培養(yǎng)基及其制備技術(shù)-習(xí)題作業(yè)

1、培養(yǎng)基及其制備技術(shù)習(xí)題作業(yè)一、填空題1、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要以 、 、 、 方式進(jìn)入細(xì)胞。2、EMB培養(yǎng)基按培養(yǎng)基功能屬于 培養(yǎng)基。 3、微生物細(xì)胞的化學(xué)成分以_和_兩種狀態(tài)存在.4、微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其在機(jī)體中的生理作用可區(qū)分為：_、_、_、_、_、_等六大類。5、微生物營(yíng)養(yǎng)類型：_、_、_、_等。6、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入到細(xì)胞的四種形式：_、_、_、_等7、培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)進(jìn)行劃分為：_、_、_。二、應(yīng)用題1、鑒別培養(yǎng)基的定義以及應(yīng)用。2、請(qǐng)寫出選擇培養(yǎng)基并舉例說(shuō)明。3、請(qǐng)寫出合成培養(yǎng)基以及天然培養(yǎng)基的應(yīng)用以及特點(diǎn)。4、請(qǐng)寫出培養(yǎng)基配制的過(guò)程。三、選擇題1、微生物細(xì)胞中含量最多的元素是（ ）A、 C B

2、、 H C、 O D、 N2、瓊脂在培養(yǎng)基中的作用是（ ）A、碳源 B、氮 源 C、凝固劑 D、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑3、實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基是（  ）A、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基B、馬鈴薯培養(yǎng)基C、高氏一號(hào)培養(yǎng)基D、麥芽汁培養(yǎng)基4、在實(shí)驗(yàn)中我們所用到的淀粉水解培養(yǎng)基是一種（   ）培養(yǎng)基A、基礎(chǔ)培養(yǎng)基B、加富培養(yǎng)基C、選擇培養(yǎng)基D、鑒別培養(yǎng)基5、下列物質(zhì)屬于生長(zhǎng)因子的是（   ）A、葡萄糖       B、蛋白胨      C、NaCl

3、0;      D、維生素 6、培養(yǎng)基進(jìn)入細(xì)胞的方式中運(yùn)送前后物質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化的是（   ）A、主動(dòng)運(yùn)輸B、被動(dòng)運(yùn)輸C、促進(jìn)擴(kuò)散D、基團(tuán)移位7、常用消毒酒精的濃度的（   ）A、30% B、70% C、95% D、100%8、占微生物細(xì)胞總物質(zhì)量70%90%以上的細(xì)胞組分是（   ）A、碳素物質(zhì)  B、氮素物質(zhì) C、水 D、無(wú)機(jī)鹽 9、為縮短細(xì)菌培養(yǎng)的延遲期，菌齡應(yīng)控制在（   ） A、潛伏期   B、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期 &

4、#160; C、穩(wěn)定期  D、衰亡期10、酵母菌常用于釀酒工業(yè)中，其主要產(chǎn)物為（   ）A、乙酸 B、乙醇 C、乳酸 D、丙醇11、接種環(huán)常用的滅菌方法是（   ）A、火焰滅菌 B、干熱滅菌 C、高壓蒸汽滅菌 D、間歇滅菌12、微生物分批培養(yǎng)時(shí)，在延遲期（   ）A、微生物的代謝機(jī)能非常不活躍  B、 菌體體積增大  C、菌體體積不變  D、 菌體體積減小13、酵母菌適宜的生長(zhǎng)PH值為（   ）A、5.0-6.0B、3.0-4.0C、8.0-9.0D、7.0-7.5培養(yǎng)基及其

