乙肝兩對(duì)半檢測(cè)中(南京)ppt課件

1、乙肝兩對(duì)半免疫學(xué)檢測(cè)相關(guān)問(wèn)題研討中山三院檢驗(yàn)科李林 HBV感染的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)是目前國(guó)內(nèi)最為常見的檢驗(yàn)工程，也是醫(yī)患糾紛產(chǎn)生較多的領(lǐng)域之一。 衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心 李金明乙肝兩對(duì)半：HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。檢測(cè)結(jié)果：定性、半定量、定量。試劑原資料：抗原天然抗原、重組抗原、抗體單抗、多抗、Fab。檢測(cè)技術(shù)：ELISA、化學(xué)發(fā)光、時(shí)間分辨熒光、免疫層析等。檢測(cè)方法：夾心法一步法，兩步法，競(jìng)爭(zhēng)法固相液相競(jìng)爭(zhēng)法，液相液相競(jìng)爭(zhēng)法等。一、HBsAg方法：雙抗體夾心法：兩步法，一步法。試劑原資料： HBsAb McAb、 PcAb或其酶解產(chǎn)物 Fab 。雙抗體夾心法方式：固相載

2、體AbAg標(biāo)志AbHBsAg抗原表位1、共同決議簇： a aa124-147；2、型特異決議簇：1 d/y aa122，賴氨酸/精氨酸；2 w/r aa160，賴氨酸/精氨酸； 四種亞型：adr、adw、ayr、ayw。 檢測(cè)中常見的問(wèn)題1、一步法測(cè)定中的鉤狀效應(yīng)Hook effect：一步法檢測(cè)時(shí)，受檢抗原的含量很高時(shí)，過(guò)量抗原分別和固相抗體及標(biāo)志抗體結(jié)合，而不能構(gòu)成 “固相抗體抗原標(biāo)志抗體夾心復(fù)合物。此時(shí)反響后的檢測(cè)信號(hào)位于抗原過(guò)剩帶上，與規(guī)范曲線位于抗體過(guò)剩帶上的某一抗原濃度的檢測(cè)信號(hào)一樣，如按抗體過(guò)剩帶上的檢測(cè)信號(hào)測(cè)讀，所得結(jié)果將低于實(shí)踐的含量，這種景象稱為鉤狀效應(yīng)。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí)，可

3、出現(xiàn)假陰性結(jié)果。雙抗體夾心一步法的鉤狀效應(yīng)表示圖:固相載體固相AbAg標(biāo)志Ab鉤狀效應(yīng)時(shí)分析濃度與檢測(cè)信號(hào)關(guān)系圖：檢測(cè)信號(hào)抗體過(guò)剩帶抗原過(guò)剩帶抗原分析濃度lHBsAg檢測(cè)試劑原資料與鉤狀反響的關(guān)系：l原資料：HBsAb。l多克隆抗體：免疫動(dòng)物或直接從感染者血清中所獲得，來(lái)源于不同的B細(xì)胞克隆，可含有針對(duì)同一抗原分子不同的抗原表位a、 d/y、 w/r的多種定向抗體。l單克隆抗體：由一株B細(xì)胞雜交瘤產(chǎn)生的只針對(duì)某一特定的抗原表位的高度均一，高度專注性的抗體。McAb制備的試劑受鉤狀效應(yīng)的影響較PcAb為輕：Ig的一個(gè)Fab片段只能與一個(gè)抗原表位結(jié)合。McAb為針對(duì)同一抗原表位的均一抗體分子群。

