兩種心臟手術(shù)方式對中性粒細(xì)胞 CD11b、丙二醛及心肌酶影響

1、兩種心臟手術(shù)方式對中性粒細(xì)胞 CD11b、丙二醛及心肌酶影響的對比研究        【摘要】     目的 探討停跳和不停跳心內(nèi)直視手術(shù)對外周血中性粒細(xì)胞（PMN） CD11b表達(dá)、血漿丙二醛（MDA）和血清心肌酶水平的影響。方法 32例先天性心臟病患者分為不停跳組（n=15）和停跳組（n=17）。在不同時間點采靜脈血測定PMN CD11b表達(dá)、血漿MDA水平和血清心肌酶水平。結(jié)果 兩組PMN CD11b和血漿MDA水平在體外循環(huán)開始后均顯著升高，在體外循環(huán)結(jié)束后

2、停跳組顯著高于不停跳組。術(shù)后血清心肌酶水平停跳組顯著高于不停跳組。結(jié)論 體外循環(huán)本身可導(dǎo)致PMN CD11b和血漿MDA的升高，而缺血再灌注損傷可使PMN CD11b、血漿MDA進(jìn)一步增高；不停跳手術(shù)的心肌保護(hù)效果優(yōu)于停跳手術(shù)。     【關(guān)鍵詞】  心臟不停跳；缺血再灌注損傷；中性粒細(xì)胞；CD11b    Comparative Study of the Effection to the Expression of  Polymorphonuclear Neutrophil CD11b, Pl

3、asma MDA and Serum Myocardiac Enzymes in Peripheral Blood by Different Open Heart Operation StyleYAN Zhi-jun,ZHAO Zhi-yong,ZHAO Yan-li,HE Rong-hai,GAO Yong-qian,YU Xin-jiang,XIE Shu-fang,FENG Guang-xing(Department of Cardiovascular Surgery,HeBei People's Provincial Hospital,Hebei ShiJiazhuang 05

4、0051,China)Abstract: OBJECTIVE   To observe the influence of the open heart operation under arrested-heart and on-pump beating-heart to the expression of polymorphonuclear neutrophil (PMN) CD11b, plasma malondialdehyde （MDA） concentration and myocardiac enzymes in peripheral blood. METHODS

5、  Thirty-two patients underwent open heart operation were divided into two groups as they were performed under on-pump beating-heart (Group 1, n=15) or arrested-heart (Group 2, n=17). The venous blood was drawn to detect the expression of PMN CD11b, plasma MDA concentration and serum myocardiac

6、 enzymes. RESULTS  Expression of PMN CD11b and plasma MDA concentration were statistically higher after extracorporeal circulation（ECC） compared with preoperative time in both groups. But it was higher of group 2 than that of group 1 after ECC was stopped. Concentration of  serum myocardia

7、c enzymes of group 1 were higher  than that  of group 2. CONCLUSION  ECC itself can cause the up-regulation of PMN CD11b and increase of plasma MDA concentration，but the ischemia reperfusion injury of myocardium can cause further increases of them. The myocardium protective effect of

8、the operation under on-pump beating-heart was better than arrested-heart.Key words：  On-pump beating-heart; Polymorphonuclear neutrophil; Ischemia reperfusion injury; CD11b炎性反應(yīng)和脂質(zhì)過氧化均參與心肌缺血再灌注損傷過程。炎性反應(yīng)中，白細(xì)胞同靶細(xì)胞的黏附是其產(chǎn)生吞噬作用的基礎(chǔ)，這一過程有賴于有關(guān)的黏附分子的表達(dá)，特別是中性粒細(xì)胞(polymorphonuclear neutrophil, PMN)CD11b 1-3

