均勻設(shè)計法從人發(fā)中提取黑色素的工藝及其性質(zhì)研究

1、應(yīng)用技術(shù)學(xué)院2008屆本科畢業(yè)論文17均勻設(shè)計法提取人發(fā)中黑色素工藝及其性質(zhì)研究摘要：本文用均勻設(shè)計法探討了不同的提取劑、提取時間、提取劑濃度、提取劑用量及提取溫度對人發(fā)中黑色素提取率的影響，因而確定了人發(fā)黑色素的最佳提取工藝，即以人發(fā)(g):提取劑(ml )為1:2的比例，36%濃鹽酸做提取劑，在(95±1)的恒溫條件下回流4 h。隨后，對該黑色素的理化性質(zhì)等進行了較系統(tǒng)的研究。結(jié)果表明，人發(fā)黑色素耐光、耐熱;對還原劑較穩(wěn)定；對強氧化劑不夠穩(wěn)定；堿性條件下較穩(wěn)定;Cu2+、 Ca2+、Fe3+、Zn2+等金屬離子對該色素有護色、增色作用；Mg2+、Al3+、Na+雖有減色作用，結(jié)果

2、表明制備的天然黑色素性能優(yōu)良。關(guān)鍵字：均勻設(shè)計法；提??；黑色素；理化性質(zhì)；胱氨酸；穩(wěn)定性Study on Extraction Technology and Properties of the Melanin from Hair by Uniform Design MethodAbstract: In this paper, the extraction technology and the effects of different solvent, extraction time, solvent concentration, solvent dosage and temperature o

3、n the extraction rate of the melanin from hair was studied. The results showed that 36% hydrochloric acid was used as the solvent and the optimum stock ratio 1:2，temperature 95 and distillation 4 h. Physical and chemical properties of the melanin indicated that the melanin was stable to light and te

4、mperature,stable in alkaline solution and reducing agents, it had less resistance against oxidant. The metal ions,Ca2+, Cu2+,Fe3+,Zn2+ could stabilize and enhance the pigment color in alkaline condition. Although Mg2+,Al3+,Na+could reduce pigment color, the effect was not obvious. It was found that

5、the nature melanin has good performance and the method is convenient and feasible.Key words：Uniform design; Extraction; Melanin; Physical and chemical properties; Cystine; Stability1 前言1.1 黑色素的概述1.1.1黑色素的理化性質(zhì)黑色素(melanin )是一種生物多聚體。它廣泛存在于動物、植物和微生物中，是目前已知生物色素中最多最廣的一類色素1。黑色素可分為兩類，一是真黑色素(eu-melanin)，不含硫原

6、子，呈棕色或黑色；二是脫黑色素( pheomelanin )，含硫原子，呈黃色或微紅棕色。黑色素不溶于酸性溶液，微溶于水，不溶于常見有機溶劑，可溶于堿溶液。在一些情況下，黑色素與糖及蛋白質(zhì)結(jié)合，導(dǎo)致黑色素具有水溶性2。黑色素在紫外波長220 nm下吸收值最大，且隨波長的增加，其吸收值下降3。它的紅外吸收光譜在3 m和6 m各有一個吸收峰4。其中3422 cm 的吸收峰是由-0H的伸縮振動產(chǎn)生的，1636和 1558 cm 吸收峰是由芳環(huán)骨架振動產(chǎn)生的，在 860650 cm 范圍內(nèi)的吸收帶很弱，表明芳環(huán)被取代，形成了共軛體系。黑色素的電子自旋共振（ESR）波譜是典型的一次微商波譜，無超精細結(jié)構(gòu)

