潔凈室環(huán)境監(jiān)測操縱制度

1、* * 青島有限公司文件 文件名稱 潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測操作規(guī)程 文件編號 SOP-ZL66-1 制定人 審核人 審核人 制定日期 審核日期 審核日期 批準(zhǔn)人 批準(zhǔn)日期 生效日期 頒發(fā)部門 品管部 印 數(shù) 份 分發(fā)部門 品管部 目的 建立潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測規(guī)程，規(guī)范潔凈區(qū)沉降菌、浮游菌、懸浮粒子的測試，保 證藥品在規(guī)定的潔凈級別內(nèi)進(jìn)行生產(chǎn)。 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)適用于潔凈區(qū)沉降菌、浮游菌、懸浮粒子的監(jiān)測。 責(zé)任環(huán)境監(jiān)測員 內(nèi)容 1、檢驗依據(jù)： 1.1 GB/T16294-2010 1.2 GB/T16293-2010 醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法 醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）浮游菌的測試方法 1.3 GB/T16292

2、-2010 2、懸浮粒子的監(jiān)測 醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）懸浮粒子的測試方法 2.1概述：本測試方法采用計數(shù)濃度法，即通過測定潔凈區(qū)環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中 含大于或等于某粒徑懸浮粒子數(shù)，來評定潔凈室（區(qū)）的懸浮粒子潔凈度等級。 2.2儀器和設(shè)備：塵埃粒子計數(shù)器，嚴(yán)格按照塵埃粒子計數(shù)器操作、維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程 （SOP-ZL95-1 ）操作。 2.3測試步驟 2.3.1測試條件：在測試之前，要對潔凈室（區(qū)）相關(guān)參數(shù)進(jìn)行預(yù)先測試，包括溫度 控制在18-26 C、相對濕度控制在45-65%、壓差等，同時應(yīng)滿足儀器的使用范圍。 2.3.2測試狀態(tài)：靜態(tài)測試，人員不得多于2人。測試報告中應(yīng)明確測試時所采用的 狀態(tài)及測試人

3、員數(shù)。 2.3.3測試時間：在空態(tài)或靜態(tài)a測試時，對單向流潔凈室（區(qū)）而言，測試宜在凈 化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時間不少于 10min后開始。對非單向流潔凈室（區(qū)），測試宜 在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時間不少于 30min開始。在靜態(tài)b測試時，對單向流潔 凈室（區(qū)），測試宜在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場并經(jīng)過 10min后開始；對非單向流潔凈室 （區(qū)），測試宜在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場并經(jīng)過 20min自凈后開始。* * 2.4采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置 2.4.1在空態(tài)或靜態(tài)測試時，懸浮粒子采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置應(yīng)力求均勻，并不得少 于最少采樣點(diǎn)數(shù)目。在動態(tài)測試時，懸浮粒子采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的生產(chǎn)及 工藝關(guān)

4、鍵操作區(qū)設(shè)置。最少采樣點(diǎn)數(shù)目如下 最少采樣點(diǎn)數(shù)目 面積（m2） 潔凈級別 A級 C級 D級 v 10 2-3 2 2 10 v 20 4 2 2 20 v 40 8 2 2 40 v 100 16 4 2 采樣點(diǎn)的布置: -1 1 - H - 1- 1 I 11 4 4 * r X X XX X2.4.2采樣點(diǎn)位置：一般在離地0.8m高度的水平面上均勻布置，并避開回風(fēng)口。測 試人員應(yīng)在采樣口的下風(fēng)側(cè)。 2.4.3采樣次數(shù)的限定：對于任何小潔凈室或局部空氣凈化區(qū)域， 采樣點(diǎn)的數(shù)目不得 少于2個，總采樣次數(shù)不得少于5次。 最小米樣量 潔凈度級別 米樣量L/次 0.5 (jm 5 A級 5.66 8

5、.5 C級 2.83 8.5 D級 2.83 8.5 2.5判斷標(biāo)準(zhǔn): * * 潔凈度級別 懸浮粒子最大允許數(shù) （個/m 3） （靜態(tài)） M）.5 阿 5 m A級 3520 20 C級 352000 2900 D級 3520000 29000 2.6監(jiān)測頻率： 2.6.1每季度對微生物潔凈實(shí)驗室進(jìn)行監(jiān)測，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件 2 ）。 262 D級取樣間每季度監(jiān)測所有房間，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件 1） 263每季度對D級潔凈區(qū)所有房間進(jìn)行監(jiān)測，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件 1）。 3、沉降菌的監(jiān)測 3.1概述：本測試方法利用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子 于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)