9、；脂質(zhì)過氧化的終產(chǎn)物是丙二醛(malondialdehyde, MDA)。二者能直接反應(yīng)心肌缺血再灌注損傷的程度。但體外循環(huán)（extracorporeal circulation，ECC）本身對PMN CD11b和血漿MDA水平亦有影響4-7，因此在心內(nèi)直視手術(shù)中二者所受的影響是雙重的。    為此我們比較在停跳和不停跳兩種心臟手術(shù)中，外周血PMN CD11b表達(dá)、血漿MDA和血清心肌酶水平的差別，探討其變化規(guī)律和心肌保護(hù)效果。1  資料與方法1.1  病例選擇  2000年5月至2005年12月32例在我科擇期行先天性心臟病手術(shù)的患

10、者，其中停跳組17例，均為室間隔缺損，年齡228歲；不停跳組15例，包括室間隔缺損8例，房間隔缺損3例，房間隔缺損合并部分性肺靜脈異位引流2例，肺動脈瓣狹窄2例，年齡1.2534歲。   1.2  麻醉和ECC  兩組均于術(shù)前30 min肌注杜冷丁1 mg/kg，東莨菪堿0.01 mg/kg。麻醉誘導(dǎo)為芬太尼5 g/kg，咪唑安定0.15 mg/kg，萬可松1.5mg/kg，麻醉維持用芬太尼2530 g/kg，間斷應(yīng)用萬可松、異丙酚、恩氟烷吸入麻醉。ECC均采用Sarns 7400人工心肺機(jī)，科威-87鼓泡式氧合器，林格液及血定安預(yù)充，常規(guī)肝素抗凝，保持

11、激活全血凝固時間（ACT）>480 s，流量100120 ml/（kg·min），中度血液稀釋。停跳組在主動脈根部間斷灌注St.Thomas液，淺中度低溫，維持血壓在(4060) mmHg；不停跳組不降溫，維持血壓在(5060) mmHg。術(shù)畢魚精蛋白用量同ECC期間肝素用量之比為11。1.3  指標(biāo)檢測 1.3.1  PMN CD11b 測定  采用單克隆抗體法，分別于麻醉后（T1）、ECC開始后30 min（T2）、ECC結(jié)束后30min（T3）和4 h（T4）采外周血0.5 ml，加肝素75 U/ml抗凝（肝素化血不抗凝），用PE標(biāo)

12、記的鼠抗人CD11b單克隆抗體（美國Pharmingen公司）標(biāo)記，當(dāng)天用FACS Vantage 流式細(xì)胞儀（美國Beckton-Dickinson公司）獲取細(xì)胞數(shù)10000個，用CELL QUEST軟件進(jìn)行分析，測出其平均熒光強(qiáng)度（Mean Fluorescence Intensity, MFI）。因?qū)偌?xì)胞學(xué)方法，故不再進(jìn)行濃度校正。1.3.2   血漿MDA 水平  分別于T1、T2和T3取靜脈血1.5 ml，加入肝素75 U/ml抗凝（肝素化血不抗凝）。離心分離血漿后放-80冰箱凍存。血漿MDA水平檢測用硫代巴比妥酸比色法（試劑盒由南京建成生物工程公司提供

13、）。由于ECC期間血液被稀釋，故T2和T3時間點的MDA水平根據(jù)相應(yīng)紅細(xì)胞壓積（Hct）用以下公式校正：MDA校正值=（麻醉后Hct/該時間點Hct）× MDA實際值1.3.3  血清心肌酶水平  ECC結(jié)束后10 h取靜脈血2 ml送生化室測定血清心肌酶水平，包括乳酸脫氫酶（LDH）、-羥丁酸脫氫酶（HBDH）、天冬氨酸氫基轉(zhuǎn)移酶（AST）、肌酸磷酶激酶（CK）和肌酸磷酸激酶同工酶（CKMB）。1.4  統(tǒng)計學(xué)處理  應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s )表示。組內(nèi)比較用配對t檢驗；組

