生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定與控制

1、第十四章 生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定與控制第一節(jié) 影響生藥品質(zhì)的自然因素 影響生藥品質(zhì)的自然因素有：l生藥的品種l植物的生長發(fā)育l植物的遺傳與變異l植物的環(huán)境因素等一、生藥品種對(duì)品質(zhì)的影響 品種的確認(rèn)鑒定應(yīng)為質(zhì)量控制系統(tǒng)的首要環(huán)節(jié)。l我國現(xiàn)有已知中藥資源種類12807種：l藥用植物11146種；l藥用動(dòng)物1581種；l藥用礦物80種。l中華人民共和國藥典(2000年版一部)收載的中藥材534種，其中有143種中藥為多基源；l其中二基源的有92種，三基源的38種，四基源的有8種，五基源的有4種，六基源的有1種；l同科不同屬有21種，不同科者有4種。 l藥用動(dòng)、植物涉及生物分類的科、屬分別為395科862

2、屬與383科2309屬。l實(shí)際上中藥的品種要比中國藥典所揭示的復(fù)雜的多。l除存在多基源的情況外，同名異物現(xiàn)象十分普遍，嚴(yán)重影響了生藥的品質(zhì)。二、植物成長發(fā)育對(duì)生藥品質(zhì)的影響 藥用植物在不同的生長階段，其活性成分也會(huì)發(fā)生一些變化，因而對(duì)生藥的質(zhì)量也會(huì)產(chǎn)生一些影響。 l例如：茵陳過去是春季采收幼苗，有“正月茵陳二月蒿，三月茵陳當(dāng)柴燒”的說法，說明采收期的重要性。 l經(jīng)研究表明，茵陳的主要利膽活性成分蒿屬香豆精、對(duì)羥基苯乙酮和茵陳香豆酸A和B以秋季的花前期和至花果期含量最高。 l中國藥典因此規(guī)定有兩個(gè)采收期，春季和秋季?！熬d茵陳”及“茵陳蒿”三、植物的遺傳與變異因素對(duì)生藥品質(zhì)的影響 l植物會(huì)產(chǎn)生種內(nèi)

3、次生代謝產(chǎn)物的多型性，又稱化學(xué)變種或化學(xué)型。 l研究藥用植物種內(nèi)化學(xué)成分的變異具有重要的實(shí)踐意義。l變異原因，普遍認(rèn)為是環(huán)境因素的作用，如環(huán)境溫度的驟變，天然雷電射線及土壤中微量元素引起的突變。四、環(huán)境因素對(duì)生藥品質(zhì)的影響 l光照對(duì)藥用植物活性成分積累的影響l環(huán)境溫度對(duì)藥用植物活性成分積累的影響 l降水量對(duì)藥用植物活性成分積累的影響 l土壤條件對(duì)藥用植物活性成分積累的影響等。第二節(jié) 生藥質(zhì)量的控制與生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂 藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)l是一個(gè)國家或地區(qū)對(duì)藥品的質(zhì)量和檢驗(yàn)方法所作的技術(shù)規(guī)定；l是藥品生產(chǎn)、供應(yīng)、使用以及管理部門共同遵循的法律依據(jù)；l對(duì)保障人民用藥安全有效起著重要作用，它是藥品現(xiàn)代化

4、生產(chǎn)和質(zhì)量管理的重要組成部分。 一、生藥質(zhì)量控制的依據(jù) （一）國家藥典 藥典：國家對(duì)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及檢驗(yàn)方法所作的技術(shù)規(guī)定，是藥品生產(chǎn)、供應(yīng)、使用、檢驗(yàn)、管理部門共同遵循的法定依據(jù)。中華人民共和國藥典(中國藥典)是我們國家控制藥品質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)，收載使用較廣、療效較好的藥品。中國藥典自1953年版起 2000年版止，目前共出版7次。 l第一部中國藥典1953年版由衛(wèi)生部編印發(fā)行。l收載藥品531種，其中化學(xué)藥215種，植物藥與油脂類65種，動(dòng)物藥13種，抗生素2種，生物制品25種，各類制劑211種。l中國藥典1963年版1965年由衛(wèi)生部公布施行。l1963年版藥典共收載藥品1310種，分一、二兩部

