加味桃核承氣湯對糖尿病大鼠冠狀動脈結(jié)扎致心肌缺血預(yù)防作用的研究

1、加味桃核承氣湯對糖尿病大鼠冠狀動脈結(jié)扎致心肌缺血預(yù)防作用的研究日期：2005-9-5 14:44:31     編輯：頁面功能 【字體：大 中 小】【打印】 【關(guān)閉】加味桃核承氣湯對糖尿病大鼠冠狀動脈結(jié)扎致心肌缺血預(yù)防作用的研究中醫(yī)雜志 2000年第8期第41卷 方藥研究作者：李賽美熊曼琪林安鐘許慶文鄭海霞胡永珍何敏單位：廣州中醫(yī)藥大學(xué),廣州市機(jī)場路12號(510407)關(guān)鍵詞： 糖尿病；病理生理學(xué)；心肌缺血；預(yù)防和控制；桃核承氣湯/治療應(yīng)用摘要采用STZ大鼠冠狀動脈結(jié)扎致心肌缺血模型，觀察了加味桃核承氣湯抗心肌缺血作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該方對心電圖

2、(ECG)T波異常有顯著改善，并能提高存活率(P0.05)，在該方基礎(chǔ)上加用水蛭則減少心肌缺血面積，降低ECG異律率效果更佳。既往研究表明,加味桃核承氣湯對糖尿病患者及動物模型具有肯定療效1。為進(jìn)一步探討該方對糖尿病心臟病的影響，我們于1998年911月，觀察了該方對鏈脲佐菌素(STZ)大鼠冠狀動脈結(jié)扎致心肌缺血的預(yù)防作用，現(xiàn)報(bào)告如下。1材料和方法1.1實(shí)驗(yàn)動物與飼料加工：采用清潔級SD雄性大鼠，體重200280g，由上海西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動物有限公司提供。隨機(jī)分為正常組(8只)與造模組(40只)。STZ造模40天后，分為模型組、模型加中藥組。后者依中藥組方不同進(jìn)一步分為綜合組(即加味桃核承氣湯

3、組)、綜合加水蛭組。1.2藥物及試劑：綜合組予加味桃核承氣湯：黃芪30g，大黃6g，桃仁10g，桂枝6g，芒硝3g，麥冬12g，生地黃15g，玄參12g，甘草3g。綜合加水蛭組予上方加水蛭10g。中藥經(jīng)煎煮-合并-加熱-濃縮-酒精沉淀-抽濾-消毒-分裝，制為含生藥2g/ml腹腔注射液(由廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院臨床藥理研究室制備)。造模試劑STZ為SIGMA公司產(chǎn)品。硝基四氧唑藍(lán)(N-BT)購自上海前進(jìn)試劑廠，用0.2mmol Tris液配制成0.125%溶液。1.3實(shí)驗(yàn)儀器：小動物呼吸機(jī)由江西特力麻醉呼吸設(shè)備公司生產(chǎn)，型號TKR-2000A。電生理儀由日本光電株氏會社生產(chǎn)，型號RM-600

4、。1.4動物模型及實(shí)驗(yàn)方法：糖尿病動物模型復(fù)制， 所有大鼠禁食12小時(shí)， 造模組按60mg/kg體重的劑量腹腔內(nèi)注射STZ(溶于0.1mmol/L檸檬酸緩沖液，pH4.4)； 正常組腹腔內(nèi)注射等量的檸檬酸緩沖液。 1周后復(fù)查空腹血糖11.1mmol/L, 確認(rèn)為糖尿病模型。糖尿病心肌缺血模型復(fù)制，參考藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)結(jié)扎冠狀動脈引起心肌梗塞法2，糖尿病動物模型成功后，各組均普通飼料喂養(yǎng)4周，大白鼠予1.5%戊巴比妥麻醉(2ml/kg)，在人工呼吸條件下開胸(呼吸器頻率為54次/分，呼吸量為2ml/100g)，剪斷左側(cè)胸廓第35肋，剪開心包膜暴露心臟，用小圓針和0號線在左心耳下緣穿越左冠狀動脈，于

5、肺動脈圓錐旁出針。中藥組于冠脈結(jié)扎前30分鐘注射(5g生藥/kg)，模型及空白組注射等量蒸餾水。分別于冠脈結(jié)扎前、術(shù)后10分、20分、30分、60分、90分、120分鐘測錄心電圖(ECG)，觀察心率(HR)、T波、異律率，并計(jì)算動物2小時(shí)存活率。NB-T染色：沿冠狀溝切除心房，留下心室，冰凍5分鐘后，順房室溝從心尖到心基部平行將心室切成0.1cm厚心肌片，生理鹽水沖洗干凈后，將其放入0.125%的NB-T溶液中，37溫孵15分鐘，染色后立即用水沖洗去多余染料。梗塞區(qū)不著色，非梗塞區(qū)被NB-T染為藍(lán)色。心肌缺血區(qū)測算：將未染色的缺血心肌重量除以全心肌重量，乘以%。1.5數(shù)據(jù)處理：計(jì)數(shù)資料用2檢驗(yàn)