4、HBsAg分子雖具有三個(gè)不同的表位(a、d/y、r/w)，但一分子HBsAg同樣的表位只需一個(gè)，只能封鎖一個(gè)單體McAb的一個(gè)抗原位點(diǎn)，兩分子抗原才干封鎖一個(gè)McAb單體。而PcAb為針對(duì)同一抗原不同表位抗體分子群(抗a、抗d/y、抗w/r )，一分子HBsAg上不同的表位可同時(shí)與針對(duì)不同表位的兩個(gè)以上單體PcAb結(jié)合，其封閉作用的效率高于對(duì)McAb。McAb試劑的鉤狀效應(yīng)固相載體McAb(抗a)Ag標(biāo)志McAb(抗d)PcAb試劑的鉤狀效應(yīng)固相載體McAb(抗a)標(biāo)志McAb(抗r)標(biāo)志McAb(抗d)l鉤狀效應(yīng)是HBsAg一步法檢測(cè)時(shí)不可防止的景象；l由于鉤狀效應(yīng)的存在，一步法檢測(cè)HBsA

5、g所得到的檢測(cè)信號(hào)無(wú)法確定其真實(shí)性；l處理勾狀效應(yīng)的根本方法為固相抗體與抗原反響后分別游離抗原，再加標(biāo)志抗體的兩步法檢測(cè)：l第一步：包被抗體捕獲抗原成為固相，然后分別游離抗原；第二步：固相抗原與標(biāo)志抗體結(jié)合，分別液相標(biāo)志抗體后記錄檢測(cè)信號(hào)。兩步法檢測(cè)：固相載體AbAg標(biāo)志Ab兩步法檢測(cè)時(shí)目的檢測(cè)物濃度和檢測(cè)信號(hào)關(guān)系曲線檢測(cè)信號(hào)分析濃度易誤解為兩步法的一步法檢測(cè)：1、標(biāo)本生物素化抗體標(biāo)志抗體生物素化抗體抗原標(biāo)志抗體復(fù)合物；2、參與親和素包被的固相載體固相生物素化抗體抗原標(biāo)志抗體復(fù)物；3、洗滌，判讀結(jié)果。2人抗鼠抗體效應(yīng)(Human anti-mouse effect, HAMA效應(yīng)) 對(duì)檢測(cè)的干

6、擾產(chǎn)生HAMA的緣由：l經(jīng)常接觸老鼠；l腫瘤病人進(jìn)展鼠單克隆抗體的治療。用鼠源McAb檢測(cè)HBsAg時(shí)，如樣品中有 HAMA，就會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性或假陰性。非鼠源的PcAb可消除HAMA效應(yīng)，IgFabFab)可消除HAMA引起的假陽(yáng)性 。 HAMA效應(yīng)的假陽(yáng)性方式：標(biāo)本中的人抗鼠抗體分別與固相HBsAb和標(biāo)志HBsAb McAb結(jié)合，構(gòu)成固相HBsAbHAMAHBsAb復(fù)合物雙抗原夾心，提供假陽(yáng)性檢測(cè)信號(hào)。固相載體固相McAb標(biāo)志McAb人抗鼠抗體Human Anti-Mouse Antibodies (HAMA)lHAMA效應(yīng)的假陰性方式:Figure 3-6 How HAMA generate

7、s a false negative3) S基因突變引起的HBsAg漏檢： 基因突變引起“a決議簇內(nèi)部一個(gè)或多個(gè)氨基酸置換、缺失或插入，HBsAg 蛋白質(zhì)氨基酸組成發(fā)生改動(dòng)，導(dǎo)致其抗原性產(chǎn)生變化。 變異率高 ，自然變異和免疫逃避，變異無(wú)地域性。 HBsAg抗原性發(fā)生改動(dòng)，不能被野生型HBsAb所識(shí)別。 此時(shí)用普通的國(guó)產(chǎn)試劑盒能夠檢不出。能導(dǎo)致HBsAg陰性的S區(qū)變異 145甘氨酸 精氨酸 aa124 半胱氨酸 酪氨酸 aa129 谷氨酸 天冬氨酸 aa131 蘇氨酸 天冬氨酸 aa131 蛋氨酸 蘇氨酸 aa122-124 插入氨基酸 前S1/S2部分缺失 不一定HBsAg抗原性發(fā)生改動(dòng)后就一