5、，各有凡例和有關(guān)的附錄。l一部收載中醫(yī)常用的中藥材446種和中藥成方制劑197種；l二部收載化學(xué)藥品667種。l中國藥典1977年版1977年版藥典共收載藥品1925種。l一部收載中草藥材(包括民族藥)、中草藥提取物、植物油脂以及一些單味藥材制劑等882種，成方制劑(包括少數(shù)民族藥)270種，共1152種；l二部收載化學(xué)藥品等773種。 l中國藥典1985年版1986年4月l日起執(zhí)行。l該版藥典共收載藥品1489種。l一部收載中藥材、植物油脂及單味制劑506種，中藥成方207種，共713種；l二部收載化學(xué)藥品、生物制品等776種。 l中國藥典1990年版1991年7月1日起執(zhí)行。l共收載品種1

6、751種。l一部收載784種，其中中藥材、植物油脂等509種，中藥成方及單味制劑275種；l二部收載化學(xué)藥品、生物制品等967種。l中國藥典1995年版1996年4月1日起執(zhí)行。l共收載品種2375種。l一部收載920種，其中中藥材、植物油脂等522種，中藥成方及單味制劑398種。l二部收載1455種，包括化學(xué)藥、抗生素、生化藥、生物制品及輔料等。l中國藥典2000年版由原國家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)頒布，2000年7月1日起正式執(zhí)行。l共收載藥品2691種，其中一部收載992種，二部收載1699種。l一、二兩部共新增品種399種，修訂品種562種。l本版藥典的附錄作了較大幅度的改進(jìn)和提高，現(xiàn)代分析

7、技術(shù)在本版藥典中得到進(jìn)一步擴(kuò)充。 l2000年版藥典一部每種藥材項(xiàng)下內(nèi)容為：中文名、漢語拼音、拉丁名、來源、性狀、鑒別、檢查、含量測定、炮制、性味與歸經(jīng)、功能與主治、用法與用量、貯藏等。 （二）局(部)頒標(biāo)準(zhǔn) l國家食品藥品監(jiān)督管理局(SFDA)頒發(fā)的藥品標(biāo)準(zhǔn)，簡稱局頒標(biāo)準(zhǔn)。l除中國藥典收載的品種外，其余的品種，凡來源清楚，療效確切，本著“一名一物”原則，分期分批，由藥典委員會(huì)編寫、收入局頒標(biāo)準(zhǔn)。l1998年以前，藥典委員會(huì)隸屬衛(wèi)生部，當(dāng)時(shí)該標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部批準(zhǔn)頒發(fā)執(zhí)行，稱為部頒標(biāo)準(zhǔn)。l目前共頒布10冊(cè)，中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥材(第一冊(cè))收載了101種，于1991年12月10日頒布執(zhí)行。

8、 （三）地方標(biāo)準(zhǔn)l各省、直轄市、自治區(qū)衛(wèi)生廳(局)審批的藥品標(biāo)準(zhǔn)簡稱地方標(biāo)準(zhǔn)。l此標(biāo)準(zhǔn)系收載中國藥典及局(部)頒標(biāo)準(zhǔn)中未收載的本地區(qū)經(jīng)營、使用的藥品，或雖有收載但規(guī)格有所不同的本地區(qū)生產(chǎn)的藥品，它具有本地區(qū)性的約束力。l現(xiàn)行的中華人民共和國藥品管理法取消了中成藥的地方標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定：“藥品必須符合國家藥品標(biāo)準(zhǔn)”。l由于中藥材、中藥飲片品種較多，各地方用藥習(xí)慣、炮制方法不統(tǒng)一，全部納入規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化管理有較大困難，故中藥材的地方標(biāo)準(zhǔn)目前仍然存在。二、生藥質(zhì)量控制的主要內(nèi)容及方法 l生藥質(zhì)量控制的主要內(nèi)容包括：l檢查生藥中可能混入的雜質(zhì)；l與藥品質(zhì)量有關(guān)的項(xiàng)目。l根據(jù)基源，生藥可分為l植物類生藥l動(dòng)物