7、，其特征參數(shù)g =2.00302.0044。1.1.2黑色素的形成 黑色素的形成是黑色素細胞能分泌一種酪氨酸酶(一種氧化酶)，使人發(fā)中的酪氨酸被氧化成-(3，4-二羥苯基)-氨基丙酸(又名多巴DOPA)。天然的多巴為L構(gòu)型，在酶作用下，它再被氧化成多巴醌，多巴醌進一步被氧化，然后聚合生成黑色素。黑色素與角蛋白結(jié)合形成一種結(jié)合蛋白質(zhì)黑色素蛋白質(zhì)。反應(yīng)如下：圖1 黑色素蛋白的合成1.1.3黑色素的提取方法國內(nèi)外對黑色素提取方法，主要有酸法、酶法、超聲波法等。各種方法各有其優(yōu)缺點，應(yīng)根據(jù)試驗?zāi)康?、要求及實際條件來選擇適用的方法，亦可將各方法進行比較、結(jié)合使用。其中，酸法是一種較常用的方法，只是其操作

8、比較繁瑣。酸法提取的人發(fā)黑色素光穩(wěn)定性優(yōu)于酶法，但熱穩(wěn)定性方面，酸法不及酶法的人發(fā)黑色素穩(wěn)定。在抗紫外線方面，酶法優(yōu)于酸法。在黑色素的提取率上,蛋白酶法高于鹽酸水解法。超聲提取過程產(chǎn)生強烈的振動、空化、攪拌，與傳統(tǒng)提取方式比較具有收率高、生產(chǎn)周期短、無需加熱，有效成分不被破壞等優(yōu)點5。與傳統(tǒng)提取方式比較，超聲提取方法具有簡便、提取率高、操作時間短、溶劑用量少的優(yōu)點。1.1.4前景與展望 目前，在化學(xué)工業(yè)中所用的黑色染料絕大多數(shù)是合成染料，其結(jié)構(gòu)中的特征基團為偶氮基(-N=N-)，現(xiàn)己證實具這種結(jié)構(gòu)的黑色染料有一定的毒性，能夠致癌。因此，很多國家己禁止將這種偶氮結(jié)構(gòu)的染料用于與人體直接接觸的消費

9、品上，如染發(fā)劑和皮革工業(yè)。在回歸自然的趨勢下，人們迫切需要安全無毒，不會引起皮膚過敏的天然植物染發(fā)劑。日本、法國正在研制從天然植物中提取白發(fā)染黑劑。印度從蘇木精中提取染發(fā)劑。我國地域廣闊，有極其豐富的天然黑色素資源，必須抓緊充分利用這些資源，研制出具有實用價值的染發(fā)劑產(chǎn)品口6。目前國內(nèi)外己有這方面的專利報道7，8，但在應(yīng)用過程中發(fā)現(xiàn)用天然黑色素做成的染發(fā)劑染發(fā)還存在不穩(wěn)定的缺點，尤其是在流汗后更易脫落，因此，還應(yīng)進行配方方面的研究。 天然黑色素在食品工業(yè)上也有很廣泛的用途，可將它作為酒類、飲料類、嬰兒保健品及大眾食品等添加劑。例如，提取黑芝麻、黑豆、黑米內(nèi)的天然黑色素，再配以山野果汁天形成黑色

10、飲料，更加豐富了營養(yǎng)成份，又保持著天然本色。特別是近年來的研究表明，黑色素具有抗氧化和防止衰老等功能9，10，這將大大促進天然黑色素在日益受重視的保健食品工業(yè)中的應(yīng)用。 天然黑色素具有防止紫外線輻射的功能，因此，可被用于日用化妝工業(yè)制備防曬膏、防曬霖和黑發(fā)劑。此外，近年來發(fā)現(xiàn)一些可溶性黑色素在體外對愛滋病病毒有顯著的抑制作用，使天然黑色素將來有可能成為一種新的抗愛滋病藥物11。2 實驗部分2.1 實驗儀器名稱廠商WZFUV-2102PCS型紫外-可見分光光度儀龍尼柯（上海）有限公司Tanon-4100全自動數(shù)碼凝膠成像儀天能科技（上海）有限公司精密酸度計PHS-2C型上海大普儀器有限公司RE-

