醫(yī)院病理科分子病理實(shí)驗(yàn)室實(shí)施方案

1、SEEPOO TECH*醫(yī)院病理科分子病理實(shí)驗(yàn)室推薦方案目錄第一部分 分子病理概述31.1分子病理診斷的應(yīng)用范圍51.2常用分子病理技術(shù)51.3 FISH-熒光原位雜交61.4部分FISH產(chǎn)品對(duì)比（廠家提供，僅供參考）71.5實(shí)時(shí)熒光定量PCR91.6 基因測序10第二部分 分子病理實(shí)驗(yàn)室設(shè)施與環(huán)境11第三部分 病理科實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)12第四部分 分子病理常用檢測設(shè)備131、熒光顯微鏡原位雜交圖像分析系統(tǒng)132、Leica Bond-Max全自動(dòng)免疫組化和原位雜交多功能染色機(jī)133、羅氏LightCycler® 480 模塊式高通量實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)144、羅氏BenchMar

2、k GX 全自動(dòng)多功能組織病理檢測系統(tǒng)155、Illumina HiSeq 2000高通量測序儀156、NatureGene TermoBrite 原位雜交儀167、力康HFsafe-1200 Class Type A2 生物安全柜178、Neofuge1600 Healforce 臺(tái)式高速冷凍大容量離心機(jī)18第五部分 分子病理實(shí)驗(yàn)室推薦設(shè)備型號(hào)及預(yù)算19方案一 初級(jí)配置方案19方案二 專業(yè)性配置方案19方案三 科研型配置方案20第六部分 分子病理常用試劑及價(jià)格20第七部分 分子病理經(jīng)濟(jì)效益分析257.1熒光原位雜交（FISH）檢測項(xiàng)目的經(jīng)濟(jì)價(jià)值257.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR項(xiàng)目的經(jīng)濟(jì)價(jià)值27

3、第一部分 分子病理概述病理為醫(yī)之本 As is our pathology, so is our medicine器官病理學(xué)組織細(xì)胞病理學(xué)臨床病理免疫組化分子病理18-19世紀(jì)19世紀(jì)19世紀(jì)中葉取活體病變組織做病檢提高病理診斷準(zhǔn)確性20世紀(jì)早期診斷、靶向治療20世紀(jì)手術(shù)切除組織標(biāo)本病理檢測病理學(xué)發(fā)展過程分子病理學(xué)中常用的分子生物學(xué)技術(shù)主要有核酸分子雜交、PCR相關(guān)技術(shù)、免疫熒光化學(xué)、基因芯片以及DNA序列分析等。由于分子病理學(xué)的應(yīng)用，使得我們對(duì)疾病本質(zhì)的認(rèn)識(shí)更加深化，對(duì)于腫瘤的診斷和治療也取得很大的進(jìn)展。主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：1、腫瘤易感基因的檢測：腫瘤遺傳相關(guān)的易感基因檢測對(duì)于腫瘤高危人

4、群的篩檢具有實(shí)用價(jià)值，已明確的腫瘤易感基因及其相關(guān)腫瘤有Rb1(視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤)、WT1(腎母細(xì)胞瘤)等。除了檢測高危人群的易感基因外，有方法也應(yīng)用于正常人群腫瘤易感性檢測，如檢測Ret基因突變用于診斷型多發(fā)性內(nèi)分泌腫瘤，通過分析GST基因型以判斷個(gè)體暴露于致癌物時(shí)的致癌危險(xiǎn)性等。2、腫瘤相關(guān)病毒的檢測：如HPV病毒與宮頸癌的發(fā)生有很大關(guān)系，通過對(duì)HPV病毒的檢測可起到預(yù)防和提早治療的作用。而當(dāng)前國際上診斷HPV感染以DNA檢測為主。3、腫瘤的早期診斷：K-ras基因突變?cè)诮Y(jié)腸癌、胰腺癌和肺癌等腫瘤中發(fā)生率較高。應(yīng)用細(xì)針穿刺活檢材料檢測胰腺癌的第12密碼子變突。應(yīng)用PCR-RFLP方法檢測結(jié)腸

5、癌患者糞便中的Ras基因突變，其檢出率與瘤組織中相似，可用于高危人群的篩選。4、疑難腫瘤的診斷和分類：傳統(tǒng)的病理學(xué)診斷主要通過形態(tài)學(xué)和免疫表型來判斷淋巴細(xì)胞增生與淋巴細(xì)胞性腫瘤，但對(duì)對(duì)醫(yī)生的經(jīng)驗(yàn)要求較高，且難度較大。應(yīng)用RFLP分析免疫球蛋白或T細(xì)胞受體基因重排，具有鑒別診斷作用，且這種分子病理分型比免疫學(xué)分型更為準(zhǔn)確。對(duì)Bcr區(qū)基因重排的檢測，可對(duì)慢性粒細(xì)胞性白血病和急性粒細(xì)胞性白血病進(jìn)行鑒別診斷。N-myc和C-myc擴(kuò)增和表達(dá)的檢測，對(duì)鑒別神經(jīng)母細(xì)胞瘤和神經(jīng)上皮瘤具有應(yīng)用價(jià)值，因前者N-myc明顯擴(kuò)增，而后者則為C-myc明顯擴(kuò)增。 5、腫瘤的預(yù)后監(jiān)測：利用癌癥患者的全基因序列開發(fā)出的個(gè)

