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文檔簡介

1、專題檢測A卷(時(shí)間:45分鐘滿分:100分)考查知識點(diǎn)及角度難度及題號基礎(chǔ)中檔稍難基因工程的基本操作1、2、3、4、6、7、91315基因工程的應(yīng)用5、8、10蛋白質(zhì)工程1112、14一、選擇題(共12小題,每小題5分,共60分)1下列關(guān)于基因工程的敘述,錯(cuò)誤的是()。A目的基因和受體細(xì)胞均可來自動、植物或微生物B限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無生物活性D載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)解析人胰島素原基因中有內(nèi)含子存在,因此在大腸桿菌中表達(dá)后無生物活性。載體上的抗性基因有處于篩選含重組DNA的細(xì)胞,但由

2、于它和目的基因是相互獨(dú)立的,并不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)。答案D2下列關(guān)于限制酶的說法正確的是()。A限制酶廣泛存在于各種生物中,微生物中很少分布B一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列C不同的限制酶切割DNA后都會形成黏性末端D限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氫鍵解析此題主要考查限制酶的有關(guān)知識。限制酶主要是從原核生物中分離純化出來的,并不是廣泛存在于各種生物中,一種限制酶能識別雙鏈DNA的某種特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,DNA分子經(jīng)限制酶切割形成的末端有兩種形式黏性末端和平末端。答案B3工程菌是指()。A用物理或化學(xué)方法,誘發(fā)菌類自身某些基因

3、得到高效表達(dá)的菌類細(xì)胞株系B用遺傳工程的方法,使同種不同株系的菌類雜交,得到的新細(xì)胞株系C用基因工程的方法,使外源基因得到高效率表達(dá)的菌類細(xì)胞株系D從自然界中選取能迅速增殖的菌類解析工程菌是指用基因工程的方法,使外源基因得到高效率表達(dá)的菌類細(xì)胞株系。本題A項(xiàng)是誘變育種的例子;B項(xiàng)是雜交育種的例子;D項(xiàng)是最傳統(tǒng)的育種方式選擇育種。故正確答案為C。答案C4一個(gè)雙鏈DNA經(jīng)一限制酶切割一次形成的黏性末端個(gè)數(shù)為()。A1 B2 C3 D4解析限制性核酸內(nèi)切酶只能識別雙鏈DNA上特定的核苷酸序列,并在識別的特定部位切割,將每條鏈切割點(diǎn)處脫氧核糖與磷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。因而切割一次后會形成一個(gè)切口,每

4、條鏈上形成一個(gè)黏性末端,共切出兩個(gè)黏性末端。答案B5下表有關(guān)基因表達(dá)的選項(xiàng)中,不可能的是()?;虮磉_(dá)的細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物A細(xì)菌抗蟲蛋白基因抗蟲棉葉肉細(xì)胞細(xì)菌抗蟲蛋白B人酪氨酸酶基因正常人皮膚細(xì)胞人酪氨酸酶C動物胰島素基因大腸桿菌工程菌細(xì)胞動物胰島素D兔血紅蛋白基因兔成熟紅細(xì)胞兔血紅蛋白解析抗蟲棉葉肉細(xì)胞中存在細(xì)菌抗蟲蛋白基因,細(xì)菌抗蟲蛋白基因能夠表達(dá)產(chǎn)生細(xì)菌抗蟲蛋白;正常人皮膚細(xì)胞中含有人酪氨酸酶基因,人酪氨酸酶基因能夠表達(dá)產(chǎn)生人酪氨酸酶;大腸桿菌工程菌細(xì)胞存在動物胰島素基因,動物胰島素基因能夠表達(dá)產(chǎn)生動物胰島素;兔成熟紅細(xì)胞中無細(xì)胞核及各種細(xì)胞器,所以無兔血紅蛋白基因不能表達(dá)產(chǎn)生兔血紅蛋白。答案