6、若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計數(shù)，以平板 培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈室（區(qū)）的潔凈 度。本法采用動態(tài)監(jiān)測，培養(yǎng)皿暴露時間為不大于 4小時。 3.2儀器和設(shè)備：高壓消毒鍋、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿（已滅菌，90mm X15mm ）、 大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）或沙氏瓊脂培養(yǎng)基（SDA）。 3.3測試步驟： 3.3.1測試前培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。將已于 30 35 C恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)48 小時且無菌落生長的培養(yǎng)皿按照采樣點(diǎn)布置圖逐個放置， 然后從里到外逐個打開培養(yǎng)皿 蓋，使培養(yǎng)基表面暴露在空氣中。全部采樣結(jié)束，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培

7、養(yǎng)。 采用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后在3035 C下培養(yǎng)，時間不 少于2天。采用沙氏瓊脂培養(yǎng)基（SDA）配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后在2025 C下培養(yǎng)，時 間不少于5天。每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗，檢查培養(yǎng)基本身是否污染，可每批選定3只培 養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。 3.3.2菌落計數(shù)：用肉眼直接計數(shù)，然后用510倍放大鏡檢查有否遺漏。若培養(yǎng)皿 上有2個或2個以上菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上的菌落計數(shù)。 3.3.3采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置：參照懸浮粒子的采樣點(diǎn)數(shù)目。 3.3.4最少培養(yǎng)皿數(shù)：在滿足最少采樣點(diǎn)數(shù)目的同時，還應(yīng)滿足最少培養(yǎng)皿數(shù) 最少培養(yǎng)皿數(shù) 潔凈度級別 最少培養(yǎng)皿數(shù)（90mm

8、 ） A級 2 C級 2 D級 2 * * 3.3.5采樣次數(shù)：每個采樣點(diǎn)采樣一次 3.3.6評定標(biāo)準(zhǔn)： 潔凈度級別 浮游菌 cfu/m 3 沉降菌（ 90mm ） cfu/4 小 時 接觸蝶 cfu/ 蝶 手套 cfu/ 手 套 A級 小于1 小于1 小于1 小于1 C級 100 50 25 D級 200 100 50 3.3.7監(jiān)測頻率： 3.3.7.1微生物潔凈實(shí)驗室凈化臺樣品每次實(shí)驗時監(jiān)測，其他房間每周一次并及時 填寫監(jiān)測記錄（附件4 ）。 337.2 D級取樣間每季度監(jiān)測所有房間，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件 3）。 3.3.7.3 D級潔凈區(qū)每季度監(jiān)測所有房間，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件

9、 3）。 3.3.7.4陽性對照間生物安全柜每次實(shí)驗時監(jiān)測，其他房間每季度測一次并及時填 寫監(jiān)測記錄（附件4） 3.3.7.5微生物潔凈實(shí)驗室表面微生物（手套及操作服）每周測一次，并及時填寫 監(jiān)測記錄（附件4 ）。 4、浮游菌的監(jiān)測 4.1概述 本方法采用計數(shù)濃度法，即通過收集懸游在空氣中的生物性粒子于專門 的培養(yǎng)基，經(jīng)若干時間，在適宜的生長條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計數(shù)，從而判 定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微生物數(shù)，以此來評定潔凈室 （區(qū)）的潔凈度。本法采 用動態(tài)監(jiān)測。 4.2儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基：FKC-1型浮游菌采樣器，嚴(yán)格按照浮游菌采樣器操作及 維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程（SOP-ZL96-1

10、）操作。 培養(yǎng)皿（已滅菌， 90mm X15mm ）、大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）或沙氏瓊 脂培養(yǎng)基 （SDA）、恒溫培養(yǎng)箱。 4.3測試步驟 431測試前儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。采樣器進(jìn)入被測房間前先的消毒劑 滅菌，用于100級潔凈室的采樣器宜一直放在被測房間內(nèi)。 先用消毒劑消毒采樣器的頂 蓋、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。采樣 口及采樣管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對采樣管的外壁及內(nèi)壁進(jìn)行消毒時，應(yīng) 將管中的殘留液倒掉并晾干。采樣者應(yīng)穿戴與被測潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤上放 入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒。 4.3.2儀器經(jīng)消毒后先不