8、定漏檢。很多時(shí)候野生型與突變型是混合存在的，這種情況雖然有突變，同樣可以檢出 。4)RF引起的假陽(yáng)性 RF是一種本身抗體，能和多種動(dòng)物IgG的Fc段結(jié)合。由于固相抗體和標(biāo)志抗體均為IgG，雙抗體夾心法測(cè)抗原能夠有RF的干擾，產(chǎn)生假陽(yáng)性。固相載體固相IgG標(biāo)志IgGRF處理方法：用IgG的Fab 或F(ab)片段作酶結(jié)合物替代完好的IgG；標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑(G蛋白)處置； 將熱變性IgG參與到標(biāo)本稀釋液中；離心分別IgM和IgG；參與羊抗人IgG。鼠源單克隆抗體對(duì)RF的親和力較低，也能明顯地降低RF對(duì)結(jié)果的干擾。McAb和PcAb在HBsAg檢測(cè)中的運(yùn)用lMcAb：l優(yōu)點(diǎn)：在一

9、步法檢測(cè)中能減輕鉤狀效應(yīng)；便 l 于人為處置和質(zhì)量控制。l缺陷：HAMA效應(yīng)，靈敏度比不上PcAb。lPcAb：l優(yōu)點(diǎn)：免疫反響性好于McAb，作為標(biāo)志抗體，l PcAb能夠提供更強(qiáng)的檢測(cè)信號(hào)，到達(dá)更高l 的靈敏度；非鼠源PcAb 無(wú)HAMA效應(yīng)。l缺陷：一步法檢測(cè)時(shí)鉤狀效應(yīng)明顯。固相載體HBsAg McAb “aHBsAg McAb “a標(biāo)志McAb抗“d標(biāo)志PcAb抗“rMcAb和PcAb在檢測(cè)HBsAgadr時(shí)抗原抗體結(jié)合表示圖標(biāo)志PcAb抗“dHBsAg標(biāo)志McAb抗“d上述情況是指只采用一種McAb的情況，假設(shè)采用兩種針對(duì)不同表位的McAb ，可以提高靈敏度，但同時(shí)也和PcAb一樣，

10、會(huì)發(fā)生明顯的鉤狀效應(yīng)。常見HBsAg檢測(cè)情況：ELISA檢測(cè)方式：一步法。原資料：McAb；檢測(cè)結(jié)果：定性。缺陷：鉤狀效應(yīng)，靈敏度較差，HAMA干擾、RF干擾，不能定量?；瘜W(xué)發(fā)光檢測(cè)方式：一步法。原資料：McAb(Fab)；檢測(cè)結(jié)果：定量。靈敏度好于ELISA，無(wú)RF干擾。缺陷：鉤狀效應(yīng)， HAMA干擾，定量結(jié)果不能溯源到國(guó)際規(guī)范。lAbbottl檢測(cè)方式：兩步法。l原資料：McAb(固相捕獲抗體，PcAb Fab，標(biāo)志抗體 ；l檢測(cè)結(jié)果：定量。l優(yōu)點(diǎn)：1無(wú)鉤狀效應(yīng)；2無(wú)HAMA、無(wú)RF干擾；l3靈敏度高；4加用了針對(duì)不同突變株病毒l抗原的檢測(cè)抗體，可以進(jìn)展HBsAg突變株的檢l測(cè)；5定量結(jié)果

11、可溯源到國(guó)際規(guī)范。l時(shí)間分辨熒光l檢測(cè)方式：兩步法。l原資料：McAb(固相捕獲抗體，PcAb 標(biāo)志抗體 ；l檢測(cè)結(jié)果：定量。l特點(diǎn)：無(wú)鉤狀效應(yīng)；靈敏度高；無(wú)HAMA干擾。不能進(jìn)展HBsAg突變株的檢測(cè), 能夠有RF干擾，定量結(jié)果不能溯源到國(guó)際規(guī)范。目前國(guó)際上常用的HBsAg規(guī)范物質(zhì)：Paul Ehrlich Institute 參考物: PEI/ml;法國(guó)參考物： ng/ml;雅培參考物： ng/mlAxsym), IU/ml (i2000)；NIBSC參考物：IU/ml.英國(guó)國(guó)家生物規(guī)范與檢定所，National Institute for Biological Standards and

