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1、 痰液標(biāo)本是臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)最常見(jiàn)的的標(biāo)本,但不是下呼吸道感染的最佳標(biāo)本。而痰為下呼吸道的分泌物,其病原菌的情況最能真實(shí)的反應(yīng)下呼吸道的感染情況,因此痰涂片鏡檢即格蘭染色和痰培養(yǎng)一直受到臨床上的關(guān)注,且常規(guī)用以指導(dǎo)臨床治療。痰培養(yǎng)的目的:檢查痰液中的致病菌??筛鶕?jù)需要進(jìn)行需氧菌培養(yǎng)、厭氧菌培養(yǎng)、結(jié)核桿菌培養(yǎng)、或真菌培養(yǎng),用于呼吸道感染的病因診斷。痰培養(yǎng)的理論依據(jù)是致病菌應(yīng)高于污染菌,據(jù)此,對(duì)痰液進(jìn)行定量培養(yǎng)和半定量培養(yǎng)。常與藥物敏感試驗(yàn)一起進(jìn)行。在抗菌素使用前采集價(jià)值高。最好注明相關(guān)體征、感染指標(biāo)、前期用藥情況。采集方法2.1自然咳痰法盡可能在用抗菌藥物之前采集標(biāo)本。以晨痰為佳,采集標(biāo)本前應(yīng)用
2、清水、冷開水漱口或用牙刷(不用牙膏)清潔口腔和牙齒,有假牙者應(yīng)取下假牙(為減少口腔正常菌群污染標(biāo)本),用力咳出呼吸道深部的痰(非后鼻部分泌物、非唾液),痰液直接吐入無(wú)菌痰杯中,標(biāo)本量應(yīng)1ml。對(duì)于痰量少或無(wú)痰或咳痰困難者可用霧化吸入加溫至45°C的10%NaCl水溶液(痰液粘稠難咳,阻塞氣道的,需要用-糜蛋白酶鹽水溶液),使痰液易于排出后咳痰。2.1.1濃縮法找結(jié)核桿菌時(shí),則應(yīng)留取24h痰液:正確的留痰方法是,在留痰之前先用清水漱口數(shù)次,以清除口腔內(nèi)的食物殘?jiān)安糠蛛s菌。留取的痰應(yīng)是用力咳嗽后自氣管內(nèi)咳出的痰,然后盛于痰盒內(nèi)送檢。不要將唾液或鼻涕吐入痰盒,以免影響查痰結(jié)果。初次就診需
3、查痰者,醫(yī)生要求送三個(gè)痰標(biāo)本:1 即時(shí)痰:就診當(dāng)時(shí)咳出的痰,2夜間痰:前一天晚間咳出的痰,3清晨痰:起床后深咳吐出的痰,其中以清晨第一次咳出的痰效果最好。痰培養(yǎng)注意事項(xiàng):痰液的采集必須注意兩個(gè)環(huán)節(jié),即所留的痰標(biāo)本必須是從肺部咳出(不要混入唾液、鼻咽分泌物、食物、漱口水等)及痰液必須十分新鮮(送檢標(biāo)本在1小時(shí)內(nèi)處理,以防細(xì)胞自溶)。采集方法通常包括:讓患者自然咳痰,清晨留取,用清水反復(fù)漱口三次,以清除口腔中的細(xì)菌。無(wú)痰者可用加溫45左右的10%的鹽水霧化吸入。痰咳出后立即放入干凈消毒的痰盒內(nèi),封好蓋子,立即送檢。1、量 正常人一般不咯痰或僅有少量泡沫樣痰或粘液樣痰。當(dāng)呼吸道有病變時(shí),痰量可增加(
4、50ml),大量痰液提示肺內(nèi)有慢性炎癥或空腔性化膿性病變,如支氣管擴(kuò)張癥、肺膿腫、肺結(jié)核等。在病程中如痰量逐漸減少,表示病情好轉(zhuǎn);反之表示病情有所發(fā)展。在肺膿腫或膿胸向支氣管破潰時(shí),痰量可突然增加并呈膿性,因此觀察痰量可了解病情的變化 2、痰結(jié)核菌培養(yǎng)陽(yáng)性,是肺結(jié)核診斷的另一個(gè)金標(biāo)準(zhǔn)。在100個(gè)結(jié)核患者中約有40個(gè)患者可能培養(yǎng)出結(jié)核菌。約有60%的結(jié)核患者痰結(jié)核菌培養(yǎng)陰性。由于不是每個(gè)患者都做痰培養(yǎng)結(jié)核菌,痰培養(yǎng)結(jié)核菌費(fèi)用高,時(shí)間長(zhǎng)。過(guò)去要1月余,現(xiàn)在也要10天左右。而且不是每一家醫(yī)院都能做痰培養(yǎng)結(jié)核菌的,大多數(shù)醫(yī)院沒(méi)有開展這一檢查。即使痰培養(yǎng)陰性,仍不能說(shuō)沒(méi)有傳染性,因?yàn)榻Y(jié)核菌數(shù)需1x102
