食管癌β連環(huán)蛋白、核因子κB的表達(dá)及意義

1、    食管癌連環(huán)蛋白、核因子B的表達(dá)及意義食管癌連環(huán)蛋白、核因子B的表達(dá)及意義作者：王蕾,劉惠民,梁 爽    【摘要】  目的 探討cat 和NFB在食管癌組織中的表達(dá)及意義。方法 采用免疫組化SP法檢測78例食管癌和40例正常食管粘膜中cat 和NFB的表達(dá)情況。結(jié)果 cat 在78例食管癌中的陽性率70.51%顯著高于40例正常食管粘膜中的陽性率22.50%(P<0.05)。NFB在78例食管癌中的陽性率58.97%顯著高于40例正常食管粘膜中的陽性率15.00%(P<0.05)。cat異常表達(dá)與食管癌的

2、病理分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期具有相關(guān)性(P<0.05)，NFB的表達(dá)與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分期相關(guān)(P<0.05)。食管癌中cat和NFB的表達(dá)相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論 cat 和NFB在食管癌中表達(dá)上調(diào)，兩者可能共同參與了食管癌的轉(zhuǎn)移，在食管癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。    【關(guān)鍵詞】  食管癌；cat ；NFB；轉(zhuǎn)移    Expression of cat and NFB in Esophageal Carcinoma and Its Significance  WANG Lei,LIU Hu

3、imin,LIANG Shuang Department of Pathology,College of Medicine, Hebei University of Engineering,Handan 056029,ChinaAbstract：Objective   To study the expression of cat and NFB in human esophageal carcinoma and its significance.Methods  The expression of cat and NFB in 78 cases of esopha

4、geal carcinoma and 40 cases of normal esophageal were detected by immunohistochemical staining.Results  The positive expression rate of cat in esophageal carcinoma was  70.51%,which was much higher than that in normal esophageal (22.50%)(P<0.05). The positive expression rate of NFB in e

5、sophageal carcinoma was 58.87%,and which was  higher than that in normal esophageal  (15.00%)(P<0.05).The expression of cat was closely correlated with the differentiation,TNM and lymph nodes metastasis(P<0.05),while NFB positive staining was correlated with TNM and lymph nodes metas

6、tasis(P<0.05).The expression cat and NFB in esophageal carcinoma was correlated (P<0.05).Conclusion  cat and NFB is upregulated in esophageal carcinoma,both of them may play an important role in metastasis and proliferation during the occurance of esophageal carcinoma.    K

7、ey words：Esophageal carcinoma; cat; NFB; Metastasis     腫瘤的轉(zhuǎn)移是一個復(fù)雜的過程,已知許多細(xì)胞間信息傳遞分子參與該過程,而近年來細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的一些信號分子與腫瘤之間關(guān)系的發(fā)現(xiàn)使得該領(lǐng)域的研究更加活躍。本研究擬用免疫組化SP法檢測人食管鱗狀細(xì)胞癌中連環(huán)蛋白（catenin，cat）、核因子B(nuclear factor kappa B， NFB) 的表達(dá)，初步探討兩者與食管癌的臨床病理關(guān)系。1  資料與方法    1.1  資料  收集2000

8、2006年在河北工程大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)系進(jìn)行病理檢查的食管鱗狀細(xì)胞癌石蠟包埋標(biāo)本78例，所有病例根治性手術(shù)前均未行化療或放療。男53例，女25例。年齡3979歲，平均年齡59.3歲，中位年齡58歲。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移43例，非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移35例。按WHO(1996)分類標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行組織學(xué)分級：高分化24例，中分化24例，低分化30例。所有病例根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟(UICC)1997年修訂的TNM分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期。另取胃鏡檢出的40例正常食管粘膜作為對照。    1.2  方法  (1)試劑：兔抗人NFB p65多克隆抗體購自Santa Cruz Biotechno

9、log，鼠抗人單克隆抗體cat和即用型SP試劑盒均購自福州邁新公司。(2)步驟：采用免疫組化SP法，玻片經(jīng)多聚賴氨酸行防脫片處理，微波抗原修復(fù)。染色過程按試劑盒說明操作。    1.3  結(jié)果判斷  切片免疫組化染色以已知陽性的肺癌為陽性對照，以PBS代替一抗為陰性對照。染色均以細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞，兩名病理醫(yī)生在顯微鏡下計數(shù)10個高倍視野，按陽性細(xì)胞所占百分比并參考著色強(qiáng)度分級如下：（-）：陽性細(xì)胞數(shù)<10%；（+）：陽性細(xì)胞數(shù)10%24%；（+）：陽性細(xì)胞數(shù)25%以上。    1.4 

