kj-07天然藥物化學

1、第七章第七章 三萜及其苷類三萜及其苷類一、概述一、概述l 組成：組成： 多數三萜是由多數三萜是由3030個碳原子組成的萜類化合物，個碳原子組成的萜類化合物， 根據根據“異戊二烯定則異戊二烯定則”，多數三萜被認為是，多數三萜被認為是 由由6 6個異戊二烯（三十個碳）縮合而成的個異戊二烯（三十個碳）縮合而成的. .l 存在形式：存在形式： （1 1）游離態(tài)）游離態(tài) （2 2）與糖結合成苷）與糖結合成苷 皂苷類化合物多數可溶于水，水溶液振搖后產生似肥皂皂苷類化合物多數可溶于水，水溶液振搖后產生似肥皂 水溶液樣泡沫，故稱為水溶液樣泡沫，故稱為三萜皂苷三萜皂苷。 該類皂苷多具有羧基，所以有時又稱之為該類

2、皂苷多具有羧基，所以有時又稱之為酸性皂苷酸性皂苷。 三萜及其皂苷三萜及其皂苷廣泛存在于自然界、菌類、蕨類、單子葉、雙子葉植物、動物廣泛存在于自然界、菌類、蕨類、單子葉、雙子葉植物、動物及海洋生物中均有分布，尤以雙子葉植物中分布最多。及海洋生物中均有分布，尤以雙子葉植物中分布最多。游離三萜游離三萜主要來源于菊科、豆科、大戟科、楝科、衛(wèi)茅科、茜草科、橄主要來源于菊科、豆科、大戟科、楝科、衛(wèi)茅科、茜草科、橄欖科、唇形科等植物欖科、唇形科等植物三萜皂苷三萜皂苷在豆科、五加科、葫蘆科、毛莨科、石竹科、傘形科、鼠李科、在豆科、五加科、葫蘆科、毛莨科、石竹科、傘形科、鼠李科、報春花科等植物分布較多。報春花科

3、等植物分布較多。l 三萜皂苷組成：三萜皂苷組成： 三萜皂苷是由三萜皂苷元和糖組成三萜皂苷是由三萜皂苷元和糖組成 常見的苷元為四環(huán)三萜和五環(huán)三萜。常見的苷元為四環(huán)三萜和五環(huán)三萜。 常見的糖有葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、常見的糖有葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、 呋糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸呋糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸。 分類：分類：根據糖鏈的多少根據糖鏈的多少 單糖鏈苷單糖鏈苷 雙糖鏈苷雙糖鏈苷 三糖鏈皂苷三糖鏈皂苷二、四環(huán)三萜二、四環(huán)三萜 1、達瑪烷型、達瑪烷型 2、羊毛脂烷型、羊毛脂烷型 3、甘遂烷型、甘遂烷型 4、環(huán)阿屯烷型、環(huán)阿屯烷型 5、葫蘆烷型、葫蘆烷型 6、楝烷

4、型、楝烷型 1、達瑪烷型、達瑪烷型 H HH HH H123456789101112131415161718192021222324252627282930DammaranesDammaranes H HO OH HH HH HO OH HR R2 2O OR R1 1R1 = H 20(S)原人參二醇原人參二醇20(S)protopanaxadiol類類R1 = OR3 20(S)原人參三醇原人參三醇 20(S)protopanaxatriol類類西洋參西洋參三七三七人參人參 三、五環(huán)三萜三、五環(huán)三萜 1、齊墩果烷型、齊墩果烷型2、烏蘇烷型、烏蘇烷型3、羽扇豆烷型、羽扇豆烷型4、木栓烷型、木

5、栓烷型 1、齊墩果烷型、齊墩果烷型 OleananesOleananes302928272625242322212019181716151413121110987654321H HH HH HH H 從油橄欖（從油橄欖（Olea europaea）中分到）中分到齊墩果酸：齊墩果酸： H HH HH HC CO OO OH HH HO OOleanolic acidOleanolic acid 從甘草（從甘草（Glycyrrhiza uralensis）中）中分離得到的分離得到的 甘草次酸甘草次酸 H HH HC CO OO OH HH HH HO OO OGlycyrrhetinic acid

6、Glycyrrhetinic acid 1 1、性狀及溶解度、性狀及溶解度 其苷元多有較好結晶，能溶于石油醚、苯、其苷元多有較好結晶，能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等有機溶劑，而不溶于水乙醚、氯仿等有機溶劑，而不溶于水. . 四、理化性質四、理化性質 成苷后，極性加大，不易結晶，因而成苷后，極性加大，不易結晶，因而皂苷大多為無色定形皂苷大多為無色定形粉末粉末，可溶于水，易溶于熱水，稀醇、熱甲醇和熱乙醇中，可溶于水，易溶于熱水，稀醇、熱甲醇和熱乙醇中，幾不溶或難溶于乙醚、苯等極性小的有機溶劑，含水丁醇或幾不溶或難溶于乙醚、苯等極性小的有機溶劑，含水丁醇或戊醇對皂苷的溶解度較好。戊醇對皂苷的溶解度較