6、，計(jì)量資料用配對t檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1正常組與模型組血糖、體重、心臟重量/體重的比較：結(jié)果顯示，造模后模型組體重明顯下降，血糖升高，且心臟重量增高，與正常組比較有非常顯著性差異(P0.01)，正常組40天后血糖也有所提高。見表1。表1正常組與模型組BS、W、心臟重量/體重的比較(±s)分組造模前造模后(40天)鼠數(shù)體重(g)血糖(mmol/L)鼠數(shù)體重(g)血糖(mmol/L)心臟重量/體重()正常組8293.25±42.742.73±0.388331.25±122.183.38±0.833.11±0.20模型組40295.95

7、7;22.962.79±0.3835207.49±35.19*22.45±6.99*3.62±0.39*與正常組比較*P0.01；與造模前比較,P0.05，P0.01 2.2各組大鼠心肌缺血面積、ECG異律率及2小時(shí)存活率比較：結(jié)果表明，模型組(模型加結(jié)扎)心肌缺血面積較正常組(正常加結(jié)扎)及綜合加水蛭組(模型加結(jié)扎、綜合、水蛭)顯著增大(P0.01)，2小時(shí)存活率降低(P0.05)；綜合加水蛭組缺血面積低于綜合組(P0.05)，而與正常組無顯著性差異(P0.05)。其異律率也呈現(xiàn)模型綜合綜合加水蛭正常，依次下降趨勢，但其差異無顯著性意義。見表2。表2各

8、組心肌缺血面積、ECG異律率及存活率比較分組鼠數(shù)缺血面積(±s,)異律率()存活率()正常811.76±7.52*37.5100*模型組1131.18±15.4872.763.64綜合組1122.96±8.8763.64100*綜合加水蛭組1315.18±10.93*38.5100*與模型組比較,*P0.05，*P0.01；與綜合組比較,P0.05 2.3不同治法對冠脈結(jié)扎后T波改變的影響：模型組在冠脈結(jié)扎術(shù)前，T波已有顯著性升高(P0.01)，表明在糖尿病成模1月后，心肌缺血已經(jīng)存在。在施行冠脈結(jié)扎術(shù)后，分別于5分、10分、20分、30分、6

9、0分、90分鐘，T波仍居高不下(P0.01)，在120分鐘時(shí)差異略有縮小，但仍顯著高于正常組(P0.05)。治療組中，綜合加水蛭組于結(jié)扎術(shù)后30分鐘，心肌缺血有所改善，T波回落，與模型組比較有顯著性差異(P0.05)。綜合組分別于60分、90分鐘，T波回落，與模型組比較差異有顯著性(P0.05)，并接近正常水平(P0.05)，且與自身術(shù)前比較，分別于20分、60分、90分、120分鐘心肌缺血得到明顯改善(P0.05或P0.01)。見表3。表3不同治法對冠脈結(jié)扎后T波(mV)改變的影響(±s)分組術(shù)前術(shù)后5分10分20分30分60分90分120分正常組0.09±0.03(8)

10、0.07±0.03(7)0.10±0.08(6)0.07±0.07(7)0.07±0.08(8)0.09±0.09(7)0.13±0.07(6)0.15±0.09(4)模型組033.±0.08(11)*0.30±0.15(9)*0.33±0.11(7)*0.28±0.20(9)*0.34±0.14(9)*0.41±0.17(7)*0.4±0.13(5)*0.32±0.08(5)*綜合組0.38±0.10(11)*0.32±0.

11、13(10)*0.33±0.14(9)*0.27±0.15(10)*0.30±0.17(10)*0.24±0.15(9)*0.22±0.16(8)0.20±0.14(9)綜合加水蛭組0.30±0.08(13)*0.26±0.10(13)*0.25±0.10(13)*0.27±0.12(13)*0.25±0.10(13)*0.29±0.16(10)*0.29±0.12(8)*0.28±0.12(8)*括號內(nèi)為鼠數(shù)。與正常組比較,*P0.05，*P0.01；與

