急性肝損傷動(dòng)物模型制備研究進(jìn)展_張琪

1、文章編號(hào) :1673-2995(2011 04-0216-05·綜 述 ·急性肝損傷動(dòng)物模型制備研究進(jìn)展Progress study of animal models of acute hepatic injury張 琪 1, 陳 輝 2, 彭順利 1, 白 楊 1綜述 , 鐘秀宏 3*審校 (吉林醫(yī)藥學(xué)院 :12009級(jí)臨床本科甲班 , 22008級(jí) 臨床本科班 , 3病理學(xué)教研室 , 吉林 吉林 132013摘 要 :肝臟疾病是影響人類健康的最為常見(jiàn)疾病之一 , 而各種肝臟疾病的發(fā)病機(jī)制的研究與治療藥物的篩 選 , 在很大程度上依賴于人類肝臟疾病病理機(jī)制相似的試驗(yàn)動(dòng)物模

2、型的建立和應(yīng)用 。 現(xiàn)在就試驗(yàn)性急性肝損 傷動(dòng)物模型的分類 、 造模方法 、 機(jī)制等進(jìn)行相關(guān)的闡述 。關(guān) 鍵 詞 :肝損傷 ; 異煙肼 ; 四氯化碳 ; 雷公藤 ; 造模方法中圖分類號(hào) :R-332文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 :A肝臟疾病是影響人類健康的最為常見(jiàn)疾病之一 。 各種有害因素導(dǎo)致的肝損傷主要有病毒性肝炎 、 酒精 性肝炎和藥物性肝炎等類型 , 其臨床表現(xiàn)為肝壞死 、 脂肪肝 、 膽汁淤積 、 肝纖維化 、 肝硬化以及肝癌等 。 目 前 , 對(duì)肝損傷的治療仍是一個(gè)全球性的嚴(yán)峻課題 , 而 各種肝臟疾病的發(fā)病機(jī)制的研究與治療藥物的篩選 , 在很大程度上依賴于人類肝臟疾病病理機(jī)制相似的 試驗(yàn)動(dòng)物模型的建

3、立和應(yīng)用 。 現(xiàn)在就試驗(yàn)性急性肝 損傷動(dòng)物模型的分類 、 造模方法 、 機(jī)制等進(jìn)行相關(guān)的 闡述 。1四氯化碳 (CCl4引起的肝損傷11造模方法常用大鼠和小鼠進(jìn)行急性肝損傷的造模 。 大鼠 造模 :大鼠體重為 200 250g , 常規(guī)飼養(yǎng) , 按 10mL / kg 容量 , 大鼠 1次性腹腔注射體積分?jǐn)?shù)為 01%, 或灌胃 01% 02%, 或皮下注射 05%的 CCl4油溶 液 , 染毒 12 24h 后處死大鼠 1。 小鼠造模 :小鼠體 重為 20 25g , 常規(guī)飼養(yǎng) , 按 10mL /kg經(jīng)小鼠腹腔注射 , 一次給予 0125%、 025%、 05%、 10%CCl 4溶 液 ,

4、 12 24h 后處死 , 均可制造小鼠急性肝損傷模 型 。 其中 0125%cq 腹腔注射制造的小鼠急性肝損 基金項(xiàng)目 :吉林醫(yī)藥學(xué)院大學(xué)生科研基 金 資 助 項(xiàng) 目 (吉 醫(yī) 學(xué) 科 字 2010第 3號(hào) 作者簡(jiǎn)介 :張 琪 (1990 , 女 (漢族 , 在讀本科 通訊作者 :鐘秀宏 (1971 , 女 (畬族 , 副教授 , 碩士 傷模型 , 可應(yīng)用于保健食品護(hù)肝功能的篩選 2。 根 據(jù)張孝衛(wèi) 3等人的研究發(fā)現(xiàn) , 大鼠的 CCl4肝損傷模 型具有良好的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性 。12機(jī) 制近年來(lái) , 一致認(rèn)為 CCl4肝毒的主要機(jī)制為自由基的形成及引發(fā)的鏈?zhǔn)竭^(guò)氧化反應(yīng) 。 CCl4的代謝產(chǎn) 物