7、好。 皂苷多數具有苦而辛辣味，吸入鼻內能引起噴嚏。某些皂苷皂苷多數具有苦而辛辣味，吸入鼻內能引起噴嚏。某些皂苷內服，能刺激，產生反射性粘液腺分泌，而用于祛痰止咳。內服，能刺激，產生反射性粘液腺分泌，而用于祛痰止咳。皂苷具有吸濕性。皂苷具有吸濕性。 2 2、顏色反應、顏色反應 三萜化合物（苷元和苷）在無水條件下，與強酸、三萜化合物（苷元和苷）在無水條件下，與強酸、 三氯乙酸（氯化鋅、三氯化鋁、三氯化銻）作用三氯乙酸（氯化鋅、三氯化鋁、三氯化銻）作用 會產生顏色變化或熒光。會產生顏色變化或熒光。 全飽和、且全飽和、且3 3位又無羥基或羰基的化合物呈陰性反應位又無羥基或羰基的化合物呈陰性反應 醋酐醋

8、酐- -濃硫酸反應濃硫酸反應 將樣品溶于醋酐中，加硫酸將樣品溶于醋酐中，加硫酸- -醋酐（醋酐（1 1：2020），可產），可產 生黃生黃紅紅紫紫藍等顏色變化，最后褪色。藍等顏色變化，最后褪色。 氯化銻反應氯化銻反應 將樣品氯仿或醇溶液點于濾紙上，噴以將樣品氯仿或醇溶液點于濾紙上，噴以20%20%五氯化五氯化 銻的氯仿溶液，干燥后銻的氯仿溶液，干燥后60-7060-70加熱，顯藍色、加熱，顯藍色、 灰藍色，灰紫色等多種顏色斑點灰藍色，灰紫色等多種顏色斑點。 三氯醋酸反應三氯醋酸反應 將樣品溶液滴在濾紙上，噴將樣品溶液滴在濾紙上，噴25%25%三氯醋酸乙醇溶液，加三氯醋酸乙醇溶液，加熱至熱至10

9、0100，生成紅色漸變?yōu)樽仙?。，生成紅色漸變?yōu)樽仙?氯仿氯仿- -濃硫酸反應濃硫酸反應 樣品溶于氯仿，加入濃硫酸后，在氯仿層呈現紅色或樣品溶于氯仿，加入濃硫酸后，在氯仿層呈現紅色或藍色，氯仿層有綠色熒光出現。藍色，氯仿層有綠色熒光出現。 冰醋酸冰醋酸- -乙酰氯反應乙酰氯反應 樣品溶于冰醋酸中，加乙酰氯數滴及氯化鋅結晶數粒，樣品溶于冰醋酸中，加乙酰氯數滴及氯化鋅結晶數粒，稍加熱，則呈現淡紅色或紫紅色。稍加熱，則呈現淡紅色或紫紅色。 3 3、表面活性、表面活性許多皂苷水溶液強烈振搖后產生持久的泡沫，但有一些皂苷許多皂苷水溶液強烈振搖后產生持久的泡沫，但有一些皂苷沒有此種活性。沒有此種活性。4

10、4、溶血作用、溶血作用大多皂苷的水溶液有溶血作用，但也有的皂苷（如以人參萜大多皂苷的水溶液有溶血作用，但也有的皂苷（如以人參萜二醇為母核的皂苷）的水溶液有抗溶血作用。所以不能用于二醇為母核的皂苷）的水溶液有抗溶血作用。所以不能用于靜脈注射和肌肉注射。靜脈注射和肌肉注射。5 5、沉淀反應、沉淀反應皂苷的水溶液可以和鉛鹽、鋇鹽、銅鹽等產生沉淀。皂苷的水溶液可以和鉛鹽、鋇鹽、銅鹽等產生沉淀。 酸性皂苷酸性皂苷（通常指三萜皂苷）的水溶液加入硫酸銨、醋酸（通常指三萜皂苷）的水溶液加入硫酸銨、醋酸鉛或其他中性鹽類即生成沉淀。鉛或其他中性鹽類即生成沉淀。 中性皂苷中性皂苷（通常指甾體皂苷）的水溶液則需加入堿