14、間比較用兩個樣本均數(shù)的t檢驗。P<0.05為差別有顯著性，P<0.01為差別有極顯著性。2  結(jié)果2.1  一般臨床資料  兩組性別、年齡、體重及ECC時間均無顯著性差異，見表1。2.2  PMN CD11b表達(dá)  兩組在T2、T3和T4時間點均顯著升高，在T3達(dá)高峰，并在T4開始下降，但仍高于T1時；兩組在T1和T2時比較無差異，但停跳組PMN CD11b表達(dá)在T3和T4明顯高于不停跳組，見表2。2.3  血漿MDA水平  兩組在T2和T3均顯著升高，停跳組在T3時明顯高于不停跳組，見表3。2.4 

15、血清心肌酶水平  ECC結(jié)束后10 h血清心肌酶譜各酶水平停跳組要顯著高于不停跳組，見表4。表1  兩組患者一般狀況比較（略）表2  兩組PMN CD11b（平均熒光強(qiáng)度, MFI）比較 （略）表3  兩組血漿MDA水平比較（略）表4  兩組血清心肌酶水平（略）3  討論3.1  關(guān)于PMN CD11b  兩組ECC 30 min時PMN CD11b均高于麻醉后，且無明顯組間差異，證實了ECC本身對其的影響，且其影響是同等的。有人發(fā)現(xiàn)人體血液同PVC管道接觸、血液稀釋、改變預(yù)充液pH值均可引起PMN CD11b上調(diào)

16、和L-Selectin下調(diào)4，7-9，但并無報道能夠肯定溫度變化會對黏附分子表達(dá)產(chǎn)生影響。ECC本身能夠激活許多炎性介質(zhì)，造成全身炎性反應(yīng)綜合征，也造成PMN CD11b的激活。    但是國內(nèi)外有報道說明，ECC前、后PMN CD11b峰值并不在ECC過程中，而在ECC結(jié)束后，并認(rèn)為是由于心肺的缺血再灌注損傷所致，我們的研究結(jié)果與此相符 10-11。這是由于停跳組產(chǎn)生心肌缺血再灌注過程，使PMN進(jìn)一步活化，因而ECC結(jié)束后PMN CD11b表達(dá)高于不停跳組。依賴于PMN CD11b的高表達(dá)，PMN得以游出毛細(xì)血管，同心肌組織的細(xì)胞間黏附因子（ICAM-1）發(fā)生黏

17、附，進(jìn)而造成組織損傷，因而PMN CD11b表達(dá)的強(qiáng)度同心肌損傷的程度是正相關(guān)的。不停跳組ECC結(jié)束后PMN CD11b表達(dá)低于停跳組，表明前者心肌保護(hù)效果好于后者。3.2  關(guān)于血漿MDA水平  由于ECC過程中血液稀釋，故ECC過程中的MDA數(shù)據(jù)應(yīng)進(jìn)行校正12。我們的研究發(fā)現(xiàn)，ECC 30 min時血漿MDA水平高于術(shù)前，可說明ECC本身對MDA的影響。以往有報道指出，心內(nèi)直視手術(shù)中心肌的缺血再灌注損傷使MDA產(chǎn)生增多 12，我們的研究印證了這一觀點，同時表明不停跳組的心肌保護(hù)效果好于停跳組。3.3  關(guān)于血清心肌酶  血清心肌酶是心肌損傷的特異性指

18、標(biāo)，本研究證實，不停跳組因術(shù)中有持續(xù)的冠狀動脈血液灌注，心肌損傷較停跳組輕，同以往報道相符13。4  結(jié)論    兩種手術(shù)中，ECC本身可導(dǎo)致PMN CD11b和血漿MDA的升高，其影響是同等的；由于缺血再灌注損傷的存在使PMN CD11b和血漿MDA在停跳組更高；不停跳手術(shù)的心肌保護(hù)效果比停跳手術(shù)更好。    【參考文獻(xiàn)】  1 Kawamura T, Kadosaki M, Nara N,et al. Nicorandil attenuates NF-kappaB activation, adhesi

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