5、能迅速與細(xì)胞成分發(fā)生不可逆的共價(jià)結(jié)合而導(dǎo)致 細(xì)胞死亡 。 特別是自由基作用于 DNA 時(shí) , 直接破壞 核酸 , 引起 DNA 斷裂或 DNA 與蛋白質(zhì)交聯(lián) , 影響其信息傳遞以及轉(zhuǎn)錄和復(fù)制 。 在 CCl4引起的脂質(zhì)過(guò)氧 化物和共價(jià)結(jié)合的雙重作用下 , 導(dǎo)致膜脂質(zhì)流動(dòng)性降 低 、 鈣泵抑制 、 谷胱甘肽活性抑制 、 線粒體功能喪失 、 肝細(xì)胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)失調(diào)及代謝紊亂 , 引起肝細(xì)胞損傷加 劇 4。CCl4所致急性肝損傷動(dòng)物模型形態(tài)學(xué)一般表現(xiàn) 為肝小葉中央?yún)^(qū)壞死和脂肪變性 , 血清學(xué)指標(biāo)為丙氨 酸氨基轉(zhuǎn)移酶 (ALT 、 天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 (AST 升高 。 還可以測(cè)定反映肝臟功能的血清學(xué)的

6、指標(biāo) , 如 總膽紅 (TB 、 總蛋白 (TP 、 白蛋白 (A 、 白球蛋白比 值 (APG 及 組 織 病 理 學(xué) 檢 查 , 肝 勻 漿 脂 質(zhì) 過(guò) 氧 化 (LPO 或丙二醛 (MDA 、 超氧化物歧化酶 (SOD 、 谷 甘肽過(guò)氧化物酶 (GSH-Px 或還原性谷胱甘肽 (GSH 等有關(guān)指標(biāo) 。2氨基半乳糖肝損傷21造模方法常用大鼠和小鼠進(jìn)行造模 , 將氨基半乳糖用生理 612 第 32卷 第 4期2011年 08月吉 林 醫(yī) 藥 學(xué) 院 學(xué) 報(bào)Journal of Jilin Medical CollegeVol32No4 Aug2011鹽水配制成 10%溶液 , 并用 1mmo

7、l /LNaOH 將 pH 調(diào) 至 70, 一次性腹腔注射 600 900mg /kg, 24 48h 后處死 。 顧呈華 5等人曾用 ICR 小鼠進(jìn)行急性尾靜 脈注射氨基半乳糖誘導(dǎo)小鼠肝損傷模型 , 發(fā)現(xiàn)具有染 毒特異性高 、 劑量 -效應(yīng)關(guān)系好 、 指標(biāo)特異性和靈敏度 高等特點(diǎn) , 是較理想的肝損傷造模方法 。22機(jī) 制氨基半乳糖是一種肝細(xì)胞磷酸尿嘧啶核苷干擾 劑 , 能競(jìng)爭(zhēng)性捕捉 UTP 生成二磷酸尿苷半乳糖 , 使磷 酸鳥(niǎo)苷耗竭 , 導(dǎo)致物質(zhì)代謝嚴(yán)重障礙 , 引起肝細(xì)胞變 性 , 解毒 機(jī) 制 障 礙 更 加 劇 了 氨 基 半 乳 糖 的 毒 性 作 用 6。 若反復(fù)多次給藥能誘發(fā)動(dòng)

8、物肝纖維化的慢性 肝損傷及癌變 。 其形態(tài)學(xué)表現(xiàn)為彌漫性的多發(fā)性片 狀壞死 , 脂肪變性不明顯 , 細(xì)胞內(nèi)呈現(xiàn)大量的 PAS 染 色陽(yáng)性的毒性顆粒 , 嗜酸性小體較多見(jiàn) , 與病毒性肝 炎造成的肝損傷類似 , 因此常用于肝炎藥物的研發(fā) 。 氨基半乳糖肝損傷模型是目前公認(rèn)的比較好的研究 病毒性肝炎的發(fā)病機(jī)制及有效治療藥物的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 模型 。3異煙肼性肝損傷31造模方法家兔對(duì)異煙肼敏感 , 故常選用家兔建立異煙肼性 肝損傷模型 。 先經(jīng)皮下注射 0135mmol /kg劑量的 異煙肼后 , 再每隔 4h 皮下注射 0128mmol /kg劑 量 , 2d 即可成功建立急性肝損傷模型 7。 祿保平