11、52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器鞏義市英峪予華儀器廠GZX-9140ME型數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠DK-8D型電熱恒溫水槽鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司852型恒溫磁力加熱攪拌器常州澳森電器有限公司微量進樣器上海安亭微量進樣器廠薄層色譜展開缸上海信誼儀器廠電子天平梅特勒托利多儀器（上海）有限公司2.2 實驗藥品藥品名稱純度生產(chǎn)廠家濃鹽酸（3638%）化學(xué)純湖南省株洲市化學(xué)工業(yè)研究羧甲基纖維素鈉化學(xué)純天津市光復(fù)精細化工研究所板層析硅膠G化學(xué)純青島海浪硅膠干燥劑廠乙酸乙酯化學(xué)純天津市光復(fù)精細化工研究所甲醇化學(xué)純廣東汕頭市西隴化工廠丙酮分析純廣東汕頭市光華化學(xué)廠石油醚（沸程：6090）分析純天津市

12、光復(fù)科技發(fā)展有限公司無水乙醇分析純安徽安特生物化學(xué)有限公司茚三酮分析純上海試劑三廠氨水分析純汕頭市光華化學(xué)廠L-精氨酸分析純天津市光復(fù)精細化工研究所正丁醇分析純天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心乙酸分析純廣東·汕頭市西隴化工廠氫氧化鈉分析純廣東汕頭市光華化學(xué)廠硫酸銅分析純天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心硫酸鎂分析純天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心氯化鈣分析純天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心硫酸鈉分析純天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心三氯化鋁分析純天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心氯化鋅分析純天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心高錳酸鉀分析純天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心重鉻酸鉀分析純天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心雙氧水分析

13、純天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心次氯酸鈉分析純天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心亞硫酸鈉分析純天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心亞硝酸鈉分析純天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心2.3 實驗原理與方法2.3.1實驗原理 當頭發(fā)的角蛋白在一定條件下被水解時，由于角蛋白的結(jié)構(gòu)被破壞，包含在其中的黑色素隨即被游離出來。在反應(yīng)條件下，部分黑色素被離解成分子量更小的可溶性物質(zhì)，使水解液呈棕黑色，部分則為黑色不溶性物質(zhì)，即為本試驗中提取的黑色素12。 水解液中生成的氨基酸，其中主要是胱氨酸，利用氨基酸在其等電點時溶解度最小，調(diào)整介質(zhì)的pH值，使胱氨酸沉淀析出。2.3.2黑色素提取工藝優(yōu)化2.3.2.1提取劑的選擇 準確稱取4份

14、人發(fā)各10.00 g，分別加36%濃鹽酸20.00 mL、80甲醇、乙醇、乙醚與濃鹽酸的混合液各20 mL（V：V=1：1），在(95±1)的恒溫條件下回流4 h，然后過濾、蒸餾濃縮、干燥、稱重。2.3.2.2提取劑濃度的選擇準確稱取4份人發(fā)各10.00 g，分別加20.00 mL濃度為5%、10、20、36鹽酸溶液，在(95±1)的恒溫條件下回流4 h，然后過濾、蒸餾濃縮、干燥、稱重。2.3.2.3提取劑用量的選擇準確稱取4份人發(fā)各10.00 g，分別加36的濃鹽酸10 mL、20 mL、30 mL、40 mL，在(95±1)的恒溫條件下回流4 h，然后過濾、蒸

15、餾濃縮、干燥、稱重。2.3.2.4提取時間的選擇準確稱取4份人發(fā)各l0.00 g，各加36濃鹽酸20.00 mL，在(95±1)的恒溫條件下回流2 h、3 h、4 h、5 h，然后過濾、蒸餾濃縮、干燥、稱重。2.3.2.5提取溫度的選擇準確稱取4份人發(fā)各l0.00 g，各加36濃鹽酸20.00 mL，在80、85、90、95、100、105的恒溫條件下回流4 h，然后過濾、蒸餾濃縮、干燥、稱重。2.3.3人發(fā)中黑色素的理化性質(zhì)研究2.3.3.1色素溶解性 取少量黑色素加入蒸餾水、36%濃鹽酸、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、濃氨水和pH值為813的NaOH溶液中，觀察其溶解性13。2.3