12、 Control, NIBSC) 1 IU/ml=0.58PEI/ml=1.93“法國(guó)ng/ml=5.59雅培ng/ml二、HBsAb 原資料：HBsAg1、天然HBsAg ：血源的純HBsAg，即S蛋白小球形顆粒；HBsAg小球型顆粒2022nmDane顆粒40 42nm)管型顆粒rHBsAg球型顆粒2830 nm2、基因工程重組抗原rHBsAg)。 HBsAb為分別針對(duì)HBsAg五種表位a、 d/y 、w/r的不同抗體，其中90%的HBsAb為針對(duì)“a的抗體，為最重要的維護(hù)性體，對(duì)不同亞型感染均有維護(hù)作用但交叉免疫不完全，也是HBsAb各種抗體中最重要的血清標(biāo)志物。用于檢測(cè)HBsAb的抗原

13、，無(wú)論天然抗原或重組抗原，必需具有“a表位，普通為ad、ay亞性結(jié)合運(yùn)用。 HBsAb試劑原資料質(zhì)量?jī)?yōu)良，檢測(cè)方法為雙抗原夾心法，定量定性檢測(cè)的結(jié)果均準(zhǔn)確可靠。能夠出現(xiàn)的問(wèn)題：如包被物和酶標(biāo)志物均運(yùn)用血源球形顆粒，在提取過(guò)程中混入Dane顆粒會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的特異性 。緣由：Dane顆粒中心構(gòu)造中的HBcAg暴露；HBcAg降解為HBeAg抗原。乙型肝炎病毒Dane顆粒構(gòu)造方式L蛋白M蛋白S蛋白C蛋白Dane顆粒暴露的HBcAg和降解生成HBeAg在制備的試劑中也同時(shí)作為固相抗原和標(biāo)志抗原。此時(shí)檢出的HBsAb，能夠并非真陽(yáng)性，而是HBcAg或/和HBeAg夾心檢出的HBcAb或/和HBeAb。

14、 固相載體HBsAgHBsAb標(biāo)志HBsAgHBcAgHBcAb標(biāo)志HBcAg假陽(yáng)性結(jié)果此時(shí)HBsAb假陽(yáng)性結(jié)果將使兩對(duì)半檢測(cè)方式產(chǎn)生誤差：1、HBsAg+HBsAb+HBeAg+HBcAb陽(yáng)性；2、HBsAg+HBsAb+HBeAb+HBcAb陽(yáng)性。lHBsAg陽(yáng)性+HBsAb陽(yáng)性方式討論l在HBV感染及機(jī)體免疫過(guò)程中，能夠有HBsAg和HBsAb同時(shí)存在的短暫過(guò)程，但很難出如今檢測(cè)過(guò)程中：lHBsAg過(guò)剩時(shí)，HBsAb與其結(jié)合，以抗原抗體復(fù)合物情勢(shì)存在，血中測(cè)不到游離抗體。lHBsAb過(guò)剩時(shí)，HBsAg以抗原抗體復(fù)合物情勢(shì)存在，血中測(cè)不到游離抗原。l由于抗原抗體反響是可逆的，在檢測(cè)靈敏度大