11、放入培養(yǎng)皿， 開動真空泵抽氣， 使儀器中的殘余消毒劑蒸 發(fā)， 時間不少于5min，并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子 后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。置采樣口于采樣點(diǎn)后，依次開啟 采樣器、真空泵，轉(zhuǎn)動定時 * * 器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時間。 433培養(yǎng) 全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在30 C35 C 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于48h。每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗，檢驗培養(yǎng)基本身是否污染。 可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。 4.3.4菌落計數(shù) 用肉眼直接計數(shù)、標(biāo)記或在菌落計數(shù)器上點(diǎn)計，然后用 510 倍放大鏡檢查，有否遺漏。若平板上有 2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍

12、以 2 個或2個以上的菌落計數(shù)。 4.4采樣點(diǎn)數(shù)量及其布置 浮游菌測試的最少采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置參照懸浮粒子的 采樣點(diǎn)數(shù)目。 4.5監(jiān)測頻率： 4.5.1微生物潔凈實(shí)驗室每季度監(jiān)測一次，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件 6 ）。 4.5.2 D級取樣間每季度監(jiān)測所有房間，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件 5）。 4.5.3 D級潔凈區(qū)每季度監(jiān)測所有房間，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件 5）。 5、 注意事項 5.1使用前仔細(xì)檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不 能使用。 5.2采取一切措施防止采樣管的污染和其他人為對樣本的污染。 5.3對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。 5.4由于細(xì)菌種

13、類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì) 觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細(xì)菌菌落或培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必 要時用顯微鏡鑒別。 6、 年度回顧審核與數(shù)據(jù)趨勢分析 6.1品管部每年對通過質(zhì)量回顧對監(jiān)測數(shù)據(jù)收集并經(jīng)評價，用統(tǒng)計分析圖將趨勢直 觀地反映出來，在圖中標(biāo)出警戒限度及糾偏限度。 6.2根據(jù)趨勢分析結(jié)果可對環(huán)境控制區(qū)的微生物學(xué)質(zhì)量做出評估，并對警戒和糾偏 限度做出相應(yīng)調(diào)整，并通知相關(guān)部門 7、 警戒限度與糾偏限度的確定原則 7.1警戒限度：用以指示環(huán)境中的微生物水平是否有偏離正常水平的可能性如超 過，至少應(yīng)予以調(diào)查。 7.2糾偏限度：一旦超出，表示環(huán)境中微生物污

14、染水平已嚴(yán)重偏離正常水平，對產(chǎn) 品質(zhì)量造成高度的污染風(fēng)險必須立即采取糾偏措施。 7.3制定依據(jù):警戒限、糾偏限以正常監(jiān)測數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，并賦與一定的安全系數(shù)。即: 警戒限度二平均值+ 2 c, 糾偏限度二平均值+ 3(7 8、 附件1潔凈區(qū)懸浮粒子監(jiān)測記錄(R-SOP-ZL66-1-01 ) 附件2微生物潔凈實(shí)驗室懸浮粒子監(jiān)測記錄(R-SOP-ZL66-1-02 ) 附件3潔凈區(qū)沉降菌監(jiān)測記錄(R-SOP-ZL66-1-03 ) 附件4微生物潔凈實(shí)驗室沉降菌監(jiān)測記錄(R-SOP-ZL66-1-04 ) 附件5潔凈區(qū)浮游菌監(jiān)測記錄(R-SOP-ZL66-1-05 ) * * 附件6微生物潔凈實(shí)驗室浮

15、游菌監(jiān)測記錄(R-SOP-ZL66-1-06 ) 附件7監(jiān)測點(diǎn)分布圖 9、修訂歷史 文件修訂、變更歷史 原文件編號 現(xiàn)文件編號 生效日期 修訂變更原因 * * 附件1 潔凈區(qū)懸浮粒子監(jiān)測記錄 編號：R-SOP-ZL66-1-01 監(jiān)測狀態(tài) 靜態(tài) 監(jiān)測日期 年 月 日 監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn) D 級：0.5 阿 3520000/m 3; 藥 m 29000 /m 3 報告日期 年 月 日 監(jiān)測依據(jù) GB/T16292-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）懸浮粒子的測試方法 監(jiān)測數(shù)據(jù) 房間名稱 平均值 房間名稱 平均值 0.5 m 5 pm 0.5 pm 5 pm 男二更 中控室 女二更 粉篩室 緩沖間 產(chǎn)氣劑前室2 洗衣