5、D6在基因工程中,為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞常采用土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,在土壤農(nóng)桿菌中常含有一個(gè)Ti質(zhì)粒。某科研小組欲將某抗蟲基因?qū)肽持参铮铝蟹治鲥e(cuò)誤的是()。ATi質(zhì)粒含有對宿主細(xì)胞生存具有決定性作用的基因,是基因工程中重要的載體B用Ca2處理細(xì)菌是重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌中的重要方法C重組Ti質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌成功感染植物細(xì)胞,可通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)將該細(xì)胞培養(yǎng)成具有抗蟲性狀的植物D若能夠在植物細(xì)胞中檢測到抗蟲基因,則說明將重組質(zhì)粒成功地導(dǎo)入到了受體細(xì)胞解析Ti質(zhì)粒是基因工程中重要的載體,不含有對宿主細(xì)胞生存具有決定性作用的基因;用Ca2處理細(xì)菌可增加細(xì)胞壁的通透性,是重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)

6、桿菌中的重要方法;轉(zhuǎn)基因成功的植物細(xì)胞,可通過植物組織培養(yǎng)技術(shù),獲得轉(zhuǎn)基因植物。在植物細(xì)胞中檢測到抗蟲目的基因,說明目的基因已成功導(dǎo)入,但不能證明其能表達(dá)。答案A7基因工程技術(shù)也稱DNA重組技術(shù),其實(shí)施必須具備的4個(gè)必要條件是()。A工具酶、目的基因、載體、受體細(xì)胞B重組DNA、RNA聚合酶、限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶C模板DNA、信使RNA、質(zhì)粒、受體細(xì)胞D目的基因、限制性內(nèi)切酶、載體、受體細(xì)胞解析基因工程是按照人們的意愿,把一種生物的個(gè)別基因(目的基因)復(fù)制出來,加以修飾改造,然后放到另一種生物的細(xì)胞(受體細(xì)胞)里,定向地改造生物的遺傳性狀?;虿僮鞯墓ぞ呙甘窍拗菩詢?nèi)切酶和DNA連接酶,基

7、因進(jìn)入受體細(xì)胞的運(yùn)輸工具是載體。答案A8干擾素是治療癌癥的重要藥物,它必須從血液中提取,每升人血中只能提取0.5 g,所以價(jià)格昂貴。美國加利福尼亞的某生物制品公司用如下方法(如圖所示)生產(chǎn)干擾素。從上述方式中可以看出該公司生產(chǎn)干擾素運(yùn)用的方法是()。A個(gè)體間的雜交 B基因工程C蛋白質(zhì)工程 D器官移植解析從圖中可以看出整個(gè)過程為將人的淋巴細(xì)胞中控制干擾素合成的基因與質(zhì)粒結(jié)合后導(dǎo)入酵母菌,并從酵母菌產(chǎn)物中提取干擾素,這項(xiàng)技術(shù)為基因工程。答案B9在基因工程中,若受體細(xì)胞是細(xì)菌,則用來處理該細(xì)菌以增強(qiáng)細(xì)胞壁通透性的化學(xué)試劑是()。A氯化鈉 B聚乙二醇 C氯化鈣 D二苯胺解析用CaCl2處理細(xì)菌,可增強(qiáng)

8、細(xì)胞壁的通透性,以使其成為感受態(tài)細(xì)胞,從而便于接受外源DNA分子。答案C10下圖表示基因工程中獲取水稻某目的基因的不同方法。下列相關(guān)敘述中正確的是()。A這三種方法都用到酶,都是在體外進(jìn)行B堿基對的排列順序均相同C圖示a、b、c三種方法均屬人工合成法D方法a不遵循中心法則解析由圖示可知a為逆轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因,用到逆轉(zhuǎn)錄酶;b為直接從生物體獲得目的基因,用到限制酶;c為用PCR技術(shù)擴(kuò)增獲取目的基因,用到Taq酶,且三種方法均在生物體外進(jìn)行,故A正確;圖示中為逆轉(zhuǎn)錄法,為直接分離目的基因,為人工合成法。答案A11上海醫(yī)學(xué)遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶人白蛋白的轉(zhuǎn)基因牛,他們還研究出一種可大大提高