9、等 8采用 180mg /kg劑量異煙肼灌胃 18h 后也可成 功建立該模型 , 并認(rèn)為其肝損傷機(jī)制與自由基脂質(zhì)過(guò) 氧化反應(yīng)有關(guān) 。 也有學(xué)者 9聯(lián)合運(yùn)用異煙肼和利福 平建立藥物性肝損傷模型 。32機(jī) 制異煙肼是常用的抗結(jié)核病藥 , 具有肝毒性 , 多用 于藥物性肝炎的研究 。 異煙肼進(jìn)入肝細(xì)胞 , 首先形成 乙酰化異煙肼 , 并快速水解為聯(lián)胺 , 聯(lián)胺在細(xì)胞色素 P450的作用下 , 被氧化為無(wú)毒且具有活性的乙?；?異煙肼 , 乙?；悷熾乱环矫娼?jīng)過(guò)乙酰化形成二乙酰 異煙肼隨尿液排出 ; 另一方面與肝蛋白通過(guò)共價(jià)鍵結(jié) 合而導(dǎo)致肝臟損害 。 另外在酰胺酶作用下 , 乙?；?煙肼可被代謝成聯(lián)胺

10、 , 導(dǎo)致肝臟損害 , 引起血清中轉(zhuǎn) 氨酶和精氨琥珀酸裂解酶明顯升高 ; 肝細(xì)胞變性 、 壞 死 、 匯管區(qū)炎癥 、 中央靜脈淤血明顯增高 。 異煙肼引 起的肝損害是可以預(yù)防的 , 保肝藥物可有效減輕損肝 藥物的肝毒性 。 保肝藥物宜早期介入 , 否則 , 損肝藥 物應(yīng)用時(shí)間越長(zhǎng) , 肝損傷程度越重 , 則保肝藥物的干 預(yù)效果越差 。4對(duì)乙酰氨基酚肝損傷41造模方法將對(duì)乙酰氨基酚溶于 40 無(wú)菌生理鹽水 , 給小 鼠 300 500mg /kg一次性腹腔注射 ; 配成質(zhì)量濃度 為 25%混懸液經(jīng)小鼠口灌胃 , 染毒 24h 后處死動(dòng) 物 , 以上兩種方法均可制成肝損傷模型 1。42機(jī) 制對(duì)乙酰

11、氨基酚又名撲熱息痛 、 醋氨酚 , 為常用的 解熱鎮(zhèn)痛藥 , 小劑量不會(huì)引起肝損傷 , 當(dāng)大劑量使用 時(shí) , 會(huì)造成不同程度的肝損傷 。 其與葡萄糖醛酸或硫 酸結(jié)合 飽 和 后 , 剩 余 的 對(duì) 乙 酰 氨 基 酚 經(jīng) 細(xì) 胞 色 素 P450代謝生成過(guò)量的對(duì)乙?；锦?, 對(duì)乙酰基苯醌 能與谷胱甘肽結(jié)合解毒 ; 但當(dāng)谷胱甘肽含量不足時(shí) , 過(guò)剩的對(duì)乙?；锦c肝細(xì)胞構(gòu)成蛋白形成共價(jià)鍵 結(jié)合而導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷 。 乙?；锦螕p傷動(dòng)物模 型多用于因各種原因?qū)е鹿入赘孰暮繙p少而引起 肝細(xì)胞損傷的治療藥物篩選 。 它是常用的藥物性肝 損傷模型 , 形態(tài)學(xué)主要表現(xiàn)為以中央靜脈為中心的圓 盤狀大量細(xì)