5、/ml,才可能有陽(yáng)性結(jié)果。另外取到的痰中結(jié)核菌可能處置不當(dāng)已經(jīng)死了,故培養(yǎng)不出來(lái)。所以由于技術(shù)和其他原因仍有可能造成這一結(jié)果為陰性。 3、 檢查痰中有無(wú)結(jié)核菌,是基于一定量痰樣品中能夠檢測(cè)到的結(jié)核菌數(shù)量超過(guò)某一數(shù)量集,一般涂片檢查菌數(shù)需5x103/ml,培養(yǎng)需1x102/ml,標(biāo)本中菌數(shù)少于此數(shù)時(shí)不易獲得陽(yáng)性結(jié)果。如果痰中結(jié)核菌數(shù)量低于這一數(shù)字,痰找結(jié)核菌結(jié)果就呈現(xiàn)陰性,還有其他因素可能造成這一陰性結(jié)果。大家就容易誤以為沒(méi)有傳染性,實(shí)際上這些患者仍有可能從痰中向外排放結(jié)核菌。對(duì)檢驗(yàn)人員的要求:查找痰中的結(jié)核菌是一項(xiàng)耐心細(xì)致的工作,只要在工作上疏忽大意就有可能使痰菌的檢出率下降。一般認(rèn)為,痰涂片
6、陽(yáng)性的病人的含菌量每毫升痰在100萬(wàn)個(gè)左右,而在涂片時(shí)在涂片上的細(xì)菌數(shù)就比較少了,因?yàn)樵谕科瑫r(shí)只是在載坡片上,只涂上薄薄一層。所以,我們要求檢驗(yàn)人員在顯微鏡下查痰菌時(shí)必須仔細(xì)搜索每一個(gè)鏡下視野,至少搜索100300個(gè)視野。如果能做到一絲不茍,痰結(jié)核菌的檢出率就會(huì)大大提高。標(biāo)本的采集。當(dāng)肺部結(jié)核病灶與支氣管相通時(shí),咳出的痰中含菌量就較高。怎樣提高標(biāo)本中結(jié)核菌的檢出率?正確的操作方法應(yīng)該按如下面的步驟進(jìn)行:在采集標(biāo)本前,患者應(yīng)以清水漱口,這樣可以去掉口腔內(nèi)的大部分染菌,然后鼓勵(lì)病人用力咳嗽(如有出血危險(xiǎn)的病人應(yīng)避免用力咳嗽)盡力將氣管深部的痰液咳出,并將咳出的痰液放于清潔(最好消毒過(guò)的)容器內(nèi)并加
7、蓋,馬上送檢驗(yàn)室,直接涂片檢查。采集痰液的最好時(shí)間是清晨起床時(shí)咳出的痰。另一個(gè)必須注意的問(wèn)題是,有的病人無(wú)痰,咳嗽也很少,而為了應(yīng)付查痰就將唾沫作為痰標(biāo)本進(jìn)行檢查,這樣的痰標(biāo)本、結(jié)核菌的檢出率很低,甚至根本檢測(cè)不到結(jié)核菌,報(bào)告結(jié)果肯定是陰性的,這樣的檢驗(yàn)結(jié)果是不正確的,也絕對(duì)不可靠。檢驗(yàn)方法:對(duì)結(jié)核菌的檢驗(yàn),用得最多的方法是,直接厚涂片染色后在顯微鏡下檢測(cè),還有將痰液離心沉淀,漂浮集菌等處理后,再進(jìn)行涂片檢測(cè),這些方法都必須由專業(yè)人員操作,我們只要作一般了解就行了。下面介紹一下結(jié)核菌的培養(yǎng),由于結(jié)核菌屬于緩慢生長(zhǎng)需氧的抗酸桿菌,營(yíng)養(yǎng)要求高,在培養(yǎng)基中要有血清、卵黃、甘油、天門冬素及馬鈴薯等物質(zhì)
