l維持蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子穩(wěn)定的天然構(gòu)象維持蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子穩(wěn)定的天然構(gòu)象l是良好的熱導(dǎo)體;是良好的熱導(dǎo)體;l維持細(xì)胞正常形態(tài);維持細(xì)胞正常形態(tài);l控制多亞基組成的細(xì)胞結(jié)構(gòu)??刂贫鄟喕M成的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。水活度的表示方法水活度的表示方法 A Aw w是指在相同的溫度和壓力下,溶液中水的是指在相同的溫度和壓
14、力下,溶液中水的蒸氣壓和純水的蒸氣壓的比,即蒸氣壓和純水的蒸氣壓的比,即A Aw w=P=Pw w/P/Pw w0 0。 微生物可利用的水用水活度(微生物可利用的水用水活度(A Aw w)來(lái)表示。)來(lái)表示。 微生物生長(zhǎng)所需的水活度通常在微生物生長(zhǎng)所需的水活度通常在0.600.600.990.99之間。之間。細(xì)菌細(xì)菌水活度較高為水活度較高為0.910.91,酵母菌次之酵母菌次之,耐,耐高滲的微生物水活度為高滲的微生物水活度為0.60.6,水中溶質(zhì)越高水活,水中溶質(zhì)越高水活度越低。度越低。二、微生物的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型二、微生物的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型 根據(jù)微生物所需根據(jù)微生物所需碳源、能源碳源、能源不同可將微生物不同可
15、將微生物化為四類(lèi):化為四類(lèi): 光能無(wú)機(jī)自養(yǎng)型微生物光能無(wú)機(jī)自養(yǎng)型微生物 可在完全無(wú)機(jī)的環(huán)境中生長(zhǎng),以可在完全無(wú)機(jī)的環(huán)境中生長(zhǎng),以COCO2 2為碳源,光為碳源,光做能源,無(wú)機(jī)物(如硫化氫等)為供做能源,無(wú)機(jī)物(如硫化氫等)為供H H體還原體還原COCO2 2合合成細(xì)胞有機(jī)物質(zhì)的微生物叫成細(xì)胞有機(jī)物質(zhì)的微生物叫光能自養(yǎng)微生物光能自養(yǎng)微生物。 COCO2 2+H+H2 2S S 光能、菌綠素光能、菌綠素 CHCH2 2O+HO+H2 2O+SO+S 光能自養(yǎng)型微生物包括光能自養(yǎng)型微生物包括藍(lán)細(xì)菌藍(lán)細(xì)菌(含葉綠素)、(含葉綠素)、紫硫細(xì)菌紫硫細(xì)菌和和綠硫細(xì)菌綠硫細(xì)菌等少數(shù)微生物,由于含有光合等少數(shù)微
16、生物,由于含有光合色素,因而能使光能轉(zhuǎn)變成化學(xué)能(色素,因而能使光能轉(zhuǎn)變成化學(xué)能(ATPATP),供機(jī)體),供機(jī)體直接利用。直接利用。光能有機(jī)異養(yǎng)型微生物光能有機(jī)異養(yǎng)型微生物 如紅螺細(xì)菌可以異丙醇為供氫體,還原二氧化如紅螺細(xì)菌可以異丙醇為供氫體,還原二氧化碳。碳。 光能光能 2(H2(H3 3C)C)2 2CHOH+COCHOH+CO2 2 2CH 2CH3 3COCHCOCH3 3+CH+CH2 2O+HO+H2 2O O 光合色素光合色素 這類(lèi)微生物不能以二氧化碳為主要碳源或唯一這類(lèi)微生物不能以二氧化碳為主要碳源或唯一碳源,而能利用光作能源,以有機(jī)化合物為供碳源,而能利用光作能源,以有機(jī)化
17、合物為供H H體,體,還原還原COCO2 2,合成細(xì)胞物質(zhì)的微生物,稱(chēng)光能異養(yǎng)微,合成細(xì)胞物質(zhì)的微生物,稱(chēng)光能異養(yǎng)微生物。生物。化能無(wú)機(jī)自養(yǎng)型微生物化能無(wú)機(jī)自養(yǎng)型微生物 以以COCO2 2或碳酸鹽為唯一或主要碳源,以無(wú)機(jī)或碳酸鹽為唯一或主要碳源,以無(wú)機(jī)化合物氧化時(shí)釋放的能量為能源,合成細(xì)胞物化合物氧化時(shí)釋放的能量為能源,合成細(xì)胞物質(zhì)的微生物叫化能自養(yǎng)微生物。質(zhì)的微生物叫化能自養(yǎng)微生物。 2Fe2Fe+ +1/2O+1/2O2 2+2H+2H+ +2Fe2Fe3+3+H+H2 2O+ O+ 這類(lèi)細(xì)菌包括這類(lèi)細(xì)菌包括硫化細(xì)菌、硝化細(xì)菌、氫細(xì)硫化細(xì)菌、硝化細(xì)菌、氫細(xì)菌、鐵細(xì)菌菌、鐵細(xì)菌等,硫細(xì)菌和硝
18、化細(xì)菌與生產(chǎn)密切等,硫細(xì)菌和硝化細(xì)菌與生產(chǎn)密切相關(guān),它們?cè)谧匀唤缥镔|(zhì)轉(zhuǎn)換過(guò)程中起著重要相關(guān),它們?cè)谧匀唤缥镔|(zhì)轉(zhuǎn)換過(guò)程中起著重要的作用。的作用。化能有機(jī)異養(yǎng)型微生物化能有機(jī)異養(yǎng)型微生物 這類(lèi)微生物以這類(lèi)微生物以有機(jī)化合物有機(jī)化合物為碳源,利用有機(jī)化合為碳源,利用有機(jī)化合物氧化過(guò)程中產(chǎn)生的能量為能源,合成細(xì)胞物質(zhì),這物氧化過(guò)程中產(chǎn)生的能量為能源,合成細(xì)胞物質(zhì),這類(lèi)微生物稱(chēng)為化能異養(yǎng)微生物。類(lèi)微生物稱(chēng)為化能異養(yǎng)微生物。絕大多數(shù)細(xì)菌、真菌絕大多數(shù)細(xì)菌、真菌和和原生動(dòng)物原生動(dòng)物屬于這種類(lèi)型。屬于這種類(lèi)型。 由于棲息場(chǎng)所和攝取養(yǎng)料不同,可將異養(yǎng)微生由于棲息場(chǎng)所和攝取養(yǎng)料不同,可將異養(yǎng)微生物分為腐生型和寄生
