聚乙二醇牛血紅蛋白偶聯(lián)物對(duì)血清炎性因子的影響

1、聚乙二醇牛血紅蛋白偶聯(lián)物對(duì)血清炎性因子的影響         08-08-31 15:19:00     編輯：studa20                作者：趙明霞，龍村，賀學(xué)英，管博，王蕊  【摘要】  目的 探討在體外循環(huán)（extracorporeal circulation，ECC）預(yù)充

2、液中加入聚乙二醇牛血紅蛋白偶聯(lián)物（PEG-bHb）對(duì)兔血清炎性因子的影響。方法 24只成年健康大耳白兔，通過(guò)股動(dòng)脈、頸靜脈插管建立體外循環(huán)通路，轉(zhuǎn)流1 h。隨機(jī)分成三組，對(duì)照組（n8），以晶/膠體液作為ECC預(yù)充液；實(shí)驗(yàn)組1（n8），在預(yù)充液中加入PEG-bHb，PEG-bHb占總?cè)萘浚ㄍ醚h(huán)血量預(yù)充量）的5%；實(shí)驗(yàn)組2（n8），預(yù)充液中加入PEG-bHb，占總?cè)萘浚ㄍ醚h(huán)血量預(yù)充量）的15%，ECC開(kāi)始時(shí)放出自體血（放血量占兔循環(huán)血量的20%），ECC結(jié)束后將自體血回輸。每組監(jiān)測(cè)ECC前、中和ECC后的血?dú)鈪?shù)，用ELISA法測(cè)定各時(shí)間點(diǎn)血清白介素6（IL-6）、腫瘤壞死因子（TNF-）、C

3、反應(yīng)蛋白（CRP）濃度。結(jié)果 三組在ECC后各時(shí)間點(diǎn)的炎性因子無(wú)顯著差異，但實(shí)驗(yàn)組2在ECC后各時(shí)間點(diǎn)的炎性指標(biāo)較對(duì)照組相比有下降的趨勢(shì)。結(jié)論 血液代用品PEGbHb單純用于預(yù)充對(duì)兔ECC后炎性反應(yīng)無(wú)影響，用PEG-bHb置換自體血有可能減輕兔ECC后炎性反應(yīng)。 【關(guān)鍵詞】  炎性因子；血液代用品；體外循環(huán)；PEG-bHbAbstract: OBJECTIVE   To investigate the effect of PEG-conjugated bovine hemoglobin (PEG-bHb) on inflammatory factors when

4、added directly to extracorporeal circulation（ECC） prime in anaesthetized rabbit. METHODS  24 anaesthetized rabbits  (2.59±0.19)kg, connected to ECC by jugular venous and femoral arterial cannulation and bypass for 1 hour, were randomly divided into 3 groups. In control group(n=8), a c

5、rystalloid/colloid solution was used as prime solution. In experimental group 1(n=8), PEG-bHb (5% total volume) was added to the pump prime of bypass. Total volume is the sum of circulation volume and prime volume. In experimental group 2(n=8), PEG-bHb (15% total volume) was used in the pump prime w

6、ith previous blood harvesting(20% circulation volume) before ECC. Blood gas were monitored throughout the procedure. The inflammatory factors (IL-6,TNF-,CRP) were measured using ELISA.RESULTS  There were no significant difference of IL-6,TNF- and CRP between three groups. But in experimental gr

7、oup 2, the inflammatory factors were less than those in control group, but not significantly.CONCLUSION  PEG-bHb added to the prime of a rabbit ECC circuit does not independently affect inflammatory response. PEG-bHb on the prime with previous blood harvesting before ECC may improve inflammator

8、y response.Key words：   Inflammatory factor; Blood substitute; Extracorporeal circulation; PEG-bHb聚乙二醇牛血紅蛋白偶聯(lián)物（polyethylene glycol conjugated bovine hemoglobin，PEG-bHb）是我國(guó)研究開(kāi)發(fā)的一種血紅蛋白類(lèi)血液代用品，研究表明，PEG-bHb具有良好的攜帶、釋放氧的能力，同時(shí)具有大分子物質(zhì)的擴(kuò)容效應(yīng)，因此，PEG-bHb在提升血壓、恢復(fù)微循環(huán)血流量的同時(shí)，可以改善組織的氧供(資料由北京凱正生物工程發(fā)展有限責(zé)任公司提供

