根治幽門螺桿菌對(duì)胃粘膜上皮p53蛋白表達(dá)的影響

1、    根治幽門螺桿菌對(duì)胃粘膜上皮p53蛋白表達(dá)的影響        摘要目的研究幽門螺桿菌(Hp)根除治療對(duì)p53蛋白表達(dá)的影響，探討Hp與胃癌的關(guān)系。方法利用免疫組化染色對(duì)206例胃粘膜活檢組織，包括正常胃粘膜、Hp陰性胃癌前各階段病變、Hp陽性胃癌前各階段病變Hp根除治療前后及胃癌，進(jìn)行p53蛋白表達(dá)的分析。結(jié)果正常胃粘膜未見p53蛋白表達(dá)。Hp陽性胃癌前階段病變p53蛋白表達(dá)陽性率顯著高于正常胃粘膜及Hp陰性胃癌前階段病變，其中Hp陽性腸上皮化生p53蛋白表達(dá)陽性率顯

2、著高于Hp陰性相應(yīng)病變組，低于Hp陽性異型增生組。Hp陽性胃癌前階段病變Hp根除治療后，其p53蛋白表達(dá)陽性率顯著降低。結(jié)論Hp根除治療后，胃癌前階段病變p53蛋白表達(dá)陽性率明顯降低；Hp感染可促進(jìn)突變型p53基因表達(dá)增強(qiáng)。關(guān)鍵詞幽門螺桿菌；胃癌前病變；p53蛋白中分類號(hào)文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼B Effect of the eradication of Helicobacter pylori on p53 protein expression in gastric epithelialZHANG Zhong,YUAN Yuan,GAO Hua,et al.(Cancer Institute of Chin

3、a Medical University,Shenyang,110001.)AbstractObjectiveTo investigate the effect of the eradication of Helicobacter pylorei (Hp) on p53 protein expression,and understand the relationship between Hp and gastric carcinoma.Methodsp53 protein immunohistochemical staining were used in the research.Total

4、206 gastric mucosal biopsy specimens,including normal gastric mucosa,Hp-negative gastric precancerous lesions,Hp-positive gastric precancerous lesions before and after eradication of Hp and gastric carcinoma,were studied.Resultsp53 protein positive experession was not found in normal gastric mucosa.

5、Positivity of p53 protein expression in Hp-positive gastric precancerous lesions was significantly higher than that in normal gastric mucosa and in Hp-negative gastric precancerous lesions;Positivity of p53 expression in Hp-positive metaplasia was significantly higher than that in Hp-negative metapl

6、asia,and lower than that in Hp-positive dysplasia;After eradication of Hp,positivity of p53 experession significantly decreased in Hp-positive gastric precancerous lesions.ConclusionsAfter eradication of Hp,positivity of p53 experession in gastric precancerous lesions significantly decreased.It was

7、supposed that Hp infection caused mutated p53 gene expression to increase.Key wordsHelicobacter pylori;gastric precancerous lesions;p53 proteinp53基因是研究最廣泛的抑癌基因，該基因的突變與人類一半以上的腫瘤密切相關(guān)。有關(guān)胃癌p53基因突變和表達(dá)的研究國內(nèi)外已有較多報(bào)道，但幽門螺桿菌(Helicobacter pylori Hp)感染及其根除治療對(duì)胃癌前病變p53蛋白表達(dá)的影響則未見報(bào)道。本研究采用免疫組織化學(xué)染色對(duì)胃癌前各階段病變中Hp陽性病變Hp根

8、除治療前后及Hp陰性病變胃粘膜上皮和胃癌組織p53蛋白表達(dá)進(jìn)行了分析，旨在探討Hp根除治療對(duì)胃癌前階段病變中p53蛋白表達(dá)的影響，以期揭示Hp與胃癌的病因?qū)W關(guān)系。材料和方法一、觀察對(duì)象本組觀察對(duì)象選自遼寧省莊河胃癌高發(fā)區(qū)高危人群接受胃鏡篩檢者，共206例，其中包括基本正常胃粘膜20例、慢性淺表性胃炎50例、腸上皮化生53例、異型增生51例和胃癌32例。經(jīng)HE染色及PCR檢測(cè)，確定觀察對(duì)象有無Hp感染。上述兩法皆陽性者，判為Hp陽性，而皆陰性者判為Hp陰性。對(duì)Hp陽性者給予有機(jī)鉍劑(胃敏膠囊)、甲硝唑、羥氨芐青霉素三聯(lián)藥物治療，治療結(jié)束后復(fù)查胃鏡。停藥4周后Hp仍保持陰性者為Hp根除。二、實(shí)驗(yàn)方