19、型兩大類(lèi)。物分為腐生型和寄生型兩大類(lèi)。 腐生型:腐生型:利用無(wú)生命的有機(jī)物獲得營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。利用無(wú)生命的有機(jī)物獲得營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。 寄生型:寄生型:從活的寄生體內(nèi)獲取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如病從活的寄生體內(nèi)獲取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如病毒。毒。 中間類(lèi)型中間類(lèi)型: :(兼性腐生或兼性寄生)如痢疾桿菌(兼性腐生或兼性寄生)如痢疾桿菌就是兼性寄生菌。就是兼性寄生菌。營(yíng)養(yǎng)缺陷型與原養(yǎng)型營(yíng)養(yǎng)缺陷型與原養(yǎng)型 某些菌株發(fā)生突變(自然突變或人工誘變)后,某些菌株發(fā)生突變(自然突變或人工誘變)后,失去合成某種(或某些)對(duì)該菌株生長(zhǎng)必不可少的失去合成某種(或某些)對(duì)該菌株生長(zhǎng)必不可少的物質(zhì)(通常是生長(zhǎng)因子如氨基酸、維生素)的能力,物質(zhì)(通常是生
20、長(zhǎng)因子如氨基酸、維生素)的能力,必須從外界環(huán)境獲得該物質(zhì)才能生長(zhǎng)繁殖,這種突必須從外界環(huán)境獲得該物質(zhì)才能生長(zhǎng)繁殖,這種突變型菌株稱(chēng)為變型菌株稱(chēng)為營(yíng)養(yǎng)缺陷型(營(yíng)養(yǎng)缺陷型(auxotrophauxotroph),),相應(yīng)的相應(yīng)的野生型菌株稱(chēng)為野生型菌株稱(chēng)為原養(yǎng)型(原養(yǎng)型(prototrophprototroph)。)。第二節(jié)第二節(jié) 微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收一、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)能否進(jìn)入細(xì)胞取決于三個(gè)方面的因素:一、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)能否進(jìn)入細(xì)胞取決于三個(gè)方面的因素:營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)本身的性質(zhì)(相對(duì)分子量、質(zhì)量、溶解營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)本身的性質(zhì)(相對(duì)分子量、質(zhì)量、溶解性、電負(fù)性等性、電負(fù)性等微生物所處的環(huán)境(溫度、微
21、生物所處的環(huán)境(溫度、pHpH等);等);微生物細(xì)胞的透過(guò)屏障(原生質(zhì)膜、細(xì)胞壁、莢微生物細(xì)胞的透過(guò)屏障(原生質(zhì)膜、細(xì)胞壁、莢膜等)。膜等)。單純擴(kuò)散(單純擴(kuò)散(simple diffusion)促進(jìn)擴(kuò)散(促進(jìn)擴(kuò)散(facilitated diffusion)主動(dòng)運(yùn)輸(主動(dòng)運(yùn)輸(active transport)基團(tuán)轉(zhuǎn)位(基團(tuán)轉(zhuǎn)位(group translocation)二、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式二、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式概念:概念:營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)細(xì)胞外濃度高于細(xì)胞內(nèi)濃度時(shí),營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)細(xì)胞外濃度高于細(xì)胞內(nèi)濃度時(shí),小分子可溶性物質(zhì)利用濃度差,通過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入小分子可溶性物質(zhì)利用濃度差,通過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)
22、。細(xì)胞內(nèi)。1、單純擴(kuò)散(被動(dòng)擴(kuò)散)、單純擴(kuò)散(被動(dòng)擴(kuò)散)特點(diǎn):特點(diǎn):取決于濃度梯度,是一種單純的物理擴(kuò)散取決于濃度梯度,是一種單純的物理擴(kuò)散作用,不需要能量和載體。速度慢,不能滿(mǎn)足生作用,不需要能量和載體。速度慢,不能滿(mǎn)足生長(zhǎng)需要。長(zhǎng)需要。運(yùn)輸物質(zhì):運(yùn)輸物質(zhì):水、氧氣、二氧化碳、某些無(wú)機(jī)離子水、氧氣、二氧化碳、某些無(wú)機(jī)離子及一些水溶性小分子(乙醇、甘油等)。及一些水溶性小分子(乙醇、甘油等)。概念:概念:營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在載體蛋白作用下,由高濃度細(xì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在載體蛋白作用下,由高濃度細(xì)胞外向低濃度細(xì)胞內(nèi)擴(kuò)散。胞外向低濃度細(xì)胞內(nèi)擴(kuò)散。2 2、促進(jìn)擴(kuò)散、促進(jìn)擴(kuò)散特點(diǎn):特點(diǎn):需載體蛋白加速擴(kuò)散,靠濃度梯度,不
