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文檔簡介

1、1 腦脊液及漿膜腔積液檢驗?zāi)X脊液及漿膜腔積液檢驗2 腦脊液檢驗?zāi)X脊液檢驗3腦脊液(腦脊液(cerebrospinal fluid, CSF)概概 述述l分布于腦室系統(tǒng)和蛛網(wǎng)膜下腔分布于腦室系統(tǒng)和蛛網(wǎng)膜下腔l比重為比重為1.006 _ 1.008 1.006 _ 1.008 無色透明細(xì)胞外液無色透明細(xì)胞外液l成人總量為成人總量為120180ml(120180ml(平均平均160ml)160ml)l主要由血循環(huán)經(jīng)腦脈絡(luò)膜叢和腦內(nèi)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞濾過主要由血循環(huán)經(jīng)腦脈絡(luò)膜叢和腦內(nèi)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞濾過而生成的血漿超濾液而生成的血漿超濾液(95(95在側(cè)腦室形成在側(cè)腦室形成) )l與血漿相比,其蛋白、脂

2、質(zhì)與鈣含量較低,而氯化物、葉與血漿相比,其蛋白、脂質(zhì)與鈣含量較低,而氯化物、葉酸與鎂的含量較高酸與鎂的含量較高l血、腦脊液、腦之間血、腦脊液、腦之間 _ _ 血血- -腦屏障腦屏障(blood-brain barrier,BBB)(blood-brain barrier,BBB) 4一.標(biāo)本采集 由臨床醫(yī)師進(jìn)行腰椎穿刺采集,必要時可由臨床醫(yī)師進(jìn)行腰椎穿刺采集,必要時可從小腦延腦池或側(cè)腦室穿刺獲得。從小腦延腦池或側(cè)腦室穿刺獲得。 標(biāo)本要求:將腦脊液分別收集于標(biāo)本要求:將腦脊液分別收集于3個無菌試個無菌試管中,第一管作細(xì)菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)管中,第一管作細(xì)菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,第三

3、管作一般性狀及分析和免疫學(xué)檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查。顯微鏡檢查。采集后申請單上注明時間、日期采集后申請單上注明時間、日期每管收集每管收集1-2毫升。毫升。 遇高蛋白標(biāo)本時可采用遇高蛋白標(biāo)本時可采用EDTA K2抗凝??鼓?。5標(biāo)本采集 三管三管 細(xì)菌培養(yǎng)細(xì)菌培養(yǎng) 化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查 一般性狀及顯微鏡細(xì)胞計數(shù)檢查一般性狀及顯微鏡細(xì)胞計數(shù)檢查 &每管收集每管收集 1-2毫升毫升 及時送檢及時送檢 6標(biāo)本送檢 標(biāo)本儲存:標(biāo)本儲存:立即送檢,一般不能超過1小時。 標(biāo)本運(yùn)輸:標(biāo)本運(yùn)輸:室溫運(yùn)輸。 標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn):污染,久置標(biāo)本。7 易被污染而影響結(jié)果的準(zhǔn)

4、確性易被污染而影響結(jié)果的準(zhǔn)確性 細(xì)胞破壞、變形、消失,纖維蛋白凝結(jié),影響細(xì)胞破壞、變形、消失,纖維蛋白凝結(jié),影響 計數(shù)及細(xì)胞學(xué)檢查計數(shù)及細(xì)胞學(xué)檢查 糖因細(xì)胞、微生物等耗解而降低糖因細(xì)胞、微生物等耗解而降低 致病菌如隱球菌、腦膜炎雙球菌等可溶解死亡致病菌如隱球菌、腦膜炎雙球菌等可溶解死亡腰穿后腦脊液應(yīng)立即送檢,放置過久會造成腰穿后腦脊液應(yīng)立即送檢,放置過久會造成 8二二 檢查內(nèi)容檢查內(nèi)容一、一般性狀檢查一、一般性狀檢查 1 . 顏色(color) 2 . 透明度(CSF clarity) 3 . 凝塊或薄膜(pellicle formation and clot) 4 .蛋白定性二、顯微鏡檢查二