6、性化血液檢測方法有助于醫(yī)生調(diào)整癌癥患者的治療方案，可以監(jiān)測癌癥治療后的情況以及發(fā)現(xiàn)癌癥是否復(fù)發(fā)。6、為腫瘤個(gè)體化和預(yù)見性治療提供依據(jù)：腫瘤在發(fā)生、發(fā)展的不同時(shí)期，可能涉及不同基因的不同變化形式，而這種變化與腫瘤臨床治療的敏感性密切相關(guān)，如能在分子水平對(duì)腫瘤基因變化提供指標(biāo)，對(duì)腫瘤的個(gè)體化和預(yù)見性治療具有指導(dǎo)意義。如在90%的胰腺癌、50%的結(jié)腸癌、30%的非小細(xì)胞肺癌中存在Ras基因的激活，50%左右的腫瘤有P53基因不同形式的突變，這些基因的異常，使腫瘤對(duì)某些放療或化療的方法具有抵抗性，如能從基因水平上改變異常基因的狀態(tài)，則可提高放、化療的敏感性。 7、腫瘤的預(yù)后判斷：腫瘤基因的突變、擴(kuò)增及

7、過表達(dá)等改變常與腫瘤的預(yù)后密切相關(guān)。如HER2基因擴(kuò)增與乳腺癌發(fā)生發(fā)展及臨床預(yù)后密切相關(guān), HER2的陽性表達(dá)提示預(yù)后不良，可通過熒光原位雜交（FISH）技術(shù)進(jìn)行檢測，配合術(shù)后治療，指導(dǎo)臨床用藥。組織病理學(xué)診斷免疫病理學(xué)診斷分子病理學(xué)診斷病理學(xué)診斷及鑒別診斷腫瘤“個(gè)體化”靶向治療斷藥物療效的評(píng)價(jià)臨床預(yù)后評(píng)估及預(yù)測1.1分子病理診斷的應(yīng)用范圍n 人類遺傳病的基因診斷和產(chǎn)前診斷 n 腫瘤分子靶向治療 n 明確感染性疾病的病源體（細(xì)胞、真菌、病毒） n 多基因病研究 n 組織器官移植配型 n 輔助病理診斷 n 法醫(yī)學(xué) n 性別鑒定 n 基礎(chǔ)研究通過PCR技術(shù)確認(rèn)Ig和TCR基因是否發(fā)生重排，判定淋巴

8、造血系統(tǒng)疾病的良惡性。FISH法檢測乳腺癌her-2基因是否發(fā)生擴(kuò)增，指導(dǎo)臨床靶向藥物（赫賽?。┲委煛ISH法檢測滑膜肉瘤SYT基因是否發(fā)生易位，協(xié)助臨床診斷。通過對(duì)結(jié)直腸癌KRAS基因的突變測序分析，指導(dǎo)靶向用藥（愛比妥）。HPV多亞型檢測，提示宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。肺癌分子靶向治療 EGFR酪氨酸激酶抑制劑：吉非替尼(gefitinib, 商品名Iressa) 、埃羅替尼 (Erlotinib, 商品名Tarceva)檢測HER2狀態(tài)的臨床價(jià)值胃癌靶向治療患者篩選、療效預(yù)測 1.2常用分子病理技術(shù)免疫組織化學(xué)（IHC）技術(shù)檢測蛋白 分子原位雜交DNA，RNA 熒光原位雜交（FISH）技術(shù)DN

9、A，RNA多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR技術(shù)DNA，RNA 熒光定量PCRDNA，RNADNA測序技術(shù)DNA突變 生物芯片技術(shù)DNA，RNA，蛋白質(zhì)等DNA印跡（Southern blot）微衛(wèi)星不穩(wěn)定檢測（MSI） 醫(yī)院病理科開展分子病理實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，一般從實(shí)用出發(fā)，二級(jí)醫(yī)院主要開展熒光原位雜交（FISH）項(xiàng)目，三級(jí)醫(yī)院主要開展熒光原位雜交（FISH）、熒光定量PCR項(xiàng)目，有條件的三級(jí)醫(yī)院可以開展DNA基因測序項(xiàng)目。1.3 FISH-熒光原位雜交FISH技術(shù)是一種通過熒光標(biāo)記的DNA探針與細(xì)胞核內(nèi)的DNA靶序列雜交，在熒光顯微鏡下能原位顯示細(xì)胞核內(nèi)雜交信號(hào)的分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)。FISH技術(shù)檢測基因擴(kuò)增的準(zhǔn)

10、確性比其他檢測技術(shù)高，可以避免由于染色體的多體而呈現(xiàn)的假陽性，被譽(yù)為“金標(biāo)準(zhǔn)”。實(shí)驗(yàn)流程 FISH樣本的制備-探針的制備-探針標(biāo)記-雜交-（染色體顯帶）-熒光顯微鏡檢測-結(jié)果分析FISH優(yōu)點(diǎn)1.熒光探針商業(yè)化、采購方便、保存安全。2.實(shí)驗(yàn)周期短、特異性好、定位準(zhǔn)確。3.可定位1KB的DNA序列，靈敏度高4.一次染色可獲取24種不同顏色的染色體，對(duì)于隱匿性的缺失、異位診斷準(zhǔn)確。FISH技術(shù)在醫(yī)院的運(yùn)用 一切與染色體相關(guān)的科室。特別是病理科、血液科、婦產(chǎn)科、生殖中心（產(chǎn)前診斷、植入前診斷）等。目前應(yīng)用于臨床檢測的FISH基因探針有接近于一百種。在美國，F(xiàn)ISH探針已被FDA列為“特異性分析試劑”，