23、需需載體蛋白加速擴(kuò)散,靠濃度梯度,不需要能量。要能量。運(yùn)輸物質(zhì):運(yùn)輸物質(zhì):氨基酸、單糖、維生素及無(wú)機(jī)鹽等的氨基酸、單糖、維生素及無(wú)機(jī)鹽等的運(yùn)輸。運(yùn)輸。概念:概念:營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在特異性載體蛋白和能量參與下,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在特異性載體蛋白和能量參與下,由細(xì)胞外低濃度向細(xì)胞內(nèi)高濃度進(jìn)行運(yùn)輸?shù)姆绞?。由?xì)胞外低濃度向細(xì)胞內(nèi)高濃度進(jìn)行運(yùn)輸?shù)姆绞健? 3、主動(dòng)運(yùn)輸、主動(dòng)運(yùn)輸特點(diǎn):特點(diǎn):營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)由低濃度向高濃度進(jìn)行、需載體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)由低濃度向高濃度進(jìn)行、需載體蛋白質(zhì)、耗能、被轉(zhuǎn)運(yùn)的物質(zhì)結(jié)構(gòu)沒(méi)有發(fā)生變化。蛋白質(zhì)、耗能、被轉(zhuǎn)運(yùn)的物質(zhì)結(jié)構(gòu)沒(méi)有發(fā)生變化。運(yùn)輸物質(zhì):運(yùn)輸物質(zhì):無(wú)機(jī)離子、有機(jī)離子、一些糖類(lèi)和氨無(wú)機(jī)離子、有機(jī)離子、一些
24、糖類(lèi)和氨基酸等?;岬取V鲃?dòng)運(yùn)輸是微生物一種主要的運(yùn)輸方式。主動(dòng)運(yùn)輸是微生物一種主要的運(yùn)輸方式。概念:概念:是一種主動(dòng)運(yùn)輸方式,運(yùn)輸過(guò)程中需要是一種主動(dòng)運(yùn)輸方式,運(yùn)輸過(guò)程中需要能量,被運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)發(fā)生化學(xué)變化,因此叫基團(tuán)能量,被運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)發(fā)生化學(xué)變化,因此叫基團(tuán)轉(zhuǎn)位。轉(zhuǎn)位。4 4、基團(tuán)轉(zhuǎn)位、基團(tuán)轉(zhuǎn)位特點(diǎn):特點(diǎn):被轉(zhuǎn)運(yùn)物質(zhì)發(fā)生了化學(xué)結(jié)構(gòu)變化,其余同被轉(zhuǎn)運(yùn)物質(zhì)發(fā)生了化學(xué)結(jié)構(gòu)變化,其余同主動(dòng)運(yùn)輸。主動(dòng)運(yùn)輸。運(yùn)輸物質(zhì):運(yùn)輸物質(zhì):葡萄糖、果糖、甘露糖、核苷酸、丁葡萄糖、果糖、甘露糖、核苷酸、丁酸等。酸等。主要在厭氧微生物中發(fā)現(xiàn),在好氧微生主要在厭氧微生物中發(fā)現(xiàn),在好氧微生物中還未發(fā)現(xiàn)。物中還未發(fā)現(xiàn)。四種運(yùn)
25、輸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)方式的比較四種運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)方式的比較比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目單純擴(kuò)散單純擴(kuò)散促進(jìn)擴(kuò)散促進(jìn)擴(kuò)散主動(dòng)運(yùn)輸主動(dòng)運(yùn)輸基團(tuán)轉(zhuǎn)位基團(tuán)轉(zhuǎn)位特異載體蛋白特異載體蛋白運(yùn)輸速度運(yùn)輸速度物質(zhì)運(yùn)輸方向物質(zhì)運(yùn)輸方向胞內(nèi)外濃度胞內(nèi)外濃度運(yùn)輸分子運(yùn)輸分子能量消耗能量消耗運(yùn)輸后物質(zhì)的結(jié)構(gòu)運(yùn)輸后物質(zhì)的結(jié)構(gòu)無(wú)無(wú)慢慢由濃至稀由濃至稀相等相等無(wú)特異性無(wú)特異性不需要不需要不變不變有有快快由濃至稀由濃至稀相等相等特異性特異性不需要不需要不變不變有有快快由稀至濃由稀至濃胞內(nèi)濃度高胞內(nèi)濃度高特異性特異性需要需要不變不變有有快快由稀至濃由稀至濃胞內(nèi)濃度高胞內(nèi)濃度高特異性特異性需要需要改變改變培養(yǎng)基:培養(yǎng)基:根據(jù)微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要,人工配
26、根據(jù)微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要,人工配制的、適合微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)制的、適合微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。養(yǎng)基質(zhì)。第三節(jié)第三節(jié) 培養(yǎng)基培養(yǎng)基(culture medium)用途:用途:促使微生物生長(zhǎng)繁殖,用于微生物的純種分促使微生物生長(zhǎng)繁殖,用于微生物的純種分離、鑒定和制造微生物制品等,它是從事微生物學(xué)離、鑒定和制造微生物制品等,它是從事微生物學(xué)方面科研和生產(chǎn)的基礎(chǔ)。方面科研和生產(chǎn)的基礎(chǔ)。u選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);u營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適;營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適;u控制理化條件:控制理化條件: pH值值 氧化還原電位氧化還原電位u原料來(lái)源的選擇;原料來(lái)源的選
