仙人掌藥用成分的提取及其鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究

1、仙人掌藥用成分的提取及其鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究 作者：韋國(guó)鋒， 李振中， 黃祖良， 何有成 【關(guān)鍵詞】 仙人掌；,藥用成分；,提?。?藥理；,鎮(zhèn)痛摘要：目的對(duì)仙人掌藥用成分的提取工藝及鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行探討。方法 采用乙醇提取，醋酸乙酯等有機(jī)溶劑萃取，經(jīng)硅膠柱層分離，得到淡黃色物質(zhì)，并對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行了化學(xué)定性分析和小鼠鎮(zhèn)痛作用實(shí)驗(yàn)。結(jié)果經(jīng)化學(xué)定性分析，表明這種藥用成分中含有黃酮類物質(zhì)，其鎮(zhèn)痛作用與阿司匹林和生理鹽水比較：扭體法2分別為5.19，9.68（P<0.05或0.001）；溫浴法P<0.01或P<0.001。結(jié)論仙人掌植物中含有黃酮類物質(zhì)，對(duì)小鼠具有顯著的

2、鎮(zhèn)痛作用。關(guān)鍵詞：仙人掌； 藥用成分； 提取； 藥理； 鎮(zhèn)痛Studies on Extraction and Analgesic Effect of Medicinal Components in Opuntia dillenii HawAbstract：ObjectiveTo investigate the extract processing and the analgesic effect of medicinal components in Opuntia dillenii Haw.MethodsThe chemical quantitative analysis and the a

3、nalgesic effect on mice were carried out on a primrose yellow material which was extracted by ethanol, ethyl acetate and chromatographically separated by silica gel column.ResultsA flavonoid chemical compound was found and the 2 were 5.19( P< 0.05 or 0.01) in writhing tests（P< 0.01 or

4、0.001）, 9.68 in lukewarm bath procedure while compared its analgesic effect with aspirin and normal saline.ConclusionObvious analgesic effect on mice is found in Opuntia dillenii Haw.Key words：Opuntia dillenii Haw; Medicinal Components; Extraction; Pharmacology; Analgesia 仙人掌是仙人掌科仙人掌Opuntia dillenii

5、 Haw的根和莖，其味苦、寒，入心、肺、胃三經(jīng)，具有活血行氣、清熱解毒之功效，主治心胃氣痛、痞塊、肺癰、乳癰、燙火傷、蛇傷等1 。由于仙人掌資源豐富，具有較強(qiáng)的藥理作用，深受人們的青睞。近年來(lái)的研究表明，仙人掌具有抗炎、消腫、抑菌作用和有抗脂質(zhì)氧化以及降血糖的作用24 。課題組曾對(duì)仙人掌的降血壓作用和鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行了初步探討5。在此主要針對(duì)仙人掌鎮(zhèn)痛成分的提取工藝以及鎮(zhèn)痛作用作進(jìn)一步的研究。1 材料1.1 仙人掌 采自廣西那坡縣石山區(qū)。1.2 動(dòng)物小鼠由本院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1.3 儀器 電熱恒溫水浴鍋，北京長(zhǎng)原實(shí)驗(yàn)儀器廠；秒表，上海秒表廠；鼠筒，自制；2FA02旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海玻璃儀器廠；層析

6、柱。1.4 試劑乙醇；阿司匹林片，廣西南寧制藥企業(yè)集團(tuán)公司生產(chǎn)；醋酸；氯仿；醋酸乙酯；生理鹽水；三氯化鐵；乙酸鎂；三氯化鋁；硅膠，青島海洋化工廠。1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 計(jì)數(shù)資料采用2 檢驗(yàn)，計(jì)量數(shù)據(jù)以±s表示，采用t檢驗(yàn)。2 方法2.1 仙人掌藥用成分的提取與分離仙人掌粉碎70%EtOH 回流3次提取液減壓回收 EtOH醇提取物H2O 混懸液氯仿、醋酸乙酯、 正丁醇萃取萃取液減壓回收 溶劑取正丁醇部分 上硅膠柱H2O洗1次 再用氯仿甲醇水洗脫 洗脫液減壓回收 溶劑粗提取物 EtOH 活性炭脫色淡黃色物質(zhì)。2.2 提取物的定性分析2.2.1 乙酸鎂實(shí)驗(yàn) 取樣品溶液1滴，滴于濾紙上，滴乙酸