8、條件,溫度必須在3737.5,PH值為6.57.0的酸堿度,才緩慢生長(zhǎng)。在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)2周8周,以后才可以用肉眼看見(jiàn)菌落,如果碰到耐藥菌株可能在20周以上才能培養(yǎng)成可見(jiàn)菌落。結(jié)核菌的培養(yǎng)對(duì)臨床上的難治病例,耐藥病例意義較大,可以幫助醫(yī)生正確選擇敏感藥物制訂有效的治療方案。而我們?cè)谂R床上對(duì)初治病人或者其他復(fù)治病人,在痰中找結(jié)核菌陽(yáng)性以后即可開始抗癆治療,而不必等到培養(yǎng)報(bào)告陽(yáng)性才開始治療,一則培養(yǎng)一般在2個(gè)月以后才有結(jié)果,不馬上治療勢(shì)必耽誤病情;二則,如果進(jìn)行結(jié)核菌藥敏試驗(yàn),那么時(shí)間就更長(zhǎng),病情會(huì)進(jìn)一步延誤;三則在培養(yǎng)和做藥敏的一段時(shí)間里結(jié)核菌在體內(nèi)是否會(huì)產(chǎn)生變異而給治療帶來(lái)困難。痰結(jié)核菌檢查,我
9、們可以根據(jù)顯微鏡下每個(gè)視野的菌量的多少,來(lái)判斷每位病人排菌量大小,判定治療效果。通過(guò)上面這些介紹,結(jié)核病,特別是肺結(jié)核的診斷和治療,結(jié)核菌的檢測(cè)是非常重要的。所以,我們應(yīng)該重視該項(xiàng)工作,該項(xiàng)工作做好了,關(guān)系到我們今后在結(jié)核病防治方面成績(jī)的大小。由于結(jié)核菌的感染是全身性的,所以,結(jié)核菌的檢測(cè),我們還可以從胸水、腹水、腦脊液、膿汁、尿液、糞便以及結(jié)核病灶中進(jìn)行檢測(cè),操作要求都比較高,都必須專業(yè)技術(shù)人員來(lái)完成。2.2吸痰器吸痰對(duì)難于自然咳痰患者也可用無(wú)菌吸痰管抽取氣管深部分泌物。吸痰器吸痰,質(zhì)量保證有困難。如果一個(gè)責(zé)任性不強(qiáng)的護(hù)士從咽喉處途徑吸痰器吸出來(lái)的“痰液”也許比自然咳取的質(zhì)量更糟糕,更有甚者
10、,吸取的根部不是插管內(nèi)的樣本,而是順著口腔吸取的是咽喉處的分泌物,此處唾液、鼻涕、咽部分泌物什么都有,根本不適合作培養(yǎng)的,作拒收處理。2.3支氣管鏡采集法和氣管穿刺法:僅用于昏迷患者,由臨床醫(yī)師進(jìn)行。4.4纖維支氣管鏡抽吸:通常用于在患者行纖維支氣管鏡檢查時(shí)順便抽取2.5支氣管肺泡灌洗法、防污染毛刷采集法、環(huán)甲膜穿刺經(jīng)氣管吸引法、經(jīng)胸壁針穿刺和吸引法,均由臨床醫(yī)生按相應(yīng)操作規(guī)程采集,但必須注意采集標(biāo)本時(shí)盡可能避免咽喉部正常菌群的污染。而經(jīng)氣管吸引術(shù)采痰、纖支鏡保護(hù)性毛刷及肺泡灌洗和肺活檢均為有創(chuàng)檢查,一般患者難以接受,限制了其在臨床中的廣泛使用。、2.6小兒采集痰液的方法非常多,根據(jù)不同患兒的不同特點(diǎn)分別采用:喉部輕壓刺激法、霧化刺激法等等。其中喉部輕壓刺激法最簡(jiǎn)單,無(wú)危險(xiǎn)性,安全有效:2.6.1小兒取痰法(喉部輕壓刺激法)用彎壓舌板向后壓舌,將拭子伸入咽部,小兒經(jīng)壓舌刺激咳痰時(shí),可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上送檢。2.6.2幼兒還可用手指輕叩胸骨柄上方,以誘發(fā)咳痰。幼兒采痰的具體方法:需要兩位醫(yī)護(hù)人員配合,其中一位醫(yī)護(hù)人員端坐,將患兒俯臥放置于醫(yī)護(hù)人員雙腿之上,用左手手指輕輕按壓咽喉部&q
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