9、類生藥l礦物類生藥植物類生藥檢查：l根據(jù)生藥的具體情況確定對(duì)質(zhì)量有影響的檢查項(xiàng)目：l如雜質(zhì)、水分、總灰分、酸不溶性灰分、膨脹度、水中不溶物、重金屬、砷鹽、吸收度、色度、農(nóng)藥殘留量等。 動(dòng)物類生藥檢查：l動(dòng)物類生藥含較多水分，易霉壞變質(zhì)，故多規(guī)定水分檢查；l動(dòng)物類藥物在生產(chǎn)或貯存過程中，會(huì)產(chǎn)生一些帶有腐敗氣的堿性物質(zhì)，影響質(zhì)量與療效，可以規(guī)定揮發(fā)性堿性(揮發(fā)性鹽基氮)物質(zhì)的限量檢查，及常規(guī)項(xiàng)目的檢查。礦物類生藥檢查：l礦物類生藥廣泛分布于自然界，有的雖然進(jìn)行精細(xì)加工，仍易夾有雜質(zhì)及有害物質(zhì)，必須加以檢查并規(guī)定限度；l如檢查重金屬、砷鹽、鎂鹽、鐵鹽、鋅鹽、干燥失重等項(xiàng)目。 l限量檢查是指常規(guī)檢查項(xiàng)

10、目，多數(shù)生藥均可使用，即共性內(nèi)容。如：水分的限量、有害物質(zhì)的限量、雜質(zhì)的限量等。l定量檢查是指與生藥臨床療效直接相關(guān)的項(xiàng)目，即個(gè)性內(nèi)容。如：有效成分的含量，生物活性的強(qiáng)度等。 (一)生藥質(zhì)量的限量控制 1水分含量測定一般對(duì)容易吸濕發(fā)霉變質(zhì)、酸敗的生藥應(yīng)規(guī)定水分檢查。l常用的測定方法：l烘干法l甲苯法l減壓干燥法2灰分含量測定生藥的灰分測定分為總灰分測定及酸不溶性灰分測定。l總灰分：指生藥本身經(jīng)過灰化后遺留的不揮發(fā)性的無機(jī)成分以及生藥表面附著的不揮發(fā)性無機(jī)成分總和。l酸不溶灰分：指總灰分中加10鹽酸處理，得到不溶于10鹽酸的灰分。l規(guī)定生藥的總灰分限度，對(duì)于保證生藥的品質(zhì)和純凈程度，有一定的意義

11、。l常用的測定方法l總灰分測定法l酸不溶灰分測定法3、浸出物的測定：某些生藥有效成分尚不明確，無法進(jìn)行含量測定，可測定其浸出物量。選擇溶劑，可結(jié)合用藥習(xí)慣、生藥質(zhì)地等，選擇適宜的溶劑，或采用鑒別中提取成分的溶劑。常用的測定方法l水溶性浸出物的測定l冷浸法l熱浸法l醇溶性浸出物的測定 l醚溶性浸出物的測定 4揮發(fā)油測定l適用于含揮發(fā)油的生藥。l測定用的供試品，一般須粉碎使通過二號(hào)至三號(hào)篩，并混合均勻，在特制的揮發(fā)油測定器中進(jìn)行測定。常用的測定方法l甲法：適用于測定相對(duì)密度在1.0以下的揮發(fā)油。l乙法：適用于測定相對(duì)密度在10以上的揮發(fā)油。 5有害物質(zhì)的控制 指農(nóng)藥殘留過量和重金屬含量超標(biāo)。l生藥