9、基因表達(dá)水平的新方法,使轉(zhuǎn)基因動物乳汁中的藥物蛋白含量提高30多倍。標(biāo)志著我國轉(zhuǎn)基因研究向產(chǎn)業(yè)化的目標(biāo)又邁進(jìn)了一大步。下列有關(guān)的敘述中,正確的是()。A所謂“提高基因表達(dá)水平”是指設(shè)法使牛的乳腺細(xì)胞中含有更多的人白蛋白基因B可將白蛋白基因?qū)肱5穆鸭?xì)胞中,通過組織培養(yǎng)形成轉(zhuǎn)基因牛C人們只在轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中才能獲取人白蛋白,是因?yàn)橹辉谵D(zhuǎn)基因牛的乳腺細(xì)胞中才有人白蛋白基因D運(yùn)用基因工程技術(shù)讓牛合成人白蛋白,該技術(shù)將導(dǎo)致定向變異解析“提高基因表達(dá)水平”是指設(shè)法使牛的乳腺細(xì)胞中的人白蛋白基因合成出更多的蛋白質(zhì)。動物細(xì)胞的全能性變窄,用牛的卵細(xì)胞不能培養(yǎng)形成轉(zhuǎn)基因牛。轉(zhuǎn)基因牛的細(xì)胞中都含有人白蛋白基因,

10、人們只在轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中才能獲取人白蛋白,是因?yàn)槿税椎鞍谆蛑辉谵D(zhuǎn)基因牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)。答案D12基因工程與蛋白質(zhì)工程的區(qū)別是()。A基因工程需對基因進(jìn)行分子水平操作,蛋白質(zhì)工程不對基因進(jìn)行操作B基因工程合成自然界已存在的蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)工程可以合成自然界不存在的蛋白質(zhì)C基因工程是分子水平操作,蛋白質(zhì)工程是細(xì)胞水平(或性狀水平)的操作D基因工程完全不同于蛋白質(zhì)工程解析蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程,是從分子水平對蛋白質(zhì)進(jìn)行改造設(shè)計(jì),然后直接對相應(yīng)的基因進(jìn)行修飾加工甚至人工進(jìn)行基因合成,從而對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。而基因工程

11、只是將外源基因?qū)肓硪簧矬w內(nèi),并使之表達(dá),體現(xiàn)人類所需的性狀,或者獲取所需的產(chǎn)品,因此,基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界中已存在的蛋白質(zhì)。答案B二、非選擇題(共3小題,共40分)13(12分)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法。下圖為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法示意圖,請據(jù)圖回答問題。(1)Ti質(zhì)粒多存在于細(xì)菌中,它是能自我復(fù)制的_。(2)獲取外源基因(目的基因)需要限制酶的參與,而目的基因在重組過程中需要_酶的參與,并依據(jù)堿基_原則進(jìn)行重組。(3)Ti質(zhì)粒原存在于_中,其上的T­DNA具有可轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞的_上的特點(diǎn),因此攜帶外源基因的DNA片段必須插入到_部位。(

12、4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法適于將目的基因?qū)隷和祼子植物,而不易于感染大多數(shù)_。(5)若將相關(guān)的目的基因?qū)雱游锛?xì)胞或微生物細(xì)胞則常采用_和_。解析將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法多種多樣,應(yīng)根據(jù)受體細(xì)胞的類型和目的基因的特點(diǎn)分別采用相應(yīng)的方法。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法適于將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞,而顯微注射技術(shù)和Ca2處理法感受態(tài)細(xì)胞法分別適于將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞和微生物細(xì)胞。答案(1)小型環(huán)狀DNA分子(2)DNA連接互補(bǔ)配對(3)農(nóng)桿菌細(xì)胞質(zhì)染色體DNAT­DNA片段(內(nèi)部)(4)雙子葉植物單子葉植物(5)顯微注射技術(shù)Ca2處理法感受態(tài)細(xì)胞法14(12分)2011年11月,武漢大學(xué)利用細(xì)菌將人的血清白蛋

