培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證方案.

1、編號：FA/06-31-B培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案計(jì)數(shù)培養(yǎng)基甘肅佛仁制藥科技有限公司培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案編FA/基06-適號31-B頁、20頒發(fā)部門GM分行P綜發(fā)政管合辦部理辦公室門公室1.概述 .22.驗(yàn)證目23.驗(yàn)證的范圍4.驗(yàn)證人員及職起草人草日核核日批批準(zhǔn)準(zhǔn)日人期25.驗(yàn)證程序和方6.驗(yàn)證可接受的標(biāo)準(zhǔn)37.驗(yàn)證步驟38.結(jié)果分析及評價：9.驗(yàn)證報510.建議11.最準(zhǔn)批準(zhǔn).5.512.所使用的記.61. 驗(yàn)證目的:細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查。本次驗(yàn)證的 目的是確認(rèn)營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基適合細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)測 定。2. 參照標(biāo)準(zhǔn)：2010版中國藥

2、典二部附錄XI J微生物限度檢查法。3. 驗(yàn)證項(xiàng)目：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查。4. 驗(yàn)證小組人員及職責(zé):4.1驗(yàn)證小組人員:所在部門質(zhì)量部小組人員職務(wù)連學(xué)仁黃志康質(zhì)量部QC主任郭萍珍質(zhì)量部檢驗(yàn)員4.2驗(yàn)證人員職責(zé)及要求421按驗(yàn)證方案及相關(guān)文件實(shí)施驗(yàn)證。4.2.2認(rèn)真觀察并做好驗(yàn)證原始記錄。4.2.3對實(shí)施驗(yàn)證的結(jié)果負(fù)責(zé)。4.3驗(yàn)證中各部門的職責(zé)4.3.1驗(yàn)證領(lǐng)導(dǎo)組職責(zé)431.1制訂驗(yàn)證總計(jì)劃，負(fù)責(zé)全公司驗(yàn)證工作的管理。4.3.1.2確定驗(yàn)證項(xiàng)目及驗(yàn)證項(xiàng)目負(fù)責(zé)人。4.3.1.3負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的批準(zhǔn)工作。4.3.1.5負(fù)責(zé)驗(yàn)證報告的批準(zhǔn)工作。4.3.2驗(yàn)證工作小組職責(zé)4.3.

3、1.4負(fù)責(zé)驗(yàn)證資料及結(jié)果的審核工作。4.321負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的起草工作。4.322參與驗(yàn)證方案的討論、確認(rèn)工作。4.3.2.3負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的實(shí)施。4.3.2.4負(fù)責(zé)驗(yàn)證結(jié)果的分析、統(tǒng)計(jì)、報告工作。4.3.2.5參與驗(yàn)證結(jié)果的評價工作。4.3.3質(zhì)量部職責(zé)4.3.3.1負(fù)責(zé)公司驗(yàn)證日常管理工作。4.3.3.2負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的審核工作。4.3.3.3負(fù)責(zé)驗(yàn)證過程中儀器、儀表、計(jì)量器具的校驗(yàn)工作。4.3.3.4負(fù)責(zé)檢驗(yàn)儀器及檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證。4.3.3.6負(fù)責(zé)對驗(yàn)證人員的培訓(xùn)、考核工作。4.3.3.7負(fù)責(zé)驗(yàn)證資料和報告的審核工作。4.3.3.5負(fù)責(zé)驗(yàn)證中各項(xiàng)檢測工作，提供驗(yàn)證的檢驗(yàn)記錄、檢驗(yàn)報告，對驗(yàn)證過

4、程中的各項(xiàng)檢驗(yàn)工作負(fù)責(zé)。4.3.3.8負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件回收、歸檔管理工作。5. 合格標(biāo)準(zhǔn)：被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)不小于對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的70%且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基上的菌落一致。6. 試驗(yàn)材料:6.1. 被驗(yàn)證產(chǎn)品：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基62儀器設(shè)備:6.2.1. SYQ-DSX-280B型手提式壓力蒸汽滅菌器6.2.2. SW-CJ-2A 雙人凈化工作臺6.2.3. XSW-CJ-1A單人凈化操作臺6.2.4. HZMJ型霉菌培養(yǎng)箱（2328（6.2.5. JC303-4電熱恒溫培養(yǎng)箱（3035C 6.2.6.不銹鋼遠(yuǎn)紅外烘箱6.2.7 101-2A電熱鼓風(fēng)干燥箱6.2