15、幅提高的情況下，上述情況不能絕對(duì)化。lHBsAg陽(yáng)性+ HBsAb陽(yáng)性+HBcAb陽(yáng)性方式解釋：“不同亞型HBV感染 。l兩株不同亞型HBV感染及機(jī)體免疫過(guò)程：1、兩株不同亞型HBV同時(shí)或先后感染同一個(gè)體，合成兩種不同亞型的HBsAg1和HBsAg2；2、前者刺激機(jī)體產(chǎn)生HBsAb1，后者未刺激機(jī)體產(chǎn)生HBsAb2；3、 HBsAb1中和了相應(yīng)的HBsAg1而不能中和HBsAg2 , HBsAg2與HBsAb1同時(shí)存在。出現(xiàn)HBsAg和HBsAb同時(shí)陽(yáng)性應(yīng)詳細(xì)分析：90%的HBsAb為針對(duì)“a的抗體，對(duì)不同亞型感染均有維護(hù)作用，雖然交叉免疫不完全，但出現(xiàn)機(jī)率極低；如因不同亞型HBV感染，交叉免

16、疫不完全，而出現(xiàn)HBsAg和HBsAb同時(shí)陽(yáng)性，此時(shí)普通試劑也無(wú)法檢出(用于檢測(cè)HBsAg的HBsAb中，并無(wú)針對(duì)特殊亞型HBsAg的HBsAb)；更為合理的解釋是：部分HBV的S基因突變引起“a決議簇氨基酸組成發(fā)生改動(dòng)，導(dǎo)致其抗原性產(chǎn)生變化，野生株抗HBs不能將其去除。 進(jìn)口試劑能夠檢出。 常見HBsAb檢測(cè)情況：ELISA原資料：天然抗原。檢測(cè)方式：一步法。檢測(cè)結(jié)果：定性，半定量。缺陷：能夠出現(xiàn)假陽(yáng)性，定量不準(zhǔn)?；瘜W(xué)發(fā)光原資料：天然抗原。檢測(cè)結(jié)果：定量。檢測(cè)方式：一步法。 lAbbottl原資料：重組抗原。l檢測(cè)方式：兩步法。l檢測(cè)結(jié)果：定量。l時(shí)間分辨熒光l原資料：天然抗原。l檢測(cè)方式：

17、兩步法。l檢測(cè)結(jié)果：定量。三、HBeAg原資料：McAb HBeAb。檢測(cè)方法：雙抗體夾心法(一步法，兩步法)。目前HBeAg檢測(cè)中，存在明顯的假陰性結(jié)果：1、一步法檢測(cè)鉤狀效應(yīng)(主要緣由)； 2、靈敏度差。HBeAg是診斷、治療檢測(cè)、預(yù)后估計(jì)重要的目的，但目前的陰性結(jié)果并未引起足夠的注重。常見HBeAg檢測(cè)情況：ELISA檢測(cè)方式：一步法。鉤狀效應(yīng)明顯，HAMA干擾，靈敏度不理想?；瘜W(xué)發(fā)光檢測(cè)方式：一步法。靈敏度好，鉤狀效應(yīng)較ELISA為輕， HAMA干擾。lAbbottl檢測(cè)方式：兩步法。l無(wú)鉤狀效應(yīng)，靈敏度好， HAMA干擾輕。l時(shí)間分辨熒光l檢測(cè)方式：兩步法。l無(wú)鉤狀效應(yīng)，靈敏度好于E

18、LISA， HAMA干擾。四、HBeAb方法：競(jìng)爭(zhēng)法。原資料：1 McAb HBeAb; 2 rHBeAg。 存在問(wèn)題： 原資料：大腸桿菌表達(dá)的基因工程抗原 (rHBeAg/E.coli)： 優(yōu)點(diǎn)：穩(wěn)定性好，運(yùn)用平安，價(jià)錢低廉 。 缺陷：特異性差。 1、與HBcAg間存在明顯的交叉抗原性 ； 2、菌體雜質(zhì)干擾檢測(cè)。lHBeAg和HBcAg是基因同源性很高的兩種抗原，但具有完全不同的抗體結(jié)合表位。由于E.coli在蛋白合成后處置上與肝細(xì)胞的差別，rHBeAg/E.coli存在明顯的HBcAg免疫反響性 。l很多人感染過(guò)大腸桿菌，血清中的抗大腸桿菌抗體能與重組抗原中的宿主成分結(jié)合。2檢測(cè)方式： 由