7、鎂試液1滴，晾干于365 nm燈下觀察呈淡藍(lán)色熒光。2.2.2 三氯化鋁實(shí)驗(yàn) 取樣品溶液1滴，滴于濾紙上，滴三氯化鋁1滴，晾干于365 nm燈下觀察，出現(xiàn)亮黃色熒光。2.2.3 三氯化鐵實(shí)驗(yàn) 取樣品溶液與三氯化鐵反應(yīng)呈綠色。2.2.4 濃氨水實(shí)驗(yàn) 取樣品溶液1滴，滴于濾紙上，晾干，再用濃氨水熏，顏色加深。2.2.5 絡(luò)合反應(yīng)實(shí)驗(yàn) 取樣品溶液與亞硝酸鈉溶液、硝酸鋁溶液、氫氧化鈉溶液反應(yīng)呈櫻紅色。2.2.6 TLC定性0.5%CMCNa、硅膠G制板，對(duì)照品及樣品溶液點(diǎn)樣，用70%乙醇展開(kāi)后，晾干，紫外線（365 nm）下觀察，在相同位置出現(xiàn)相同的斑點(diǎn)。2.3 提取物的鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn) 2.3.1 扭體法取

8、小鼠75只，體重為1618 g。雌雄不拘，隨機(jī)分為3組，每組25只。分別予腹腔注射仙人掌提取物、阿司匹林和等量生理鹽水各1 ml/只，給藥1 h后，各鼠腹腔注射醋酸溶液0.2 ml/只，觀察15 min內(nèi)小鼠的扭體數(shù)。2.3.2 溫浴法6取小鼠45只，體重為1618 g，雌雄不拘，隨機(jī)分為3組，每組15只。分別予腹腔注射仙人掌提取，阿司匹林和等量生理鹽水各1 ml/只。用特制鼠籠裝置，將小鼠裝入固定的筒內(nèi)，然后把小鼠尾部浸入50的水浴中，以尾部回縮作為痛反應(yīng)，以在溫水浴中反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)或痛閾提高(%)表示痛反應(yīng)。觀察給藥前后20，30，60 min的痛閾潛伏期。3 結(jié)果3.1 仙人掌提取物對(duì)扭體

9、法小鼠疼痛的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，仙人掌提取物對(duì)扭體法致小鼠疼痛具有顯著的鎮(zhèn)痛作用，與阿司匹林和生理鹽水組比較差異有顯著性（P0.05或P0.001）。結(jié)果見(jiàn)表1。3.2 仙人掌提取物對(duì)溫浴法致小鼠疼痛的影響 結(jié)果顯示，仙人掌提取物給藥后不同時(shí)間痛閾潛伏期明顯優(yōu)于生理鹽水和阿司匹林組（P0.01或P0.001）。結(jié)果見(jiàn)表2。表1 仙人掌提取物對(duì)扭體法致小鼠疼痛的影響（略）與生理鹽水組比較，aP<0.001；與阿司匹林組比較，bP<0.05，n=25表2 仙人掌提取物對(duì)溫浴法致小鼠疼痛的影響（略）與生理鹽水組比較，aP<0.01，bP<0.01

10、，cP<0.001；與阿司匹林組比較，dP<0.01，eP<0.001，n=154 討論仙人掌植物中含有多種活性成分，其中較重要的有生物堿、黃酮類、甾醇類等化合物，此外還有多糖、有機(jī)酸類等。本次實(shí)驗(yàn)主要是針對(duì)仙人掌植物中的黃酮類化合物進(jìn)行提取。定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，按此法對(duì)仙人掌進(jìn)行提取分離，結(jié)果得到黃酮類化合物，但是哪一種黃酮化合物，還需要作進(jìn)一步的研究。特別是仙人掌植物中黃酮的含量還需進(jìn)一步測(cè)定。因?yàn)辄S酮類化合物具有多種多樣的生理活性，從而引起了國(guó)內(nèi)外學(xué)者的高度重視，對(duì)黃酮類化合物的研究日益廣泛。本次鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)表明，從仙人掌植物中提取得到的淡黃色物質(zhì)，確

11、實(shí)對(duì)小鼠具有顯著的鎮(zhèn)痛作用。對(duì)醋酸刺激導(dǎo)致小鼠產(chǎn)生腹膜炎癥產(chǎn)生疼痛，該淡黃色物質(zhì)更能減少小鼠扭體次數(shù)與阿司匹林和生理鹽水組比較（P<0.05或P<0.001）；溫浴法實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明仙人掌提取物對(duì)小鼠痛反應(yīng)有抑制作用，給藥后不同時(shí)間痛閾潛伏期長(zhǎng)于阿司匹林組和生理鹽水組，P<0.01或P<0.001，但仙人掌提取物的鎮(zhèn)痛作用機(jī)理有待于進(jìn)一步研究。參考文獻(xiàn)：1 全國(guó)中草藥匯編編寫(xiě)組. 全國(guó)中草藥匯編M. 北京：人民衛(wèi)生出版社，1975：275.2 陳淑冰，唐雨文.仙人掌抗炎作用的研究J.中藥藥理與臨床，1991，7（6）：33.3 陳淑冰. 仙人掌抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用的研究J.中藥藥理與臨床，19