11、不需批準(zhǔn)即可用于臨床醫(yī)學(xué)檢測。所以，F(xiàn)ISH檢測在國外應(yīng)用非常廣泛和迅速。如Vysis、Cytocell等公司，其產(chǎn)品已遍布全球，但其價(jià)格較貴，嚴(yán)重阻礙了在我國國內(nèi)的推廣。國內(nèi)廠家，如金菩嘉和廣州安必平，近年來發(fā)展迅速，品種覆蓋范圍較廣，且產(chǎn)品質(zhì)量保證、性價(jià)比高。并且，更為有利的是，國內(nèi)公司供貨快速及時(shí)、售后服務(wù)好。由于國內(nèi)廠家的崛起，近年來國內(nèi)醫(yī)院開展FISH檢測的速度大大加快。FISH技術(shù)實(shí)驗(yàn)室基本要求實(shí)驗(yàn)室環(huán)境：樣本準(zhǔn)備區(qū)、暗室（10-15平米左右）；實(shí)驗(yàn)設(shè)備：熒光顯微鏡以及熒光成像分析系統(tǒng)、水浴鍋、原位雜交儀、冰箱、離心機(jī)、恒溫箱辦公設(shè)備：電腦、打印機(jī)實(shí)驗(yàn)耗材：FISH探針，進(jìn)口如雅培

12、、羅氏 細(xì)胞類探針：諸如血液病類，如白血病、淋巴瘤、骨髓瘤等。其次，產(chǎn)前診斷和產(chǎn)后篩查類；實(shí)體腫瘤類探針：病理科在檢測乳腺癌、子宮頸癌、膀胱癌、肺癌、宮頸癌、軟組織肉瘤、前列腺癌、甲狀腺癌等方面。技術(shù)人員：1人1.4部分FISH產(chǎn)品對(duì)比（廠家提供，僅供參考）品牌比較廣州安必平金菩嘉雅培（Vysis）探針種類覆蓋70種腫瘤探針，品種齊全，覆蓋了實(shí)體瘤及血液疾病。約40種，部分腫瘤沒有覆蓋。覆蓋70種腫瘤探針，品種齊全，覆蓋了實(shí)體瘤及血液疾病。探針質(zhì)量用多個(gè)克隆標(biāo)記探針，信號(hào)靈敏，背景低，質(zhì)量與國外相當(dāng)。實(shí)體瘤探針質(zhì)量與國外相當(dāng)，但血液病探針信號(hào)不佳。探針信號(hào)靈敏，背景低，質(zhì)量好。價(jià)格由于有自己的

13、研發(fā)團(tuán)隊(duì)，探針都為自產(chǎn)，成本較低，具有強(qiáng)大的價(jià)格競爭力，本公司的出現(xiàn)也打破了國內(nèi)公司一家獨(dú)大的壟斷。價(jià)格比雅培低，但高于安必平。由于異國操作，運(yùn)營成本高，價(jià)格高。操作便利性即用型探針：探針溶液已包含雜交液組分，可直接點(diǎn)樣雜交，無需雜交前溶解探針和混勻探針及雜交液，方便操作和減少出錯(cuò)。探針與雜交液分開，雜交前需在黑暗環(huán)境中混合兩者，操作不變、容易出錯(cuò)。探針與雜交液分開，雜交前需在黑暗環(huán)境中混合兩者，操作不變、容易出錯(cuò)。輔助試劑配送FISH所需的常規(guī)試劑（蛋白酶K或胃蛋白酶、NP-40、多聚甲醛、20×SSC等），節(jié)約客戶采購時(shí)間及成本。搭配蛋白酶K一起銷售。搭配蛋白酶K、NP-40等一

14、起銷售。熒光顯微系統(tǒng)配置從客戶出發(fā)，幫客戶選用性價(jià)比高的熒光顯微鏡及圖像分析軟件，操作便利，性價(jià)比高。滿足要求，但價(jià)格較高。滿足要求，但價(jià)格較高，且客戶可能需自己配置系統(tǒng)。顯微鏡明場觀察配相差功能，可鏡下仔細(xì)觀察蛋白酶消化狀態(tài)，對(duì)小體積樣本及珍貴樣本處理特別有效，避免消化不佳導(dǎo)致雜交結(jié)果不好。不配相差功能。不配相差功能。標(biāo)配濾塊對(duì)新客戶標(biāo)配四種顏色的熒光濾塊（DAPI、綠、紅、青），可同時(shí)滿足實(shí)體瘤及產(chǎn)前診斷。只標(biāo)配三種顏色濾塊（DAPI、綠、紅），如需開展產(chǎn)前診斷的話客戶還要額外購買青色濾塊。只標(biāo)配三種顏色濾塊（DAPI、綠、紅）；如需開展產(chǎn)前診斷的話客戶還要額外購買青色濾塊，且需用到金色濾

15、塊（容易出現(xiàn)竄色），濾塊配置要求太高。檢測靶標(biāo)因?yàn)闃?biāo)配了四種濾塊，可同時(shí)檢測三個(gè)靶標(biāo)（綠紅青），臨床檢測效率高、能降低試劑成本、且能應(yīng)用于多靶標(biāo)檢測的科研課題。只有兩個(gè)靶標(biāo)的試劑（綠紅），靶向選擇及組合受限。有同時(shí)檢測三個(gè)靶標(biāo)的試劑，但因?yàn)椴皇菢?biāo)配，應(yīng)用受限。圖像分析軟件有自主研發(fā)的圖像分析軟件，降低客戶采購成本。外購。外購。品種設(shè)計(jì)因?yàn)樗刑结樁紴樽灾餮邪l(fā)，可為客戶靈活設(shè)計(jì)產(chǎn)品探針組成，以便臨床、科研充分使用及降低試劑成本探針不能根據(jù)客戶需求進(jìn)行調(diào)整，可能存在試劑成本較高的風(fēng)險(xiǎn)。探針不能根據(jù)客戶需求進(jìn)行調(diào)整，可能存在試劑成本較高的風(fēng)險(xiǎn)。特色產(chǎn)品能設(shè)計(jì)多個(gè)“二合一”探針組合；15種微缺失探針（

