菘藍(lán)的藥理研究及臨床應(yīng)用

1、菘藍(lán)的藥理研究及臨床應(yīng)用          菘藍(lán)(Isatis tinctoria L.)為十字花科植物，其根和葉均可入藥，干燥根入藥稱板藍(lán)根，干燥葉入藥稱為大青葉，板藍(lán)根和大青葉的藥性基本相同，有泄火，解毒，涼血等功效，主要分布在華東各省，河南，山西等地1。臨床病例研究證明菘藍(lán)可治療流行性腮腺炎、病毒性腸炎、尖銳濕疣、乙型肝炎、甲型流感病毒、扁平疣等病毒性疾病2。還有報(bào)道菘藍(lán)有調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞分泌IL-2、TNF- 及提高細(xì)胞免疫功能的作用3，還有抗活性氧、抗炎及抗菌作用4,5。因其應(yīng)用廣泛，故有很高的研究

2、價(jià)值?，F(xiàn)就其化學(xué)成分及藥理作用，作一簡(jiǎn)單的概述。   1 化學(xué)成分   菘藍(lán)的主要化學(xué)成分有：生物堿類物質(zhì)如靛藍(lán)、靛玉紅、靛苷、靛紅、腺苷、芥甙、新芥甙、色胺酮、1硫氰酸2羥基3丁烯、黑芥子苷、4，3(H)-喹唑酮。甾醇類物質(zhì)如谷甾醇、谷甾醇。多種氨基酸如精氨酸、脯氨酸、酪氨酸、纈氨酸、-氨基丁酸。此外，還有文獻(xiàn)報(bào)道指出喹唑酮也為菘藍(lán)的有效成分6。   2 藥理作用   菘藍(lán)作為傳統(tǒng)的清熱解毒中藥，對(duì)它藥理的研究發(fā)現(xiàn)，它具有抗菌，抗病毒，解熱，抗炎，抗腫瘤，增強(qiáng)免疫力等多種作用，是一種有著開(kāi)發(fā)前景的中藥。 

3、;  2.1 抗菌作用 菘藍(lán)的水浸液對(duì)金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、枯草桿菌、八聯(lián)球菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、甲型鏈球菌、肺炎雙球菌、流感桿菌、腦膜炎雙球菌均有抑制作用。鄭劍玲用不同的方法提取了菘藍(lán)的總浸液、乙醇提取液和正丁醇萃取液，通過(guò)對(duì)金黃色葡萄球菌、腸炎桿菌和大腸埃希菌的藥物敏感試驗(yàn)，試驗(yàn)證實(shí)，菘藍(lán)的各級(jí)提取物均對(duì)金黃色葡萄球菌有較強(qiáng)的抑制作用，對(duì)腸炎桿菌和大腸埃希菌的抑菌作用隨逐級(jí)提取而增強(qiáng)7。   2.2 抗病毒作用 菘藍(lán)作為傳統(tǒng)的清熱解毒的中藥，其抗病毒的作用一直以來(lái)作為其主要的功效進(jìn)行研究。（1）流感病毒：劉盛8用12天胚齡的雛雞，采用血凝滴法做抗流感

4、病毒的實(shí)驗(yàn)，證明菘藍(lán)根部的水提醇沉液對(duì)流感病毒在直接作用、治療作用、預(yù)防作用的有效率分別為100、60、70；而菘藍(lán)葉子的水提醇沉液對(duì)流感病毒在直接作用、治療作用、預(yù)防作用的有效率分別為87、87、40。胡興昌9將菘藍(lán)的根部以丙酮脫脂用Tris-HCL緩沖液提取，用兔紅細(xì)胞做凝集實(shí)驗(yàn)，將具有血凝活性的凝集數(shù)樣品用雞胚培養(yǎng)法測(cè)定抗流感病毒的效果。結(jié)果表明，凝集素的血凝效價(jià)與其抗流感病毒的作用成正比，即血凝效價(jià)愈高，抗流感病毒能力愈強(qiáng)。（2）巨細(xì)胞病毒：何超蔓10用菘藍(lán)根部和葉子提取物制成的注射液，稀釋后采用細(xì)胞病變抑制法和MTT法觀察其對(duì)巨細(xì)胞病毒AD169毒株的抑制作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明都對(duì)巨細(xì)胞

