探討蚊香對小白鼠肝功能的影響final

1、探討蚊香對小白鼠的毒性李忠清（20037021）、（20037036）、（20037033）、（20037015）（廣西醫(yī)科大學 2003 級本碩 1 班）摘要 目的 探討蚊香對小白鼠的毒性將小白鼠分為 4 組，其中慢性組每晚熏兩盤蚊香連續(xù) 6 晚，性組在慢性的基礎(chǔ)上再急熏 2.5h，急性組急熏 2.5h，空白組不作處理。眼球取血，檢驗其血清中轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、膽紅素的指標并觀察其肝、肺、腎的病理切片。結(jié)果 肝功能：慢慢性組 AST 較慢性組、空白組著升高，慢性組 ALT 較慢性組顯著降低。病理切片：腎臟腎，及炎細胞現(xiàn)象；小白鼠的肝臟有水變性和肝小管上皮也出現(xiàn)水變性；肺臟

2、有肺不張，擴張血表現(xiàn)。結(jié)論 蚊香對小白鼠確害作用。：蚊香毒性；轉(zhuǎn)氨酶；谷草轉(zhuǎn)氨酶；膽紅素；肝損傷；水變性前面做過一個對比蚊香與香煙對小白鼠的毒性的實驗，對比蚊香與香煙對小白鼠的毒性，即分別用蚊煙熏小鼠。我們的預期結(jié)果為肺水腫，或肺有斑。但實驗結(jié)果顯示小鼠肺部變化不明顯，而肝臟紅腫充血，腸道失去正常的青灰色，而顯示為粉紅色。為了進一步研究蚊香對小白鼠的毒害作用，進行了此次實驗。1 材料和1.1 材料：第二次小白鼠 30 只，由廣西醫(yī)科大學動物試驗中心提供；錦江牌大盤微煙蚊香兩盒，福建省錦江日用化工兩個。1.2生產(chǎn)，購自還心愿超市廣西醫(yī)科店帶有通風觀察窗的紙盒（26 cm *15 cm *22cm

3、）：同批小白鼠 30 只隨機分為 4 組，慢性組 13 只，慢性組 6 只，急性組 7 只，空白組 4 只。慢性組和慢性組放入同一內(nèi)，每晚 23:00 時左右，關(guān)閉門窗，在其內(nèi)點燃兩盤蚊香讓其自然燃燒。第二天 7:30 左右打開窗子通風，盡量模擬日常使用蚊香的情況，連續(xù) 6 晚。其余小鼠暫不作煙熏處理，并同等條件飼養(yǎng)。第七天，將慢性組和急性組分別放入事先熏兩紙盒中，急熏 2.5h。然后所有小鼠眼球取血以分離血清做肝功能檢測，再頸椎脫臼處死，并進行胸腹腔的解剖，取肝、肺、腎做病理切片。心、肺、肝、腸，并2結(jié)果2.1對肝功能檢測的結(jié)果見表 1。經(jīng)方差分析統(tǒng)計學處理（SPSS），慢性組 AST 較慢

4、性組顯著ALT 較慢性組顯著升高升高（P<0.01）；慢（P<0.05）。性組 AST較空白組著升高（P<0.05）；慢性組蚊香對肝功能的影響（x±s）序號實驗組型nALTAST1234慢性組慢急性組空白組1367465.46±22.46130.5±43.0196.86±58.2096.25±79.21168.54±43.64249.50±92.60197.43±50.79155.25±48.94性組蚊香對肝功能的影響（x±s）（續(xù)表）nAST/ALTT-Bil序號 實驗組型1

5、234慢性組慢急性組空白組136742.81±1.082.03±0.812.40±0.952.02±0.666.69±1.418.22±1.747.67±2.337.15±0.86性組注：AST 比較2 組與 1 組P<0.01；2 組與 4 組P<0.05；ALT 比較1 組與 2 組 P<0.05。2.2病理切片結(jié)果：腎臟：急性組（22、23 號）少數(shù)腎小管上皮細胞水變性（圖 1），慢性組（15、19 號）少數(shù)腎小管有水變性，并有充血的表現(xiàn)（圖 2）；肺臟：慢性組肺泡內(nèi)可見（圖 1），有炎性浸

