南美白對(duì)蝦 ( Penaeusvannamei ) 視神經(jīng)節(jié)和腦 免疫細(xì)胞化學(xué)研究3_圖文

1、3福建省重中之重“福建省海洋生物優(yōu)良種質(zhì)和生物活性物質(zhì)的應(yīng)用基礎(chǔ)研究”項(xiàng)目(19982002資助。葉海輝,博士,講師,E 2mail :haihuiye 1通訊作者收稿日期:2003202219,收修改稿日期:2003205220南美白對(duì)蝦(Penaeus vannamei 視神經(jīng)節(jié)和腦免疫細(xì)胞化學(xué)研究3葉海輝王桂忠 金朱興 李少菁 1黃輝洋 陳錦民(廈門(mén)大學(xué)海洋系亞熱帶海洋研究所;廈門(mén)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究室廈門(mén)361005(廈門(mén)大學(xué)海洋系亞熱帶海洋研究所廈門(mén)361005提要應(yīng)用抗脊椎動(dòng)物52羥色胺、神經(jīng)肽Y 、2內(nèi)啡肽、P 物質(zhì)、生長(zhǎng)抑素、胰高血糖素、催乳素抗體和S ABC 免疫細(xì)

2、胞化學(xué)方法,對(duì)南美白對(duì)蝦視神經(jīng)節(jié)和腦進(jìn)行了免疫細(xì)胞化學(xué)研究。結(jié)果表明,前4種抗體呈現(xiàn)免疫陽(yáng)性反應(yīng):52羥色胺免疫陽(yáng)性細(xì)胞分布于視神經(jīng)節(jié)的視神經(jīng)層、視內(nèi)髓和視端髓;前腦前中細(xì)胞群,中腦嗅葉內(nèi)側(cè)細(xì)胞群、嗅葉外側(cè)細(xì)胞群以及前腦中部的前端神經(jīng)髓質(zhì)呈免疫陽(yáng)性反應(yīng)。神經(jīng)肽Y 免疫陽(yáng)性細(xì)胞分布于視神經(jīng)節(jié)的4個(gè)神經(jīng)髓;前腦前中群細(xì)胞和前腦中部的前端神經(jīng)髓質(zhì)也呈陽(yáng)性反應(yīng)。P 物質(zhì)免疫陽(yáng)性細(xì)胞位于前腦前中群。2內(nèi)啡肽免疫陽(yáng)性細(xì)胞僅分布于后腦后側(cè)群。4種免疫陽(yáng)性物質(zhì)特異性的分布模式,為其可能參與調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌活動(dòng)提供了形態(tài)學(xué)證據(jù)。關(guān)鍵詞南美白對(duì)蝦,視神經(jīng)節(jié),腦,免疫細(xì)胞化學(xué)中圖分類(lèi)號(hào)Q952胺類(lèi)和肽類(lèi)是甲殼動(dòng)物體內(nèi)

3、重要的生物活性物質(zhì),可作為激素、神經(jīng)遞質(zhì)、神經(jīng)調(diào)質(zhì)參與調(diào)節(jié)生命活動(dòng)。迄今,已從甲殼動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)檢測(cè)出52羥色胺、多巴胺、腦啡肽、內(nèi)啡肽、P 物質(zhì)、催產(chǎn)素、血管緊張素、促黑色素激素、神經(jīng)肽Y 、生長(zhǎng)抑素、胃泌素、降鈣素等物質(zhì)(Fingerman et al ,1993,1994;Harzsch et al ,2002。視神經(jīng)節(jié)和腦是甲殼動(dòng)物神經(jīng)內(nèi)分泌中心,對(duì)蛻皮、生殖、血糖濃度變化和色素遷移等生理活動(dòng)具有重要的調(diào)節(jié)作用(Fingerman ,1997a ;Hu 2berman ,2000。開(kāi)展生物活性物質(zhì)在腦和視神經(jīng)節(jié)分布的定位研究,可為了解其神經(jīng)活動(dòng)機(jī)制提供基礎(chǔ)資料。南美白對(duì)蝦(Penaeus