10、 統(tǒng)計學(xué)方法  用SPSS10.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)，采用2檢驗，檢驗水準(zhǔn)=0.05。2  結(jié)果    2.1  cat、 NFB在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)  cat陽性物質(zhì)分布于細(xì)胞核或胞膜，NFB陽性物質(zhì)主要分布于胞漿。在78例食管癌中cat、 NFB陽性表達(dá)率顯著高于正常食管粘膜（P<0.05），見表1。表1  食管癌和正常食管粘膜中cat、 NFB的表達(dá)    2.2  食管癌組織中cat、 NFB表達(dá)與臨床病理指標(biāo)之間的關(guān)系  cat陽性表達(dá)與食管癌的病

11、理分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期具有相關(guān)性（P<0.05），NFB的陽性表達(dá)與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分期相關(guān)（P<0.05）。NFB和cat的陽性表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤的部位、大小無顯著相關(guān)（P>0.05），見表2。表2  食管癌組織中cat、 NFB的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系    2.3  食管癌組織中cat與 NFB表達(dá)之間的關(guān)系  78例食管癌中cat和NFB共同陽性率為32.78%，均為陰性35.09%，cat陽性、NFB陰性為13.97%，NFB陽性、cat陰性為21.02%(25.34，P<0

12、.05），表明食管癌中cat和NFB的表達(dá)具有正相關(guān)性。3  討論    在細(xì)胞內(nèi)，cat與cad胞內(nèi)肽段結(jié)合形成復(fù)合體（cadherincatenin complex,ccc）。當(dāng)cat的酪氨酸磷酸化后即與ccc分離，游離的cat作為信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子參與Wnt信號通路。上皮鈣黏蛋白(epithelialcadherin,Ecad)由于失去錨著連接，細(xì)胞黏附功能降低，導(dǎo)致細(xì)胞分散程度增加、移動加強(qiáng)和侵襲。部分cat進(jìn)入核內(nèi)，與轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子結(jié)合，使這些因子失去調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的作用，導(dǎo)致與細(xì)胞增殖有關(guān)的基因轉(zhuǎn)錄，使細(xì)胞過度增殖。因此，現(xiàn)在認(rèn)為cat是一種促癌因子1

13、，它的功能異常是導(dǎo)致細(xì)胞向癌變方向發(fā)展的原因之一23。本研究發(fā)現(xiàn)cat的表達(dá)與腫瘤的浸潤深度、TNM 分期、分化程度及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。    核因子NFB是具有多向性轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能的核轉(zhuǎn)錄因子。當(dāng)受到各種細(xì)胞外信號刺激時被激活，進(jìn)入細(xì)胞核與靶基因上的特異性位點結(jié)合，發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。田芳等4通過免疫細(xì)胞化學(xué)法和Western blot法發(fā)現(xiàn)，NFB的亞單位p50、p65在食管鱗癌細(xì)胞系中的表達(dá)升高,并通過EMSA法證實了進(jìn)入到核內(nèi)的p50、p65具有與DNA結(jié)合并促進(jìn)轉(zhuǎn)錄的能力。我們對78例食管癌石蠟標(biāo)本研究發(fā)現(xiàn)NFB在食管癌中的陽性率顯著高于正常食管粘膜中的陽性率

14、，且其表達(dá)與食管癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，表明其參與了食管癌的發(fā)生發(fā)展。這與 Sasaki等5的研究相符。    已證明，糖原合成酶激酶3（GSK3）能使cat磷酸化，同時 GSK3又是IB激酶/IBNFB通路中的成員，能使某些蛋白因子泛素化而調(diào)節(jié)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)乃至細(xì)胞增殖。Wnt信號系統(tǒng)和NFB信號系統(tǒng)通過GSK3進(jìn)行了“交談”6。本實驗證實cat與NFB在食管癌組織中的表達(dá)有相關(guān)性。    總之，cat與NFB在食管癌中均過度表達(dá)且相關(guān)，兩者可能在食管癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移上共同起作用，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。【參考文獻(xiàn)】1 Peifer M.catenin

15、as oncogene: the smoking gunJ.Science,1997,275(5307):17521753.2 Rimm DL,Caca K,Hu G,et al.Frequent nuclear/cytoplasmic localization of catenin without exon 3 mutation in malignant melanomaJ.Am J Pathol,1999,154(2):325329.3 Chan TA,Wang ZH,Dang LH,et al.Targeted inactivation of CTNNB1 reveals unexpected effects of beta catenin mutationJ.Proc Natl Acad Sci,USA,2002,99(12):82658270.4 田芳,許培榮,侯衛(wèi)紅,等.NFB信號通路在食管鱗癌細(xì)胞系中的激活J.腫瘤防治研究,2006,