27、擇;u滅菌處理。滅菌處理。一、配制培養(yǎng)基的原則一、配制培養(yǎng)基的原則 根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求配制針對(duì)性強(qiáng)的培根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。養(yǎng)基。 任何培養(yǎng)基都應(yīng)該具備微生物生長(zhǎng)所需要五大任何培養(yǎng)基都應(yīng)該具備微生物生長(zhǎng)所需要五大營(yíng)養(yǎng)要素:碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子、水。營(yíng)養(yǎng)要素:碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子、水。 如自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以由簡(jiǎn)單的無(wú)如自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以由簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物質(zhì)組成。異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基需要添加有機(jī)機(jī)物質(zhì)組成。異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基需要添加有機(jī)物質(zhì),有的甚至要添加生長(zhǎng)因子。物質(zhì),有的甚至要添加生長(zhǎng)因子。 實(shí)驗(yàn)室中,用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌
28、;實(shí)驗(yàn)室中,用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌;高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)放線(xiàn)菌;用麥芽汁培養(yǎng)基高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)放線(xiàn)菌;用麥芽汁培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌、用查氏培養(yǎng)基培養(yǎng)霉菌。培養(yǎng)酵母菌、用查氏培養(yǎng)基培養(yǎng)霉菌。1 1、選擇合適的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),營(yíng)養(yǎng)成分全面、選擇合適的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),營(yíng)養(yǎng)成分全面常見(jiàn)的培養(yǎng)四大類(lèi)微生物的培養(yǎng)基常見(jiàn)的培養(yǎng)四大類(lèi)微生物的培養(yǎng)基細(xì)菌(牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基):細(xì)菌(牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基):牛肉膏牛肉膏 3g 蛋白胨蛋白胨 10g NaCl 5g H2O 1000ml pH 7.2-7.4放線(xiàn)菌(高氏一號(hào))放線(xiàn)菌(高氏一號(hào))淀粉淀粉 20g K2HPO4 0.5g NaCl 0.5g MgSO47H
29、2O 0.5g KNO3 1g FeSO4 0.01g H2O 1000ml酵母菌酵母菌( (麥芽汁培養(yǎng)基麥芽汁培養(yǎng)基) )干麥芽粉加四倍水,在干麥芽粉加四倍水,在5865保溫糖化保溫糖化34小時(shí),用碘小時(shí),用碘液試驗(yàn)檢查至糖化完全為止,調(diào)整糖液濃度為液試驗(yàn)檢查至糖化完全為止,調(diào)整糖液濃度為10波美度,煮波美度,煮沸后,紗布過(guò)濾,調(diào)沸后,紗布過(guò)濾,調(diào)pH為為6.0。霉菌(查氏合成培養(yǎng)基)霉菌(查氏合成培養(yǎng)基)蔗糖蔗糖 30g NaNO3 3g K2HPO4 1g KCl 0.5g MgSO47H2O 0.5g FeSO4 0.01g H2O 1000ml2.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及
30、配比合適培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時(shí)微生物才能生長(zhǎng)良培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時(shí)微生物才能生長(zhǎng)良好,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低時(shí)不能滿(mǎn)足微生物正常生長(zhǎng)所好,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低時(shí)不能滿(mǎn)足微生物正常生長(zhǎng)所需,濃度過(guò)高時(shí)則可能對(duì)微生物生長(zhǎng)起抑制作用。需,濃度過(guò)高時(shí)則可能對(duì)微生物生長(zhǎng)起抑制作用。 培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和代謝產(chǎn)物的形成與積累,其中碳微生物的生長(zhǎng)繁殖和代謝產(chǎn)物的形成與積累,其中碳氮比(氮比(C/NC/N)的影響較大。)的影響較大。碳氮比:指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質(zhì)的量比值,有時(shí)碳氮比:指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質(zhì)的量比值