16、用于流產(chǎn)原因篩查及其他少見綜合癥）；只有部分基因探針。不能根據(jù)客戶需求設(shè)計(jì)“二合一”探針。國內(nèi)SFDA證書兩個(gè)產(chǎn)品取得注冊(cè)受理號(hào)，即將取得注冊(cè)證書。幾個(gè)產(chǎn)品取得注冊(cè)證書。兩個(gè)產(chǎn)品取得注冊(cè)證書。地理位置位于廣州，華南地區(qū)客戶地理位置近，送貨及服務(wù)及時(shí)到位。位于北京，華南地區(qū)服務(wù)不便。位于國外，國內(nèi)雖有代理，但售后服務(wù)及技術(shù)支持不能最快反應(yīng)。平臺(tái)支持有多年其他產(chǎn)品的網(wǎng)絡(luò)支持，如病理科中的液基細(xì)胞學(xué)平臺(tái)，與客戶建立了多年來的良好關(guān)系。產(chǎn)品單一，只有FISH試劑，設(shè)備、人員投入高。有其他試劑，但病理科中只有FISH，無其他平臺(tái)支持。售后服務(wù)借助于廣泛的液基細(xì)胞學(xué)網(wǎng)絡(luò)及合作公司達(dá)安基因的全國網(wǎng)絡(luò)，售后服

17、務(wù)迅速周到。售后服務(wù)網(wǎng)絡(luò)單一，售后服務(wù)風(fēng)險(xiǎn)較高。售后服務(wù)網(wǎng)絡(luò)單一，售后服務(wù)風(fēng)險(xiǎn)較高。優(yōu)勢(shì)資源與達(dá)安基因合資，充分利用全國廣泛的銷售及技術(shù)支持資源。特殊資源有自己的學(xué)術(shù)核心期刊分子診斷與治療，方便客戶課題研究。無無1.5實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。臨床疾病診斷：各型肝炎、艾滋病、禽流感、結(jié)核、性病等傳染病診斷和療效評(píng)價(jià)；地中海貧血、血友病、性別發(fā)育異常、智力低下綜合癥、胎兒畸形等優(yōu)生優(yōu)育檢測；腫瘤標(biāo)志物及瘤基因檢測實(shí)現(xiàn)腫瘤病診斷；遺傳基因檢測實(shí)現(xiàn)遺傳病診斷。實(shí)時(shí)

18、熒光定量PCR分子病理診斷應(yīng)用 絕對(duì)定量（Absolute Quantification）> 病原體檢測(HiV,HBV,結(jié)核桿菌,H1N1等）> 基因表達(dá)研究(白血病融合基因表達(dá)檢測） 相對(duì)定量（Relative Quantification）> 腫瘤組織中的特定基因表達(dá)(EGFR,VEGFR,BRCA1&2,ERCC1&2,RRM1）> 腫瘤Bio-Marker特定miRNA檢測1900多個(gè)試劑盒> CNV研究超過160萬個(gè)TaqMan Copy Numer Assay> 藥物療效考核 突變分型（Allelic Discriminatio

19、n）> 基因突變分析-腫瘤個(gè)體化醫(yī)療> SNP研究2600 個(gè)藥物代謝試劑盒,個(gè)體化醫(yī)療> 物種鑒定、菌株鑒定 陰陽性檢驗(yàn)（Plus/Minus with IPC） 稀有突變檢測（早期腫瘤診斷：外周血痕量腫瘤細(xì)胞等熒光定量PCR顯著優(yōu)點(diǎn)       （1）、可以進(jìn)行準(zhǔn)確的定量檢測，可適用于基因診斷的各種疾病；       （2）、定量范圍極寬，樣品無需做梯度稀釋；       （3）、特異性更強(qiáng)，克

20、服了假陽性的主要來源；       （4）、操作快速，無需PCR后處理；       （5）、技術(shù)簡單，易于學(xué)習(xí)和掌握；       （6）、安全，對(duì)操作員和環(huán)境都無危害。       （7）、易于進(jìn)行電腦化操作和數(shù)據(jù)管理，有利于醫(yī)院的現(xiàn)代化建設(shè)。      實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測腫瘤的有關(guān)項(xiàng)目&#

21、160;     CEA  mRNA、 AFP mRNA、uPA mRNA、CK19 mRNA、CK20 mRNA、 MDRI mRNA。1.6 基因測序DNA 測序技術(shù)主要依據(jù) Sanger 的雙脫氧鏈終止法。以 DNA 單鏈為模板，在特定條件下，用特異的引物在測序級(jí) DNA 聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，不斷將 4 種脫氧核糖核苷酸 (dNTP) 加到引物的 3''- 羥基末端并使引物鏈得到延伸。將測序結(jié)果用DNA sequencing analysis 5.1軟件自動(dòng)分析原始測序數(shù)據(jù)，獲取測序電泳圖和序列圖。臨床基

22、因測序檢測對(duì)病理科的形態(tài)診斷金標(biāo)準(zhǔn)含金量的提升和分子病理技術(shù)的開發(fā)及經(jīng)濟(jì)效益改善有現(xiàn)實(shí)意義。對(duì)于可疑癌前病變患者可以明確其病變標(biāo)本是否真正含有候選基因的突變，以解除大量由免疫組化標(biāo)記癌基因陽性患者的心理恐慌和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。對(duì)癌癥家族有血緣關(guān)系的親屬檢測相關(guān)癌基因突變或多態(tài)性，具有亞健康診斷和體檢意義。第二部分 分子病理實(shí)驗(yàn)室設(shè)施與環(huán)境1、布局合理、實(shí)驗(yàn)室各區(qū)域的劃分；2、水電、照明、通風(fēng)符合實(shí)驗(yàn)室基本要求；3、消防設(shè)施齊全、消防通道暢通；4、石蠟組織、DNA樣本的存放；5、實(shí)驗(yàn)室記錄、操作手冊(cè)等文件存放；6、實(shí)驗(yàn)室耗材、試劑的存放；7、安裝生物安全防護(hù)設(shè)施；8、廢棄物的處置9、實(shí)驗(yàn)室的清潔與日常消