5、病毒有較強(qiáng)的抑制作用，且隨著藥物濃度的增高抑制作用增強(qiáng)。（3）柯薩奇病毒：張寰毫11發(fā)現(xiàn)用菘藍(lán)根部的水煎劑有直接滅活柯薩奇B組4型病毒的作用；但對(duì)阻止病毒吸附作用不明顯；對(duì)已感染了柯薩奇病毒的細(xì)胞也有明顯的抑制作用。即菘藍(lán)的水煎劑在細(xì)胞水平有明顯抑制CB4V的作用。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，CVB4是1型胰島素依賴性糖尿病發(fā)病的重要環(huán)境誘因，故菘藍(lán)抗CVB4的作用可能有助于進(jìn)一步研究對(duì)1型胰島素依賴性糖尿病的治療。李小青12通過(guò)小鼠的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)菘藍(lán)的葉子水煎劑在CVB3感染的早期對(duì)小鼠病毒性心肌炎（VMC）的病理改變有顯著影響，可能是通過(guò)抑制病毒合成，增強(qiáng)白細(xì)胞的吞噬作用，降低毛細(xì)血管的通透性等作用改善

6、和保護(hù)心肌細(xì)胞。（4）腎綜合征出血熱病毒：李聞文13用間接免疫熒光法研究用菘藍(lán)根部提取物制作的針劑對(duì)腎綜合征出血熱病毒（HFRSV）的作用。結(jié)果表明，對(duì)HFRSV是殺滅作用而非抑制作用，1:100有效，1:1000以上濃度的無(wú)效。并進(jìn)一步用酶免疫組化技術(shù)研究菘藍(lán)在體外對(duì)HFRSV有殺滅作用。   2.3 對(duì)內(nèi)毒素作用 菘藍(lán)抗內(nèi)毒素的作用是近來(lái)研究的一個(gè)熱點(diǎn)。劉云海14用被菘藍(lán)作用過(guò)的類毒素做家兔熱原實(shí)驗(yàn)，在電子顯微鏡下觀察結(jié)構(gòu)形態(tài)變化，證實(shí)確有抗大腸桿菌O111B4內(nèi)毒素作用。并在進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)15中發(fā)現(xiàn)，藥物與內(nèi)毒素之間的凝集反應(yīng)具有高度的特異性、靈敏性，通常試樣中的微量?jī)?nèi)

7、毒素的存在就可以激活鰲試劑中凝固酶使凝固蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槟痰鞍桩a(chǎn)生凝集反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)說(shuō)明了菘藍(lán)中確有抗內(nèi)毒素活性的物質(zhì)存在。他還在實(shí)驗(yàn)中16發(fā)現(xiàn)抑制內(nèi)毒素作用是通過(guò)對(duì)內(nèi)毒素刺激機(jī)體防御系統(tǒng)釋放炎癥因子即腫瘤壞死因子（TNF-）及一氧化氮（NO）的抑制，且有劑量的依賴性。湯杰17通過(guò)對(duì)菘藍(lán)根部用乙醇滲漉提取后依次以石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇加熱浸提后得到的提取物，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，可顯著降低內(nèi)毒素性DIC家兔血清的血清脂質(zhì)過(guò)氧化物（LPO）水平，提高超氧化物歧化酶(SOD)活力，提示提取物具有抗脂質(zhì)過(guò)氧化，清除氧自由基的作用，能夠拮抗內(nèi)毒素的生物效應(yīng)，是發(fā)揮抗內(nèi)毒素活性的物質(zhì)基礎(chǔ)。方建國(guó)18通過(guò)提取菘藍(lán)葉