5、、顯微鏡檢查三、化學(xué)檢驗三、化學(xué)檢驗 1. 蛋白質(zhì)(protein) 2. 葡萄糖(glucose) 3. 氯化物(chloride) 4. 酶類(enzymes) 四、四、 病原體檢查病原體檢查 9 1. 一般性狀檢查 顏色顏色 透明度透明度 凝固物凝固物 蛋白定性蛋白定性10 顏色11主要與穿刺損傷性出血鑒別主要與穿刺損傷性出血鑒別如為蛛網(wǎng)膜下腔出血,三管試驗均勻血性,靜置不凝固,離如為蛛網(wǎng)膜下腔出血,三管試驗均勻血性,靜置不凝固,離心后上液黃色,因含鐵質(zhì)上液潛血聯(lián)苯胺試驗心后上液黃色,因含鐵質(zhì)上液潛血聯(lián)苯胺試驗(+)(+),鏡下多見,鏡下多見皺縮紅細(xì)胞皺縮紅細(xì)胞如為損傷性出血,三管試驗初

6、為血性,逐漸變淡轉(zhuǎn)為無色透如為損傷性出血,三管試驗初為血性,逐漸變淡轉(zhuǎn)為無色透明,離心后上清為透明水樣,因無鐵質(zhì)上液潛血聯(lián)苯胺試驗明,離心后上清為透明水樣,因無鐵質(zhì)上液潛血聯(lián)苯胺試驗( -( - ) ),鏡下紅細(xì)胞形態(tài)完整,鏡下紅細(xì)胞形態(tài)完整報告時填寫:腦脊液顏色及離心后上清顏色及沉淀物報告時填寫:腦脊液顏色及離心后上清顏色及沉淀物性質(zhì)性質(zhì)紅紅 色色12項項 目目新鮮性出血新鮮性出血陳舊性出血陳舊性出血外觀渾濁清晰、透明易凝性易凝不易凝離心后上清液無色、透明紅色、黃褐色或檸檬色紅細(xì)胞形態(tài)無變化皺縮上清液OB試驗陰性陽性白細(xì)胞不增高繼發(fā)性或反應(yīng)性增高腦脊液新鮮性出血與陳舊性出血的鑒別 13腦或蛛

7、網(wǎng)膜下腔出血腦或蛛網(wǎng)膜下腔出血5 56 6小時紅細(xì)胞破壞可逐漸產(chǎn)生黃變,小時紅細(xì)胞破壞可逐漸產(chǎn)生黃變,4848小小時明顯,時明顯,3 3周后消失周后消失由于椎管阻塞或癌腫浸潤致腦脊液蛋白增高,產(chǎn)生梗阻性和郁滯由于椎管阻塞或癌腫浸潤致腦脊液蛋白增高,產(chǎn)生梗阻性和郁滯性黃變癥,與出血性黃變癥不同點在于蛋白量極高,當(dāng)腦脊液蛋白性黃變癥,與出血性黃變癥不同點在于蛋白量極高,當(dāng)腦脊液蛋白量超過量超過1500mg/L1500mg/L時,腰穿采集腦脊液可以發(fā)生自發(fā)性凝固,稱為時,腰穿采集腦脊液可以發(fā)生自發(fā)性凝固,稱為FroinFroin氏現(xiàn)象氏現(xiàn)象嚴(yán)重黃疸(血清膽紅素嚴(yán)重黃疸(血清膽紅素150mg/L150

8、mg/L)或來自血液中的其他黃色物質(zhì))或來自血液中的其他黃色物質(zhì)如胡蘿卜素、脂色素等由于血腦屏障的病理性改變(如腦膜炎)彌如胡蘿卜素、脂色素等由于血腦屏障的病理性改變(如腦膜炎)彌散入腦脊液的影響散入腦脊液的影響 黃 色14主要見于中樞神經(jīng)系統(tǒng)腦膜黑色素瘤主要見于中樞神經(jīng)系統(tǒng)腦膜黑色素瘤的侵犯的侵犯黑色黑色15乳白色乳白色 見于腦膜炎球菌、肺炎球菌、溶血性鏈球見于腦膜炎球菌、肺炎球菌、溶血性鏈球菌引起的化膿性腦膜炎菌引起的化膿性腦膜炎16 透明度 清澈透明:正常清澈透明:正常 微濁:病毒性腦(膜)炎等微濁:病毒性腦(膜)炎等 毛玻璃樣渾濁:結(jié)核性腦膜炎毛玻璃樣渾濁:結(jié)核性腦膜炎 乳白色渾濁:化