13、白基因?qū)胨倔w內(nèi),借助水稻合成了人的血清白蛋白,這種蛋白質(zhì)和人體自然產(chǎn)生的這類物質(zhì)是完全一致的,這一成果轟動了生物界。結(jié)合圖示回答轉(zhuǎn)基因水稻培育過程的相關(guān)問題。(1)限制酶Mun 和限制酶EcoR的識別序列及切割位點(diǎn)分別是CAATTG和GAATTC。為保證重組質(zhì)粒表達(dá)載體的準(zhǔn)確構(gòu)建,應(yīng)該怎樣操作?_,_,_。(2)過程常用的細(xì)菌是_。(3)經(jīng)歷的生理過程主要有_和_兩個(gè)階段。培育出轉(zhuǎn)基因水稻完整個(gè)體所依據(jù)的生物學(xué)原理是_。(4)基因工程的最后步驟是目的基因的檢測與鑒定,在此步驟可對培育的植株進(jìn)行分子水平的檢測,可檢測的物質(zhì)有_、_、_。解析(1)目的基因的兩側(cè)是限制酶EcoR的識別序列,因此

14、需用限制酶EcoR 切割含目的基因的DNA分子;但是若用限制酶EcoR切割質(zhì)粒,會破壞標(biāo)記基因,因此,需用限制酶Mun 切割質(zhì)粒;用這兩種酶切出的黏性末端相同,因此可用DNA連接酶連接目的基因和質(zhì)粒。(2)將表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,因此常用的細(xì)菌是農(nóng)桿菌。(3)過程是組織培養(yǎng)獲得完整植株的過程,因此主要的過程是脫分化獲得愈傷組織,經(jīng)再分化獲得胚狀體。轉(zhuǎn)基因植物的培育體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性。(4)目的基因的檢測與鑒定在分子水平上來看,應(yīng)進(jìn)行目的基因、轉(zhuǎn)錄出的mRNA和翻譯出的蛋白質(zhì)三種物質(zhì)的檢測。答案(1)用限制酶Mun 切割質(zhì)粒用限制酶EcoR 切割含目的基因的DNA分

15、子用DNA連接酶連接目的基因和質(zhì)粒(2)農(nóng)桿菌(3)脫分化再分化植物細(xì)胞的全能性(4)人血清白蛋白基因人血清白蛋白基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA人血清白蛋白15(16分)(2011·濰坊)已知SARS是由一種RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原,在SARS病人康復(fù)后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預(yù)防SARS病毒的疫苗,開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下:(1)實(shí)驗(yàn)步驟所代表的反應(yīng)過程是_。(2)步驟構(gòu)建重組表達(dá)載體A和重組表達(dá)載體B必須使用_。(3)如果省略步驟而將大量擴(kuò)增的S基因直接導(dǎo)入大腸桿菌,一般情況下,不能得到表達(dá)的S蛋白,其原

16、因是S基因在大腸桿菌中不能_,也不能_。(4)為了檢驗(yàn)步驟所表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特征,可用_與_進(jìn)行抗原抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn),從而得出結(jié)論。(5)步驟和的結(jié)果相比,原核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白與真核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白的氨基酸序列_(選填“相同”或“不同”),根本原因是_。解析本題考查基因工程的工具及操作步驟和學(xué)生識圖能力。(1)圖中RNADNA表示通過逆轉(zhuǎn)錄方式獲得目的基因。(2)基因表達(dá)載體構(gòu)建時(shí),需要利用限制酶對載體和目的基因進(jìn)行剪切,形成黏性末端,然后用DNA連接酶將目的基因和載體連接起來,形成重組載體。(3)目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,需要借助于載體在受體細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制而擴(kuò)增目