12、模型組比較,P0.05；與術(shù)前比較,P0.05；P0.013討論糖尿病心臟病是指糖尿病并發(fā)或伴發(fā)的心臟病，包括冠心病、心肌病、心臟植物神經(jīng)病變。由于與心血管病高度相關(guān)，且具有發(fā)病率高、發(fā)病早、病變重、癥狀不典型、進(jìn)展快、易發(fā)生心肌梗塞等特點(diǎn)3，已成為近年研究的熱點(diǎn)。該病屬中醫(yī)“胸痹”、“真心痛”、“心悸”等范疇，其病機(jī)主要為消渴日久，或失于調(diào)治或遷延發(fā)展，陰虛燥熱日甚，不斷耗傷氣陰，使氣陰兩虛，心脈失養(yǎng)，氣不運(yùn)血，血瘀心脈所致4。桃核承氣湯出自傷寒論，方由調(diào)胃承氣湯加桃仁、桂枝組成，為蓄血輕證而設(shè)。其蓄血者乃瘀熱互結(jié)所致，若見于下焦，少腹急結(jié)或硬滿疼痛，為太陽蓄血證；或停于中焦，屎雖硬，大便反

13、易，其色必黑，為陽明蓄血證。熊氏根據(jù)臨床型糖尿病患者多見疲倦、口渴、便秘、肢麻等癥狀，認(rèn)為氣陰不足、燥熱內(nèi)結(jié)、血脈瘀阻為其基本病機(jī)，尊仲景瀉熱通瘀法，溶益氣養(yǎng)陰之品為加味桃核承氣湯，用以治療糖尿病及其并發(fā)癥取得顯著成績1。林氏提出糖尿病及其并發(fā)癥以益氣養(yǎng)陰、活血化瘀為優(yōu)5。王氏報(bào)道用調(diào)胃承氣湯救治急性心肌梗塞療效顯著，認(rèn)為心胃經(jīng)脈相通，肺與大腸相表里，用調(diào)胃承氣湯瀉熱和胃，陰液得存，氣血流暢，則心痛得已6。均為加味桃核承氣湯用于糖尿病心臟病治療提供了佐證。本實(shí)驗(yàn)改中藥口服為腹腔注射，觀察糖尿病急性心肌缺血時(shí)加味桃核承氣湯的預(yù)防作用，初步結(jié)果顯示，該方對糖尿病大鼠冠狀動脈結(jié)扎致T波異常有顯著的改

14、善，并能提高生存率。在此基礎(chǔ)上加用水蛭能進(jìn)一步減少心肌缺血面積，降低異律率。從治療角度言盡快有效地恢復(fù)心肌的血液灌注是防治心肌缺血根本措施，而消除加重心肌缺血損傷因素，如酸中毒、鈣超載、能量匱乏、自由基損傷等，保護(hù)缺血心肌是治療的重點(diǎn)7。業(yè)已證實(shí)水蛭中的水蛭素具有抗凝，抗血小板聚集，抑制血栓形成，改善微循環(huán)，尤其能增加心肌營養(yǎng)血流量等綜合作用8，因而加用水蛭組顯示出更佳效果。急性心肌缺血引起的不可逆性損傷多發(fā)生于缺血2030分鐘后，加用水蛭組術(shù)后30分鐘T波即顯示改善，較綜合組60分鐘后出現(xiàn)改善更具意義。結(jié)扎30分鐘后T波改善與心肌缺血面積不呈平行關(guān)系，其機(jī)理有待進(jìn)一步探討。既往研究證實(shí)，ST

15、Z糖尿病大鼠飼養(yǎng)4周，即可出現(xiàn)心肌損害9，同時(shí)伴有體重下降、血糖增高、心臟增大，在此基礎(chǔ)上再施行冠狀動脈結(jié)扎，與糖尿病冠心病特征相吻合，而正常組施行冠狀動脈結(jié)扎術(shù)，則與冠心病特征相似。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：糖尿病冠心病較之冠心病，具有心肌缺血面積廣泛、程度重、異律率高、存活率低等特點(diǎn)，與臨床報(bào)道相符，我們認(rèn)為STZ大鼠冠脈結(jié)扎可作為糖尿病冠心病實(shí)驗(yàn)研究的較好載體。基金項(xiàng)目:國家中醫(yī)藥管理局青年基金課題(A95-11)參考文獻(xiàn)1，熊曼琪，梁柳文，林安鐘,等.加味桃核承氣湯治療型糖尿病的臨床與實(shí)驗(yàn)研究.中西醫(yī)結(jié)合雜志，1992，12(2)：74.2，徐叔云，卞如濂，陳修主編.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué).第2版，北京：人民衛(wèi)生出版社，1994:938，921.3，吳可光.糖尿病心血管病變的臨床處理.實(shí)用內(nèi)科雜志，1991，11(12)：631.4，錢秋海.實(shí)用糖尿病治療保健學(xué).濟(jì)南：山東大學(xué)出版社，1993:293.5，蘇愛鋒，盧景芬，何麗莉，等.降糖通脈寧對糖尿病大鼠血清及組