12、中有害物質(zhì)的來源主要有：l生境的污染(土壤、地質(zhì)背景等)；l栽培和倉儲(chǔ)過程中施用農(nóng)藥或驅(qū)蟲劑；l加工炮制過程中輔料的污染；l包裝材料的有害物質(zhì)污染。 (）農(nóng)藥殘留量測定l農(nóng)藥的使用對(duì)于中藥材的穩(wěn)產(chǎn)、高產(chǎn)有著重大的意義，但也帶來了生藥的農(nóng)藥殘留問題；l長期以來，我國使用的農(nóng)藥主要為有機(jī)氯、有機(jī)磷類，雖然在1983年已禁止使用，但因其有累積性，在許多藥材中仍可檢出。 l中國藥典2000年版選用氣相色譜法測定有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量。l生藥含有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量：l六六六(總BHC)不得過百萬分之零點(diǎn)二；l滴滴涕(總DDT)不得過百萬分之零點(diǎn)二；l五氧硝基苯(PCNB)不得過百萬分之零點(diǎn)一。 （）重金屬l重金

13、屬系指在實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)，包括鉛、汞、鎘等。l檢查時(shí)以鉛為代表，采用目視法觀察比較。 （）砷鹽檢查 砷鹽的檢查l用古蔡氏法l二乙基硫代氨基甲酸銀法砷鹽限度一般不得過百萬分之十。（）其他有害物質(zhì)的檢查 有的生藥由于寄生于有毒植物而產(chǎn)生有害物質(zhì)，亦須加以檢查。l例如桑寄生需作強(qiáng)心苷檢查，是因?yàn)榧纳趭A竹桃樹上的桑寄生會(huì)吸入夾竹桃樹中的強(qiáng)心苷，而具毒性。許多生藥在貯藏過程中易霉變而產(chǎn)生黃曲霉素，其中有：l牛膝、天冬、玉竹、黃精、當(dāng)歸、l甘草、百部、白術(shù)、天花粉、l葛根、山藥、知母、麥冬等。l現(xiàn)代科學(xué)研究結(jié)果證實(shí)有14種霉菌素有致癌作用，而黃曲霉素致癌作用強(qiáng)度位居前列

14、。l有必要對(duì)生藥中的黃曲霉素進(jìn)行限量控制，以確保用藥的安全。6其他檢查項(xiàng)目 雜質(zhì)生藥中混雜的雜質(zhì)：l系指物種與規(guī)定相符，但其性狀或部位與規(guī)定不符的藥材；l來源與規(guī)定不同的物質(zhì)；l無機(jī)雜質(zhì)如砂石，泥塊、塵土等。l檢查方法可取規(guī)定量試品，攤開，用肉眼或擴(kuò)大鏡觀察，將雜質(zhì)揀出，或通過適當(dāng)?shù)暮Y選，將雜質(zhì)分出。然后將各類雜質(zhì)分別稱重，計(jì)算其在供試品中的百分?jǐn)?shù)。l藥用部分比例：為保證藥品質(zhì)量，有的生藥需規(guī)定藥用部分的比例。酸敗度l酸?。菏侵赣椭蚝椭姆N子類生藥，在貯藏過程中，與空氣、光線接觸，發(fā)生復(fù)雜的化學(xué)變化，產(chǎn)生特異的刺激嗅味(哈喇味)。l本檢查系通過酸值、羰基值或過氧化值的測定，以控制含油脂種子