23、毒、并有相關(guān)記錄其中：PCR實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求明確分區(qū)，一般分為4個(gè)工作區(qū)；各區(qū)獨(dú)立，互不相通；設(shè)置緩沖間，設(shè)置傳遞窗；單一方向FISH實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求：需要避光獨(dú)立的暗室，專門的熒光顯微鏡觀察室第三部分 病理科實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)1、衛(wèi)生部【2009】31號(hào)文件病理科建設(shè)與管理指南（試行）2、2006年6月1日實(shí)施的醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法3、全國各省市的關(guān)于臨床病理專業(yè)質(zhì)量檢查及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)4、美國CAP認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)5、歐洲NordiQC認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)6、國際標(biāo)準(zhǔn)化組織制定并于2003年正式發(fā)布醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的管理標(biāo)準(zhǔn)：ISO15189:2003醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的專用要求，由國際實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可合作組織（ILAC）推薦

24、執(zhí)行。適合臨床多學(xué)科實(shí)驗(yàn)室對(duì)檢驗(yàn)前、中、后全過程的管理。第四部分 分子病理常用檢測設(shè)備1、徠卡Leica熒光顯微鏡原位雜交圖像分析系統(tǒng) 品牌/型號(hào):LEICA DM 2500 技術(shù)參數(shù)一、熒光顯微鏡部分1、配顯微鏡主機(jī)2、光學(xué)系統(tǒng)：無限遠(yuǎn)校正光學(xué)系統(tǒng)。3、具有明場、熒光觀察功能。4、6位物鏡轉(zhuǎn)換器。5、總放大倍數(shù)：50X-1000X。6、*三目觀察鏡筒，分光比例：100%/0,50%/50%,0/100%7、透射光照明：12V100W鹵素?zé)簟?、底座帶濾片架和日光濾光片。9、*單手操作樣夾, 方便同時(shí)記錄。10、*調(diào)焦與X-Y調(diào)節(jié)全對(duì)稱, 實(shí)現(xiàn)無疲勞操作。11、*調(diào)焦旋鈕高度可調(diào)12、*3步聚

25、焦(粗/中/細(xì)),鈕距可調(diào),停焦可調(diào)。13、*聚光鏡:帶與物鏡放大倍數(shù)相匹配的孔鏡光欄彩色標(biāo)記, 方便聚光鏡調(diào)節(jié)14、超硬鍍陶瓷載物臺(tái) 15、*載物臺(tái)調(diào)節(jié)左右手可以更換。16、X-Y移動(dòng)無暴露齒條。17、配平場半復(fù)消色差物鏡：1.25x（NA=0.04），平場半復(fù)消色差熒光物鏡10x（NA=0.30），平場復(fù)消色差熒光物鏡63x（NA=1.30）oil,平場半復(fù)消色差熒光物鏡100x（NA=1.30）oil。18、目鏡：10X寬視野目鏡，視野數(shù)為25mm；19、熒光裝置：5位熒光濾塊轉(zhuǎn)換器，配紫外、藍(lán)色、綠色熒光激發(fā)。UV 激發(fā): 激發(fā)340-380nm; 阻擋400nm; 發(fā)射: 425nm

26、;Blue激發(fā)：激發(fā)480/40nm; 阻擋505nm; 發(fā)射: 527/30nm;Green激發(fā)：激發(fā)546/12nm; 阻擋565nm; 發(fā)射: 600/40nm20、外置熒光光源：外置金屬鹵化物光源，長壽命，免調(diào)節(jié)工作時(shí)間2000小時(shí)以上。光源通過光纖傳輸，無熱力傳輸。 21、*有熒光“零像素點(diǎn)漂移”技術(shù)。22、*有光陷設(shè)計(jì)可以確保有很黑的背景:傾斜的發(fā)射光濾塊,吸收雜 光的黑色涂層,磨光表面和減少反射的涂層。23、配1 x接口二、數(shù)碼成像系統(tǒng)部分：配高靈敏度雙速單色冷CCD數(shù)碼攝像頭參數(shù)，半導(dǎo)體式制冷，-20度。 2/3英寸CCD，像素1392 x 1040(1.4 Mpixel)，像

27、素大小6.45x6.45um pixels，感光面積8.9 * 6.6 mm。三、細(xì)胞染色體核型及熒光原位雜交分析軟件 1、CytoVision karyotyping染色體核型及熒光原位雜交分析1.1、有完備的染色體圖象處理技術(shù)，對(duì)染色體之間的重疊交叉和連接等都可用單鍵自動(dòng)分割或手動(dòng)畫線分割，劃線切割時(shí)畫錯(cuò)可以任意后退回擦；1.2、畫中軸線分離染色體時(shí)，不同染色體自動(dòng)用不同顏色突出；1.3、可對(duì)顯帶不夠清晰的染色體應(yīng)用不同的高斯數(shù)陣顯示格式使條帶明晰；1.4、染色體放大、縮小、旋轉(zhuǎn)、翻轉(zhuǎn)、鏡向翻轉(zhuǎn)；1.5、可自動(dòng)或人工干預(yù)識(shí)別著絲粒位置，可自動(dòng)或手動(dòng)將染色體拉直1.6、可以創(chuàng)建用于自己染色體