4、 vannamei 隸屬甲殼綱(Crustacea 、十足目(Decapoda 、游泳亞目(Natantia 、對(duì)蝦科(Penaeidae 、對(duì)蝦屬(Penaeus ,是當(dāng)今世界養(yǎng)殖產(chǎn)量最高的三大優(yōu)良蝦類(lèi)的養(yǎng)殖種類(lèi)之一。目前,有關(guān)南美白對(duì)蝦的研究,主要集中在水產(chǎn)養(yǎng)殖和病害防治方面(劉恒等,1998;于琳江等,2001;雷質(zhì)文等,2002,尚未見(jiàn)有神經(jīng)內(nèi)分泌生理學(xué)方面的報(bào)道。本研究應(yīng)用52羥色胺、神經(jīng)肽Y 、P 物質(zhì)、2內(nèi)啡肽、胰高血糖素、生長(zhǎng)抑素和催乳素抗體進(jìn)行了免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn)前4種抗體呈現(xiàn)免疫陽(yáng)性反應(yīng),其余抗體為陰性反應(yīng)。4種免疫陽(yáng)性物質(zhì)特異性的分布模式,為其可能參與調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分

5、泌活動(dòng)提供了形態(tài)學(xué)證據(jù)。1材料與方法111取材與切片南美白對(duì)蝦18只,雌雄兼有,體長(zhǎng)11.413.8cm ,體重12.317.2g ,購(gòu)自廈門(mén)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng),全部為活體材料。迅速解剖出腦和視神經(jīng)節(jié),于B ouin s 液固定1618h ,常規(guī)脫水透明,石蠟包埋,連續(xù)橫切或縱切,切片厚度6m ,間隔取片,按順序貼片,37恒溫箱干燥備用。112主要試劑兔抗脊椎動(dòng)物52羥色胺(serotonin ,52HT 、P 物第35卷第1期海洋與湖沼V ol.35,N o.12004年1月OCE ANO LOGIA ET LI MNO LOGIA SINIC AJan.,2004質(zhì)(substance P,SP、2

6、內(nèi)啡肽(2Endorphin,2E p、生長(zhǎng)抑素(s omatostatin,SS、胰高血糖素(glucag on, G lu、催乳素(proctolin,PR L抗體為美國(guó)Z ymed公司產(chǎn)品。兔抗神經(jīng)肽Y(neuropeptide Y,NPY抗體和DAB為美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品。鏈霉菌抗生物素蛋白2過(guò)氧化物酶免疫細(xì)胞化學(xué)試劑盒(S ABC kit購(gòu)自武漢博士德公司。NPY抗體為即用型工作液,其余6種抗體的稀釋度均為150。113SABC免疫細(xì)胞化學(xué)程序切片脫蠟止水。3%H2O2/P BS室溫孵育10min,以消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活性。蒸餾水浸洗,P BS浸泡5min。滴加正常山羊血清(1

7、10孵育10min,封閉非特異性反應(yīng)部位。傾去血清,滴加第一抗體,37孵育1.5h。P BS浸洗3次×5min。滴加即用型生物素標(biāo)記的羊抗兔抗體,37孵育0.5h。P BS浸洗3次×5min。滴加即用型鏈霉菌抗生物素蛋白2過(guò)氧化物酶,37孵育0.5h。P BS浸洗3次×5min。0.06%DAB20.03%H2O2顯色510min。自來(lái)水沖洗,蘇木精復(fù)染,脫水,透明,封片。陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)采用相鄰切片,以正常羊血清代替第一抗體,同步進(jìn)行上述免疫細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)程序。2結(jié)果南美白對(duì)蝦的腦由前腦、中腦和后腦組成,左右兩側(cè)互為鏡像。視神經(jīng)節(jié)由外向內(nèi),可分為視神經(jīng)層(lamina