9、)。    本實(shí)驗(yàn)將PEG-bHb用于兔體外循環(huán)（extracorporeal circulation，ECC）預(yù)充，研究其對(duì)炎性因子的影響，為進(jìn)一步應(yīng)用于臨床提供可靠理論依據(jù)。1  材料與方法1.1  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組  成年健康大耳白兔24只，雌雄不限，體重2.32.8（2.59±0.19）kg，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心提供，符合清潔級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)。動(dòng)物飼養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)均符合我國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理實(shí)施細(xì)則（1998年）的要求。    24只動(dòng)物隨機(jī)分為三組。對(duì)照組（組,n=8），以晶/膠體液（血

10、定安50 ml，乳酸林格液）作為ECC預(yù)充液；實(shí)驗(yàn)組1（組,n8），在預(yù)充液中加入PEG-bHb，占總?cè)萘浚ㄍ醚h(huán)血量預(yù)充量）的5%；實(shí)驗(yàn)組2（組,n8），預(yù)充液中加入PEG-bHb，占總?cè)萘浚ㄍ醚h(huán)血量預(yù)充量）的15%，ECC開(kāi)始時(shí)放出自體血（放血量占兔循環(huán)血量的20%），ECC結(jié)束后將自體血回輸（如圖1）。圖1  實(shí)驗(yàn)流程（略）1.2  動(dòng)物準(zhǔn)備與實(shí)驗(yàn)操作  動(dòng)物清醒狀態(tài)下稱(chēng)重，建立耳緣靜脈通路，3%戊巴比妥鈉30 mg/kg緩慢靜脈推注麻醉。耳中動(dòng)脈穿刺監(jiān)測(cè)系統(tǒng)動(dòng)脈壓，肝素化后，頸靜脈插管（14G動(dòng)脈穿刺針）連接ECC靜脈引流管，股動(dòng)脈插管（18G動(dòng)脈穿刺針

11、）連接灌注管，建立常溫ECC通路，泵流量維持（38±11）ml/min。ECC中應(yīng)用中空纖維膜式氧合器（動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)し?西京醫(yī)療用品有限公司提供），總預(yù)充量（氧合器，循環(huán)管道）約為80 ml。ECC總時(shí)間為1 h，拔出動(dòng)靜脈插管，結(jié)扎頸靜脈和股動(dòng)脈，給予魚(yú)精蛋白（11）中和肝素，縫合切口。動(dòng)物清醒繼續(xù)飼養(yǎng)7天后處死。1.3  指標(biāo)檢測(cè)  分別在ECC前和ECC后24 h檢測(cè)動(dòng)脈血?dú)?，在ECC中15 min、50 min檢測(cè)動(dòng)、靜脈血?dú)?；分別在ECC前、ECC后4 h、8 h、24 h、48 h測(cè)血清IL-6、TNF-，在ECC前、ECC后24 h、48 h、7d測(cè)血

12、清C反應(yīng)蛋白(CRP)。1.4  實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析  實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)組間數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)，P 0.05為差異有顯著性。     2  結(jié)果    比較各組實(shí)驗(yàn)兔動(dòng)、靜脈血?dú)庵笜?biāo)（見(jiàn)表1），結(jié)果顯示：2.1  三組pH、PCO2在ECC前、ECC 15 min、50 min及ECC后24 h無(wú)顯著差異。2.2  在ECC中，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組均給予100%氧氣，各組轉(zhuǎn)中動(dòng)脈PO2均較高，在ECC 50 min時(shí)，

13、組和組靜脈PO2較低，組與組相比有顯著差異（P<0.05）。2.3  ECC中血紅蛋白(Hb)組低于組和組（P<0.05），ECC結(jié)束后組 將自體血液回輸，因此轉(zhuǎn)后24 h水平組 與組和組相比，無(wú)顯著性差異（P>0.05）。    各組炎性因子結(jié)果比較（見(jiàn)表2和圖2），結(jié)果顯示：2.4  在ECC后各時(shí)間點(diǎn)中，IL-6和TNF-三組相比無(wú)顯著差異，（P>0.05）。2.5  組中CRP在ECC前的測(cè)定值明顯低于另外兩組，調(diào)整基線后用協(xié)方差分析方法比較，三組ECC后各時(shí)間點(diǎn)CRP值無(wú)顯著差異，（P>0.05）；但從圖2可以看出組中ECC后各時(shí)間點(diǎn)CRP值均低。圖2  各組CRP結(jié)果比較（略）表1  各組pH、PCO2、PO2、Hb、P50 比較（略）注： *與組比較，P<0.05；#與組比較，P<0.05表2  各組IL-6、TNF-結(jié)果比較（略）3  討論