亞硝酸鹽氮的測定(N-(1-萘基)-乙二胺分光光度法)

1、亞硝酸鹽氮的測定（N-（1-萘基）-乙二胺分光光度法）：亞硝酸鹽是氮循環(huán)的中間產(chǎn)物，不穩(wěn)定，根據(jù)水環(huán)境條件，可被氧化成硝酸鹽，也可被還原成氨。亞硝酸鹽可使人體正常的血紅蛋白（地鐵血紅蛋白）氧化成為高鐵血紅蛋白，發(fā)生高鐵血紅蛋白癥，失去血紅蛋白在體內(nèi)輸送氧的能力，出現(xiàn)組織缺氧的癥狀。亞硝酸鹽可與仲胺類反應(yīng)生成具致癌性的亞硝胺類物質(zhì)，在PH值較低的酸性條件下，有利于亞硝胺類的形成。水中亞硝酸鹽的測定方法通常采用重氮-偶聯(lián)反應(yīng)，使生成紅紫色染料。方法靈敏、選擇性強。所用重氮和偶聯(lián)試劑種類較多，最常用，前者為對氨基苯磺酰胺和對氨基苯磺酸，后者為N-（1-萘基）-乙二胺和a-萘胺。此外，還有目前國內(nèi)外普

2、遍使用的離子色譜法和新開發(fā)的氣相分子吸收法。這兩種方法雖然須使用專用儀器，但方法簡便、快速，干擾較少。亞硝酸鹽在水中可受微生物等作用而很不穩(wěn)定，在采集后應(yīng)盡快進行分析，必要時冷藏以抑制微生物的影響。1、實驗原理 在磷酸介質(zhì)中，pH1.8±0.3時，亞硝酸鹽與對-氨基苯磺酰胺反應(yīng)，生成重氮鹽，再與N-（1-萘基）-乙二胺偶聯(lián)生成紅色染料。在540nm波長處有最大吸收。2.干擾及消除氯胺、氯、硫代硫酸鹽、聚磷酸鈉和高鐵離子有明顯干擾。水樣呈堿性（PH>11）時，可加酚酞溶液為指示劑，滴加磷酸溶液至紅色消失。水樣有顏色或懸浮物，可加氫氧化鋁懸浮液并過濾。3.方法的適用范圍本方法適用于

3、飲用水、地表水、地下水、生活污水、和工業(yè)廢水中亞硝酸鹽的測定。最低檢出濃度為0.003mg/L;測定上限為0.20mg/L亞硝酸鹽氮.4.儀器分光光度計5.試劑實驗用水均為不含亞硝酸鹽的水1）無亞硝酸鹽的水：于蒸餾水中加入少許高錳酸鉀晶體，使呈紅色，再加氫氧化鋇（或氫氧化鈣）使呈堿性。置于全玻璃蒸餾器中蒸餾，棄去50ml初餾液，收集中間約70%不含錳的餾出液。亦可于每升蒸餾水中加1ml濃硫酸和0.2ml硫酸錳溶液（每100ml水中含36.4gMnSO4.H2O）,JIARU 13ml0.04%高錳酸鉀溶液至呈紅色，重蒸餾。2）磷酸密度=1.70g/ml。3）顯色劑：于500ml燒杯中，加入25

4、0ml水和50ml磷酸，加入20.0對-氨基苯磺酰胺，再將1.00gN-（1-萘基）-乙二胺二鹽酸鹽溶于上述溶液中，轉(zhuǎn)移至500ml容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，混勻。此溶液貯于棕色瓶中，保存在25度，至少可穩(wěn)定一個月。注意：本試劑有毒性，避免與皮膚接觸或攝入體內(nèi)。4）貯備液：稱取 1.232g 亞硝酸鈉（Na2NO2），溶 于 150ml 水中，轉(zhuǎn)移至 1000ml 容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線。每 毫升含約 0.25mg 亞硝酸鹽氮。 此溶液貯于棕色瓶中，加入 1ml 三氯甲烷，保存在 2-5，至少 穩(wěn)定一個月。貯備液的標(biāo)定如下： 在 300ml 具塞錐形瓶中，移入 50.00ml 0.050mo

5、l/L 高錳酸鉀溶 液，5ml 濃硫酸，用 50ml 無分度吸管，使下端插入高錳酸鉀溶液液面 下，加入 50.00ml 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液，輕輕搖勻，置于水浴水加熱至 70-80，按每次 10.00ml 的量加入足夠的草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，使紅色褪 去并過量，記錄草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液用量（V2 ）。然后用高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶 液滴定過量草酸鈉至溶液呈微紅色，記錄高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液總用量 （V1）。 再以 50ml 水代替亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液，如上操作，用草酸鈉 標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定高錳酸鉀溶液的濃度（c1）。按下式計算高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶 液濃度：亞硝酸鹽c1(1/5KMnO4)=0.0500 × V4 /V3按下式