8、 ganglionaris,LG、視外髓(medulla externa, ME、視內(nèi)髓(medulla interna,MI和視端髓(medulla terminalis,MT等4部分。多數(shù)免疫陽(yáng)性細(xì)胞的胞質(zhì)呈棕褐色,內(nèi)有黑褐色的陽(yáng)性反應(yīng)顆粒,少數(shù)細(xì)胞陽(yáng)性反應(yīng)較淺,細(xì)胞質(zhì)中的反應(yīng)顆粒顏色較淡;細(xì)胞核空泡狀,為陰性反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)對(duì)照組結(jié)果均為陰性。211視神經(jīng)節(jié)52HT免疫陽(yáng)性細(xì)胞在LG內(nèi)緣、ME內(nèi)外緣、MI 內(nèi)外緣和MT外緣都有零星散布(圖1a,MT中陽(yáng)性細(xì)胞體積較大(圖1b,在MT近視神經(jīng)處也見(jiàn)到陽(yáng)性細(xì)胞。NPY免疫陽(yáng)性細(xì)胞在LG內(nèi)緣分布較多,排成一列。ME外緣陽(yáng)性細(xì)胞很小(圖1c,在ME內(nèi)緣

9、、MI內(nèi)緣與MT外緣也檢測(cè)到陽(yáng)性細(xì)胞(圖1d,e。除LG外,其他3個(gè)神經(jīng)髓質(zhì)都有陽(yáng)性反應(yīng)。MT中的陽(yáng)性反應(yīng)髓質(zhì)集中在MT外側(cè)細(xì)胞群附近。視神經(jīng)節(jié)中未檢測(cè)到SP免疫陽(yáng)性反應(yīng)和2E p 免疫陽(yáng)性反應(yīng)。212腦52HT免疫陽(yáng)性反應(yīng)強(qiáng),陽(yáng)性細(xì)胞位于前腦和中腦,細(xì)胞數(shù)量最多的部位是中腦嗅葉外側(cè)群(圖1f,其次是嗅葉內(nèi)側(cè)細(xì)胞群(圖1g,在前腦的前中群也檢測(cè)到少量免疫陽(yáng)性細(xì)胞(圖1h。但神經(jīng)髓質(zhì)中只有前腦中部的前端神經(jīng)髓檢測(cè)到陽(yáng)性反應(yīng)(圖1h。NPY免疫陽(yáng)性細(xì)胞只位于前腦前中群,有的細(xì)胞陽(yáng)性反應(yīng)較弱,另有一些細(xì)胞陽(yáng)性反應(yīng)強(qiáng),染色深(圖1i。前腦中部的前端神經(jīng)髓質(zhì)呈免疫陽(yáng)性反應(yīng),嗅葉免疫陽(yáng)性較弱,染色淺。SP

10、免疫陽(yáng)性細(xì)胞僅分布于前腦前中群(圖1j。2E p免疫陽(yáng)性細(xì)胞位于后腦后側(cè)群,免疫陽(yáng)性反應(yīng)較弱(圖1k。3討論31152HT免疫陽(yáng)性反應(yīng)52羥色胺又稱(chēng)血清動(dòng)素(serotonin,屬于一種重要的生物胺。應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)、放射免疫法和色譜等技術(shù),在甲殼動(dòng)物的視神經(jīng)節(jié)、腦、腹神經(jīng)鏈、圍食道神經(jīng)節(jié)、口胃神經(jīng)節(jié)和圍心器等處,都檢測(cè)出52HT,52HT在甲殼動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)的廣泛分布反映了其生理作用的多樣性(Fingerman et al,1994。52HT陽(yáng)性細(xì)胞在視神經(jīng)節(jié)的分布有不少報(bào)道。黃道蟹(Cancer antennarius的ME和MI外緣52HT細(xì)胞多,竇腺下方和X器各有1個(gè)細(xì)胞(Rudolph