15、類的酸敗程度。（二）生藥質(zhì)量的定量控制 意義：l選擇具生理活性的主要化學(xué)成分，作為有效成分或指標(biāo)性成分；l建立含量測定項(xiàng)目，評(píng)價(jià)藥物的內(nèi)在質(zhì)量，并衡量其商品質(zhì)量是否達(dá)到要求及產(chǎn)品是否穩(wěn)定。1以化學(xué)成分為對(duì)象 l生藥中化學(xué)成分眾多，依據(jù)生物活性，可分為：l活性成分l非活性成分l有效成分(activeconstituent)l以化學(xué)成分作為質(zhì)量控制指標(biāo)時(shí)，應(yīng)該首選有效成分，進(jìn)行針對(duì)性定量；l有效成分尚不清楚，可對(duì)總成分如總黃酮、總生物堿、總皂苷進(jìn)行測定；l有效成分不清楚，質(zhì)量控制指標(biāo)應(yīng)選用“指標(biāo)成分”。2、化學(xué)成分的定量分析 (1)含量測定方法選擇l經(jīng)典分析方法(容量法、重量法)l分光光度法(包括

16、比色法)l氣相色譜法l高效液相色譜法l薄層-分光光度法、薄層掃描法l其它理化檢測方法及生物測定法。 (2)含量測定方法考察一般考察項(xiàng)目如下l1)提取條件的選定；l2)分離、純化；l3)測定條件的選擇；l4)線性關(guān)系的考察；l5)測定方法的穩(wěn)定性試驗(yàn)；l6)精密度試驗(yàn)；l7)重復(fù)性試驗(yàn)；l8)回收率試驗(yàn)；l9)樣品測定，至少測3批樣品。 (3)含量限(幅)度的制定 l可根據(jù)傳統(tǒng)鑒別經(jīng)驗(yàn)。將生藥樣品依質(zhì)量優(yōu)劣順序排列，如所測成分含量高低與之相應(yīng)，則把含量較低但仍可藥用者取為下限。l也可根據(jù)樣品檢測實(shí)際情況規(guī)定，做為暫行限度，至少測得10批樣品數(shù)據(jù)。l生藥含量限度可規(guī)定幅度，如部頒標(biāo)準(zhǔn)中進(jìn)口西洋參，

17、人參總皂苷為5.010.0。l毒劇藥必須規(guī)定幅度，如中國藥典2000版1部規(guī)定馬錢子中含士的寧為120220；l含量測定也可用限度表示，如中國藥典2000版一部規(guī)定黃連中含生物堿以鹽酸小檗堿計(jì)不得少于70。 3生物檢定 l又稱生物測定法，是利用生物(整體或離體)的反應(yīng)來測定各種藥物的效價(jià)、作用強(qiáng)度和毒性的一種方法。 l通常用標(biāo)準(zhǔn)品和檢品對(duì)照的方法來確定檢品的效價(jià)單位。 (三)生藥化學(xué)成分的指紋圖譜 應(yīng)用現(xiàn)代色譜、波譜分析手段建立生藥化學(xué)成分指紋圖譜(fingerprint)是實(shí)現(xiàn)質(zhì)量控制的有效方法。 l生藥化學(xué)成分指紋圖譜 指生藥經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標(biāo)示該生藥特性的共有

18、化學(xué)成分峰的圖譜。指紋圖譜須具有：l系統(tǒng)性：是指指紋圖譜反映的化學(xué)成分應(yīng)包括有效組分群中的主要成分，或指標(biāo)成分的全部。 l特征性：是指指紋圖譜中反映的化學(xué)成分信息是具有高度選擇性的，將能特征地區(qū)分中藥的真?zhèn)闻c優(yōu)劣。 l重現(xiàn)性：指在規(guī)定的方法與條件下，不同的操作者和不同的實(shí)驗(yàn)室所建立的指紋圖譜的誤差，在允許的范圍之內(nèi)。 指紋圖譜有關(guān)項(xiàng)目的技術(shù)要求如下： l1名稱、漢語拼音：按中藥命名原則制定。 l2來源：包括原植物的科名、中文名、拉丁學(xué)名、藥用部位、產(chǎn)地、采收季節(jié)、產(chǎn)地加工、炮制方法等。l3供試品的制備：應(yīng)根據(jù)生藥中所含化學(xué)成分的理化性質(zhì)和檢測方法的需要，選擇適宜的方法進(jìn)行制備。 l4參照物的制