28、樣品的分類體系以增加分類的精確性，也可以對(duì)已有的分類器進(jìn)行訓(xùn)練，使之與分析對(duì)象更匹配1.7、快速校正錯(cuò)放和未識(shí)別的染色體1.8、可以編輯定義染色體標(biāo)準(zhǔn)模式圖1.9、強(qiáng)大的(CASEVIEW)功能，可對(duì)捕獲的中期相圖進(jìn)行分類標(biāo)記，可根據(jù)需要選擇不同的中期相分別進(jìn)行核型分析、染色體數(shù)目直接計(jì)數(shù)和中期染色體直接標(biāo)記1.10、強(qiáng)大的多細(xì)胞平行比較(MULTICELL)功能，方便比較同一或不同玻片上的同一號(hào)染色體的差異1.11、強(qiáng)大的主任管理(DIRECTOR REVIEW)功能，方便和復(fù)查相關(guān)病例的核型結(jié)果；1.12、可識(shí)別G、R、Q、C、DAPI的顯帶分型，G帶有300、400、550、700、85

29、0條帶的分類標(biāo)準(zhǔn)、R帶有400、550條帶的標(biāo)準(zhǔn)；1.13、強(qiáng)大的實(shí)驗(yàn)室管理、質(zhì)量控制和數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)功能，可追蹤染色體分析的數(shù)量，可對(duì)各種不同類型病例進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)。2、CytoVision FISH熒光原位雜交分析模塊2.1、多通道顏色采集，不限數(shù)量2.2、可以識(shí)別出DAPI和PI染色的染色體分帶細(xì)節(jié)2.3、可對(duì)FISH圖像的探針信號(hào)對(duì)比度調(diào)節(jié)2.4、可對(duì)部分選擇對(duì)目標(biāo)信號(hào)單獨(dú)修飾2.5、有對(duì)信號(hào)的感興趣區(qū)采集功能2.6、可用于探針標(biāo)記和G-帶染色體比較2.7、可計(jì)算FISH信號(hào)的強(qiáng)度面積距離等2.8、可測量P端長度比（FLPTER）值2.9、可對(duì)中期FISH圖中的信號(hào)進(jìn)行定位2.10、可對(duì)中期F

30、ISH圖進(jìn)行染色體分割排列2.11、核型圖可顯示為反轉(zhuǎn)黑白條帶（與G帶帶紋匹配）2.12、FISH核型圖可顯示為彩色熒光圖2.13、彩色熒光信號(hào)可明確顯示位于哪條染色體具體什么位置2.14、強(qiáng)大的捕獲中和鋪貨后圖像處理功能（除常規(guī)GAMMA、對(duì)比度、銳化柔化、消除等等功能外，還可以使用多種高斯數(shù)陣改變圖像顯示方式）2.15、可手工直接對(duì)間期細(xì)胞進(jìn)行分類標(biāo)記，然后自動(dòng)統(tǒng)計(jì)每一類細(xì)胞的數(shù)量和百分比2.16、可在FISH圖像上添加文字和圖譜2.17、可與染色體標(biāo)準(zhǔn)模式圖或核型圖比較2.18、可與染色體核型圖出在一張報(bào)告上；2.19、Z軸分層采集：每種熒光素獨(dú)立設(shè)置不同參數(shù)，分別進(jìn)行分層采集，然后自動(dòng)

31、合彩色圖像，層間距根據(jù)細(xì)胞大小靈活設(shè)置，層數(shù)根據(jù)目標(biāo)厚度靈活設(shè)置，探針大小可靈活設(shè)置，克服了熒光信號(hào)不在同一焦平面上倒置部分信號(hào)虛化或缺失的問題，使FISH信號(hào)點(diǎn)數(shù)清晰可數(shù)，使FISH圖像漂亮美觀2.20、熒光點(diǎn)分類計(jì)數(shù)：自動(dòng)搜索間期細(xì)胞、定位間期細(xì)胞、自動(dòng)采集、統(tǒng)計(jì)每個(gè)間期細(xì)胞上不同熒光信號(hào)數(shù)量，統(tǒng)計(jì)融合信號(hào)，統(tǒng)計(jì)不同類細(xì)胞數(shù)量和百分比，可在掃描捕獲中使用z軸分層采集3、原裝進(jìn)口Dell電腦, Windows 7 控制系統(tǒng); 22” LCD 顯示屏。選配：建議核型加熒光原位雜交一起購買這樣對(duì)用戶老師使用范圍更廣，含蓋的面就比較全，如細(xì)胞中期和間期的熒光原位雜交都可以觀察，而且精度就會(huì)很高。2

32、、Leica Bond-Max全自動(dòng)免疫組化和原位雜交多功能染色機(jī)Bond-Max是一臺(tái)性能卓越的全自動(dòng)免疫組化染色機(jī)，免疫組化的所有步驟-烤片、脫蠟、抗原修復(fù)、阻斷、標(biāo)記一炕、標(biāo)記二抗、顯色直到復(fù)染-都可以由Bond-Max自動(dòng)完成，每個(gè)Bond-Max有3個(gè)玻片盤，同時(shí)最多可容納30張玻片，而每個(gè)玻片盤可獨(dú)立執(zhí)行不同程序3、羅氏LightCycler® 480 模塊式高通量實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)超過10年的實(shí)時(shí)定量PCR系統(tǒng)與試劑研發(fā)的豐富經(jīng)驗(yàn)，凝聚成今日業(yè)界的經(jīng)典之作。先進(jìn)   Therma-BaseTM 熱循環(huán)技術(shù)和改良光路設(shè)計(jì)確保檢測均一性，徹