11、 et al, 1990。同樣,軟尾太平蛄(Pacif astacus leniusculus的ME和MI外緣也散布一些陽(yáng)性細(xì)胞,但神經(jīng)纖維的陽(yáng)性反應(yīng)更強(qiáng)烈,在ME和MI各自形成3條陽(yáng)性反應(yīng)帶。MT的陽(yáng)性細(xì)胞主要分布于腹面外緣。視神經(jīng)節(jié)內(nèi)有陽(yáng)性神經(jīng)纖維進(jìn)入前腦(Elofss on, 1983。南美白對(duì)蝦視神經(jīng)節(jié)的4個(gè)髓中都有52HT 陽(yáng)性細(xì)胞分布,但神經(jīng)髓質(zhì)未見(jiàn)陽(yáng)性反應(yīng),這與上述種類(lèi)差異頗大,而與鋸齒長(zhǎng)臂蝦(Palaemon serratus的結(jié)果相似(Bellon2Humbert et al,1988。研究表明,52HT對(duì)視神經(jīng)節(jié)多種神經(jīng)激素的分泌具有調(diào)節(jié)作用,如促進(jìn)紅色素?cái)U(kuò)散激素(red

12、pigment dispersing horm one的分泌,從而調(diào)節(jié)小網(wǎng)膜細(xì)胞的光敏感桿束的活動(dòng);誘導(dǎo)光敏小網(wǎng)膜細(xì)胞中的近端小網(wǎng)膜色素(proximal retinal pigment遷移到完全黑暗的位置;增強(qiáng)離體眼柄X器內(nèi)蛻皮抑制激素(m olt inhibiting horm one,MIH的合成分泌;刺激竇腺中甲殼動(dòng)物高血糖素(crustacean hyperglycemie horm one,CHH的釋放(Fingerman et al,1994。南美白對(duì)蝦視神經(jīng)節(jié)中1期葉海輝等:南美白對(duì)蝦(Penaeus vannamei視神經(jīng)節(jié)和腦免疫細(xì)胞化學(xué)研究79圖1南美白對(duì)蝦視神經(jīng)節(jié)和腦的

13、免疫細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)Fig.1Immun oreactivity of the optic ganglia and the brain of Penaeus vannameia.LG內(nèi)緣的52HT免疫陽(yáng)性細(xì)胞;b.MT中52HT免疫陽(yáng)性細(xì)胞;c.ME外緣NPY免疫陽(yáng)性細(xì)胞;d.ME內(nèi)緣的NPY免疫陽(yáng)性細(xì)胞;e.MI內(nèi)緣的NPY免疫陽(yáng)性細(xì)胞;f.嗅葉外側(cè)群的52HT免疫陽(yáng)性細(xì)胞;g.嗅葉內(nèi)側(cè)群的52HT免疫陽(yáng)性細(xì)胞;h.前腦前中群細(xì)胞(和前腦中部的前端神經(jīng)髓(呈52HT免疫陽(yáng)性反應(yīng);i.前腦前中群的NPY免疫陽(yáng)性細(xì)胞;j.前腦前中群SP免疫陽(yáng)性細(xì)胞;k.后腦后側(cè)群2E p免疫陽(yáng)性細(xì)胞。放大倍數(shù)均為&

14、#215;330較廣泛分布的52HT免疫陽(yáng)性物質(zhì),提示52HT在神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)可能起著神經(jīng)遞質(zhì)的作用,參與了有關(guān)神經(jīng)激素的合成與釋放作用。軟尾太平蛄腦的前中區(qū)、后中區(qū)和嗅葉內(nèi)側(cè)的細(xì)胞群均有52HT陽(yáng)性細(xì)胞,前腦橋、中央體和嗅葉等多個(gè)神經(jīng)髓質(zhì)也有陽(yáng)性反應(yīng)(Elofss on,1983。南美白對(duì)蝦前腦中部的前端神經(jīng)髓質(zhì)、前腦的前中群、嗅葉內(nèi)側(cè)群和嗅葉外側(cè)群都呈52HT陽(yáng)性反應(yīng)。Johanss on(1991將嗅葉內(nèi)側(cè)的細(xì)胞群中的嗅覺(jué)中間神經(jīng)元分為:52HT陽(yáng)性大型細(xì)胞和52HT陽(yáng)性小型細(xì)胞:羅氏沼蝦(Macrobrachium rosenbergii只有大型細(xì)胞,刺鎧蝦(Munida sarni只有小