6、計算亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液的濃度： 亞硝酸鹽氮(N, mg/L)=(V1c1 0.0500 × V2 ) × 7.00 × 1000/50.00=140 V1 c1 7.00×V2式中:c1-經(jīng)標(biāo)定的高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mol/L)； V1滴定亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液時，加入高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液總 量（ml）； V2-滴定亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液時，加入草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液總量 （ml）； V3滴定水時，加入高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液總量（ml）； V4滴定空白時，加入草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液總量（ml）； 7.00亞硝酸鹽氮（1/2N）的摩爾質(zhì)量（g/mol）； 50.00亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)貯

7、備液取用量（ml）； 0.0500草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（1/2Na2C2O4，mol/L）。4) 亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)中間液:分取適量亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)貯備液（使含 12.5mg 亞硝酸鹽氮），置于 250ml 容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線。此 溶液每毫升含 50.0µg 亞硝酸鹽氮。中間液貯于棕色瓶內(nèi)，保存在 2-5，可穩(wěn)定一周。 6) 亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液:取 10.00ml 亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)中間液，置于 500ml 容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線。每毫升含 1.00µg 亞硝酸鹽氮。 此溶液使用時，當(dāng)天配制。 7)氫氧化鋁懸浮液：溶解 125g 硫酸鋁鉀KAl (SO4)2·12H2O或

8、硫酸鋁NH4Al(SO4)2·12H2O于 1000ml 水中，加熱至 60，在不斷攪拌下，徐徐加入 55ml 氨水，放置約 1h 后，移入 1000ml 量筒內(nèi)，用水 反復(fù)洗滌沉淀，最后至洗滌液中不含亞硝酸鹽為止。澄清后，把上 清液盡量全部傾出，只留稠的懸浮物，最后加入 300ml 水，使用前 應(yīng)振蕩均勻.8)高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液（1/5KMnO4，0.050 mol/L）：溶解1.6g 高錳酸鉀于1200ml 水中，煮沸 0.5-1h，使體積減少到 1000ml 左右，放置過夜。用 G-3 號玻璃砂芯濾器過濾后，濾液貯存于棕色試劑瓶中避 光保存，按上述方法標(biāo)定。 9)草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（

9、1/2Na2C2O4，0.0500mol/L）：溶解經(jīng) 105烘干 2h 的優(yōu)級純無水草酸鈉 3.350g 于 750ml 水中，移入 1000ml 容量瓶 中，稀釋至標(biāo)線.6、實驗步驟（1）校準(zhǔn)曲線的繪制 依次吸取亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液0ml、1.00ml、3.00ml、5.00ml、 7.00ml及10.00ml ，至50ml比色管中，用水稀釋 至標(biāo)線，然后加入1.0 ml顯色劑 密塞，混勻。 顯色劑， 至標(biāo)線，然后加入1.0 ml顯色劑，密塞，混勻。 靜置20 min， 1cm比色皿 于波長540 nm處 比色皿， 靜置20 min， 1cm比色皿，于波長540 nm處，以 水為參比，測量

10、吸光度。 水為參比，測量吸光度。 從測得的吸光度， 從測得的吸光度，減去零濃度空白管的吸光 度后，獲得校正吸光度繪制曲線。 （2） 水樣的測定 當(dāng)水樣pH11時，可加入1滴酚酞指示液，邊攪拌邊逐滴加入（1+9）磷酸溶液，至紅剛消 失。（ 水樣如有顏色和懸浮物，加入2 ml氫氧化鋁懸浮液，攪拌、靜置、過濾， 棄去25 ml初濾液 初濾液。 棄去25 ml初濾液。 分取經(jīng)預(yù)處理的水樣入50 ml比色管中（分取經(jīng)預(yù)處理的水樣入50 ml比色管中 比色管中（如含量高，則分取適量，用水稀釋至標(biāo)線）， ），加量高，則分取適量，用水稀釋至標(biāo)線），加1.0 ml顯色劑，然后按校準(zhǔn)曲線繪制的相同的步驟操作，測量吸光度。經(jīng)空白校正后， 步驟操作，測量吸光度。經(jīng)空白校正后，從校準(zhǔn)曲線上查得亞硝酸鹽氮含量。準(zhǔn)曲線上查得亞硝酸鹽氮含量。 （3）空白試驗用實驗用水代替水樣，用實驗用水代替水樣，按相同步驟進行全程測定。7、計算亞硝酸鹽氮（mg/L）亞硝酸鹽氮（N，mg/L）= m/V m由水樣測得的校正吸光度，從校準(zhǔn)曲線 由水樣測得的校正吸光度 由水樣測得的校正吸光度上查得相應(yīng)的亞硝酸鹽氮含量（g）；V水樣體積（ml）。 8、注意事項如水樣經(jīng)預(yù)處理后，還有顏色時，則分取兩 如水樣經(jīng)預(yù)處理后，還有顏色時，份體積相同的經(jīng)預(yù)處理的水樣，一份加1.0ml 1.0ml顯色 份體積