5、制備技術(shù)作業(yè)習(xí)題答案一、填空題：1、單純擴(kuò)散、促進(jìn)擴(kuò)散、主動(dòng)運(yùn)輸、基團(tuán)轉(zhuǎn)位2、鑒別培養(yǎng)基3、有機(jī)物、無(wú)機(jī)物4、碳源、氮源、能源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子、水5、光能自養(yǎng)型、化能自養(yǎng)型、光能異氧型、化能異養(yǎng)型二、應(yīng)用題：1、答：鑒別培養(yǎng)基是用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基中加入某種特殊化學(xué)物質(zhì)，某種微生物在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)后能產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物，而這種代謝產(chǎn)物可以與培養(yǎng)基中的特殊化學(xué)物質(zhì)發(fā)生特定的化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征性變化，根據(jù)這種特征性變化，可將該種微生物與其他微生物區(qū)分開來(lái)。鑒別培養(yǎng)基主要用于微生物的快速分類鑒定，以及分離和篩選產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物的微生物菌種。2、答：選擇培養(yǎng)基是用來(lái)將某種或某類

6、微生物從混雜的微生物群體中分離出來(lái)的培養(yǎng)基。根據(jù)不同種類微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同，在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，有利于所需微生物的生長(zhǎng)。一種類型選擇培養(yǎng)基是依據(jù)某些微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)需求設(shè)計(jì)的，例如，利用以纖維素或石蠟油作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，可以從混雜的微生物群體中分離出能分解纖維素或石蠟油的微生物；利用以蛋白質(zhì)作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，可以分離產(chǎn)胞外蛋白酶的微生物；缺乏氮源的選擇培養(yǎng)基可用來(lái)分離固氮微生物。另一類選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，這種化學(xué)物質(zhì)沒(méi)有營(yíng)養(yǎng)作用，對(duì)所需分離的微生物無(wú)害，但可以抑制或殺死其他微生物

7、，例如，在培養(yǎng)基中加入數(shù)滴10%酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)，從而由混雜的微生物群體中分離出放線菌；在培養(yǎng)基中加入亞硫酸銨，可以抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和絕大多數(shù)革蘭氏陰性細(xì)菌的生長(zhǎng)，而革蘭氏陰性的傷寒沙門氏菌(Salmomnella typhi)可以在這種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入染料亮綠(brilliant green)或結(jié)晶紫(crystal vio1et)，可以抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的生長(zhǎng)，從而達(dá)到分離革蘭氏陰性細(xì)菌的目的；在培養(yǎng)基中加人青霉素、四環(huán)素或鏈霉素，可以抑制細(xì)菌和放線菌生長(zhǎng)，而將酵母菌和霉菌分離出來(lái)?，F(xiàn)代基因克隆技術(shù)中也常用選擇培養(yǎng)基，在篩選含有重組質(zhì)粒的基因工程菌株過(guò)程中，利用質(zhì)粒

8、上具有的對(duì)某種(些)抗生素的抗性選擇標(biāo)記，在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)抗生素，就能比較方便地淘汰非重組菌株，以減少篩選目標(biāo)菌株的工作量。3、答： 天然培養(yǎng)基(complex medium) 這類培養(yǎng)基含有化學(xué)成分還不清楚或化學(xué)成分不恒定的天然有機(jī)物，也稱非化學(xué)限定培養(yǎng)基(chemically undefined medium)。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和麥芽汁培養(yǎng)基就屬于此類?；蚩寺〖夹g(shù)中常用的LB(LuriaBertani)培養(yǎng)基也是一種天然培養(yǎng)基。牛肉浸膏、蛋白胨及酵母浸膏的來(lái)源及主要成分營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來(lái) 源主要成分牛肉浸膏瘦牛肉組織浸出汁濃縮而成的膏狀物質(zhì)富含水溶性糖類、有機(jī)氮化合物、維生素、鹽等蛋白胨將肉