15、型細(xì)胞,而軟尾太平蛄和互愛(ài)蟹(Hyas araneus兼具兩種細(xì)胞。嗅覺(jué)中間神經(jīng)元類(lèi)型的不同反映了嗅覺(jué)信息加工處理過(guò)程的差異。南美白對(duì)蝦嗅葉內(nèi)側(cè)細(xì)胞群的52 HT陽(yáng)性神經(jīng)細(xì)胞也只有一種類(lèi)型,即為組織學(xué)觀察中的型神經(jīng)細(xì)胞。據(jù)美國(guó)Tulane大學(xué)Fingerman 課題組的報(bào)道,52HT能夠刺激克氏原螯蝦(Procam2 barus clarkii和大西洋招潮蟹(Uca pugilater的腦、胸神經(jīng)節(jié)分泌性腺刺激激素(g onad stimulating horm one, G SH,從而促進(jìn)性腺發(fā)育(Fingerman,1997b。Vaca 等(2000也發(fā)現(xiàn)注射52HT可以促進(jìn)南美白對(duì)蝦卵8

16、0海洋與湖沼35卷 巢成熟和產(chǎn)卵。本研究發(fā)現(xiàn),南美白對(duì)蝦腦內(nèi)52HT 免疫陽(yáng)性強(qiáng),為52HT 可能參與南美白對(duì)蝦G SH 分泌活動(dòng)提供了形態(tài)學(xué)依據(jù)。312NPY 免疫陽(yáng)性反應(yīng)NPY 為胰多肽家族的一個(gè)成員,對(duì)脊椎動(dòng)物的攝食、性行為、血壓和生理節(jié)律等生理活動(dòng)起著重要的調(diào)節(jié)作用(H oyle ,1998。迄今,NPY 在甲殼動(dòng)物分布的研究甚少,僅發(fā)現(xiàn)海蛄(Homarus gam 2 marus ME 和MI 具有少量NPY 陽(yáng)性細(xì)胞,竇腺呈陽(yáng)性反應(yīng)(Charmantier 2Daures et al ,1987。南美白對(duì)蝦視神經(jīng)節(jié)的4個(gè)神經(jīng)髓均有NPY 陽(yáng)性細(xì)胞;除LG 外,其他3個(gè)神經(jīng)髓質(zhì)都呈陽(yáng)

17、性反應(yīng)。南美白對(duì)蝦前腦中部的前端神經(jīng)髓質(zhì)、嗅葉和前腦前中群呈NPY 陽(yáng)性反應(yīng),這與陸生的蟹(Chiro 2mantes haematocheir 是一致的(H onma 2Y oshiharu et al ,1996。南美白對(duì)蝦NPY 免疫陽(yáng)性物質(zhì)分布前腦與嗅葉的特點(diǎn),或許提示了NPY 參與嗅覺(jué)形成和攝食活動(dòng)的生理作用。迄今,從原生動(dòng)物、腔腸動(dòng)物、甲殼動(dòng)物和脊椎動(dòng)物中均發(fā)現(xiàn)NPY 的存在(張小云等,1993;顧靜雄等,1998。鑒于NPY 在不同門(mén)類(lèi)動(dòng)物中的分布,可以認(rèn)為NPY 在生物系統(tǒng)發(fā)生過(guò)程中具有一定的保守性。313SP 免疫陽(yáng)性反應(yīng)SP 廣泛分布于脊椎動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)和外周器官中,與興奮平

18、滑肌、舒張血管、促進(jìn)腺體分泌、興奮脊髓運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元、參與軸突反射、調(diào)節(jié)水平衡以及與痛覺(jué)感受和傳遞有密切關(guān)系(顧增發(fā),1985。應(yīng)用脊椎動(dòng)物SP 抗體在龍蝦(Panulirus inter 2ruptus 視神經(jīng)節(jié)的4個(gè)神經(jīng)髓及竇腺,大西洋招潮蟹的小網(wǎng)膜細(xì)胞和4個(gè)神經(jīng)髓及竇腺都檢出陽(yáng)性反應(yīng)(Mancillas et al ,1981;Fingerman et al ,1985。SP 在竇腺中的分布,表明SP 具有神經(jīng)激素的作用。但南美白對(duì)蝦視神經(jīng)節(jié)中未檢出陽(yáng)性反應(yīng)。雜色瘦方蟹(Leptograpsus variegatus 和粗螯蛄(Cherax destructor 的前腦和中腦各有2個(gè)大型SP