9、膿性腦膜炎乳白色渾濁:化膿性腦膜炎黑色或白色背景下觀察黑色或白色背景下觀察 報告時填寫:報告時填寫:“清澈透明清澈透明”“”“微濁微濁”“”“渾濁渾濁”17 凝固物 液面薄膜形成:結(jié)核性腦膜炎液面薄膜形成:結(jié)核性腦膜炎疑為結(jié)核性腦膜炎時在疑為結(jié)核性腦膜炎時在2-4度環(huán)境中靜置度環(huán)境中靜置12-24小時,在觀察表面有無薄膜形成小時,在觀察表面有無薄膜形成 凝塊或沉淀物:化膿性腦膜炎凝塊或沉淀物:化膿性腦膜炎 黃色膠凍狀物:蛛網(wǎng)膜下腔阻塞黃色膠凍狀物:蛛網(wǎng)膜下腔阻塞 報告時填寫:報告時填寫:“無凝塊無凝塊”“”“有凝塊有凝塊”“”“有薄有薄膜膜”“”“膠凍狀膠凍狀”描述描述18蛋白定性蛋白定性蛋白

10、定性試驗蛋白定性試驗( (潘氏法潘氏法) ):實驗原理:腦脊液中球蛋白與苯酚結(jié)合,可形成不溶性蛋白鹽而下沉,實驗原理:腦脊液中球蛋白與苯酚結(jié)合,可形成不溶性蛋白鹽而下沉,產(chǎn)生白色渾濁或沉淀。產(chǎn)生白色渾濁或沉淀。試驗方法:取潘氏試劑試驗方法:取潘氏試劑2-3ml2-3ml于小試管內(nèi),用毛細(xì)滴管滴入腦脊液于小試管內(nèi),用毛細(xì)滴管滴入腦脊液( (上上清液清液) ) 1-2 1-2滴,襯以黑背景,立即觀察結(jié)果。滴,襯以黑背景,立即觀察結(jié)果。結(jié)果判斷:結(jié)果判斷:陰性:清晰透明,不顯霧狀;陰性:清晰透明,不顯霧狀;極弱陽性(極弱陽性():微呈白霧狀,在黑色背景下才能看到;):微呈白霧狀,在黑色背景下才能看到

11、;弱陽性(弱陽性(+ +):灰白色云霧狀;):灰白色云霧狀;陽性(陽性(+):白色渾濁;):白色渾濁;強(qiáng)陽性(強(qiáng)陽性(3+3+):白色濃絮狀沉淀;):白色濃絮狀沉淀;最強(qiáng)陽性(最強(qiáng)陽性(4+4+):白色凝塊;):白色凝塊;19 臨床意義:臨床意義: 1腦脊液蛋白明顯增高腦脊液蛋白明顯增高(+以上以上):常見于化膿性腦膜炎、:常見于化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎、脊髓腔等中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤及其轉(zhuǎn)移結(jié)核性腦膜炎、脊髓腔等中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤及其轉(zhuǎn)移癌、腦出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血及梗阻等。癌、腦出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血及梗阻等。 2腦脊液蛋白輕度增高腦脊液蛋白輕度增高(+ - +):常見于病毒性腦膜炎、:常見

12、于病毒性腦膜炎、霉菌性腦膜性、乙型腦炎、脊髓灰質(zhì)炎、腦膜血管梅毒、霉菌性腦膜性、乙型腦炎、脊髓灰質(zhì)炎、腦膜血管梅毒、麻痹性癡呆、腦血栓形成等。麻痹性癡呆、腦血栓形成等。202、 顯微鏡檢查顯微鏡檢查21牛鮑氏計數(shù)板 計數(shù)公式計數(shù)公式: 白細(xì)胞總數(shù)= 4個大方格數(shù)(N)/4*10*稀釋倍數(shù)*10622 白細(xì)胞數(shù): 直接計數(shù)法直接計數(shù)法:適用于細(xì)胞總數(shù)不:適用于細(xì)胞總數(shù)不高,非血性或微混的標(biāo)本。小試管高,非血性或微混的標(biāo)本。小試管內(nèi)放入冰乙酸內(nèi)放入冰乙酸1-2滴,轉(zhuǎn)動試管,滴,轉(zhuǎn)動試管,使內(nèi)壁沾有冰乙酸后傾去之,然后使內(nèi)壁沾有冰乙酸后傾去之,然后滴加混勻的腦脊液滴加混勻的腦脊液3-4滴,數(shù)分鐘滴,