16、整衣間 配漿室 稱量室 制粒烘干室 備料室 *男二更 潔具間 *女二更 物料氣閘室 *緩沖間 內(nèi)包材室 *潔凈走廊 潔凈走廊 *中控室 暫存室 *模具室 顆粒填充室 *暫存室 產(chǎn)氣劑前室1 *物料緩沖間 * * 模具室 *器具存放室 預(yù)留間 *器具清洗室 配料室 *潔具間 器具存放室 *噴干室 器具清洗室 *內(nèi)包裝室 機(jī)械間 取樣緩沖間 取樣間 備注：帶“*”為一樓潔凈區(qū) 監(jiān)測人： 復(fù)核人:* * 附件2 微生物潔凈實(shí)驗室懸浮粒子監(jiān)測記錄 編號：R-SOP-ZL66-1-02 監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn) A 級：0.5 pm 3520/m 3; 5 阿 20/ m 3 監(jiān)測狀態(tài) 靜態(tài) C 級：0.5 pm 35

17、2000/m 3 ; 5 pm 2900/ m 3 監(jiān)測依據(jù) GB/T16292-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）懸浮粒子的測試方法 監(jiān)測數(shù)據(jù) 年 區(qū)域名稱 平均值 年 區(qū)域名稱 平均值 月 日 0.5 pm 5 pm 月 日 0.5 pm 5 pm * * 監(jiān)測人： 復(fù)核人:* * 附件3 潔凈區(qū)沉降菌監(jiān)測記錄 編號：R-SOP-ZL66-1-03 監(jiān)測狀態(tài) 動態(tài) 監(jiān)測日期 年 月 日 監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn) D 級：v 100cfu/4 小時，90mm 平皿 報告日期 年 月 日 監(jiān)測依據(jù) GB/T16294-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法 監(jiān)測數(shù)據(jù) 區(qū)域名稱 菌落數(shù) 平均菌 落數(shù) 區(qū)域名稱 菌落數(shù)

18、平均菌 落數(shù) 1#采樣 占 八、 （累計） 2#采樣 占 八、 （累計） 1#采樣 占 八、 （累計） 2#采樣 占 八、 （累計） 男二更 中控室 女二更 粉篩室 緩沖間 產(chǎn)氣劑前室 2 洗衣整衣間 配漿室 稱量室 制粒烘干室 備料室 *男二更 潔具間 *女二更 物料氣閘室 *緩沖間 內(nèi)包材室 *潔凈走廊 潔凈走廊 *中控室 暫存室 *模具室 顆粒填充室 *暫存室 產(chǎn)氣劑前室 1 *物料緩沖間 模具室 *器具存放室 * * 預(yù)留間 *器具清洗室 * * 監(jiān)測人： 復(fù)核人: 配料室 *潔具間 器具存放室 *噴干室 器具清洗室 *內(nèi)包裝室 機(jī)械間 取樣緩沖間 取樣間 備注：帶“*”為一樓潔凈區(qū)*

19、 * 沉降菌、溫濕度、壓差監(jiān)測記錄 微生物實(shí)驗室口 陽性菌對照室口 編號：R-SOP-ZL66-1-04 年 二更 cfu/ 皿 操作間 cfu/ 皿 操作臺 cfu/ 皿 相對 濕度% 溫度C 壓差 Pa 備注 月 日 1 2 1 2 1 2 附件4 * * 監(jiān)測人:復(fù)核人: * * 附件5 潔凈區(qū)浮游菌監(jiān)測記錄 編號：R-SOP-ZL66-1-05 監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn) D 級：w200cfu/m 3 監(jiān)測日期 年 月 日 監(jiān)測狀態(tài) 動態(tài) 報告日期 年 月 日 采樣點(diǎn) 2個（面積w 100m 2） 采樣里 200L/ 次 監(jiān)測依據(jù) GB/T16293-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）浮游菌的測試方法 監(jiān)測數(shù)據(jù) 區(qū)域名稱 菌落數(shù) cfu 菌落數(shù) cfu/m 3 區(qū)域名稱 菌落數(shù) cfu 菌落數(shù)