HPLC測定屏風(fēng)生脈膠囊人參皂苷Rg1 的研究

1、    HPLC測定屏風(fēng)生脈膠囊人參皂苷Rg1 的研究余 琳1 文永蘭2 黃 濤11 四川省成都市第一人民醫(yī)院藥劑科(610041) 2 四川省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院(610041)摘要：目的 建立高效液相色譜(HPLC)測定屏風(fēng)生脈膠囊中的人參皂苷Rg1的含量的方法，更有效地控制該產(chǎn)品質(zhì)量。方法 色譜柱為KromasilODS-1C18 ,流動相為乙腈水(1981)。結(jié)果 準確、可靠，重現(xiàn)性好，回收率為95%105%，RSD為1.85%。結(jié)論 該標準可用于屏風(fēng)生脈膠囊的質(zhì)量控制。關(guān)鍵詞：屏風(fēng)生脈膠囊;人參;人參皂苷Rg1;高效液相色譜;含量測定Quality

2、standard of GinsenosideRg1 for Pingfeng Shengmai CapsuleYu Lin1 Wen Yong Lan2 Hang Tao11 Sichuan Institute of Chinese Materia Medica .Chinese Academy of Traditional Chinese Medicine 6100412 Sichuan cooperation of Chinese and Western medicine hospital,610041Abstract：Objective To establish the qulity

3、standard for Pingfeng Shengmai Capsule Metheds The identification and inspect were carried out DL-tetrahydropalmatine in preparation was determined by HPLC. The HPLC Conditions: KROMASIL ODS-1C18 column, mobil phase of melthyl cyanide-water(19:81). Results HPLC methed was accurate and reliable, the

4、recovery was 95-105%, RSD was 1.85%.Conclusion This standard can be used for the quality control of Pingfeng Shengmai Capsule.Key words：Pingfeng Shengmai Capsule;Jinseng; GinsenosideRg1; HPLC;Determination屏風(fēng)生脈膠囊收載于衛(wèi)生部藥品標準成方制劑部分，由黃芪、人參、五味子、附片等7味藥材制成的中藥復(fù)方制劑，具有益氣、扶陽、固表功效，是治療心悸氣短、表虛自汗的有效制劑。原標準僅有理化鑒別和人參的

5、薄層鑒別而無含量測定標準。為了更加有效地控制屏風(fēng)生脈膠囊的產(chǎn)品質(zhì)量，本文建立了人參皂苷Rg1的含量測定項目。1 儀器與試藥SHIMADZU高效液相色譜儀(LC-10ATVP雙泵溶劑輸送系統(tǒng)，SPD-M10AVP檢測器; CTO-10ASVP 柱溫箱);KQ-400DB型數(shù)控超聲清洗波器(工作頻率：40KHz，功率：400W;昆山市超聲儀器有限公司);FA1104型電子天平(感量：0.01mg，上海精科);SZ-93型自動雙重純水蒸餾器(上海亞榮生化儀器廠);人參皂苷Rg1對照品(中國藥品生物制品檢定所批號：110703-200424供含量測定用)。乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑均為分析純

6、;屏風(fēng)生脈膠囊(四川綿陽一康制藥有限公司，批號：090503山西康威制藥有限責(zé)任公司 批號：090509 陜西美聯(lián)藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號：090315)。2 實驗與結(jié)果2.1 試驗條件 色譜條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;乙腈水(1981)為流動相，檢測波長203nm。理論板數(shù)按人參皂苷Rg1峰計算應(yīng)不低于3000。2.2 測定方法2.2.1 對照品溶液的制備 取人參皂苷Rg1對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml約含0.2mg的溶液，搖勻，即得。2.2.2 供試品溶液的制備 取本品內(nèi)容物約3g，精密稱定，加甲醇40ml，超聲處理(功率400W，頻率40KHz)2次，每次45min，濾

7、過，濾液合并，用少量甲醇洗滌容器，洗液并入濾液中，揮干，殘渣加水30ml使溶解，用乙醚提取兩次，每次30ml，棄去乙醚液，再用水飽和的正丁醇提取4次(30，20，20，20ml)，合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌2次，每次40ml，棄去氨液，再加正丁醇飽和的水10 ml洗滌，棄去水層，正丁醇液置水浴上揮干，殘渣加甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得1。2.2.3 陰性溶液的制備 精密稱取按處方制成的缺人參的樣品3g，照供試品溶液的制備方法制備。2.3 測定波長的選擇 人參皂苷Rg1的測定波長為203nm。2.4 空白試驗 按上述色譜條件，吸取供試品溶液、對照品

8、溶液、陰性溶液各10l，分別注入色譜儀中。供試品色譜中，在與對照品色譜圖相應(yīng)位置上，有一相同的色譜峰，陰性溶液在此保留時間無干擾。2.5 方法學(xué)考察2.5.1 線性關(guān)系 精密量取人參皂苷Rg1對照品溶液(0.517mg/ml)2µl、4µl、6µl、8µl、10µl進樣，以峰面積值(A)對進樣量(C)進行回歸，得標準曲線方程為：A = 322531.14 C + 13152.20，r=0.9999。以峰面積值(A)對進樣量(C)作圖，得一直線，結(jié)果表明在1.0345.170g范圍內(nèi)，人參皂苷Rg1進樣量與峰面積之間線性關(guān)系良好。2.5.2 精密

9、度試驗 精密吸取對照品溶液(0.517mg/ml)5µl注入液相色譜儀，連續(xù)進樣5次，測得人參皂苷Rg1峰面積的相對標準差(RSD)=3%，表明儀器精密度良好。2.5.3 重復(fù)性試驗 按擬定的含量測定方法，對同一批樣品(批號090503) ，同時制備6份樣品供試品溶液，分別精密進樣10µl，計算人參皂苷Rg1含量，重復(fù)性試驗結(jié)果RSD=3%(n=6)，說明提取和檢測方法重現(xiàn)性良好。2.5.4 穩(wěn)定性試驗 取樣品(批號090503)，按擬定的色譜條件制備供試品溶液，分別于0h、1h、2h、4h、8h，進樣10µl，測得樣品中人參皂苷Rg1峰面積值的RSD=0.3%(

10、n=5)，試驗表明，樣品供試液在8h內(nèi)基本穩(wěn)定。2.5.5 回收率試驗 取已知含量的樣品粉末(0.264mg/g，批號090503)6份，每份約1.5g，精密稱定，分別精密加入人參皂苷Rg1對照品溶液(0.403mg/ml) 1ml，照標準正文擬定的方法，制備加樣回收供試品溶液，并精密吸取10µl注入高效液相色譜儀，計算回收率?；厥章试囼灲Y(jié)果表明：6次試驗的加樣回收率測得結(jié)果平均為100.6%，說明該方法的回收率良好。2.6 樣品測定 按正文擬定的含量測定方法，制備樣品供試品溶液，對上述三批樣品進行了含量測定，結(jié)果見表1。根據(jù)三批樣品人參皂苷Rg1含量測定，平均值為87.87µg/粒，故規(guī)定屏風(fēng)生脈膠囊人參皂苷Rg1含量不得低于61µg/粒，并在公司內(nèi)控標準中加以規(guī)定。3 討論參照有關(guān)文獻2-4，采用HPLC對屏風(fēng)生脈膠囊人參皂苷Rg1進行測定。結(jié)果方法可靠，操作簡便，專屬性強，可以作為屏風(fēng)生脈膠囊含量控制的有效方法。參考文獻1 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)S.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:316.2 楊軍,王玲,吳詩惠,等.HPL