13、數(shù)分鐘后,混勻充入計數(shù)池,按白細(xì)胞計后,混勻充入計數(shù)池,按白細(xì)胞計數(shù)法計數(shù)數(shù)法計數(shù)10個大方格細(xì)胞數(shù)。個大方格細(xì)胞數(shù)。23 稀釋計數(shù)法:稀釋計數(shù)法:適用于白細(xì)胞數(shù)較高、渾濁的標(biāo)本。根據(jù)渾適用于白細(xì)胞數(shù)較高、渾濁的標(biāo)本。根據(jù)渾濁程度不同,將混勻的腦脊液用白細(xì)胞稀釋液進(jìn)行不同倍濁程度不同,將混勻的腦脊液用白細(xì)胞稀釋液進(jìn)行不同倍數(shù)稀釋后進(jìn)行計數(shù)。數(shù)稀釋后進(jìn)行計數(shù)。 血性標(biāo)本:血性標(biāo)本:&當(dāng)穿刺損傷血管導(dǎo)致血性腦脊液或出血性腦當(dāng)穿刺損傷血管導(dǎo)致血性腦脊液或出血性腦血管病時,計數(shù)白細(xì)胞總數(shù)已無意義,白細(xì)胞數(shù)須經(jīng)校正血管病時,計數(shù)白細(xì)胞總數(shù)已無意義,白細(xì)胞數(shù)須經(jīng)校正為剔除因出血而來的白細(xì)胞數(shù),用下

14、式進(jìn)行校正。為剔除因出血而來的白細(xì)胞數(shù),用下式進(jìn)行校正。 每每l腦脊液內(nèi)白細(xì)胞校正數(shù):腦脊液內(nèi)白細(xì)胞校正數(shù): 每每l 腦脊液內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)腦脊液內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)每每l白細(xì)胞數(shù)白細(xì)胞數(shù)=每每l腦脊液內(nèi)白細(xì)胞未校正數(shù)腦脊液內(nèi)白細(xì)胞未校正數(shù) 每每l血液內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)血液內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)24參考值: 成人腦脊液內(nèi)無紅細(xì)胞,白細(xì)胞極少,其參考范成人腦脊液內(nèi)無紅細(xì)胞,白細(xì)胞極少,其參考范圍:圍: 成人為(成人為(0-10)106/L; 兒童為(兒童為(0-15)106/L, 新生兒為(新生兒為(0-30)106/L。 如白細(xì)胞達(dá)如白細(xì)胞達(dá) (10-50)106/L為輕度增加,為輕度增加, (50-100)106/L為中度增加

15、,為中度增加, 200106/L以上顯著增加。以上顯著增加。25臨床意義1細(xì)胞數(shù)明顯增高細(xì)胞數(shù)明顯增高(200106/L):常見于化膿:常見于化膿性腦膜炎、流行性腦脊髓膜炎。性腦膜炎、流行性腦脊髓膜炎。2中度增高中度增高(200106/L):常見于結(jié)核性腦膜:常見于結(jié)核性腦膜炎。炎。3正?;蜉p度增高:常見于漿液性腦膜炎、流正?;蜉p度增高:常見于漿液性腦膜炎、流行性腦炎行性腦炎(病毒性腦炎病毒性腦炎)、腦水腫等。、腦水腫等。26 (二)白細(xì)胞分類(二)白細(xì)胞分類 白細(xì)胞數(shù)小于白細(xì)胞數(shù)小于30 不用分類計數(shù)不用分類計數(shù) 直接分類法:白細(xì)胞計數(shù)后,將低倍鏡換為高倍鏡,直接直接分類法:白細(xì)胞計數(shù)后,將

16、低倍鏡換為高倍鏡,直接在高倍鏡下根據(jù)細(xì)胞核的形態(tài)分別計數(shù)單個核細(xì)胞(包括在高倍鏡下根據(jù)細(xì)胞核的形態(tài)分別計數(shù)單個核細(xì)胞(包括淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞)和多核細(xì)胞,應(yīng)數(shù)淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞)和多核細(xì)胞,應(yīng)數(shù)100個白細(xì)胞,個白細(xì)胞,并以百分率表示。若白細(xì)胞少于并以百分率表示。若白細(xì)胞少于100個,應(yīng)直接寫出單核、個,應(yīng)直接寫出單核、多核細(xì)胞的具體數(shù)字。多核細(xì)胞的具體數(shù)字。 染色分類法:如直接分類不易區(qū)分細(xì)胞時,可將腦脊液離染色分類法:如直接分類不易區(qū)分細(xì)胞時,可將腦脊液離心沉淀,取沉淀物心沉淀,取沉淀物2滴,加正常血清滴,加正常血清1滴,推片制成均勻薄滴,推片制成均勻薄膜,置室溫或膜,置室溫或37溫箱內(nèi)待

