PH1423 CTAB抽提液實(shí)驗(yàn)步驟與方法_第1頁
PH1423 CTAB抽提液實(shí)驗(yàn)步驟與方法_第2頁
PH1423 CTAB抽提液實(shí)驗(yàn)步驟與方法_第3頁
全文預(yù)覽已結(jié)束

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、 PH1423|CTAB 抽提液 /CTAB Extract SolutionCatalog No :PH1423Size :500mL Store at RT簡介CTAB 是一種陽離子去污劑,具有從低離子強(qiáng)度的溶液中沉淀核酸和酸性多聚糖的特性,在這種條件下,蛋白質(zhì)和中性多聚糖仍留在溶液 里,在高離子強(qiáng)度的溶液里, CTAB 與蛋白質(zhì)和大多數(shù)酸性多聚糖以外的多聚糖形成復(fù)合物,只是不能沉淀核酸。因此, CTAB 可以用于 從大量產(chǎn)生粘多糖的有機(jī)體如植物以及某些革蘭氏陰性菌(包括 E.coli 的某些株中制備純化 DNA 。從植物組織中制備基因組 DNA 較常采用的方法有氯化離心法、 CTAB 抽

2、提法等。 CTAB 抽提法是經(jīng)典的植物 DNA 提取法,可以用于多種 不同類型植物樣品 DNA 的提取,獲得的量很高,但是純度一般,但是足夠用于大多數(shù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。 CTAB 抽提液的有效成分主要由 CTAB 、氯化鈉、 EDTA 等組成,附送 2-巰基乙醇,臨用前加入 2-ME ,使其更有效,更穩(wěn)定。試劑組分試劑 (A:CTAB 抽提液 -500ml-Store at RT試劑 (B:2-ME-10ml-Store at RT away from light產(chǎn)品保存Store at RT ,有效期 24個月使用步驟(僅供參考1、取 5ml 或適量 CTAB 抽提液,按 CTAB 抽提液:2

3、-ME=50:1的比例混勻,置于 15ml 或其它規(guī)格的離心管中, 60預(yù)熱。2、稱取 1.01.5g或適量新鮮植物組織或葉片,用預(yù)冷的液氮或干冰冷卻研缽或勻漿器,將新鮮植物組織或葉片粉碎成細(xì)粉末,將冷凍的 組織轉(zhuǎn)移至離心管中。3、向粉碎的組織中按 45ml/g加入預(yù)熱的 CTAB 抽提液,充分混勻, 65溫育 1560min,并不時混勻。4、加入等體積 24:1氯仿 /異戊醇,顛倒充分混勻, 8000g 離心 5min10min,回收上層水相(即上清液,該上清液中含有所需 DNA 。5、轉(zhuǎn)移上清液至新的離心管中,加入 1/22/3體積預(yù)冷的異丙醇,輕輕混勻,室溫靜置使核酸沉至管底。如果觀察不到沉淀,可在室溫 下靜置數(shù)小時至過夜。6、 2000g 離心 2min ,輕輕棄上清液。7、在松散的 DNA 沉淀物上加入 75%乙醇,室溫靜置 20min , 4000g 離心 10min ,輕輕棄上清液。8、自然干燥 DNA ,加入適量去離子水或 TE 緩沖液,低溫保存。注意事

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論