33、底消除邊緣效應(yīng)。   可以進(jìn)行高分辨率熔解曲線分析的模塊式高通量熒光定量PCR系統(tǒng)。    配合LIMS系統(tǒng)及自動(dòng)進(jìn)樣機(jī)械臂可實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程控制和自動(dòng)化運(yùn)作。準(zhǔn)確度高  動(dòng)力學(xué)范圍廣，可檢測到100 -1010 個(gè)拷貝DNA。  重復(fù)性高，CV0.15%。  高重復(fù)性，孔間溫度均一性可達(dá) ±0.1   高分辨率，輕松區(qū)分1000與2000拷貝模板濃度差異。靈活   96孔、384孔熱循環(huán)模塊用戶自助更換。

34、0;  熒光染料和試劑完全開放。   5個(gè)激發(fā)通道，6個(gè)檢測通道，支持多種檢測模式。   可廣泛應(yīng)用于絕對(duì)定量、相對(duì)定量、產(chǎn)物鑒定、終點(diǎn)法基因分型、熔解曲線基因分型、Micro RNA研究、DNA甲基化研究、HRM基因掃描等研究。高速  反應(yīng)時(shí)間(40個(gè)循環(huán))：384孔40分鐘，96孔60分鐘。4、羅氏BenchMark GX 全自動(dòng)多功能組織病理檢測系統(tǒng) ·柔性自動(dòng)化使IHC、ISH和FITC載片的所有制備步驟實(shí)現(xiàn)完全自動(dòng)化；可單獨(dú)或同步處理IHC、ISH和FITC檢測。&

35、#183;靈活優(yōu)化臨床研究方案·可選擇您自己的原抗體，也可選擇Ventana提供的即用型抗體·可根據(jù)您的比容量/通量要求選擇一個(gè)或多個(gè)BenchMark·一觸式雙色方案·染色自動(dòng)烤片·一流技術(shù)·自動(dòng)烤片·自動(dòng)脫蠟·自動(dòng)細(xì)胞調(diào)節(jié)·自動(dòng)染色5、Illumina HiSeq 2000高通量測序儀HiSeq 2000測序涉及生物學(xué)各領(lǐng)域，包括DNA測序、RNA測序、宏基因組測序、甲基化測序、外顯子捕獲測序、ChIP-Seq等。因此，HiSeq 2000能夠?yàn)榛蛘{(diào)控分析、轉(zhuǎn)錄組分析、SNP位點(diǎn)、結(jié)構(gòu)變異分析和疾病

36、分析等提供迅捷、龐大、準(zhǔn)確的信息數(shù)據(jù)。6、NatureGene TermoBrite 原位雜交儀         一次可進(jìn)行12張切片的實(shí)驗(yàn)·反應(yīng)艙密封禁閉，溫度適宜·精確的溫控，溫室均勻一致·三種固定運(yùn)行模式·四十種自定義編輯程序·數(shù)字鍵盤操作，方便易行 TermoBrite是原位雜交領(lǐng)域的領(lǐng)航者，其優(yōu)質(zhì)的性能在廣大原位雜交用戶中得到好評(píng)。嚴(yán)格溫度控制· 溫差在設(shè)定溫度±1· 超強(qiáng)的溫度均一性· 不受切片數(shù)量影響·

37、 理想的溫度控制 簡單程序設(shè)置· 40種使用者自定義的程序· 3種已設(shè)置運(yùn)行模式· 顯示屏隨時(shí)顯示實(shí)驗(yàn)條件，實(shí)驗(yàn)過程一目了然 尺寸146mm×228mm×451mm重量8.5kg容量12張玻片功率240VAC1.6A處理時(shí)間可持續(xù)0-100小時(shí)溫度控制溫度范圍30-99環(huán)境溫度5-407、力康HFsafe-1200 Class Type A2 生物安全柜Heal Force做為中國最早和最權(quán)威的生物安全柜品牌之一，一直憑借優(yōu)異的產(chǎn)品品質(zhì)、良好的用戶口碑和專業(yè)的售后服務(wù)品質(zhì)深得全球100多個(gè)國家用戶的肯定，是中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)YY0569-2

38、005生物安全柜產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的主要起草單位。Heal Force 品牌生物安全柜在中國各級(jí)疾病控制中心、醫(yī)院臨檢系統(tǒng)和科研院所系統(tǒng)是廣大科研工作者進(jìn)行生物安全研究的重要防護(hù)屏障。8、Neofuge1600 Healforce 臺(tái)式高速冷凍大容量離心機(jī)HEAL FORCE是中國唯一一家同時(shí)獲得德國TUV ISO9001質(zhì)量管理體系認(rèn)證和歐盟CE產(chǎn)品質(zhì)量認(rèn)證的離心機(jī)品牌，全系列產(chǎn)品獲得中國SFDA認(rèn)證的品牌，是全球首家采用“Strong-Drive”驅(qū)動(dòng)軸技術(shù)、真正掌握膨脹閥反饋調(diào)節(jié)制冷技術(shù)以及離心機(jī)轉(zhuǎn)子硬質(zhì)陽極氧化處理工藝的離心機(jī)品牌，采用德國的工藝技術(shù)，優(yōu)質(zhì)的售后服務(wù)，多年的客戶好評(píng)，保證了絕對(duì)的