8、子的有效部位，發(fā)現(xiàn)有能直接中和和降解內(nèi)毒素，顯著降低內(nèi)毒素的致死性和致熱性，具有顯著的體外抗內(nèi)毒素活性的作用。   2.4 對(duì)免疫系統(tǒng)的作用 趙紅19通過(guò)研究菘藍(lán)葉的水煎劑體外對(duì)C57小鼠免疫細(xì)胞分泌IL-2、TNF-水平的影響，用3H-TdR摻入法測(cè)定不同濃度的水煎劑對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞和腹腔巨噬細(xì)胞的毒性作用，MTT方法分別檢測(cè)IL-2、TNF-的生物學(xué)活性。結(jié)果表明，在0.41.6mg/ml濃度時(shí)能促進(jìn)正常小鼠被ConA誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞分泌IL-2，未見(jiàn)到對(duì)小鼠腹腔分泌TNF-有明顯作用。認(rèn)為菘藍(lán)的水煎劑通過(guò)促進(jìn)淋巴細(xì)胞IL-2的分泌，可以在細(xì)胞免疫和體液免疫兩個(gè)方面上調(diào)

9、小鼠的免疫功能，同時(shí)對(duì)巨噬細(xì)胞分泌TNF致炎效應(yīng)和免疫病理?yè)p傷無(wú)明顯影響，故提示在免疫增強(qiáng)的同時(shí)沒(méi)有更多影響白細(xì)胞的活動(dòng)，不造成更嚴(yán)重的病理?yè)p傷及功能失調(diào)。秦箐20用快速低壓干柱柱層析從菘藍(lán)根部中分離出一個(gè)低極性流分及一組亞流分，用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)對(duì)人多形核細(xì)胞化學(xué)發(fā)光的影響。結(jié)果表明，菘藍(lán)低極性流分具有雙向免疫活性，在低濃度時(shí)有激活作用，在高濃度時(shí)具有抑制作用；而亞流分的免疫活性并未因?yàn)槠浼兌鹊奶岣叨鄳?yīng)提高。故說(shuō)明了菘藍(lán)低極性流分及亞流分含有抗炎成分。   2.5 抗癌作用 菘藍(lán)的提取物具有抗癌作用，在許多學(xué)者的研究中被報(bào)道。菘藍(lán)中的有效成分靛玉紅是抗腫瘤的主要活性物質(zhì)。

10、采用靛玉紅-脂質(zhì)體，通過(guò)對(duì)大鼠的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，它能降低大鼠細(xì)胞膜流動(dòng)性，DNA聚合酶I的活性比治療前降低74。侯華新21從菘藍(lán)的根部分離出高級(jí)不飽和脂肪組酸，用MTT法測(cè)定細(xì)胞毒作用，集落形成實(shí)驗(yàn)觀察對(duì)肝癌細(xì)胞增殖的抑制作用，PCR-ELISA試劑盒測(cè)定細(xì)胞的端粒酶活性等方法研究體外抗人肝癌BEL-7402細(xì)胞活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，分離出的高級(jí)不飽和脂肪組酸能抑制BEL-7402細(xì)胞的增殖，其IC50為0.6mg/ml，有促使腫瘤細(xì)胞向正常細(xì)胞逆轉(zhuǎn)的趨勢(shì)，可降低端粒酶活性的表達(dá)，具有體外抗腫瘤的活性。韋長(zhǎng)元22從菘藍(lán)的根部分離的板藍(lán)根組酸對(duì)人耐藥肝癌細(xì)胞BEL-7404/ADM進(jìn)行了體外逆轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)