12、胞壞死 , 但出血和脂肪變性不明顯 。 此模 型對(duì)小鼠十分敏感而對(duì)大鼠不敏感 10。5卡介苗和脂多糖誘導(dǎo)的肝損傷51造模方法一般采用小鼠體重為 25 30g , 用生理鹽水配制 卡介苗 (BCG 溶液 , 使每毫升含 108個(gè)活菌 , 經(jīng)尾靜 脈注射 02mL (25mg BCG 溶液 。 10d 后經(jīng)尾靜脈 注射 02mL (10g 脂多糖 (LPS 生理鹽水溶液 , 16h 后采血和取肝組織 11。52機(jī) 制此模型的原理是預(yù)先給小鼠注射 BCG , 激活致 敏 T 淋巴細(xì)胞 , 尤其是致敏肝內(nèi)庫(kù)普弗細(xì)胞和巨噬 細(xì)胞 , 使其聚集于肝臟 。 之后再用低劑量大腸桿菌 LPS 攻擊注射 , 可激

13、發(fā)這些細(xì)胞因子釋放對(duì)肝細(xì)胞有 毒性作用的可溶性因子 , 如一氧化氮 (NO 、 腫瘤壞死 因子 (TNF 、 白細(xì)胞介素 、 自由基 、 白三烯等造成肝細(xì) 胞損害 , 從而導(dǎo)致免疫性肝損傷 。 此模型可致血清 ALT 、 AST 值升高 , 注射 LPS 12h 后達(dá)到高峰 , 肝臟病 712第 4期 張 琪 , 等 急性肝損傷動(dòng)物模型制備研究進(jìn)展理學(xué)變化以肉芽腫性炎癥浸潤(rùn)為主 , 可見(jiàn)中度或重度 炎性細(xì)胞浸潤(rùn) , 存在大量的點(diǎn)狀壞死 、 小灶性壞死及 灶性纖維化 , 還可見(jiàn)細(xì)胞凋亡小體 。 BCG 加 LPS 肝 損傷模型造成的肝損傷與病毒性肝炎發(fā)病機(jī)制有較 大的相似 , 因此常用此模型研究

14、病毒性暴發(fā)性肝炎 。6雷公藤肝損傷模型61造模方法祿保平等以 270mg /kg劑量雷公藤多苷配制成 混懸液 , 按 02mL /10g 體重進(jìn)行小鼠灌胃 1次 , 18h 后處死 , 成功建立小鼠急性肝損傷模型 12。62機(jī) 制雷公藤屬衛(wèi)茅科雷公藤屬植物 , 具有祛風(fēng)除濕 、 活血通絡(luò) 、 消腫止痛 、 殺蟲(chóng)解毒等功效 。 針對(duì)其肝臟 損害的特點(diǎn) , 近年來(lái)國(guó)內(nèi)學(xué)者開(kāi)展了應(yīng)用其提取物誘 導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性肝損傷的研究 。 祿保平等以雷公藤多苷配 制混懸液進(jìn)行小鼠灌胃致急性肝損傷 , 研究顯示小鼠 血清 ALT 、 AST 升 高 , SOD 和 GSH-PX 水 平 降 低 , MDA 、 IL-18

15、水 平 升 高 。 肝 細(xì) 胞 出 現(xiàn) 顯 著 的 脂 肪 變 性 、 水腫 (氣球樣變 及散在的嗜酸性變 。 認(rèn)為雷公 藤多苷所致的急性肝損傷與自由基脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng) 及 IL-18有較大關(guān)系 。 IL-18能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生多種與肝 細(xì)胞損害有關(guān)的細(xì)胞因子 , 并能增強(qiáng) FasL 的表達(dá) , 而 Fas-FasL 系統(tǒng)與某些肝損害也密切相關(guān) 。 實(shí)驗(yàn)還表 明 , 雷公藤多苷能夠通過(guò)各種途徑誘導(dǎo)小鼠肝細(xì)胞發(fā) 生凋亡 。 由于臨床應(yīng)用中藥或其提取物進(jìn)行模型研 究的幾乎沒(méi)有 , 所以用雷公藤建立的藥物性肝損傷模 型作為以中藥建立肝損傷模型的代表 。7四環(huán)素肝損傷模型71造模方法祿保平等以 2250mg