19、于檢測(cè)抗原特異性差，不能采用雙抗原夾心法、間接法、捕獲法等反響方式。固相載體HBeAg/E.coliHBcAb標(biāo)志HBeAg/E.coliAg/E.coli抗E.coli抗體標(biāo)志Ag/E.coli夾心法時(shí)的假陽(yáng)性結(jié)果固相載體HBeAg/E.coliHBcAb 標(biāo)志抗人IgGAg/E.coli抗E.coli抗體 標(biāo)志抗人IgG間接法時(shí)的假陽(yáng)性結(jié)果處理方法：采用HBeAb McAb為參比抗體，用競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)HBeAb，防止樣本中HBcAb及抗大腸桿菌抗體的干擾：固相載體HBeAgHBcAb標(biāo)志HBeAb抗E.coliAg/E.coli陰性結(jié)果HBeAb檢測(cè)方式：兩步法：1、固相抗體標(biāo)本中和試劑 rH

20、BeAg 分別游離抗原；2、參與標(biāo)志抗體分別游離標(biāo)志抗體，測(cè)定固相抗體抗原標(biāo)志抗體提供的檢測(cè)信號(hào)，判讀結(jié)果。經(jīng)典方法:防止中和試劑抗原和標(biāo)本中能夠存在的HBeAg對(duì)標(biāo)志抗體(HBeAb)的中和作用而引起的假陽(yáng)性結(jié)果。1固相-液相競(jìng)爭(zhēng)法固相-液相競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)HBeAb固相載體HBeAb標(biāo)志HBeAbrHBeAg中和試劑陰性結(jié)果.固相-液相競(jìng)爭(zhēng)法 固相載體rHBeAg中和試劑HBeAb標(biāo)本固相HBeAb標(biāo)志HBeAb陽(yáng)性結(jié)果 2液相-液相競(jìng)爭(zhēng)法一步法：固相抗原標(biāo)本標(biāo)志抗體分別游離抗體測(cè)定固相抗原標(biāo)志抗體提供的檢測(cè)信號(hào)，判讀結(jié)果。優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便，節(jié)約時(shí)間。缺陷：當(dāng)檢測(cè)標(biāo)本中存在較高濃度的HBeAg時(shí)，

21、能夠與液相中與標(biāo)志抗體結(jié)合，封鎖標(biāo)志抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)，不能構(gòu)成固相抗原-標(biāo)志抗體免疫復(fù)合物，導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。液相-液相競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)HBeAb固相載體rHBeAgHBeAb標(biāo)志HBeAb陽(yáng)性結(jié)果液相-液相競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)HBeAb固相載體rHBeAg酶標(biāo)HBeAb陰性結(jié)果液相-液相競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)HBeAb時(shí)，標(biāo)本中的HBeAg對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾固相載體HBeAg(標(biāo)本rHBeAg標(biāo)志HBeAb液相-液相競(jìng)爭(zhēng)法競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)HBeAb時(shí)，標(biāo)本中的HBeAg對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾固相載體HBeAg(標(biāo)本rHBeAg標(biāo)志抗體假陽(yáng)性結(jié)果3固相-液相-液相競(jìng)爭(zhēng)法：一步法：固相抗體標(biāo)本中和試劑標(biāo)志抗體分別游離抗原、抗體測(cè)定固相抗