6、潤現(xiàn)象并有肺不張的現(xiàn)象（圖 3）。慢性組和急性組也有肺不張及炎細胞浸潤現(xiàn)象（圖 4）。肝臟：正常組肝細胞彌漫水變性部分肝細胞氣球樣變，肝竇變窄或消失（圖 5），其它組小白鼠有一些沒有表現(xiàn)出明顯的病理變化，有一部分小白鼠的肝細胞有不同程度的水變性（15 號、20 號、22 號），以 15 小白鼠的肝臟水變性最嚴重（圖 6），還有不少小白鼠的肝竇擴張充血，還可以看到有肝小葉號、19 號、20 號、26 號）（圖 7、8）。靜脈內(nèi)皮被破壞的現(xiàn)象（2圖 1：急性組腎小管（22 號）（可見水變性）圖 2：慢性組腎臟（15 號）（可見水變性）圖 3：慢性組肺組織（2 號）（可見肺不張）圖 4：急性組肺組織

7、（26 號）（肺泡內(nèi)可見）圖 5：空白組肝組織 （40 號）（水變性）圖 6：慢性組肝組織（15 號）（水變性）圖 7：急性組肝組織（26 號）（肝3 討論血）圖 8：慢性組（19 號）（靜脈充血，可見內(nèi)皮破壞）有研究指出，AST有兩種同工酶，分別位于肝細胞線粒體內(nèi)(ASTm)（占80）和細胞漿基質(zhì)內(nèi)(ASTs)（占20），肝細胞病變較輕，只有細胞膜通透性增加時，細胞漿基質(zhì)內(nèi)的ASTs和ALT入血，ASTm仍然保存，嚴重肝細胞壞死時，ASTm也入血，使血清AST升高幅度較ALT為大1，2。本次實驗中，慢性急性組小鼠AST相對于空白組升高，而ALT和空白組相似，說明AST較ALT升高較為大，因此

8、可以認為慢性組小鼠已經(jīng)發(fā)生嚴重的肝損傷。還有，雖然結(jié)果顯示慢性組小白鼠血清中的ALT、AST并沒有性組小鼠血清ALT、AST升高，但也不能說長期使用蚊香對小鼠的肝功能沒有損害。升高，只有在慢因為急性組小鼠AST、ALT相對空白組并沒有升高，而慢性組的AST比空白組升高，這就表明慢性過程已經(jīng)對肝細胞造成損傷，使得其膜的性下降，在急性條件下細胞更容易受損。已經(jīng)有研究證明，在門窗關(guān)閉的的情況下，有煙蚊香和無煙蚊香燃燒后均會造成嚴重的室內(nèi)空氣污染。蚊香燃燒屬全燃燒，可產(chǎn)生CO、CO2 、可吸入顆粒（IP）等空氣污染物。有煙蚊香燃燒后主要產(chǎn)生室內(nèi)嚴重IP污染，無煙蚊香燃燒后主要造成室內(nèi)嚴重CO污染3。C

9、O,CO2 污染均會造成機體組織缺氧，進而造成細胞缺氧性損傷， 導致細胞膜，線粒體膜，溶酶體膜的改變。同時，蚊香中的有效成分除蟲菊脂進入體內(nèi)后若肝臟的防御功4。能失效，則會引起細胞受損，甚至肝細胞受損后肝竇中的KUPFFER細胞大量被激活，肝的清除能力加強。有研究表明肝AST的清除大于ALT 1， ALT的半衰期又較短5，而本次實驗是在煙熏后8h才取血做檢測，所以AST和ALT可以在這一段時間降到正常水平。還有本次試驗慢性組持續(xù)的時間僅6天，對小鼠的慢性損傷作用可能還沒有表現(xiàn)出來。因此試驗結(jié)果顯示的慢性組AST、ALT沒有升高不一定是真實的反映。AST、ALT這二種酶的活性對肝臟受損均是一項敏