31、,有時(shí)也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比。也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比。高氏一號(hào)培養(yǎng)基:高氏一號(hào)培養(yǎng)基: g/l (培養(yǎng)放線(xiàn)菌培養(yǎng)放線(xiàn)菌)可溶性淀粉可溶性淀粉 20 KNO3 1 MgSO47H2O 0.5FeSO4 0.01 K2HPO4 0.5 NaCl 0.5 H2O 1000 pH 7.0 121 20min 如在如在異養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物培養(yǎng)中各營(yíng)養(yǎng)要素大體上存在培養(yǎng)中各營(yíng)養(yǎng)要素大體上存在1010倍序列的遞減趨勢(shì):倍序列的遞減趨勢(shì): H H2 2O O碳源碳源N N源源P P、S SK K、MgMg生長(zhǎng)因子生長(zhǎng)因子3 3、控制合適的理化條件、控制合適的理化條件(1 1)控制)控制pHpH
32、條件條件 培養(yǎng)基的培養(yǎng)基的pHpH必須控制在一定的范圍內(nèi),以滿(mǎn)足必須控制在一定的范圍內(nèi),以滿(mǎn)足不同類(lèi)型微生物的生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。不同類(lèi)型微生物的生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。 一般來(lái)講:細(xì)菌與放線(xiàn)菌適合一般來(lái)講:細(xì)菌與放線(xiàn)菌適合pHpH為為7 77.57.5;酵;酵母菌和霉菌適合母菌和霉菌適合pHpH為為4.54.56 6。 由于微生物在代謝過(guò)程中,不斷地向培養(yǎng)基中由于微生物在代謝過(guò)程中,不斷地向培養(yǎng)基中分泌代謝產(chǎn)物,影響培養(yǎng)基的分泌代謝產(chǎn)物,影響培養(yǎng)基的pHpH變化,為了維持培變化,為了維持培養(yǎng)基養(yǎng)基pHpH的相對(duì)恒定,通常在培養(yǎng)基中加入的相對(duì)恒定,通常在培養(yǎng)基中加入pHpH緩沖劑,緩沖劑,
33、常用的緩沖物質(zhì)主要有常用的緩沖物質(zhì)主要有磷酸鹽類(lèi)磷酸鹽類(lèi)和和碳酸鈣碳酸鈣;或在進(jìn);或在進(jìn)行工業(yè)發(fā)酵時(shí)補(bǔ)加酸、堿。行工業(yè)發(fā)酵時(shí)補(bǔ)加酸、堿。(2 2)控制氧化還原電位)控制氧化還原電位 不同類(lèi)型微生物生長(zhǎng)對(duì)氧化還原電位的要求不同。不同類(lèi)型微生物生長(zhǎng)對(duì)氧化還原電位的要求不同。好氧性微生物:好氧性微生物:+0.1+0.1伏以上可正常生長(zhǎng)伏以上可正常生長(zhǎng), ,一般以一般以+0.3+0.3+0.4+0.4伏為宜伏為宜厭氧性微生物:低于厭氧性微生物:低于+0.1+0.1伏條件下生長(zhǎng);伏條件下生長(zhǎng);兼性厭氧微生物:兼性厭氧微生物:+0.1+0.1伏以上進(jìn)行好氧呼吸伏以上進(jìn)行好氧呼吸, , +0.1+0.1伏以
34、下進(jìn)行發(fā)酵。伏以下進(jìn)行發(fā)酵。 因此,好氧菌、兼性厭氧菌、厭氧菌需在不同的條件下因此,好氧菌、兼性厭氧菌、厭氧菌需在不同的條件下培養(yǎng)。培養(yǎng)。 值與氧分壓和值與氧分壓和pHpH有關(guān),也受某些代謝產(chǎn)物影響。有關(guān),也受某些代謝產(chǎn)物影響。 在在pHpH相對(duì)穩(wěn)定的條件下,可通過(guò)增加通氣量(如振蕩、攪拌相對(duì)穩(wěn)定的條件下,可通過(guò)增加通氣量(如振蕩、攪拌等)提高培養(yǎng)基的氧分壓,或加入氧化劑,以增加等)提高培養(yǎng)基的氧分壓,或加入氧化劑,以增加值;在值;在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸等可降低培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸等可降低值。值。4 4、原料來(lái)源的選擇、原料來(lái)源的選擇 配制培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)盡量考
35、慮利用價(jià)廉并且易配制培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)盡量考慮利用價(jià)廉并且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基的成分,特別是在工業(yè)于獲得的原料作為培養(yǎng)基的成分,特別是在工業(yè)發(fā)酵中,培養(yǎng)基用量很大,更應(yīng)該考慮到這一點(diǎn),發(fā)酵中,培養(yǎng)基用量很大,更應(yīng)該考慮到這一點(diǎn),以便降低產(chǎn)品成本。以便降低產(chǎn)品成本。 如在生產(chǎn)中利用廢糖蜜、農(nóng)副產(chǎn)品或制品如在生產(chǎn)中利用廢糖蜜、農(nóng)副產(chǎn)品或制品(如麩皮、米糠、玉米漿、酵母浸膏、酒糟及豆(如麩皮、米糠、玉米漿、酵母浸膏、酒糟及豆餅、花生餅)等。餅、花生餅)等。5 5、滅菌處理、滅菌處理n為免受雜菌污染,培養(yǎng)基必須嚴(yán)格滅菌。一般使用為免受雜菌污染,培養(yǎng)基必須嚴(yán)格滅菌。一般使用高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌,101