16、.3.2色素的光譜特征 將精制成的pH=7.5、濃度為0.0125 的黑色素溶液，以蒸餾水作基準，然后在波長180-330 nm 范圍內(nèi)用WZFUV-2102PCS型紫外-可見分光光度儀進行掃描，測定其吸光度(ABS)，確定max。2.3.3.3色素?zé)岱€(wěn)定性 將pH=7.5的0.025黑色素溶液分別置于25、50、80、100恒溫水浴中加熱，以0.5 h為時間間隔，取出后快速冷卻至室溫，在max測其ABS值。2.3.3.4色素光穩(wěn)定性 將配置的pH=7.5，濃度為0.025的黑色素溶液于容量瓶中，分別置于紫外光下30 cm 處、室內(nèi)暗處和自然光下照射，經(jīng)一定時間后測定其ABS值。2.3.3.5

17、氧化劑、還原劑對色素的穩(wěn)定性 取相同稀釋條件下的黑色素水溶液l0 mL分別加到不同濃度的KMnO4、K2Cr2O7、10 H2O2、NaClO 和Na2SO3溶液中，搖勻，在max測其ABS值。2.3.3.6金屬離子對色素的穩(wěn)定性 配制CuS04、MgSO4、CaCl2、NaSO4、FeCl3、AlCl3和ZnCl2溶液，使它們的濃度達到30 mg/L，各吸取這7種金屬離子溶液0.2 mL，分別加入到預(yù)先有10 mL黑色素液的容量瓶中，定容，在max測定色素液ABS值。2.3.3.7蔗糖、葡萄糖對黑色素的穩(wěn)定性取黑色素溶液，分別配制含蔗糖、葡萄糖濃度均為3的色素溶液，在室溫(30)下避光放置l

18、00 h后，在max下測定其最大的吸光度ABS值。2.3.4氨基酸的分離與鑒定2.3.4.1試劑配置1. Pauly試劑配制：甲液：準確稱量0.09 g對氨基苯磺酸，加12 mol/L鹽酸0.9 mL，加熱溶解后，加水至10 mL，冷卻至30，再與等量的5%亞硝酸鈉水溶液相混，置棕色瓶中，在冰箱中保存。乙液：10%硝酸鈉溶液。2. 板口試劑配制：甲液：準確稱量0.5 g8-羥基喹啉溶于500 mL的丙酮中，配制0.1%8-羥基喹啉丙酮液500 mL。乙液：1 mL溴溶于500 mL0.5 mol/L氫氧化鈉溶液中。3. 顯色劑配制： 準確稱量1 g茚三酮溶于200 mL丙酮中，配制0.5%的茚

19、三酮丙酮液200 mL。4. 展開劑配制： 按正丁醇：乙酸：水=15：3：2（V/V）配制100 mL展開劑，置于層洗缸中。5. 標準胱氨酸的配制14： 準確稱量胱氨酸10 mg加入三支試管中，再向各個試管中加入2 mL蒸餾水，使氨基酸的濃度為5 mg/mL。2.3.4.2 薄層板的制備 洗板：用水多次沖洗，再用洗衣粉水洗滌，最后用蒸餾水沖洗。 烘板 配制0.5%的羧甲基纖維素鈉溶液200 mL： 準確稱量羧甲基纖維素鈉1 g，放入200 mL的蒸餾水中，在磁力攪拌機上加熱溶解，配得200 mL0.5%的羧甲基纖維素鈉溶液。 準確稱量45.0 g硅膠與0.5%的羧甲基纖維素鈉溶液按3：1混合。