10、感的指標，但AST/ALT ALT比值增高更能反映肝細胞受損的嚴重程度6。本次實驗雖然結(jié)果顯示四個實驗組AST/ALT的差別并無統(tǒng)計學意義，但是慢性組已經(jīng)有升高的趨勢，差別沒有統(tǒng)計學意義可能是因為持續(xù)的時間太短，僅僅只有6天有關(guān)。如果持續(xù)的時間更長的話，它們之間的差別可能就顯示出統(tǒng)計學意義來。實驗時，只是從每個實驗組選取3個樣本做病理切片，因此樣本含量很少，實驗組之間的差別比一定能反映出來。從現(xiàn)有的切片結(jié)果可以看出：蚊香對腎、肺、肝組織都有損害作用。實驗組和空白組相比，腎臟腎小管上皮有水變性的表現(xiàn)；肺泡內(nèi)有，肺不張以及肺部小擴張充血的現(xiàn)象，但是各實驗組之間沒有明顯的差別。而肝臟切片的結(jié)果則出現(xiàn)

11、反常的結(jié)果，正常組肝細胞水變性是最嚴重的，而實驗組卻有幾只小白鼠的肝臟沒有明顯病理變化，有病變的小白鼠也就是水變性，肝竇擴張充血，而且它們水變性的程度沒有空白組嚴重。這種反?，F(xiàn)象可能是由于實驗過程中出現(xiàn)了某種失誤造成的。細胞發(fā)生水變性，說明蚊香的毒性物質(zhì)已損及線粒體內(nèi)ATP產(chǎn)生，其細胞膜上的Na-K-ATP酶活性降低，使細胞膜對電解質(zhì)的主動的功能發(fā)生，的鈉、鈣離子和水進入細胞內(nèi)，而細胞內(nèi)鉀離子外逸，導致細胞內(nèi)水分增多，形成細胞腫脹，細胞水變性7。因此，細胞發(fā)生水變性，說明已經(jīng)損傷了細胞的線粒體，細胞的損傷比較嚴重。另有文獻現(xiàn)8：盤式蚊香點燃后產(chǎn)生的煙霧可以嗆人、刺激眼結(jié)膜，還出具有活性的苯并芘

12、。對肺的損傷主要是因為蚊香在燃燒過程中會產(chǎn)生大量的可吸入顆粒3，這些微粒會引起肺部的炎癥反映，炎癥反應(yīng)產(chǎn)生的炎癥因子會對肺造成組織損傷。還有本次實驗的樣本含量太少而且各組間的樣本含量差別很大，而且慢性組持續(xù)的時間也比較短，各組之間本應(yīng)有的差別不一定能夠表現(xiàn)出來，所以，本次實驗的結(jié)果有待于做進一步的研究。本次實驗還留給我們一些疑問：首先本次實驗慢性組ALT、AST均比慢性組顯著升高，說明急性試驗對小鼠的肝臟也是有損害的，但是急性組的AST、AST在試驗結(jié)果中并沒有顯示出于空白組的差別來，是正常小鼠對蚊香有耐受作用，還是另有其它機制，抑或是實驗過稱中出了問題；其次，肝臟受損，膽紅素的代謝也會出現(xiàn)，

13、血中的膽紅素也應(yīng)該升高，但是本次實驗卻沒有表現(xiàn)出差別來，這是不是也隱藏著什么機制？再次，慢性組到底是因為實驗持續(xù)的時間短才出現(xiàn)這種和空白組無差別的結(jié)果，還是慢性實驗本來就對AST、ALT無影響？還有，病理切片中，空白組的肝組織細胞為什么會出現(xiàn)如此嚴重的水變性？這些個問題都有待于探討。4 結(jié)論蚊香對小白鼠的腎、肺、肝都有損害作用，特別是在門窗關(guān)閉的情況下，會產(chǎn)生很多對其有損害作用的污染物。所以在用蚊香時，一定注意開窗通風。還有，嬰幼兒的抵抗力比成人要低，盡量不要用蚊香， 要不然會對健康造成損害。參考文獻1、王英，. ASTALT比值在各種肝病中的變化和意義.熱帶醫(yī)學.2001，1（3）：222223.2、3、. 肝病患者ASTALT比值的檢測及臨床意義. 浙江臨床醫(yī)學.2002，4（12）：942943.霞，陳，煉. 兩種類型的蚊香對室內(nèi)空氣污染的研究. 江蘇預防醫(yī)學. 2004，15（3）