19、備：應(yīng)說明參照物的選擇和試驗(yàn)樣品制備的依據(jù)。 l5檢測方法：根據(jù)供試品的特點(diǎn)和所含化學(xué)成分的理化性質(zhì)選擇相應(yīng)的檢測方法。 l穩(wěn)定性試驗(yàn)：考察供試品穩(wěn)定性。l精密度試驗(yàn)：考察儀器的精密度。 l重現(xiàn)性試驗(yàn)：考察方法的重現(xiàn)性。 l6指紋圖譜及技術(shù)參數(shù)：l(1)指紋圖譜：根據(jù)供試品的檢測結(jié)果，建立指紋圖譜。 l(2)共有指紋峰的標(biāo)定：采用色譜方法制定指紋圖譜，必須根據(jù)參照物的保留時(shí)間，計(jì)算指紋峰的相對(duì)保留時(shí)間。 (3)共有指紋峰面積的比值：以對(duì)照品作為參照物的指紋圖譜。 以參照物峰面積作為1，計(jì)算各共有指紋峰面積與參照物峰面積的比值；l以內(nèi)標(biāo)物作為參照物的指紋圖譜，則以共有指紋峰中其中一個(gè)峰的峰面積作

20、為1，計(jì)算其它各共有指紋峰面積的比值。 l(4)非共有峰面積：l計(jì)算10批次以上供試品圖譜中非共有峰總面積及占總峰面積的百分比，列出各批供試品的檢測數(shù)據(jù)。生藥指紋圖譜檢測標(biāo)準(zhǔn)書寫格式 l生藥的名稱、來源；l供試品的制備；l對(duì)照品溶液或內(nèi)標(biāo)物溶液的制備；l測定方法(包括儀器、試劑、測定條件和測定方法）；l指紋圖譜及各項(xiàng)技術(shù)參數(shù)；l起草說明。 三、生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定三、生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定 生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定l建立在細(xì)致的考察及試驗(yàn)基礎(chǔ)上；l各項(xiàng)試驗(yàn)數(shù)據(jù)必須準(zhǔn)確可靠；l保證生藥質(zhì)量的可控性和重現(xiàn)性。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案：l包括名稱、漢語拼音、藥材拉丁名、來源、性狀、鑒別、檢查、浸出物、含量測定、

21、炮制、性味與歸經(jīng)、功能與主治、用法與用量、注意及貯藏等。起草說明：l說明制訂質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中各個(gè)項(xiàng)目的理由，規(guī)定各項(xiàng)目指標(biāo)的依據(jù)、技術(shù)條件和注意事項(xiàng)等，既要有理論解釋，又要有實(shí)踐工作的總結(jié)及試驗(yàn)數(shù)據(jù)。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有關(guān)項(xiàng)目的技術(shù)要求如下：l1名稱、漢語拼音、藥材拉丁名，按中藥命名原則要求制定。l2來源 來源包括原植(動(dòng)、礦)物的科名、中文名、拉丁學(xué)名、藥用部位、采收季節(jié)和產(chǎn)地加工等，礦物藥包括礦物的類、族、礦石名或巖石名、主要成分及產(chǎn)地加工。l3.性狀 系指藥材的外形、顏色、表面特征、質(zhì)地、斷面及氣味等的描述，描述要抓住主要特征，文字簡單，術(shù)語規(guī)范，描述確切。l4.鑒別 方法要求專屬、靈敏。包括經(jīng)驗(yàn)鑒別、顯微鑒別、理化鑒別、色譜或光譜鑒別及其