20、 鋪板： 涼干 活化： 將涼干的板子在105烘箱中干燥30 min，取出，放在干燥器中。2.3.4.3脫色與濃縮在濾液中加活性炭在90下脫色2次，每次用活性炭10 g。吸濾、得淺黃色液體。將此淺黃色液體，放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在65加熱濃縮3 h，使液體體積大約為5 mL。2.3.4.4點樣 先用鉛筆在距薄層板一端 1 cm 處輕輕劃一橫線作為起始線，然后用毛細管分別吸取2.3.4.3濃縮的樣品5 L，點2個樣品點。再分別吸取標準胱氨酸3 L、4 L、5 L、6 L，在起始線上小心點樣，斑點直徑一般不超過 2 mm。按少量多次，待前次點樣的溶劑揮發(fā)后方可重新點樣，以防樣點過大，造成拖尾、擴散等現(xiàn)象

21、，而影響分離效果。2.3.4.5展開 在層析缸中加入配好的展開溶劑，使其高度不超過 1 cm。將點好的薄層板小心放入層析缸中，點樣一端朝下，浸入展開劑中。蓋好瓶蓋，觀察展開劑前沿上升到一定高度時取出，盡快在板上標上展開劑前沿位置。自然晾干。2.3.4.6顯色 用噴霧器將顯色劑均勻噴于涼干的層析板上，自然涼干，觀察斑點位置，并計算Rf值。3 結(jié)果與討論3.1 提取劑選擇對提取率的影響 由圖2看出，人發(fā)中的黑色素在36%濃鹽酸中的提取率最高，水、乙醚中均不溶，在甲醇和乙醇中溶解性相差無幾。但是甲醇有毒，而乙醇無毒且價廉易得，不會引起環(huán)境污染問題。因而最佳提取劑選36%濃鹽酸為好。3.2 提取劑濃度

22、對黑色素提取率的影響圖3 提取劑濃度對黑色素提取率的影響010203040506070010203040濃度(%)提取率(%)由圖3看出，提取劑濃鹽酸濃度增加，提取率也明顯增加，當濃度為36時的提取率為65.56%，達到最大值并且時間也較短。因此，提取劑的最佳濃度為36%。3.3 提取劑用量對黑色素提取率的影響圖4 提取劑用量對提取率的影響4045505560657001020304050提取劑用量（ml）提取率（%）由圖4看出，提取劑用量增加，黑色素的提取率也逐漸增加，當提取劑用量為20 mL時提取率最大為65.5%。用量繼續(xù)增加，黑色素遭到破壞，提取率逐漸降低，最后不再變化，因此，提取劑用

23、量為20 mL時，即即人發(fā)和提取劑(重量：體積)比例為1：2時的提取效率最好。3.4 提取時間對提取率的影響圖5 提取時間對提取率的影響020406080123456時間（h）提取率（%）結(jié)果見圖5，人發(fā)中黑色素的提取率隨時間增加有所增加，但在4 h和其以上時間時無明顯差異。提取時間的延長會帶來其他雜質(zhì)，增加后續(xù)精制處理的步驟。因此，4 h時的提取效果最適。3.5 提取溫度對提取率的影響圖6 提取溫度對提取率的影響01020304050607080707580859095100105110溫度（）提取率（%）由圖6看出，隨著溫度的增加，黑色素提取率逐漸增加，在95時提取率為65.54%，達到最

24、大值，溫度繼續(xù)增加，高溫將黑色素結(jié)構(gòu)破壞，使提取率有所降低，因此，95為提取的最佳溫度。3.6 黑色素的理化性質(zhì)對穩(wěn)定性的影響3.6.1色素的溶解性表1 人發(fā)黑色素在不同試劑中的溶解性試劑蒸餾水36%濃鹽酸乙醇乙酸乙酯丙酮甲醇濃氨水NaOH溶解性不溶不溶不溶不溶不溶微溶易溶易溶圖7 pH對溶解時間的影響01020304050607080901008910111213時間（s）由表1看出，人發(fā)黑色素不溶于蒸餾水、酸和常用的乙醇、乙酸乙醋、丙酮等有機溶劑，微溶于甲醇，易溶于濃氨水和NaOH。由圖7可知，pH值增大，黑色素的溶解時間也越短，當pH大于9時，溶解時間相差無幾，從經(jīng)濟成本考慮，pH為10