9、法免疫組化染色：采用SP法。SP試劑盒為美國ZYMED公司產(chǎn)品；第一抗體為福州邁新公司即用型p53單克隆抗體。染色前切片于0.05mol/L檸檬酸液中進(jìn)行微波抗原修復(fù)。以PBS代替一抗作陰性對(duì)照。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用卡方檢驗(yàn)。結(jié)果一、Hp感染對(duì)胃粘膜上皮p53蛋白表達(dá)的影響p53蛋白陽性產(chǎn)物局限于細(xì)胞核內(nèi)，在基本正常胃粘膜中未見表達(dá)。Hp陽性胃癌前階段病變包括慢性淺表性胃炎、腸上皮化生和異型增生，其p53蛋白表達(dá)陽性率顯著高于基本正常胃粘膜(P<0.01)和Hp陰性胃癌前階段病變(P<0.05)，顯著低于胃癌的p53蛋白表達(dá)陽性率(P<0.01)。其中，Hp陽性腸上皮化生p53蛋白

10、表達(dá)陽性率顯著高于基本正常胃粘膜(P<0.01)和Hp陰性相應(yīng)病變組(P<0.05)，而Hp陰性腸上皮化生與基本正常胃粘膜間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，Hp陽性異型增生p53蛋白表達(dá)陽性率高于Hp陰性相應(yīng)病變組(P>0.05)。由腸上皮化生至胃癌，p53蛋白表達(dá)陽性率呈現(xiàn)遞增趨勢(shì)。見表1、2。表1Hp感染與不同胃粘膜上皮p53蛋白表達(dá)的關(guān)系組別總例數(shù)Hp例數(shù)p53蛋白表達(dá)陽性例(%)p53蛋白表達(dá)陰性例(%)基本正常胃粘膜20200(0.0)20(100.0)慢性淺表性胃炎50+280(0.0)28(100.0)-220(0.0)22(100.0)腸上皮化生53+3214(43.8)?18

11、(56.2)-212(9.5)19(90.5)異型增生51+3015(50.0)15(50.0)-218(38.1)13(61.9)胃癌323224(75.0)8(25.0)?與基本正常胃粘膜相比P<0.01；與Hp陰性相應(yīng)病變相比P<0.05；與胃癌相比P<0.05 表2Hp感染對(duì)胃癌前階段病變p53蛋白表達(dá)的影響組別例數(shù)p53蛋白表達(dá)陽性例(%)p53蛋白表達(dá)陰性例(%)基本正常胃粘膜200(0.0)20(100.0)Hp陰性胃癌前階段病變6410(15.6)54(84.4)Hp陽性胃癌前階段病變9029(32.2)*61(67.8)胃癌3224(75.0)8(25.0)

12、*與基本正常胃粘膜相比P<0.01；與Hp陰性胃癌前階段病變相比P<0.05；與胃癌相比P<0.05 二、Hp根除前后胃癌前階段病變p53蛋白表達(dá)的變化Hp陽性胃癌前階段病變經(jīng)Hp根除治療后，其p53蛋白表達(dá)陽性率顯著低于根除治療前(P<0.05)，與Hp陰性胃癌前階段病變無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。詳見表3。表3Hp根除前后胃癌前階段病變p53蛋白表達(dá)的變化Hp根除組Hp未根除組治療前Hp+治療后Hp-治療前Hp+治療后Hp+例數(shù)45454545p53蛋白表達(dá)陽性例(%)19(42.2)8(17.8)*10(22.2)12(26.7)p53蛋白表達(dá)陰性例(%)26(57.8)37(