36、.3kPa101.3kPa,121.3121.3,151530min30min。n一些不耐熱的培養(yǎng)基,如含糖培養(yǎng)基可采用一些不耐熱的培養(yǎng)基,如含糖培養(yǎng)基可采用56kPa56kPa,112.6112.6,151530min30min或或采用過(guò)濾除菌采用過(guò)濾除菌。n在一些用于研究的定量合成培養(yǎng)基中,為防止金屬在一些用于研究的定量合成培養(yǎng)基中,為防止金屬離子沉淀離子沉淀, ,可將金屬離子(可將金屬離子(CaCa、MgMg、FeFe等)與磷酸等)與磷酸鹽、碳酸鹽分別滅菌再混合或加入螯合劑乙二胺四鹽、碳酸鹽分別滅菌再混合或加入螯合劑乙二胺四乙酸。乙酸。n滅菌后培養(yǎng)基滅菌后培養(yǎng)基pHpH會(huì)發(fā)生改變,一般使
37、會(huì)發(fā)生改變,一般使pHpH降低,可根降低,可根據(jù)所培養(yǎng)的微生物的要求,在滅菌前后加以調(diào)整。據(jù)所培養(yǎng)的微生物的要求,在滅菌前后加以調(diào)整。不耐熱培養(yǎng)基的過(guò)濾除菌不耐熱培養(yǎng)基的過(guò)濾除菌二、培養(yǎng)基的類(lèi)型及應(yīng)用二、培養(yǎng)基的類(lèi)型及應(yīng)用根據(jù)微生物的種類(lèi)根據(jù)微生物的種類(lèi)按培養(yǎng)基的成分按培養(yǎng)基的成分按培養(yǎng)的用途按培養(yǎng)的用途 按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)1 1、按微生物種類(lèi)分、按微生物種類(lèi)分u細(xì)菌培養(yǎng)基:細(xì)菌培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基等牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基等u放細(xì)菌培養(yǎng)基:放細(xì)菌培養(yǎng)基:高氏一號(hào)培養(yǎng)基等高氏一號(hào)培養(yǎng)基等u酵母菌培養(yǎng)基:酵母菌培養(yǎng)基:麥芽汁培養(yǎng)基等麥芽汁培養(yǎng)基等u霉菌培養(yǎng)基:霉菌培養(yǎng)基:查氏培
38、養(yǎng)基等查氏培養(yǎng)基等2 2、按培養(yǎng)基的成分劃分、按培養(yǎng)基的成分劃分u天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基u合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基u半合成培養(yǎng)基半合成培養(yǎng)基 是利用一些天然的動(dòng)植物組織或抽提物制成的,是利用一些天然的動(dòng)植物組織或抽提物制成的,如如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和和麥芽汁培養(yǎng)基麥芽汁培養(yǎng)基。 常用的天然有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有牛肉膏、蛋白胨、常用的天然有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有牛肉膏、蛋白胨、酵母浸膏、豆芽汁、馬鈴薯、玉米漿、土壤浸液、酵母浸膏、豆芽汁、馬鈴薯、玉米漿、土壤浸液、牛奶、血清等。牛奶、血清等。 優(yōu)點(diǎn):優(yōu)點(diǎn):取材廣泛、營(yíng)養(yǎng)全面、價(jià)格低廉,適于取材廣泛、營(yíng)養(yǎng)全面、價(jià)格低廉,適于大規(guī)模培養(yǎng)微生物之用。大規(guī)模培
39、養(yǎng)微生物之用。 缺點(diǎn):缺點(diǎn):成分復(fù)雜、每批成分不穩(wěn)定。成分復(fù)雜、每批成分不穩(wěn)定。(1 1)天然培養(yǎng)基)天然培養(yǎng)基(complex mediumcomplex medium)細(xì)菌(牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基):細(xì)菌(牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基):牛肉膏牛肉膏 3g 蛋白胨蛋白胨 10g NaCl 5g H2O 1000ml pH 7.2-7.4酵母菌酵母菌( (麥芽汁培養(yǎng)基麥芽汁培養(yǎng)基) ):干麥芽粉加四倍水,在干麥芽粉加四倍水,在5865保溫糖化保溫糖化34小小時(shí),用碘液試驗(yàn)檢查至糖化完全為止,調(diào)整糖液濃時(shí),用碘液試驗(yàn)檢查至糖化完全為止,調(diào)整糖液濃度為度為10波美度,煮沸后,紗布過(guò)濾,調(diào)波美度,煮沸后,紗布過(guò)
40、濾,調(diào)pH為為6.0。 是利用已知成分和數(shù)量的化學(xué)物質(zhì)配是利用已知成分和數(shù)量的化學(xué)物質(zhì)配制而成。例:培養(yǎng)放線(xiàn)菌的制而成。例:培養(yǎng)放線(xiàn)菌的高氏一號(hào)培養(yǎng)高氏一號(hào)培養(yǎng)基基,培養(yǎng)霉菌的,培養(yǎng)霉菌的察氏培養(yǎng)基察氏培養(yǎng)基。 優(yōu)點(diǎn):優(yōu)點(diǎn):此類(lèi)營(yíng)養(yǎng)成分精確,一般用于此類(lèi)營(yíng)養(yǎng)成分精確,一般用于實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)代謝分類(lèi)鑒定和選育菌種實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)代謝分類(lèi)鑒定和選育菌種工作。工作。 缺點(diǎn):缺點(diǎn):配制復(fù)雜、價(jià)格貴。配制復(fù)雜、價(jià)格貴。(2 2)合成培養(yǎng)基)合成培養(yǎng)基(synthetic mediumsynthetic medium)放線(xiàn)菌(高氏一號(hào))放線(xiàn)菌(高氏一號(hào))淀粉淀粉 20g K2HPO4 0.5g NaCl 0