39、市場占有率。Heal Force Neofuge 15臺(tái)式高速離心機(jī) 最高轉(zhuǎn)速 16000rpm最大容量 4×100ml最大離心力 24900×g驅(qū)動(dòng)系統(tǒng) 無碳刷變頻電機(jī)溫度控制范圍 1040/-溫度控制精度 ±1時(shí)間設(shè)定 9h59min內(nèi)重量 79/58 Kg外形尺寸（長×寬×高） 580×520×315mm 第五部分 分子病理實(shí)驗(yàn)室推薦型號(hào)及預(yù)算方案一 初級(jí)配置方案序號(hào)設(shè)備品牌 型號(hào)單價(jià)數(shù)量金額備注01熒光顯微鏡成像分析系統(tǒng)奧林巴斯BX41或者NIKONEclipse 50i或者國產(chǎn)3900001390000低端顯微鏡國

40、產(chǎn)CCD熒光激發(fā)器國產(chǎn)軟件02恒溫加熱平臺(tái)常州菲普DB-3A型650016500高溫變性及烤片用03電熱恒溫水槽常州菲普SHA-CA型11000111000洗滌用04電熱恒溫培養(yǎng)箱上海精宏DNP-9052型460014600雜交用05生物安全柜上海力康HF safe900A22680012680006PCR擴(kuò)增儀Hema 9600基因擴(kuò)增儀47000147000合計(jì)485900（適合二級(jí)醫(yī)院，標(biāo)本量少，常規(guī)檢測，不涉及科研）方案二 專業(yè)性配置方案序號(hào)設(shè)備品牌 型號(hào)單價(jià)數(shù)量金額備注01熒光顯微鏡成像分析系統(tǒng)德國LeicaDM250005700001570000生物顯微鏡 雙速單色冷 CCD5位熒

41、光濾塊軟件CytoVision karyotyping02原位雜交儀美國StatSpinThermobrite8900017900003臺(tái)式高速離心機(jī)國產(chǎn)3200013200004實(shí)時(shí)熒光定量PCR凱杰Rotor-Gene Q 6plex360000136000005生物安全柜上海力康HFsafe-1200TE380001380001089000適合三級(jí)醫(yī)院病理科方案三 科研型配置方案序號(hào)設(shè)備品牌 型號(hào)單價(jià)數(shù)量金額備注01熒光顯微鏡成像分析系統(tǒng)德國LeicaDM40007500001750000智能顯微鏡高端配置02原位雜交儀美國StatSpinThermobrite8900018900003

42、臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)國產(chǎn)4000014000004實(shí)時(shí)熒光定量PCR羅氏LightCycler® 4806800001680000最先進(jìn)的PCR05生物安全柜上海力康HFsafe-1200TE3800013800006基因測序儀Illumina HiSeq 2000270萬1選配1597000適合綜合性醫(yī)院病理科，承擔(dān)科研項(xiàng)目。第六部分 分子病理常用試劑及價(jià)格序號(hào)名稱規(guī)格單位生產(chǎn)廠家中標(biāo)價(jià)1丙肝病毒熒光定量檢測10人份盒中山大學(xué)達(dá)安基因760.00 2結(jié)核桿菌DNA-PCR20T(定量)盒中山大學(xué)達(dá)安基因760.00 3乙肝病毒PCR熒光定量20T(定量)盒中山大學(xué)達(dá)安基因760.00

43、 4乙肝病毒PCR熒光質(zhì)控低值300ul*7盒中山大學(xué)達(dá)安基因70.00 5BCR/ABL融合基因檢測試劑盒10人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技4520.00 6EGFR基因擴(kuò)增檢測盒10人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技7000.00 7EGFR基因突變檢測盒10人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技4250.00 8HER-2 基因擴(kuò)增檢測盒20人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技18000.00 9TOP2A基因異常檢測盒10人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技7000.00 10膀胱癌細(xì)胞染色體及基因異常10人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技10540.00 11子宮頸細(xì)胞TERC位點(diǎn)擴(kuò)增10人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技3680.00 12kras基因突

44、變檢測盒10人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技11800.00 13Vysis SS18 Break Apart FISH Probe Kit (CE)150ul+20ul包vysis12694.00 14N-MYC SpectrumGreen (2p24)/CEP 2 SpectrumOrange Probe150ul+20ul包vysis19231.00 15EWSR1 (22q12) Dual Color, Break Apart Rearrangement Probe 150ul+20ul包vysis12681.00 161p36 / LSI 1q25 and LSI 19q13/19p13 D

45、ual Color Probe 1000ul*2包vysis21023.00 17IGH/MYC, CEP 8 Tri-color, Dual Fusion Translocation Probe150ul+20ul包vysis12925.00 18IGH/MALT1 t(14;18)(q32;q21) Dual Color, Dual Fusion Translocation Probe , 20 uL150ul+20ul包vysis13124.00 19IGH/CCND1 Dual Color, Dual Fusion Translocation Probe150ul+20ul包vysis

46、12925.00 20IGH/BCL2 Dual Color, Dual Fusion Translocation Probe (CE)200ul+200ul盒vysis12925.00 21TaqMan預(yù)混試劑盒200R盒ABI美國生物應(yīng)用5170.00 FISH技術(shù)其他試劑及耗材編號(hào)說明編號(hào)說明試劑1二甲苯（脫蠟）2無水乙醇（脫蠟脫水、老化）3蛋白酶K（組織切片消化）4胃蛋白酶（細(xì)胞滴片消化）520×SSC（預(yù)處理及洗滌）620×PBS（配制蛋白酶K溶液、樣本處理）7SDS（配制蛋白酶K溶液）8NP-40（雜交后洗滌)9聚乙二醇1500（細(xì)胞保存液）10KCl（低滲液）11甲醇（固定液）12冰醋酸（固定液）13鹽酸（配胃蛋白酶溶液）14多聚甲醛（固定液）15NaOH（配多聚甲醛固定液）16MgCl2（配多聚甲醛固定液）17