17、的基因,從而獲得大量的表達(dá)產(chǎn)物,而直接導(dǎo)入則容易被受體細(xì)胞中的DNA水解酶所水解,導(dǎo)致得不到表達(dá)產(chǎn)物。(4)S蛋白為SARS病毒表面主要的病毒抗原,因此用抗原抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)可檢測其是否具有同樣的抗原性。(5)步驟和相比,基因相同,只是導(dǎo)入的受體細(xì)胞的種類不同,因?yàn)檎婧松锖驮松锕灿靡惶酌艽a子,所以表達(dá)產(chǎn)物相同。答案(1)逆轉(zhuǎn)錄(2)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶(3)復(fù)制以其為模板合成S基因的mRNA(或轉(zhuǎn)錄)(4)大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白SARS康復(fù)病人血清(5)相同表達(dá)蛋白質(zhì)所用的基因相同B卷(時(shí)間:45分鐘滿分:100分)考查知識點(diǎn)及角度難度及題號基礎(chǔ)中檔稍難基因工程的操作1、2、

18、3、4、125、7、8、911、15基因工程的應(yīng)用6、1013蛋白質(zhì)工程14一、選擇題(共12小題,每小題4分,共48分)1在DNA連接酶的催化下形成的化學(xué)鍵和位置分別是()。A氫鍵堿基與脫氧核糖之間B氫鍵堿基與堿基之間C磷酸二酯鍵磷酸與脫氧核糖之間D磷酸二酯鍵脫氧核糖與堿基之間解析本題考查DNA連接酶的作用。DNA連接酶的作用只是催化DNA片段的“縫合”,能恢復(fù)被限制酶切開了的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵,不能催化氫鍵形成。答案C2從基因文庫中獲取目的基因的根據(jù)是()。A基因的核苷酸序列B基因的功能C基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNAD以上都是解析本題考查從基因文庫中獲取目的基因的方法,解題關(guān)鍵是理解從基

19、因文庫中獲取目的基因的依據(jù)。從基因文庫中獲取目的基因的依據(jù)有:(1)基因的核苷酸序列;(2)基因的功能;(3)基因在染色體上的位置;(4)基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA;(5)基因的翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)等。答案D3下列有關(guān)基因工程操作的敘述,正確的是()。A用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割載體與目的基因可獲得相同的黏性末端B以蛋白質(zhì)的氨基酸序列為依據(jù)合成的目的基因與原基因的堿基序列相同C檢測到受體細(xì)胞含有目的基因就標(biāo)志著基因工程操作的成功D用含抗生素抗性基因的質(zhì)粒作為載體是因?yàn)槠淇剐曰虮阌谂c外源基因連接解析一種氨基酸可對應(yīng)多個(gè)密碼子,以蛋白質(zhì)的氨基酸序列為依據(jù)合成的目的基因與原基因的堿基序列可能不同。只有目的基

20、因在受體細(xì)胞中成功表達(dá)才標(biāo)志著基因工程操作的成功。用含抗生素抗性基因的質(zhì)粒作為載體,是因?yàn)榭剐曰蜃鳛闃?biāo)記基因可檢測載體是否導(dǎo)入到受體細(xì)胞中。答案A4下列關(guān)于基因文庫的說法,錯(cuò)誤的是()。A可分為基因組文庫和部分基因文庫BcDNA文庫屬于部分基因文庫C基因組文庫的基因在不同物種之間均可進(jìn)行基因交流D同種生物的cDNA文庫基因數(shù)量較基因組文庫基因數(shù)量少解析基因組文庫只有部分基因能夠在不同物種之間進(jìn)行交流。故正確答案為C。答案C5下列關(guān)于DNA連接酶的敘述正確的是()。催化相同黏性末端的DNA片段之間的連接催化不同黏性末端的DNA片段之間的連接催化兩個(gè)黏性末端互補(bǔ)堿基間氫鍵的形成催化兩個(gè)核苷酸之間