11、式醋酸（通常指甾體皂苷）的水溶液則需加入堿式醋酸鉛或氧化鋇等堿性鹽類才能生成沉淀。利用這一性質進行皂鉛或氧化鋇等堿性鹽類才能生成沉淀。利用這一性質進行皂苷的提取和初步分離。苷的提取和初步分離。 三萜皂苷元提取與分離方法三萜皂苷元提取與分離方法1 1、醇類溶劑提取后，提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯等醇類溶劑提取后，提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯等溶劑進行分部提取，然后進一步分離；溶劑進行分部提取，然后進一步分離；2 2、制備成衍生物再作分離；制備成衍生物再作分離； 3 3、以皂苷形式存在的，水解后用氯仿等溶劑萃取，然后進行分以皂苷形式存在的，水解后用氯仿等溶劑萃取，然后進行分離。離。 五

12、、提取分離五、提取分離 三萜皂苷提取與分離方法：三萜皂苷提取與分離方法： 用稀醇提取，提取液減壓濃縮后，加適量水，必要用稀醇提取，提取液減壓濃縮后，加適量水，必要時先用石油醚等萃取，去雜，后用正丁醇萃取，減時先用石油醚等萃取，去雜，后用正丁醇萃取，減壓蒸干，通過大孔吸附樹脂，水洗去糖等，后用壓蒸干，通過大孔吸附樹脂，水洗去糖等，后用30%-80%30%-80%甲醇或乙醇梯度洗脫，洗脫液減壓蒸干，得甲醇或乙醇梯度洗脫，洗脫液減壓蒸干，得粗制總皂苷。用重結晶、層析等方法分離純化皂苷。粗制總皂苷。用重結晶、層析等方法分離純化皂苷。 六、結構測定六、結構測定高效液相色譜與電噴霧質譜聯用高效液相色譜與電

13、噴霧質譜聯用鑒定三七皂苷類成分鑒定三七皂苷類成分蒸發(fā)光散射檢測器蒸發(fā)光散射檢測器Evaporative light scattering, ELSDEvaporative light scattering, ELSDu 原理原理: :當柱流出物為高速氣流當柱流出物為高速氣流( (氮氣或空氣氮氣或空氣) )霧化后霧化后, ,經蒸發(fā)經蒸發(fā)器使流動相蒸發(fā)器使流動相蒸發(fā), ,不揮發(fā)的待測成分成為微粒氣霧流不揮發(fā)的待測成分成為微粒氣霧流, ,用一定強用一定強度的入射光度的入射光( (激光光源激光光源),),準直后照射此霧氣流準直后照射此霧氣流, ,測定散射光測定散射光, ,其其強度取決于微粒的大小和數量

14、強度取決于微粒的大小和數量, ,也取決于待測成分的濃度也取決于待測成分的濃度u 范圍范圍: : 通用型檢測器通用型檢測器, ,幾乎對所有樣品成分都有響應幾乎對所有樣品成分都有響應 用于在揮發(fā)性流動相中測定非揮發(fā)性成分用于在揮發(fā)性流動相中測定非揮發(fā)性成分 可用于梯度洗脫可用于梯度洗脫電噴霧電離質譜電噴霧電離質譜 (ESI)(ESI)離子化方式:大氣壓離子化大氣壓離子化(API)(API) 大氣壓電離（API） API包括包括：電噴霧離子化（電噴霧離子化（ESI） 大氣壓化學離子化（大氣壓化學離子化（APCI） 特點：特點：（1）離子化在處于大氣壓下的離子化室完成離子化在處于大氣壓下的離子化室完成

15、 （2）能有效地與離子阱質譜結合實現多級串聯）能有效地與離子阱質譜結合實現多級串聯 （3）這三種電離方式都可作為）這三種電離方式都可作為LC-MS接口接口電噴霧離子化（電噴霧離子化（ESIESI）原理）原理電場使溶液帶電，形成帶電液滴，帶電的液滴電場使溶液帶電，形成帶電液滴，帶電的液滴在電場的作用下運動并迅速除去溶劑，電荷保在電場的作用下運動并迅速除去溶劑，電荷保留在分子上，形成離子化的分子留在分子上，形成離子化的分子 四極桿離子阱質譜原理四極桿離子阱質譜原理離子經四極桿被引入阱中后，經離子經四極桿被引入阱中后，經RFRF射頻電壓掃描射頻電壓掃描, , 不同不同質荷比質荷比的離子相繼排出得到檢測。它的最大優(yōu)勢之一是的離子相繼排出得到檢測。它的最大優(yōu)勢之一是實現了阱內多級串聯。實現了阱內多級串聯。 u大氣壓下的液相色譜和質譜的聯用接口是利用氣體大氣壓下的液相色譜和質譜的聯用接口是利用氣體輔助（或加高壓）下流動相噴霧，將溶劑揮發(fā)除去，輔助（或加高壓）下