19、 陽(yáng)性細(xì)胞,胞突末梢最終進(jìn)入嗅葉內(nèi)(Sandeman et al ,1990。美洲螯龍蝦(Hamarus americanus 腦內(nèi)SP 陽(yáng)性分布極其廣泛,除中腦嗅葉束神經(jīng)髓質(zhì)、第一觸角中央神經(jīng)髓質(zhì)、第一觸角兩側(cè)神經(jīng)髓質(zhì)外,其他神經(jīng)髓質(zhì)和各細(xì)胞群均呈陽(yáng)性反應(yīng)(Lang w orthy et al ,1997。南美白對(duì)蝦僅在前腦的前中群中檢測(cè)出SP免疫陽(yáng)性細(xì)胞,神經(jīng)髓質(zhì)呈陰性反應(yīng),SP 樣物質(zhì)分布模式與上述甲殼動(dòng)物相差甚遠(yuǎn),可能為物種差異造成。3142Ep 免疫陽(yáng)性反應(yīng)2E p 主要由下丘腦弓狀核及垂體中葉合成分泌,除了具有鎮(zhèn)痛和維持神經(jīng)內(nèi)分泌相對(duì)穩(wěn)定的作用以外,它可以通過(guò)相應(yīng)的受體作用于淋巴母

20、細(xì)胞對(duì)免疫系統(tǒng)產(chǎn)生廣泛的作用(曹莉等,1999。甲殼動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)2E p 的研究很少。南美白對(duì)蝦視神經(jīng)節(jié)未檢測(cè)出陽(yáng)性反應(yīng),但后腦后側(cè)群中檢測(cè)出2E p 免疫陽(yáng)性細(xì)胞,有關(guān)生理功能尚待進(jìn)一步研究。本實(shí)驗(yàn)中,G lu 、SS 和PR L 呈陰性反應(yīng),但陰性結(jié)果并不能說(shuō)明抗原不存在,可能由于以下原因?qū)е玛幮苑磻?yīng):這些物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)迥異于脊椎動(dòng)物,即種屬差異;南美白對(duì)蝦體內(nèi)這些物質(zhì)的含量太低,超出本實(shí)驗(yàn)方法的測(cè)試范圍;實(shí)驗(yàn)所采用的固定方法對(duì)于這些物質(zhì)來(lái)說(shuō)并非適宜,從而導(dǎo)致抗原失活;或許與本實(shí)驗(yàn)?zāi)厦腊讓?duì)蝦所處的蛻皮周期、生殖周期等生理狀態(tài)有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)到52HT 、NPY 、SP 和2E p 免疫陽(yáng)性

21、反應(yīng),但由于一個(gè)特定的抗體只能識(shí)別肽類(lèi)分子結(jié)構(gòu)的某一部分,因此單純根據(jù)免疫細(xì)胞化學(xué)方法,還不能排除某些與脊椎動(dòng)物神經(jīng)肽相類(lèi)似的分子(如只差個(gè)別的氨基酸與抗體發(fā)生非特異性的交叉反應(yīng),即僅用免疫細(xì)胞化學(xué)的方法,只能說(shuō)明所測(cè)得的免疫陽(yáng)性物質(zhì)的結(jié)構(gòu)與脊椎動(dòng)物相應(yīng)的肽類(lèi)物質(zhì)相似,還不能完全確定這些物質(zhì)的結(jié)構(gòu)。要正確識(shí)別實(shí)驗(yàn)所測(cè)得的肽類(lèi)物質(zhì),應(yīng)采用氨基酸順序不同的特異性抗體,并輔以其他分離技術(shù),如離子交換層析法、凝膠層析法和色譜等方法;而從化學(xué)上鑒定其氨基酸組成則是最可靠的方法。但本文的研究結(jié)果至少說(shuō)明,南美白對(duì)蝦體內(nèi)有些細(xì)胞和神經(jīng)纖維含有可以同脊椎動(dòng)物抗體結(jié)合的抗原決定部位。這些陽(yáng)性抗原可能與脊椎動(dòng)物神