21、的磷酸二酯鍵的形成A B C D解析在DNA重組技術(shù)中,兩個(gè)DNA片段間必須有相同黏性末端才能互補(bǔ)配對,進(jìn)行結(jié)合;具有相同黏性末端的DNA分子連接時(shí),DNA連接酶的作用是催化兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵的形成,即把“梯子”的“扶手”縫合起來。故正確答案為D。答案D6科學(xué)家在培育抗蟲棉時(shí),經(jīng)過了許多復(fù)雜的過程和不懈的努力,才獲得成功。起初把蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因插入載體質(zhì)粒中,然后導(dǎo)入棉花的受精卵中,結(jié)果抗蟲基因在棉花體內(nèi)沒有表達(dá)。之后在插入抗蟲基因的質(zhì)粒中插入啟動子(抗蟲基因首端),導(dǎo)入棉花受精卵,長成的棉花植株還是沒有抗蟲能力??茖W(xué)家又在有啟動子、抗蟲基因的質(zhì)粒中插入終止子(抗蟲基因末端),

22、導(dǎo)入棉花受精卵,結(jié)果長成的植株有了抗蟲能力。那么作為重組的載體應(yīng)具備的結(jié)構(gòu)是()。A目的基因、啟動子、標(biāo)記基因B目的基因、終止子、標(biāo)記基因C目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因D啟動子、終止子、標(biāo)記基因解析一個(gè)基因表達(dá)載體的組成,除了目的基因外,還必須有啟動子、終止子以及標(biāo)記基因等。RNA聚合酶與啟動子結(jié)合,驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。終止子在目的基因的尾端,作用是終止轉(zhuǎn)錄。標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因。故正確答案為C。答案C7下列黏性末端屬于同種限制性核酸內(nèi)切酶切割而成的是()。A B C D解析同種限制酶切割形成的黏性末端堿基能互補(bǔ)配對。答案B8某線性DNA分子含有3 000個(gè)堿

23、基對(bp),先用限制酶a切割,再把得到的產(chǎn)物用限制酶b切割,得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的識別序列和切割位點(diǎn)如圖所示。下列有關(guān)說法正確的是()。a酶切割產(chǎn)物(bp)b酶再次切割產(chǎn)物(bp)1 600;1 100;300800;300A.在該DNA分子中,a酶與b酶的識別序列分別有3個(gè)和2個(gè)Ba酶與b酶切出的黏性末端不能相互連接Ca酶與b酶切斷的化學(xué)鍵分別為磷酸二酯鍵和氫鍵D用這兩種酶和DNA連接酶對該DNA分子進(jìn)行反復(fù)切割、連接操作,若干循環(huán)后,序列會明顯增多解析由a、b酶切割后產(chǎn)生的DNA片段可確認(rèn)a酶識別序列有2個(gè),b酶識別序列也有2個(gè),a酶和b酶切出的黏性末端可進(jìn)行互補(bǔ)配對

24、,故可連接;a、b酶均切割3,5一磷酸二酯鍵。答案D9檢測轉(zhuǎn)基因生物是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,應(yīng)通過何種分子雜交方法實(shí)現(xiàn)()。ADNADNA雜交 BDNARNA雜交CRNA蛋白質(zhì)雜交 D蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)雜交解析A、B、D三項(xiàng)分別是在復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯水平上檢測基因工程是否成功的方法,C項(xiàng)所述分子雜交方法是不存在的。故正確答案為B。答案B10在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過程中,下列操作錯(cuò)誤的是()。A用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸B用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體C將重組DNA分子導(dǎo)入煙草原生質(zhì)體D用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞解析本題考查基因工程操作的程序,解題關(guān)鍵

25、是理解基因工程的基本操作和過程。限制性核酸內(nèi)切酶切割的是DNA,而煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)為RNA,A錯(cuò);目的基因與運(yùn)載體的連接由DNA連接酶催化連接,B正確;煙草原生質(zhì)體可以作為受體細(xì)胞,C正確;目的基因?yàn)榭钩輨┗?,所以未成功?dǎo)入目的基因的細(xì)胞不具有抗除草劑的能力,篩選的時(shí)候應(yīng)該用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞,D正確。答案A11現(xiàn)有一長度為1000堿基對(bp)的DNA分子,用限制性核酸內(nèi)切酶EcoR單獨(dú)酶切后得到的DNA分子仍是1000 bp,用Kpn 單獨(dú)酶切得到400 bp和600 bp兩種長度的DNA分子,用EcoR 、Kpn 同時(shí)酶切后得到200 bp和600 bp兩種長度