16、/kg劑量四環(huán)素片配制成 混懸液 , 按 02mL /10g 體質(zhì)量灌胃 1次 , 成功建立 小鼠急性肝損傷模型 。 孫創(chuàng)斌等以小鼠腹腔注射 23g /(kg ·d 四環(huán)素 4d , 造成四環(huán)素脂肪肝動(dòng)物模 型 。72機(jī) 制四環(huán)素是一種臨床運(yùn)用較久的抗生素 , 國(guó)內(nèi)外文 獻(xiàn)研究表明 , 四環(huán)素類抗生素可引起嚴(yán)重的肝損害 。 用藥劑量大 、 靜脈注射 、 腎功能不全時(shí)可引起血藥濃 度過(guò)高 , 造成致死性肝臟急性脂肪變性 。 通過(guò)研究顯 示 , 四環(huán)素引起的肝損傷造成血清中 ALT 、 AST 水平 升高 , 肝細(xì)胞出現(xiàn)的脂肪變性和水腫 , 肝竇變窄或消 失 , 肝細(xì)胞廣泛損傷 , 細(xì)胞

17、超微結(jié)構(gòu)顯著變化 。 四環(huán) 素所致急性肝損傷與自由基脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)關(guān)系不 大 , 與 IL-18有較大關(guān)系 , 但仍需在今后進(jìn)一步研究 確定 13。8硫代乙酰胺肝損傷81造模方法魏新智 14等采用一次性腹腔注射硫代乙酰胺 200mg /kg, 發(fā)現(xiàn)在給藥后 24h 急性肝損傷最明顯 。 82機(jī) 制一次性腹腔注射硫代乙酰胺可導(dǎo)致急性肝炎 , 反 復(fù)腹腔注射可導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死 、 再生結(jié)節(jié)形成 、 毛細(xì) 膽管增生 、 門靜脈高壓而導(dǎo)致肝硬化 。 TAA 引起的 急性肝損傷表現(xiàn)為血清 ALT 、 AST 值顯著升高 , 病理 學(xué)顯示肝細(xì)胞變性壞死 , 肝臟病理變化均一 。 硫代乙 酰胺誘發(fā)的肝硬化被認(rèn)

18、為與人肝硬化的病理組織學(xué) 相似 , 其肝硬化模型可用于治療肝硬化藥物的研發(fā) 。9氯化鈷肝損傷91造模方法一般先在小鼠腹部涂 1%的氯化鈷乙醇液 , 然后 用 04%氯化鈷橄欖油溶液進(jìn)行肝穿刺 。92機(jī) 制氯化鈷引起肝損傷主要是氯化鈷作為抗原攻擊 肝臟后 , 其抗原信息從肝臟被傳遞至外周淋巴細(xì)胞 , 促進(jìn)其表面淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原 (LFA-1 分子的 表達(dá) , 抗原分子陽(yáng)性的細(xì)胞隨后浸潤(rùn)肝臟 , 通過(guò)免疫 反應(yīng)從而導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷 , 引起血清轉(zhuǎn)氨酶升高和肝 組織脂肪變性 、 肝細(xì)胞壞死 、 炎性細(xì)胞浸潤(rùn) 。 氯化鈷 造成肝損害時(shí)浸潤(rùn)的 T 細(xì)胞通過(guò)表面淋巴細(xì)胞功能 相關(guān)抗原和表面細(xì)胞間粘附分子

19、 (ICAM-1 相互作用 而釋放毒性物質(zhì) , 這些毒性物質(zhì)也可直接導(dǎo)致肝損 傷 。 氯化鈷肝損傷動(dòng)物模型引起肝臟損害可持續(xù)數(shù) 月 , 與慢性肝炎遷延的特征和免疫調(diào)節(jié)類似 。 氯化鈷 引起肝損傷動(dòng)物模型多用于模擬臨床肝炎的慢性化 過(guò)程 。812 吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào) 2011年 08月 第 32卷10酒精性肝損傷101造模方法一種造模方法是用 56度白酒灌胃 , 大鼠每千克 體重每次 7mL , 小鼠每千克體重每次 16mL , 每日 2次 , 1 10d 。 另一種是以 50 60度白酒或體積分?jǐn)?shù) 為 50% 60%的乙醇一次性每千克體重經(jīng)口灌胃 40 60g , 4 24h 內(nèi)取血和肝組織 。