17、干,進(jìn)行瑞氏染色后用油鏡分溫箱內(nèi)待干,進(jìn)行瑞氏染色后用油鏡分類。類。 如見有不能分類的細(xì)胞,應(yīng)另行描述報告,如腦膜白血病如見有不能分類的細(xì)胞,應(yīng)另行描述報告,如腦膜白血病或腫瘤時?;蚰[瘤時。27 參考值:參考值: 正常腦脊液中白細(xì)胞主要為單個核細(xì)胞,多為淋正常腦脊液中白細(xì)胞主要為單個核細(xì)胞,多為淋巴細(xì)胞及大單核細(xì)胞,兩者之比約為巴細(xì)胞及大單核細(xì)胞,兩者之比約為7:3,偶見,偶見內(nèi)皮細(xì)胞:軟腦膜和蛛網(wǎng)膜細(xì)胞、室管膜細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞:軟腦膜和蛛網(wǎng)膜細(xì)胞、室管膜細(xì)胞、脈絡(luò)膜細(xì)胞等。脈絡(luò)膜細(xì)胞等。 寄生蟲學(xué)檢查:經(jīng)沉淀涂片認(rèn)真尋找蟲卵、幼蟲寄生蟲學(xué)檢查:經(jīng)沉淀涂片認(rèn)真尋找蟲卵、幼蟲等。等。28臨床意義臨

18、床意義 化腦化腦: 白細(xì)胞顯著增加,以白細(xì)胞顯著增加,以 N 為主為主 結(jié)腦結(jié)腦:白細(xì)胞中度增加,早期以:白細(xì)胞中度增加,早期以 N 為主,中晚期為主,中晚期 以以 L 為主為主 病腦病腦:白細(xì)胞輕度增加,以:白細(xì)胞輕度增加,以 L 為主為主 腦寄生蟲?。耗X寄生蟲病: WBC E 急性腦膜白血?。杭毙阅X膜白血?。篧BC ,可見原始及幼稚細(xì)胞,可見原始及幼稚細(xì)胞29注意事項 1、標(biāo)本采集1小時內(nèi)計數(shù)完畢 2、血性腦脊液白細(xì)胞數(shù)必須校正 3、細(xì)胞計數(shù)時如發(fā)現(xiàn)皺縮或腫脹紅細(xì)胞應(yīng)加以描述 4、注意鑒別紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和新型隱球菌 5、不能用血液分析儀計數(shù)法計數(shù)、不能用血液分析儀計數(shù)法計數(shù)303、化學(xué)檢

19、查 蛋白質(zhì) 葡萄糖 氯化物 酶(LDH、ADA、ALT 、 AST 、 CK)31腦脊液蛋白質(zhì)來源于血漿和自身合成,腦脊液蛋白質(zhì)來源于血漿和自身合成,腦脊液蛋白質(zhì)中腦脊液蛋白質(zhì)中67為為白蛋白、白蛋白、33為球蛋白。為球蛋白。且隨不同部位而有差異,腦室且隨不同部位而有差異,腦室0.050.15gL,小腦延髓池,小腦延髓池0.10.25gL,腰池,腰池0.20.4gL隨年齡不同也有所差別,正常兒童腦脊液蛋白含量隨年齡不同也有所差別,正常兒童腦脊液蛋白含量0.10.2gL,50歲以上者為歲以上者為0.30.4gL一般而言,腦脊液總蛋白不超過一般而言,腦脊液總蛋白不超過0.4gL為正常范圍為正常范圍

20、32臨床意義 :化膿性腦膜炎:化膿性腦膜炎 :結(jié)核性腦膜炎:結(jié)核性腦膜炎 :病毒性腦膜炎:病毒性腦膜炎 33腦脊液氯化物來自血液,但高于血液濃度,含量與血漿濃度密腦脊液氯化物來自血液,但高于血液濃度,含量與血漿濃度密切相關(guān)(應(yīng)同時查血氯水平)。按氯離子計算其濃度約為血清切相關(guān)(應(yīng)同時查血氯水平)。按氯離子計算其濃度約為血清的的1.21.21.31.3(平均(平均1.251.25)倍。正常值為)倍。正常值為120120130mmol130mmolL L,兒,兒童略低童略低腦脊液氯化物降低較有意義,往往與糖降低同步發(fā)生腦脊液氯化物降低較有意義,往往與糖降低同步發(fā)生34臨床意義 :結(jié)核性腦膜炎 (1

21、02mmol/L) :化膿性腦膜炎 (102106mmol/L) :低氯血癥 35腦脊液中的葡萄糖來源于血液,正常值為腦脊液中的葡萄糖來源于血液,正常值為2.54.4mmolL,其含量約為血糖的,其含量約為血糖的1/22/3,低于,低于2.25mmolL為異常為異常注意:注意:兒童與新生兒腦脊液中葡萄糖含量較成人略高,可達(dá)兒童與新生兒腦脊液中葡萄糖含量較成人略高,可達(dá)3.35.0mmolL血糖含量、血腦屏障的完整性以及腦脊液中糖被酵解的程血糖含量、血腦屏障的完整性以及腦脊液中糖被酵解的程度,是影響腦脊液中糖含量的主要因素(應(yīng)同時查血糖水平)度,是影響腦脊液中糖含量的主要因素(應(yīng)同時查血糖水平)