25、時為最佳條件。3.6.2色素的光譜特征圖7 人發(fā)中黑色素的紫外吸收光譜0.511.522.5150200250300350波長（nm）吸光值 圖7說明人發(fā)黑色素在紫外波長下有最大吸收，最大吸收峰在220 nm處，并隨著波長增加，其吸光值下降，與Bell15報道的黑色素紫外吸收特征一致。3.6.3溫度對色素穩(wěn)定性的影響 表2 不同溫度及不同受熱時間下人發(fā)中黑色素的吸光值溫度受熱時間 熱降解率（%）00.51.01.52.02.5252.1042.0842.0832.1122.0912.098-0.9502.1042.0852.0872.1182.1092.088-0.76802.1042.089

26、2.0952.1232.1322.1251.01002.1042.1372.1682.1792.1812.1964.4從表2可知，該色素的吸光度值在80以下基本不發(fā)生變化，在100以下加熱2.5 h，黑色素降解幅度只有4.4。目測色素液顏色均無變化，所以人發(fā)中黑色素在不同溫度條件下的熱穩(wěn)定性較好。3.6.4光對色素穩(wěn)定性的影響表3 光照對人發(fā)黑色素穩(wěn)定性影響光照時間（d）吸光度變化率（%）初始值13515紫外光2.3402.3352.3302.3242.319-0.9自然光2.3402.3382.3332.3362.328-0.5暗處2.3402.3402.3402.3392.337-0.13

27、從表3中可見， 黑色素在紫外光照射下放置15 d，其吸光度值僅下降為0.9%；自然光及暗處下其吸光度值基本不變，色素液顏色也均無明顯變化，表明人發(fā)中黑色素耐光性良好。3.6.5氧化劑、還原劑對色素穩(wěn)定性的影響表4 氧化劑對人發(fā)黑色素穩(wěn)定性的影響溶液KMnO4（mL）K2Cr2O7（mL）吸光度初始值51015510152.1041.7370.3910.2291.7531.3400.711溶液NaClO（mL）H2O2（mL）吸光度初始值51015510152.1042.1082.0552.0261.8581.6101.189表5 還原劑對人發(fā)中黑色素穩(wěn)定性的影響時間（h）加入Na2SO3（g）

28、0.050.100.200.300.4001.7671.7671.7671.7671.76771.7571.7601.7621.7661.769241.7621.7651.7591.7611.773481.7441.7581.7681.7701.777 由表4可見， 該黑色素隨KMnO4、K2Cr2O7、NaClO、H2O2濃度增大，吸光度值減?。婚L期放置色素液均變?yōu)闊o色，表明KMnO4、K2Cr2O7、NaClO和H2O2對人發(fā)黑色素都有漂白作用， 說明人發(fā)黑色素對強氧化劑不穩(wěn)定。由表5可見，隨Na2SO3濃度增大，吸光度值增加，但放置48 h后，色素幾乎沒有損失，表明該色素有良好的耐還原性

29、。3.6.6金屬離子對色素穩(wěn)定性的影響表6 金屬離子對人發(fā)中黑色素穩(wěn)定性得影響時間金屬離子蒸餾水Cu2+Mg2+Ca2+Na+Fe3+Zn2+A13+10min1.4700.4381.2610.6851.5781.0260.4410.97824h1.9470.8311.4980.9651.6820.8580.9270.99448h2.0420.8421.3790.9161.8701.0620.8930.981從表6可知， 金屬離子Cu2+、Ca2+、Fe3+、Zn2+對色素有較強的保色、增色作用；Mg2+、A13+、Na+雖有減色作用，但不十分明顯。3.6.7蔗糖、葡萄糖對黑色素的影響表7 蔗