41、.5g MgSO47H2O 0.5g KNO3 1g FeSO4 0.01g H2O 1000ml霉菌(查氏合成培養(yǎng)基)霉菌(查氏合成培養(yǎng)基)蔗糖蔗糖 30g NaNO3 3g K2HPO4 1g KCl 0.5g MgSO47H2O 0.5g FeSO4 0.01g H2O 1000ml(3 3)半合成培養(yǎng)基)半合成培養(yǎng)基(semi-synthetic mediumsemi-synthetic medium) 即含有天然成分,又含有即含有天然成分,又含有純化學(xué)試劑的培養(yǎng)基。純化學(xué)試劑的培養(yǎng)基。 例:培養(yǎng)真菌的例:培養(yǎng)真菌的馬鈴薯葡馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基。萄糖培養(yǎng)基。馬鈴薯葡萄糖(馬鈴薯葡萄糖(P
42、DA)培養(yǎng)基:)培養(yǎng)基:去皮去皮馬鈴薯馬鈴薯200g,切成小塊,加,切成小塊,加1000ml水煮沸水煮沸30min,雙層,雙層紗布過(guò)濾,濾液中加入紗布過(guò)濾,濾液中加入2糖糖,補(bǔ)充因蒸發(fā)掉的,補(bǔ)充因蒸發(fā)掉的水分。固體培養(yǎng)基加水分。固體培養(yǎng)基加2%瓊脂。自然瓊脂。自然pH,115滅菌滅菌20min。 豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基:豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基:豆芽浸汁豆芽浸汁(10g黃豆芽加黃豆芽加水煮沸水煮沸30s后過(guò)濾)后過(guò)濾)100ml、葡萄糖葡萄糖3g、瓊脂、瓊脂1.52g、自然、自然pH、115滅菌滅菌20min。 2 2、根據(jù)物理狀態(tài)不同、根據(jù)物理狀態(tài)不同p液體培養(yǎng)基(液體培養(yǎng)基(liquid mediu
43、mliquid medium)p固體培養(yǎng)基(固體培養(yǎng)基(solid mediumsolid medium)p半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基(semi-solid medium)(semi-solid medium)p脫水培養(yǎng)基(脫水培養(yǎng)基(dehydrated culture mediadehydrated culture media)A A:凝固型固體培養(yǎng)基:凝固型固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入一定:在液體培養(yǎng)基中加入一定量的凝固劑,如瓊脂、明膠、硅膠等。量的凝固劑,如瓊脂、明膠、硅膠等。 例:例:瓊脂(瓊脂(1.51.52 2)、明膠()、明膠(5 51212)等等煮沸后,冷卻便凝成固體狀態(tài)。煮
44、沸后,冷卻便凝成固體狀態(tài)。 (1 1)固體培養(yǎng)基)固體培養(yǎng)基(solid mediumsolid medium) 固體培養(yǎng)基常用來(lái)進(jìn)行微生物的分離、鑒定、固體培養(yǎng)基常用來(lái)進(jìn)行微生物的分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)及菌種保藏等。活菌計(jì)數(shù)及菌種保藏等。B B:天然固體培養(yǎng)基:天然固體培養(yǎng)基:由天然營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)制成的培養(yǎng)由天然營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)制成的培養(yǎng)基。例:馬鈴薯塊、胡蘿卜條、饅頭、面包、豆餅、基。例:馬鈴薯塊、胡蘿卜條、饅頭、面包、豆餅、動(dòng)物的器官(肝臟)。動(dòng)物的器官(肝臟)。 外觀呈固體。外觀呈固體。(2 2)半固體培養(yǎng)基)半固體培養(yǎng)基(semi-solid medium)(semi-solid medium) 液
45、體培養(yǎng)基中加入凝固劑的量比固體培液體培養(yǎng)基中加入凝固劑的量比固體培養(yǎng)基少,培養(yǎng)基在容器中倒放時(shí)不下流,瓊養(yǎng)基少,培養(yǎng)基在容器中倒放時(shí)不下流,瓊脂的添加量脂的添加量0.20.20.7%0.7%。 用于穿刺培養(yǎng),鑒定細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性、分用于穿刺培養(yǎng),鑒定細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性、分類(lèi)鑒定等。類(lèi)鑒定等。 配制的培養(yǎng)基常溫常壓配制的培養(yǎng)基常溫常壓下呈液體狀態(tài),不加任何凝下呈液體狀態(tài),不加任何凝固劑。固劑。 在用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí),在用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí),通常振蕩或攪拌以增加通氣通常振蕩或攪拌以增加通氣量,微生物在其中生長(zhǎng)時(shí),量,微生物在其中生長(zhǎng)時(shí),能均勻地接觸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),有能均勻地接觸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),有利于微生物生長(zhǎng)和積累代謝利