22、36參考值參考值 成人:成人:2.52.5 4.5mmol/L4.5mmol/L 兒童:兒童:2.82.8 4.5mmol/L4.5mmol/L 腦脊液腦脊液/ /血漿:血漿: 0.30.30.90.9臨床意義 :化膿性腦膜炎:化膿性腦膜炎 :結(jié)核性腦膜炎:結(jié)核性腦膜炎 :其它腦膜(腦)炎:其它腦膜(腦)炎37化膿菌、結(jié)核菌、真菌性腦膜炎化膿菌、結(jié)核菌、真菌性腦膜炎時,被破壞的腦膜細(xì)胞釋放出葡萄糖時,被破壞的腦膜細(xì)胞釋放出葡萄糖酵解酶,將糖酵解為乳酸,使糖含量降低;感染可引發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)代酵解酶,將糖酵解為乳酸,使糖含量降低;感染可引發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)代謝改變,其代謝產(chǎn)物抑制了血腦屏障的膜攜帶運(yùn)轉(zhuǎn)

23、功能,使從血液進(jìn)入謝改變,其代謝產(chǎn)物抑制了血腦屏障的膜攜帶運(yùn)轉(zhuǎn)功能,使從血液進(jìn)入腦脊液的葡萄糖量減少腦脊液的葡萄糖量減少癌腫,尤其是腦膜癌病癌腫,尤其是腦膜癌病,由于癌細(xì)胞代謝活躍,可將葡萄糖迅速酵解;,由于癌細(xì)胞代謝活躍,可將葡萄糖迅速酵解;而癌細(xì)胞本身就能使碳水化合物發(fā)生不正常代謝,并可以阻止糖通過血而癌細(xì)胞本身就能使碳水化合物發(fā)生不正常代謝,并可以阻止糖通過血腦屏障。癌腫轉(zhuǎn)移時,糖含量可降至零腦屏障。癌腫轉(zhuǎn)移時,糖含量可降至零腦的囊蟲病、血吸蟲病、肺吸蟲病、弓形體病等腦的囊蟲病、血吸蟲病、肺吸蟲病、弓形體病等寄生蟲感染寄生蟲感染各種原因引起的各種原因引起的低血糖癥低血糖癥如胰島細(xì)胞瘤、糖

24、尿病患者胰島素使用過量如胰島細(xì)胞瘤、糖尿病患者胰島素使用過量等均可致腦脊液糖含量降低等均可致腦脊液糖含量降低其它其它如神經(jīng)梅毒、蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期、中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)節(jié)病、鼻如神經(jīng)梅毒、蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期、中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)節(jié)病、鼻咽癌、高頸位脊髓病變的深度咽癌、高頸位脊髓病變的深度X線或線或60Co放射治療,或腦脊液留置太久放射治療,或腦脊液留置太久等,均可引起腦脊液糖降低等,均可引起腦脊液糖降低38 lactic dehydrogenase (LDH ) 8-32U/L 化膿性腦膜炎化膿性腦膜炎 -病毒性腦膜炎病毒性腦膜炎 N 腦出血腦出血- 外傷引起的出血外傷引起的出血 N 腦部腫瘤腦部腫瘤

25、:急性期急性期- 靜止期靜止期 N adenosine deaminase(ADA) 0-8U/L 結(jié)核性腦膜炎結(jié)核性腦膜炎 lysozyme (Lzm) 結(jié)核性腦膜炎結(jié)核性腦膜炎 化膿性腦膜炎化膿性腦膜炎 ALT 5-15, AST 5-20 腦實質(zhì)壞死、腦出血、腦萎縮腦實質(zhì)壞死、腦出血、腦萎縮 CK 0.5-2U/L 腦實質(zhì)壞死腦實質(zhì)壞死酶學(xué)檢查酶學(xué)檢查394 4、病原體檢查、病原體檢查 1 1顯微鏡檢查顯微鏡檢查 涂片涂片 革蘭氏染色:細(xì)菌革蘭氏染色:細(xì)菌化膿性腦膜炎時其陽性率約為化膿性腦膜炎時其陽性率約為60-90% 60-90% 抗酸染色:結(jié)核菌抗酸染色:結(jié)核菌 印度墨汁染色:隱球菌