22、經(jīng)肽類(lèi)完全相同,或者是其同源物質(zhì)。參考文獻(xiàn)于琳江,于奎杰,張乃禹,2001.南美白對(duì)蝦人工繁育技術(shù)的初步研究.海洋與湖沼,32(5:575580劉恒,李光友,1998.免疫多糖對(duì)養(yǎng)殖南美白對(duì)蝦作用的研究.海洋與湖沼,29(2:113118張小云,盧麗,邱子健等,1993.棘尾蟲(chóng)類(lèi)神經(jīng)肽的免疫細(xì)胞化學(xué)研究,實(shí)驗(yàn)生物學(xué)報(bào),26(4:483491顧靜雄,羅振國(guó),張小云,1998.水螅NPY 類(lèi)似物的分布定位.動(dòng)物學(xué)研究,19(4:331333顧增發(fā),1985.P 物質(zhì).見(jiàn):王志均主編.胃腸激素.北京:科學(xué)出版社,297311曹莉,蔣春雷,路長(zhǎng)林,1999.2內(nèi)啡肽的免疫調(diào)節(jié)作用.生理科1期葉海輝等:

23、南美白對(duì)蝦(Penaeus vannamei 視神經(jīng)節(jié)和腦免疫細(xì)胞化學(xué)研究81學(xué)進(jìn)展,30(1:3840雷質(zhì)文,黃,史成銀等,2002.白斑綜合癥病毒(WSS V的宿主調(diào)查.海洋與湖沼,33(3:250258Bellon2Humbert C,Van Herp F,1988.Localization of serotonin2like im2 munoreactivity in the eyestalk of the prawn Palaemon serratus(Crus2 tacea,Decapoda,Natantia,J M orphology,196:307320 Charmantier

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35、aculture,182: 37338582海洋與湖沼35卷1期 葉海輝等 : 南美白對(duì)蝦 ( Penaeus vannamei 視神經(jīng)節(jié)和腦免疫細(xì)胞化學(xué)研究 83 IMMUNOCYTOCHEMICAL STUDIES ON THE OPTIC GANG IA AND THE L BRAIN OF P ENA EUS VANNAM EI YE Hai2Hui , WANG Gui2Zhong , J IN Zhu2Xing , LI Shao2Jing , HUANG Hui2Yang , CHEN Jin2Min ( Department of Oceanography , Institut

36、e of Subtropical Oceanography of Xiamen University ; Laboratory of Cell Biology , School of Life Science , Xiamen University , Xiamen , 361005 ( Department of Oceanography , Institute of Subtropical Oceanography of Xiamen University , Xiamen , 361005 Abstract Amines and peptides are important substa

37、nces of biological activity in crustaceans. In the life process they play the role of hormone , neurotransmitter and/ or neuromodulator , the optical ganglia and the brain are the center of neuroendocrinology in crustaceans , exerting significant modulation in molting , reproduction and other physic

38、al activities. Penaeus vannamei , despite chemistry techniques were used to observe the immunoreactive neurons and neuropils in the optic ganglia and brain of P. van2 proofs for its engagement in the secretion of GSH ( gonad stimulating hormone . The specific distribution patterns of immunoreac2 bio

39、logical limits of this research. Key words Penaeus vannamei , Optic ganglia , Brain , Immunocytochemistry © 1994-2006 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. tive cells existed in the anterior median cluster of protocerebrum and the posterior lateral cluster of

40、tritocerebrum respectively. of neuromodulator in the nerve cells. The 52HT immunoreactivity in the cerebrum of P. vannamei may supply morphological tive substances against NPY, Ep , SS and SP may also supply morphological proofs for their different neurophysiological func2 2 tions. No immunoreativities were found against SS , G and PRL. However , it cannot be concluded that these 4 corresponding lu antigen do not actually exist in the nervous system of P