30、糖、葡萄糖對黑色素穩(wěn)定性關(guān)系糖類A值顏色沉淀物3%蔗糖溶液0.35黑色無沉淀3%葡萄糖溶液0.31黑色無沉淀由表7可知，不加任何物質(zhì)的色素溶液的最大吸光度A值為0.35，而加了糖類的色素溶液在放置100 h后所測定的最大A值變化不大，因此測定結(jié)果表明，蔗糖和葡萄糖均對該黑色素的穩(wěn)定性無影響。3.7胱氨酸的薄層分析圖8 胱氨酸樣品的凝膠成像儀掃描結(jié)果圖表8 胱氨酸薄層色譜的Rf值點樣量序號123456a/cm3.43.53.53.53.63.6Rf 值0.340.350.350.350.360.36注：b10 cm Rf a/b 1號、2號為人發(fā)中分離濃縮的胱氨酸樣品，分別點樣5 L;3號、4號

31、、5號、6號為5 mg/mL標準胱氨酸，依次點樣3 L、4 L、5 L、6 L，由圖8看出，1號、2號樣品由于濃度較低，顏色很淺，標準品濃度較深；樣品的斑點與標準品基本一致，因此，樣品中含有胱氨酸。4 結(jié)論 人發(fā)中的黑色素不溶于蒸餾水、酸和常用的乙醇、乙酸乙醋、丙酮等有機溶劑，微溶于甲醇，易溶于濃氨水和pH大于9的強堿溶液。由于高溫和長時間提取會引起黑色素的降解，實驗表明，在(95±1)、4 h劑提取時，可使黑色素和玉米油同時提取出來，因而可提高人發(fā)的使用價值由于高溫和長時間提取會引起黑色素的降解，實驗表明，在(95±1)、4 h條件下，提取效果最佳。黑色素在以多種異構(gòu)體形

32、式存在，酸性條件有利于黑色素的提取。綜合提取實驗工作認為，從人發(fā)中提取黑色素的最佳條件是：以人發(fā)(g)：提取劑(mL)為1：2的比例，36濃鹽酸做提取劑，在(95±1)的恒溫條件下回流4 h，然后過濾、濃縮、干燥由于此提取方法操作簡單且提取率高故此工藝在工業(yè)生產(chǎn)上也可使用。該色素對熱、光、還原性及堿性溶液等均表現(xiàn)較穩(wěn)定；對強氧化劑不夠穩(wěn)定；Cu2+、Ca2+、Fe3+、Zn2+等金屬離子有較強的保色、增色作用；Mg2+、A13+、Na+雖有減色作用，但不明顯，可作為食品和化妝品的著色劑，具有很高的開發(fā)價值和應(yīng)用前景?？傊?，應(yīng)用實驗表明，人發(fā)黑色素具有比黑米色素等其它同類色素較為穩(wěn)定的

33、理化特性，作為一種食用天然色素已具備了最重要的理化特性，顯示了巨大的發(fā)展?jié)摿?，有望得到一種新型的天然黑色素。參考文獻1 KolloasN. New trends in photobiology phytoprotection by melanins.J. Photochem Photobiol., 1991, 9: 135160.2 Basu PK, Walker XR. Factors affecting virulence and pigment production of Xanthomo- nas phaseoli var.fuscans. Can. J. Bot., 1967,45:

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35、華.天然茶子黑發(fā)泡及其制法，P CN1116089A.8 Belcour CB, Martin R. Use of chrysanthemum extract to increase melanogenesis in cosmetic andpharmaceutical compositionsJ. P FR2768343.9 張名位，孫玲，池建偉，等. 黑米、黑大豆、黑芝麻中天然色素性質(zhì)的比較研究J. 中國糧油學(xué)報，1998，l3(2)：69.10 梁敏，潘英明，唐明明，等. 桂花種子皮黑色素提取及影響其穩(wěn)定性因素分析J. 食品添加劑，2005，26（8）：141143.11 Montefiori DC, Zhou J. Selection antiuinal activity of synthetic L-tyronsine and L- Dopa malanins against human immunodeficiency virus in vitroJ. Antiviral Res, 1991,1:11 20.12 張沙艷，胡春霞. 毛發(fā)中黑色素的提取和利用J. 遼寧師專學(xué)報，2003，5（3）：9597.13 陳鈞輝，陶力，朱婉華