20、102機(jī) 制乙醇進(jìn)入機(jī)體后 , 在乙醇脫氫酶催化下 , 氧化為 乙醛和乙酸鹽 , 使三羧酸循環(huán)障礙和脂肪酸氧化減弱 而影響脂肪代謝 ; 乙醛又能和細(xì)胞內(nèi)大分子如蛋白 質(zhì) 、 DNA 形成復(fù)合物 ; 乙醛的產(chǎn)生以及乙醇刺激腎上 腺素的釋放 , 還可引起肝臟血管收縮 , 肝竇內(nèi)壓升高 或肝組織缺氧 , 導(dǎo)致肝細(xì)胞空泡變性 。 急性酒精性肝 損傷模型以肝臟和血液中的某些化學(xué)指標(biāo)改變?yōu)橹?要特征 , 如肝組織中丙二醛含量顯著增加 , 血清中甘 油三酯明顯升高 , 但血清中轉(zhuǎn)氨酶和肝組織結(jié)構(gòu)病變 卻不明顯 。11刀豆蛋白 A 誘導(dǎo)的肝損傷111造模方法常用 Balb /c小鼠 , 體重 20 30g ,

21、 將刀豆蛋白 A (ConA 用 PBS 或生理鹽水稀釋 , 以每千克體重 20mg 一次性尾靜脈注射給藥后 , 可制作成急性肝損傷模 型 6。112機(jī) 制應(yīng)用 ConA 誘發(fā)小鼠特異性肝損傷模型是近年 來(lái)新發(fā)展起來(lái)的由 T 淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的肝損害 , 它的 建立和應(yīng)用為深入研究肝細(xì)胞損害的細(xì)胞學(xué)與分子 學(xué)機(jī)制以及進(jìn)行治療藥物篩選提供了更為方便和理 想的試驗(yàn)動(dòng)物模型 。 ConA 是植物凝集素 , 有促進(jìn)有 絲分裂的作用 , 可以引起 T 細(xì)胞介導(dǎo)的肝損傷 , 當(dāng) ConA 進(jìn)入小鼠體內(nèi) , 其活性代謝產(chǎn)物結(jié)合蛋白侵入 免疫系統(tǒng)而導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死 。 此后 , 藥物修飾蛋白逸 出細(xì)胞外 , 被庫(kù)普

22、弗細(xì)胞 、 巨噬細(xì)胞 、 肝血竇內(nèi)皮細(xì)胞 及 B 細(xì)胞等抗原提示細(xì)胞吞噬 , 在細(xì)胞內(nèi)分解小分 子肽 。 肽分子在細(xì)胞表面表出 , 就會(huì)被 T 細(xì)胞分化 群 (CD4+T 細(xì)胞所識(shí)別 , 通過(guò)一系列免疫反應(yīng)導(dǎo)致 肝細(xì)胞破壞 。 小鼠每千克體重靜脈注射 ConA 20mg 后 , 6 8h 可見(jiàn)肝細(xì)胞凋亡壞死和明顯的淋巴細(xì)胞 浸潤(rùn) , 腫瘤壞死因子 -、 干擾素 -等細(xì)胞因子血清水 平升高 。 注射 ConA 后 , 8h 血清 AST 明顯升高 , 病理 形態(tài)學(xué)改變?yōu)楦涡∪~有嚴(yán)重的中性粒細(xì)胞 、 淋巴細(xì) 胞 、 單核細(xì)胞浸潤(rùn) , 炎癥病灶在門靜脈區(qū)和中央靜脈 區(qū)尤為明顯 , 電鏡顯示彌漫性肝細(xì)