22、體抗原標(biāo)志抗體提供的檢測(cè)信號(hào)，判讀結(jié)果。缺陷：除了檢測(cè)標(biāo)本中的HBeAg可干擾檢測(cè)結(jié)果，還有液相中的中和試劑rHBeAg的干擾，二者可協(xié)同封鎖標(biāo)志抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)，導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。rHBeAg與HBeAg的作用相加，對(duì)檢測(cè)的干擾能夠比液相-液相競(jìng)爭(zhēng)法更嚴(yán)重。.固相-液相-液相競(jìng)爭(zhēng)法 固相載體rHBeAg中和試劑HBeAb標(biāo)本固相HBeAb標(biāo)志HBeAb陽(yáng)性結(jié)果固相-液相-液相競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)HBeAb固相載體HBeAbHBeAb標(biāo)本標(biāo)志HBeAbrHBeAg中和試劑陽(yáng)性結(jié)果固相-液相-液相競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)HBeAb固相載體HBeAb標(biāo)志HBeAbrHBeAg中和試劑陰性結(jié)果固相-液相-液相競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)HB

23、eAb時(shí)，標(biāo)本中的HBeAg及中和試劑rHBeAg對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾固相載體HBeAb包被HBeAg(標(biāo)本rHBeAg中和試劑標(biāo)志抗體固相-液相-液相競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)HBeAb時(shí)，標(biāo)本中的HBeAg及中和試劑rHBeAg對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾固相載體HBeAb包被HBeAg(標(biāo)本 rHBeAg中和試劑標(biāo)志抗體假陽(yáng)性結(jié)果固相-液相競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)HBeAb時(shí)，防止了標(biāo)本中的HBeAg及檢測(cè)抗原對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾固相載體HBeAb包被HBeAg(標(biāo)本rHBeAg中和試劑標(biāo)志抗體陰性結(jié)果HBeAg與HBeAb的臨床意義：HBeAg與Dane顆粒、HBV DNA有伴隨關(guān)系，是HBV DNA復(fù)制活潑的血清學(xué)目的。HBeAg陽(yáng)

24、性，闡明傳染性強(qiáng)。急性肝炎病人血清HBeAg陽(yáng)性繼續(xù)三個(gè)月以上，闡明疾病有慢性化傾向。 HBeAg-HBeAb血清轉(zhuǎn)換血清轉(zhuǎn)換 (HBeAg 消逝消逝anti-HBe 出現(xiàn)出現(xiàn)) 是是HBeAg陽(yáng)性的慢肝病人長(zhǎng)期緩解的標(biāo)志陽(yáng)性的慢肝病人長(zhǎng)期緩解的標(biāo)志 在慢性乙肝感染期間, HBeAg 的存在與肝臟疾病的活動(dòng)及進(jìn)展相關(guān)；HBeAg血清轉(zhuǎn)換 與以下相關(guān) : HBV DNA下降; ALT 轉(zhuǎn)為正常 臨床緩解 組織學(xué)上表現(xiàn)炎癥活動(dòng)減輕 HBsAg 血清轉(zhuǎn)換(HBsAg 消逝anti-HBs 出現(xiàn)) 耐久的 HBeAg血清轉(zhuǎn)換 (自發(fā)的或干擾素誘導(dǎo))提示有較好的長(zhǎng)期預(yù)后 (生存率和無(wú)病存活率lHBeAg和HBeAb是病情評(píng)價(jià)、治療監(jiān)測(cè)、預(yù)后估計(jì)的重要目的。l高濃度HBeAg在一步法檢測(cè)中會(huì)出現(xiàn)假陰性，也會(huì)導(dǎo)致液相液相競(jìng)爭(zhēng)法及固相液相液相競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)HBeAb時(shí)的假陽(yáng)性，二者是有因果關(guān)系的兩項(xiàng)誤差。l由于HBsAg/HBeAg陽(yáng)性與HBsAg/HBeAb陽(yáng)性兩者均是常見的血清學(xué)檢測(cè)方式，上述誤差不易引起注重。l兩種方式所提示的臨床意義完全不同。一步法試劑在檢測(cè)高濃度HBeAg標(biāo)本時(shí)，能夠提供了虛偽的HBeAg