5、.8微波爐6.3.驗(yàn)證用培養(yǎng)基名稱生產(chǎn)廠家批號照培養(yǎng)基養(yǎng)基養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂培營養(yǎng)肉湯培玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂對玫瑰紅鈉瓊脂對照培養(yǎng)基酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基64驗(yàn)證用菌株：（第代驗(yàn)證困株培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間（小時）大腸埃希菌營養(yǎng)肉湯30 35 C18 24金黃色葡萄球菌營養(yǎng)肉湯30 35 r18 24枯草芽抱桿菌營養(yǎng)肉湯30 35 r18 24白色念珠菌改良馬丁培23 28 r24 48養(yǎng)基黑曲霉困改良馬丁瓊23 28C5 7 （天）脂培養(yǎng)基7. 菌液制備7.1. 接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、與枯草芽抱桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，于 30二35

6、C培養(yǎng)18二24小時。取經(jīng)30二35C培養(yǎng)1824小時的大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、與枯草芽抱桿菌營養(yǎng)肉湯新鮮培養(yǎng)物1ml加入到 9ml0.9%無菌氯化鈉溶液中，10倍稀釋至10-610-7約為50100cfu /的菌懸液 備用。7.2. 接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基中，于2328 C培養(yǎng)2448小時。取經(jīng)23二28C培養(yǎng)2448小時的白色念珠菌改良馬丁液體培養(yǎng)物1ml加入到9ml0.9%無菌氯化鈉溶液中，10倍稀釋至10-5約為50100cfu / n的菌懸液備用。7.3. 接種黑曲霉菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基上，于2328 C培養(yǎng)5二7天，加入35ml 含0.05

7、%(ml/ml )聚山梨脂80 的0.9%6菌氯化鈉溶液,將抱子洗脫。然后，用適宜方法吸出抱子懸液至無菌試管內(nèi)，用含0.05%(ml/ml )聚山梨脂80 的0.9%無菌氯化鈉溶液制成每 1ml含抱子數(shù)5C100cfu / ml的菌懸液備用。8. 菌液計(jì)數(shù)：（每種菌液接種2個平皿）大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌與枯草芽抱桿菌分別取1ml接種至營養(yǎng)瓊脂培1ml接種至玫瑰紅養(yǎng)基中，置3035C培養(yǎng)48小時；白色念珠菌、黑曲霉分別取 鈉瓊脂培養(yǎng)基，置2328C培養(yǎng)72小時。菌落計(jì)數(shù)結(jié)果（2個平皿計(jì)數(shù)取平均值）見下表菌落計(jì)數(shù)結(jié)果（cfu/ ml）試驗(yàn)次數(shù)10-5稀釋10-6稀釋10-7稀釋123大腸埃希金

8、黃色葡萄球菌枯草芽抱桿菌白色念珠黑曲霉9. 適用性檢查:9.1.取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的菌液（50100cfu/ml ）各1ml，分別注入無菌平皿中，立即傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備平皿，混勻，凝固，置3035r培養(yǎng)48小時，計(jì)數(shù)；取白色念珠菌、黑曲霉菌的 菌液（50100cfu/ml ）各Iml，分別注入無菌平皿中，立即傾注玫瑰紅鈉瓊脂培 養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備 2個平皿，混勻，凝固，置 2328r培養(yǎng)72小時，計(jì)數(shù)。9.2取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽抱桿菌的菌液（50100cfu/ml ）各1ml，分別注入無菌平皿中，立即傾注營養(yǎng)瓊脂對照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備 2個平皿，混勻，凝固，置 3035r培養(yǎng)48小時，計(jì)數(shù)；取白色念珠菌、黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml ）各1ml，分別注入無菌平皿中，立即傾注玫瑰紅鈉瓊脂對照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個平皿，混勻，凝固，置2328r培養(yǎng)72小時，計(jì)數(shù)。93結(jié)果見附表10.結(jié)論:附表1:計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證記錄試驗(yàn)時間年月曰完成