23、胞壞死 。 ConA 誘 發(fā)的肝炎與炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生有密切關(guān)系 。 ConA 肝損傷動(dòng)物模型對(duì)于治療自身免疫性肝炎的藥物篩 選具有重要意義 。12脂多糖和死菌性肝損傷121造模方法一般采用 10mg 死菌和 11g LPS 給大鼠依次 注射 6d 后可誘發(fā)急性肝損傷 。 單獨(dú)一次性注射死 菌可導(dǎo)致大鼠重癥肝炎 , LPS 加死菌二者可協(xié)同導(dǎo)致 嚴(yán)重的肝損害 7。122機(jī) 制LPS 和死菌所導(dǎo)致的重癥肝炎與人的重癥肝炎 在病理形態(tài)學(xué)方面具有相似性 , 該模型被廣泛用于肝 炎的研究 。 LPS 對(duì)肝臟損害的主要機(jī)制是通過(guò)庫(kù)普 弗細(xì)胞和巨噬細(xì)胞釋放炎性細(xì)胞因子攻擊肝細(xì)胞而 誘發(fā)急性肝炎 。 當(dāng) L

24、PS 被吸收入血 , 隨門靜脈血流 進(jìn)入肝臟 , 肝臟對(duì) LPS 產(chǎn)生生物濾過(guò)作用 , 即肝血竇 中庫(kù)普弗細(xì)胞吞噬脂多糖而防止進(jìn)入體循環(huán) , LPS 促 進(jìn)庫(kù)普弗細(xì)胞釋放 TNFa 、 IL-6等而誘發(fā)急性肝炎 , 同 時(shí)抑制葡萄糖 -6-磷酸酶的活性 , 從而抑制糖異生及 膽紅素的輸送導(dǎo)致黃疸 , LPS 還可激活補(bǔ)體系統(tǒng) , 誘 發(fā)內(nèi)因性血凝固而導(dǎo)致肝臟損害 。13其 他手術(shù)肝損傷 15主要用于急性肝功能衰竭模型研 究肝移植 、 細(xì)胞移植和人工肝治療效果 , 根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng) 物的不同術(shù)式較多 。 部分肝切除 、 全肝切除術(shù)僅適合 肝移植肝切除后到供肝行使功能期間的研究 , 亦有采 用門腔端 -

25、側(cè)分流 、 膽總管結(jié)扎切斷術(shù)建立了較理想 的犬急性肝功能衰竭模型 , 有望用于生物人工肝的研 究 。 陳鐘采用 95%肝切除 , 術(shù)中經(jīng)中葉肝靜脈注入 5%葡萄糖氯化鈉溶液 (10mL /kg體重 , 建立了較理 想的大鼠急性肝功能衰竭模型 , 并指出與傳統(tǒng)手術(shù)方 法相比 , 經(jīng)中葉肝靜脈注入 5%葡萄糖氯化鈉降低了 病死率 , 藥物誘導(dǎo)肝衰竭法在肝細(xì)胞移植時(shí)藥物可對(duì) 植入的肝細(xì)胞產(chǎn)生毒性損害 , 可能影響治療 , 干擾實(shí) 驗(yàn)結(jié)果 。 單純膽總管結(jié)扎 、 膽管內(nèi)逆行性注入 N-丁 912第 4期 張 琪 , 等 急性肝損傷動(dòng)物模型制備研究進(jìn)展基 -2氰基丙烯酸鹽加膽管結(jié)扎均可建立膽管阻塞性 肝

26、纖維化模型 , 且具有炎癥反應(yīng)輕 、 造模周期短 、 自發(fā) 逆轉(zhuǎn)低 、 實(shí)驗(yàn)指標(biāo)穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn) 。綜上所述 , 制造實(shí)驗(yàn)性肝損傷動(dòng)物模型的方法很 多 , 雖然近年來(lái)國(guó)內(nèi)外有關(guān)肝損傷模型的研究取得了 顯著進(jìn)展 , 但由于肝臟功能復(fù)雜和肝損害因素的多樣 性 , 任何一種實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ投疾荒苋?、 準(zhǔn)確地反應(yīng)特定 肝損傷的本質(zhì) 。 因此 , 肝損傷動(dòng)物模型還需要進(jìn)一步 完善 , 肝損傷的機(jī)制復(fù)雜 , 尚待進(jìn)一步研究 。參考文獻(xiàn) :1于 強(qiáng) , 于 洋 肝損傷動(dòng)物模型及中藥治療研究概況 J 中國(guó)現(xiàn)代中藥 , 2006, 8(11 :25-282趙 敏 , 楊杏芬 , 池莉平 , 等 小鼠急性四氯化碳肝損傷 模

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