26、印度墨汁染色:隱球菌2 2細(xì)菌培養(yǎng)細(xì)菌培養(yǎng) 主要用于腦膜炎奈瑟菌、鏈球菌、葡萄球主要用于腦膜炎奈瑟菌、鏈球菌、葡萄球菌菌 、大腸埃希菌、流感嗜血桿菌分離培養(yǎng)、大腸埃希菌、流感嗜血桿菌分離培養(yǎng) 40墨汁染色墨汁染色原理原理:墨汁染色(負(fù)染色法),背景著色而菌體本身不著色的染色法稱負(fù)墨汁染色(負(fù)染色法),背景著色而菌體本身不著色的染色法稱負(fù)染色法。在黑色印度墨水的背景下,可清晰觀察到酵母細(xì)胞周圍環(huán)繞染色法。在黑色印度墨水的背景下,可清晰觀察到酵母細(xì)胞周圍環(huán)繞著一圈明亮的區(qū)域,即粘多糖莢膜,因此印度墨汁可以檢測到是否有著一圈明亮的區(qū)域,即粘多糖莢膜,因此印度墨汁可以檢測到是否有囊狀物包裹的酵母存在,

27、此法用以觀察細(xì)菌及某種真菌的莢膜等囊狀物包裹的酵母存在,此法用以觀察細(xì)菌及某種真菌的莢膜等染色方法:腦脊液等液體標(biāo)本經(jīng)離心后取沉淀物涂布于潔凈玻上,然后染色方法:腦脊液等液體標(biāo)本經(jīng)離心后取沉淀物涂布于潔凈玻上,然后加印度墨汁加印度墨汁1小環(huán)(或更少)混勻,加上蓋玻片,輕壓一下,使混合小環(huán)(或更少)混勻,加上蓋玻片,輕壓一下,使混合液變薄。在低倍鏡下尋找有莢膜的菌細(xì)胞,找到后換高倍鏡確認(rèn)。鏡液變薄。在低倍鏡下尋找有莢膜的菌細(xì)胞,找到后換高倍鏡確認(rèn)。鏡下背景呈黑褐色,菌體無色。下背景呈黑褐色,菌體無色。結(jié)果判斷:新型隱型球菌可呈寬闊透亮的厚莢膜,背景為均勻的黑色,結(jié)果判斷:新型隱型球菌可呈寬闊透亮

28、的厚莢膜,背景為均勻的黑色,白細(xì)胞被染成黑色不透亮,但核形明顯。白細(xì)胞被染成黑色不透亮,但核形明顯。 41圖注:圖中隱球菌呈大小不等的球體,散在和成堆出現(xiàn),圖注:圖中隱球菌呈大小不等的球體,散在和成堆出現(xiàn),可見有芽胞。可見有芽胞。隱球菌腦膜炎 常見中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的腦脊液檢查特點常見中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的腦脊液檢查特點 壓力壓力外觀外觀凝固凝固細(xì)胞細(xì)胞蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)葡萄糖葡萄糖 氯化物氯化物細(xì)菌細(xì)菌化腦化腦 濁濁可有可有多核多核 化膿菌化膿菌結(jié)核性結(jié)核性微濁微濁薄膜薄膜早中早中TB病毒性病毒性清清無無淋巴淋巴NN陰性陰性隱球菌性隱球菌性不定不定可有可有淋巴淋巴中中隱球菌隱球菌蛛網(wǎng)膜下腔出血蛛網(wǎng)膜下腔

29、出血血性血性可有可有RBC不定不定N無無綠色瘤綠色瘤清清無無淋巴淋巴輕度輕度NN無無腦膿腫腦膿腫濁濁可有可有淋巴淋巴輕度輕度NN不定不定 43三、腦脊液質(zhì)量控制三、腦脊液質(zhì)量控制1.送檢標(biāo)本的處理送檢標(biāo)本的處理CSF采集后應(yīng)立即送檢。采集后應(yīng)立即送檢。穿剌損傷出血的腦脊液細(xì)胞計數(shù)校正。穿剌損傷出血的腦脊液細(xì)胞計數(shù)校正。葡萄糖測定:留取標(biāo)本后應(yīng)馬上測定或加入氟葡萄糖測定:留取標(biāo)本后應(yīng)馬上測定或加入氟化鈉,防止葡萄糖酵解?;c,防止葡萄糖酵解。防止細(xì)菌離體后易死亡,及時檢查或需防止細(xì)菌離體后易死亡,及時檢查或需37下保溫送檢。下保溫送檢。442.建立標(biāo)準(zhǔn)化的檢驗方法建立標(biāo)準(zhǔn)化的檢驗方法(1)規(guī)范操