13、82.2)35(77.8)33(73.3)*與Hp根除組治療前相比P<0.05 胃癌前階段病變包括慢性淺表性胃炎、腸上皮化生和異型增生討論流行病學(xué)資料表明：Hp感染與胃癌前病變乃至胃癌有密切關(guān)系1，但Hp的致癌機(jī)理至今尚未闡明。p53基因是位于17p染色體，有11個(gè)外顯子的腫瘤抑制基因。在正常細(xì)胞中，野生型p53基因參與細(xì)胞周期的調(diào)控，阻止細(xì)胞從G1期進(jìn)入S期，對(duì)細(xì)胞分裂和增殖起負(fù)調(diào)節(jié)作用。它編碼產(chǎn)生一個(gè)分子量為53000道爾頓的核磷酸蛋白23。利用免疫組化法檢測(cè)p53蛋白陽性可提示突變型p53基因存在。在正常胃粘膜中未見p53蛋白表達(dá)；Hp陽性胃癌前階段病變p53蛋白表達(dá)陽性率顯著高于

14、正常胃粘膜和Hp陰性胃癌前階段病變。在胃癌前各階段病變中，Hp陽性腸上皮化生的p53蛋白表達(dá)陽性率顯著高于正常胃粘膜、Hp陽性慢性淺表性胃炎和Hp陰性相應(yīng)病變組；Hp陽性異型增生p53蛋白表達(dá)陽性率高于Hp陽性腸上皮化生和Hp陰性相應(yīng)病變組，顯著低于胃癌。我們發(fā)現(xiàn)，Hp陽性胃癌前階段病變經(jīng)Hp根除治療后，其p53蛋白表達(dá)陽性率顯著降低，接近于Hp陰性胃癌前階段病變p53蛋白表達(dá)的狀態(tài)。這些表達(dá)特點(diǎn)提示，Hp感染可促進(jìn)突變型p53基因表達(dá)增強(qiáng)，并且始于Correa的“正常胃粘膜慢性淺表性胃炎腸上皮化生異型增生胃癌”這一胃癌發(fā)生模式中的早期階段腸上皮化生；Hp根除治療使胃癌前階段病變p53蛋白表達(dá)

15、陽性率降低。研究指出Hp促進(jìn)p53基因突變和表達(dá)增強(qiáng)機(jī)制為：Hp感染后可導(dǎo)致胃粘膜一氧化氮合成酶增多、氧自由基釋放4，進(jìn)而引起DNA損傷，p53基因突變5。隨著p53基因突變量和表達(dá)量的積累以及其它致癌因素的共同作用，細(xì)胞可以無限生長(zhǎng)，細(xì)胞凋亡減少或不凋亡6，最終導(dǎo)致胃癌發(fā)生。表明Hp感染可能是導(dǎo)致胃癌發(fā)生的一個(gè)重要因素。因此預(yù)防Hp感染，早期進(jìn)行Hp根除治療，對(duì)于降低胃癌發(fā)生具有現(xiàn)實(shí)意義。作者簡(jiǎn)介：張忠，(1968-)，男，遼寧沈陽人，碩士，講師，從事胃癌的綜合防治研究。張忠(中國醫(yī)科大學(xué)腫瘤研究所第三研究室沈陽 110001)袁媛(中國醫(yī)科大學(xué)腫瘤研究所第三研究室沈陽 110001)高華(

16、中國醫(yī)科大學(xué)腫瘤研究所第三研究室沈陽 110001)吳燁秋(中國醫(yī)科大學(xué)腫瘤研究所第三研究室沈陽 110001)董明(中國醫(yī)科大學(xué)腫瘤研究所第三研究室沈陽 110001)王蘭(中國醫(yī)科大學(xué)腫瘤研究所第三研究室沈陽 110001)王梅先(中國醫(yī)科大學(xué)腫瘤研究所第三研究室沈陽 110001)孫俐(沈陽市皇姑區(qū)中心醫(yī)院中醫(yī)科)參考文獻(xiàn)1，Correa P.Human gastric carcinogenesis:a multistep and multifactorial process-first American cancer society award lecture on cancer ep

17、idemiology and prevention.Cancer Res,1992；52:6735-402，Lauwers GY.p53 expression in precancerous gastric lesions:An immunohistochemical study of pAb 1801 monoclonal antibody on adenomatous and hyperplastic gastric polyps.Am J Pathol,1993；88(11):1916-213，Joypaul BV,Newman EL.Expression of p53 protein in normal,dysplastic and malignant gastric mucosa-an immunohistochemical study.J Pathol,1993；170(3):279-844，Moss SF,Calam J,Aagrwal B,et al.Induction of gastric epit