9、、酪素或明膠用酸或蛋白酶水解后干燥而成富含有機(jī)氮化合物、也含有一些維生素和糖類的粉末狀物質(zhì)酵母浸膏酵母細(xì)胞的水溶性提取物濃縮而成的膏狀物質(zhì)富含B類維生素，也含有有機(jī)氮化合物和糖類常用的天然有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括牛肉浸膏、蛋白胨、酵母浸膏(表5.10)、豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、稻草浸汁、羽毛浸汁、胡蘿卜汁、椰子汁等，嗜糞微生物(coprophilous microorganisms)可以利用糞水作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。天然培養(yǎng)基成本較低，除在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用外，也適于用來(lái)進(jìn)行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。 合成培養(yǎng)基(synthic medium)是由化學(xué)成分完全了解的物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基，也

10、稱化學(xué)限定培養(yǎng)基(chemically defined medium)，高氏I號(hào)培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基就屬于此種類型。配制合成培養(yǎng)基時(shí)重復(fù)性強(qiáng)，但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高，微生物在其中生長(zhǎng)速度較慢，一般適于在實(shí)驗(yàn)室用來(lái)進(jìn)行有關(guān)微 生物營(yíng)養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測(cè)定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。4、答：液體培養(yǎng)基的制備 （1）稱量 根據(jù)培養(yǎng)基配方要求，準(zhǔn)確稱取試劑與藥品。 （2）溶解 先在燒杯內(nèi)加入所需水量的2/3左右（可以是自來(lái)水、深井水或蒸餾水，根據(jù)項(xiàng)目要求而定），將稱取的各種成分放入水中加熱溶解。為避免因沉淀造成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失，加入各種成分的順序?yàn)椋合燃泳彌_化合物，再加主要元素

11、，然后再加微量元素，最后加維生素、生長(zhǎng)素等，待完全溶解后加水至量。 （3）調(diào)節(jié)pH 用滴管逐滴加入lmol/L的NaOH或lmol/L的HCl，邊攪動(dòng)邊用精密pH（5.59.0）試紙測(cè)其pH至所需值為止。 （4）過(guò)濾 需要過(guò)濾的培養(yǎng)基要趁熱用四層紗布過(guò)濾。在發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)中，這一步也可省去，但對(duì)培養(yǎng)微生物條件的控制及結(jié)果的觀察的培養(yǎng)基需要過(guò)濾。 （5）分裝 取玻璃漏斗一個(gè)，裝在鐵架上。漏斗出口用乳膠管與玻璃管相連接，乳膠管上裝一彈簧夾。趁熱將培養(yǎng)基放入玻璃漏斗內(nèi)分裝。分裝時(shí)用左手拿空管（錐形瓶）或手控制彈簧夾的放和關(guān)。注意不要沾染到試管壁和試管口，以免浸濕棉塞引起雜菌污染。 裝入試管（錐形瓶）的

12、液體培養(yǎng)基，根據(jù)試管的大小及需要而定，一般裝量為試管高度的1/5。 （6）包扎、滅菌 將分裝好的培養(yǎng)基塞上棉塞，再用牛皮紙包扎，注明培養(yǎng)基的名稱、配制日期、組別等，然后立即進(jìn)行高壓蒸汽滅菌（0.1MPa，121，30min）。固體培養(yǎng)基的制備 （1）稱量、溶解、調(diào)節(jié)pH與制備液體培養(yǎng)基的相同。 （2）加瓊脂熔化 先加熱配制好的液體培養(yǎng)基，沸騰后添加2的瓊脂，不斷攪拌直到完全熔化，然后加水至所需體積。 （3）過(guò)濾、分裝 同液體培養(yǎng)基的制備。但分量要適當(dāng)，如分裝在錐形瓶的量一般為其體積的；如用試管作斜面，則每管應(yīng)裝5mL左右（約為管長(zhǎng)的）。（4）包扎、滅菌 將分裝好的培養(yǎng)基塞上棉塞，再用牛皮紙包扎，注明培養(yǎng)基的名稱、配制日期、組別（在此操作中，應(yīng)注意盡量快速，以免培養(yǎng)基凝固），然后立