46、于微生物生長(zhǎng)和積累代謝產(chǎn)物,常用于產(chǎn)物,常用于大規(guī)模工業(yè)化大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)生產(chǎn),實(shí)驗(yàn)室也用其,實(shí)驗(yàn)室也用其觀察生觀察生長(zhǎng)代謝特征長(zhǎng)代謝特征。(3 3)液體培養(yǎng)基)液體培養(yǎng)基(liquid mediumliquid medium) 又稱(chēng)脫水商品培養(yǎng)基或預(yù)制干燥培養(yǎng)又稱(chēng)脫水商品培養(yǎng)基或預(yù)制干燥培養(yǎng)基,指含有除水外一切成分的商品培養(yǎng)基,基,指含有除水外一切成分的商品培養(yǎng)基,使用時(shí)只要加入適量水分即可。是一類(lèi)成使用時(shí)只要加入適量水分即可。是一類(lèi)成分精確又使用方便的現(xiàn)代化培養(yǎng)基。分精確又使用方便的現(xiàn)代化培養(yǎng)基。(4 4)脫水培養(yǎng)基)脫水培養(yǎng)基(dehydrated culture mediadehydr
47、ated culture media)3 3、按培養(yǎng)基用途、按培養(yǎng)基用途p基礎(chǔ)培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基(minimum medium)(minimum medium)p加富培養(yǎng)基加富培養(yǎng)基(enrichment medium)(enrichment medium)p選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基(selective medium)(selective medium)p鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基(differential medium)(differential medium) 指組成物質(zhì)能基本上滿(mǎn)足一般微生物指組成物質(zhì)能基本上滿(mǎn)足一般微生物生長(zhǎng)繁殖需要的培養(yǎng)基。生長(zhǎng)繁殖需要的培養(yǎng)基。 如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基如牛肉膏蛋白
48、胨培養(yǎng)基?;A(chǔ)培養(yǎng)基?;A(chǔ)培養(yǎng)基也可作為某些特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。也可作為某些特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。(1 1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基)基礎(chǔ)培養(yǎng)基(minimum medium)(minimum medium):在基礎(chǔ)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上加入某種特殊的在基礎(chǔ)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上加入某種特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),使某種微生物能夠迅速繁殖。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),使某種微生物能夠迅速繁殖。如培養(yǎng)一些對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高的微生物通如培養(yǎng)一些對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高的微生物通常加入常加入血清、血液、酵母浸膏、動(dòng)植物血清、血液、酵母浸膏、動(dòng)植物組織抽提液組織抽提液等。等。(2 2)加富培養(yǎng)基)加富培養(yǎng)基(enrichment medium)(enrichment me
49、dium): 根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn),通過(guò)培養(yǎng)基中的特根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn),通過(guò)培養(yǎng)基中的特殊化學(xué)成分與微生物的某種代謝產(chǎn)物發(fā)生特定化殊化學(xué)成分與微生物的某種代謝產(chǎn)物發(fā)生特定化學(xué)反應(yīng),用以鑒定不同微生物的培養(yǎng)基。學(xué)反應(yīng),用以鑒定不同微生物的培養(yǎng)基。 常用于微生物的快速分類(lèi)鑒定,以及分離篩常用于微生物的快速分類(lèi)鑒定,以及分離篩選產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物的微生物菌種。選產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物的微生物菌種。 例:伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基、酪素培養(yǎng)基等。例:伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基、酪素培養(yǎng)基等。(3 3)鑒別培養(yǎng)基)鑒別培養(yǎng)基(differential medium)(differential medium):伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基(伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基(EMB EMB ):):牛肉膏牛肉膏3g3g、蛋白胨、蛋白胨10g10g、NaCl 5gNaCl 5g、2020乳糖溶液乳糖溶液20ml20ml、2 2伊紅溶液伊紅溶液20ml20ml、0.50.5美藍(lán)溶液美藍(lán)溶液
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