26、的DNA分子,該DNA分子的酶切圖譜(如圖所示)正確的是 ()。解析本題考查的是限制酶的特點(diǎn)。用限制性核酸內(nèi)切酶EcoR 單獨(dú)酶切后堿基對數(shù)量不變,長度不變,說明切割后仍是一條DNA分子,應(yīng)考慮最初DNA分子呈環(huán)狀。故正確答案為D。答案D12下列技術(shù)依據(jù)DNA分子雜交原理的是()。觀察DNA在細(xì)胞中的分布檢測目的基因是否導(dǎo)入細(xì)胞檢測目的基因是否翻譯檢測目的基因是否進(jìn)行轉(zhuǎn)錄A B C D解析解題流程如下:答案C二、非選擇題(共3小題,共52分)13(16分)下圖表示從蘇云金芽孢桿菌分離出來的殺蟲晶體蛋白質(zhì)基因(簡稱Bt基因)及形成轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的圖解。請據(jù)圖回答下面的問題。(1)圖中a過程要用到的

27、酶是_。(2)在進(jìn)行圖中b過程時(shí),由我國科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的十分簡便經(jīng)濟(jì)的方法是_,此外,也經(jīng)常采用_法。若要培育轉(zhuǎn)基因綿羊,則此過程要用_的方法。(3)為確定抗蟲棉是否培育成功,既要用放射性同位素標(biāo)記的_作探針進(jìn)行分子雜交測試,又要在個(gè)體水平上鑒定,后者具體過程是_。(4)活化的毒性物質(zhì)應(yīng)是一種_分子,可以全部或部分嵌合于昆蟲的細(xì)胞膜上,使細(xì)胞膜產(chǎn)生孔道,導(dǎo)致細(xì)胞由于滲透平衡的破壞而破裂。(5)我國在“863”計(jì)劃資助下開展Bt抗蟲棉、抗蟲水稻等研究,可以減少農(nóng)藥、殺蟲劑的使用。這將對_起到重要作用。解析(1)圖中a過程是提取目的基因,用到的酶是限制酶。(2)b為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞?;ǚ酃芡ǖ婪?/p>

28、是我國科學(xué)家所創(chuàng),此外還有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法等將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法,常用的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(3)檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法,可在分子水平檢測和個(gè)體水平檢測等。(4)活化毒性物質(zhì)是晶體蛋白在蛋白酶的作用下得到的,是多肽。(5)減少農(nóng)藥、殺蟲劑的使用必然有利于環(huán)境保護(hù)。答案(1)限制性核酸內(nèi)切酶(2)花粉管通道法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化顯微注射(3)殺蟲晶體蛋白質(zhì)基因(或Bt基因、目的基因)讓害蟲吞食抗蟲棉葉子,觀察害蟲的存活狀態(tài)(或其他合理答案)(4)多肽(5)環(huán)境保護(hù)14(18分)科學(xué)家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高,可以在相對寒冷的環(huán)境中生長。下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄的培育過程示意圖。(1)若圖中是科學(xué)家構(gòu)建的魚抗凍蛋白基因的表達(dá)載體,則該基因表達(dá)載體的組成通常應(yīng)包括_等。(2)科學(xué)家常采用_法將魚抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞內(nèi)。通常采用_技術(shù)檢測目的基因是否插入番茄的基因組。(3)多聚半乳糖醛酸酶(PG酶)可將成熟的番茄果實(shí)細(xì)胞壁中的多聚半乳糖醛酸降解為半乳糖醛酸,從而導(dǎo)致果實(shí)軟化。抑制PG酶的活性

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