11、，發(fā)現(xiàn)無(wú)毒劑量的板藍(lán)根組酸活性單體-5b能明顯增強(qiáng)化療藥對(duì)BEL-7404/ADM細(xì)胞的毒作用，且對(duì)ADM的耐藥逆轉(zhuǎn)倍數(shù)可達(dá)4.82倍，是一種較好的BEL-7404/ADM細(xì)胞的多重耐藥的調(diào)節(jié)劑，并推測(cè)它的耐藥逆轉(zhuǎn)作用主要是阻滯腫瘤細(xì)胞鈣離子通道，減少細(xì)胞內(nèi)藥物外流，從而增加了耐藥細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性。梁永紅23發(fā)現(xiàn)從菘藍(lán)的根部提取脂溶性的提取物板藍(lán)根二酮B有體外抑制肝癌BEL-7402細(xì)胞和卵巢癌A2780細(xì)胞的能力，抑制作用均與濃度呈梯度關(guān)系，且抑制卵巢癌A2780細(xì)胞的能力比肝癌BEL-7402細(xì)胞強(qiáng)。       

12、     2.6 對(duì)單胺氧化酶抑制作用 日本學(xué)者Hamaue24提出在歐洲菘藍(lán)中存在的靛紅為單胺氧化酶（MAO）的抑制劑，可增加小鼠尿及腦中的去甲腎上腺素(NE)和5-羥色胺（5-HT）的濃度，喂食靛紅2h后的小鼠紋狀體的乙酰膽堿和多巴胺的水平也顯著增高。靛紅顯著增加Parkinsons病的小鼠紋狀體多巴胺水平。認(rèn)為靛紅具有廣譜生物活性：抗抑郁，多種酶抑制劑，抗癲癇，苯二氮類受體和ANP受體的抑制劑。   2.7 抗炎作用 衛(wèi)宗玲25首次報(bào)道菘藍(lán)的醇提取物具有抗炎作用。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，菘藍(lán)根部70乙醇提取液對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹和角叉菜膠所致的大鼠足

13、部腫脹有明顯的抑制作用，且可抑制大鼠棉球肉芽腫及降低醋酸引起的毛細(xì)血管通透性增加。認(rèn)為菘藍(lán)的提取液急慢性非特異性炎癥模型及肉芽腫組織增生的抑制而發(fā)揮抗炎作用。   2.8 抗活性氧作用 龍盛京26采用化學(xué)發(fā)光分析法，利用H2O2-CTMAB魯米諾發(fā)光體系，研究菘藍(lán)干燥葉的水煎劑體外抗活性氧的作用。結(jié)果表明，提取物對(duì)H2O2有一定的清除作用，且呈量效關(guān)系，揭示它有抗氧化的性能。   菘藍(lán)的制劑中靛藍(lán)、靛玉紅及多糖的含量極低，因而以它們作為主要活性指標(biāo)建立質(zhì)控方法顯然不可??；結(jié)合型氨基酸或結(jié)合型糖蛋白有顯著的抗病毒活性，但其組成、類型、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)還不清楚；有機(jī)

14、酸成分具有抗內(nèi)毒素作用，但其作用是否為菘藍(lán)抗病毒作用的關(guān)鍵所在還要進(jìn)一步探討。故對(duì)菘藍(lán)及制劑活性指標(biāo)依然值得進(jìn)行深入研究，其質(zhì)控方法還需要進(jìn)一步完善和提高。   綜上所述，目前對(duì)菘藍(lán)的研究主要是對(duì)其藥理活性的研究，為其臨床應(yīng)用奠定了一定的化學(xué)基礎(chǔ)。但對(duì)其在臨床上治療機(jī)制的研究還不夠深入，對(duì)其工藝的提取和質(zhì)量的控制還存在較大的爭(zhēng)議。因此，結(jié)合其有效成分的藥理活性深入臨床研究菘藍(lán)對(duì)疾病治療的作用，建立更完善的制劑工藝并制定合理的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，有著現(xiàn)實(shí)和積極的意義。   【參考文獻(xiàn)】   1 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典（一部）.北京：化學(xué)工業(yè)出版

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