30、作規(guī)程規(guī)范操作規(guī)程 取標(biāo)本的試管必須清潔干凈,細(xì)菌培養(yǎng)用消毒無菌試管留取取標(biāo)本的試管必須清潔干凈,細(xì)菌培養(yǎng)用消毒無菌試管留取標(biāo)本。標(biāo)本。 白細(xì)胞計數(shù)應(yīng)注意白細(xì)胞與隱球菌和紅細(xì)胞的形態(tài)鑒別,有白細(xì)胞計數(shù)應(yīng)注意白細(xì)胞與隱球菌和紅細(xì)胞的形態(tài)鑒別,有穿剌損傷時應(yīng)作要校正穿剌損傷時應(yīng)作要校正。 化學(xué)成分測定應(yīng)離心取上清液作試驗?;瘜W(xué)成分測定應(yīng)離心取上清液作試驗。 檢測分析中嚴(yán)格按實驗步驟進(jìn)行操作。檢測分析中嚴(yán)格按實驗步驟進(jìn)行操作。45 (2)建立室內(nèi)質(zhì)控和設(shè)置陰陽性對照)建立室內(nèi)質(zhì)控和設(shè)置陰陽性對照 定期校正實驗所用的儀器和設(shè)備。定期校正實驗所用的儀器和設(shè)備。 選擇建立適當(dāng)?shù)臋z測方法。選擇建立適當(dāng)?shù)臋z測

31、方法。 保證所用檢驗試劑的質(zhì)量。保證所用檢驗試劑的質(zhì)量。 采用適當(dāng)?shù)馁|(zhì)控物。采用適當(dāng)?shù)馁|(zhì)控物。46腦脊液常規(guī)報告單 顏色:顏色:注明原有顏色及離心后上清液顏色 透明度:透明度: 凝塊:凝塊: 蛋白定性:蛋白定性: 細(xì)胞計數(shù):細(xì)胞計數(shù): *106 單個核:單個核: % 分葉核:分葉核: %47腦脊液生化項目 蛋白CSF 氯化物CL 葡萄糖GLU 酶類 LDH、ADA、ALT 、 AST 、 CK4950一、漿膜腔積液的概述一、漿膜腔積液的概述 胸膜腔胸膜腔 人體漿膜腔包括人體漿膜腔包括 腹膜腔腹膜腔 心包膜腔心包膜腔 20ml在正常情況下只有少量液體在正常情況下只有少量液體 500106/L 臨

32、界值臨界值 (300500)106/L66 2.細(xì)胞分類細(xì)胞分類直接和涂片分類法直接和涂片分類法 細(xì)胞數(shù)小于細(xì)胞數(shù)小于150不用分類計數(shù)不用分類計數(shù) 直接分類法直接分類法 直接在高倍鏡下分類計數(shù)直接在高倍鏡下分類計數(shù)100個細(xì)個細(xì)胞包括單個核細(xì)胞和多個核細(xì)胞以百分率表示胞包括單個核細(xì)胞和多個核細(xì)胞以百分率表示 染色分類法染色分類法 涂片作瑞特染色或瑞涂片作瑞特染色或瑞-吉姆薩染色吉姆薩染色后油鏡進(jìn)行分類,如需檢查腫瘤細(xì)胞應(yīng)用巴氏染后油鏡進(jìn)行分類,如需檢查腫瘤細(xì)胞應(yīng)用巴氏染色或色或HE染色染色673. 臨床意義臨床意義:漏出液漏出液 細(xì)胞少,淋巴細(xì)胞為主,少量間皮細(xì)胞細(xì)胞少,淋巴細(xì)胞為主,少量間

33、皮細(xì)胞; 滲出液滲出液 細(xì)胞較多細(xì)胞較多積液中各種細(xì)胞增多時意義積液中各種細(xì)胞增多時意義:中性粒細(xì)胞中性粒細(xì)胞 化膿性炎癥、早期結(jié)核性炎癥等化膿性炎癥、早期結(jié)核性炎癥等淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 慢性炎癥如結(jié)核、病毒感染、腫瘤等慢性炎癥如結(jié)核、病毒感染、腫瘤等嗜酸性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞 變態(tài)反應(yīng)、寄生蟲感染等變態(tài)反應(yīng)、寄生蟲感染等組織細(xì)胞組織細(xì)胞 炎癥、淤血、炎癥、淤血、 惡性腫瘤惡性腫瘤68七、化學(xué)檢查七、化學(xué)檢查1.蛋白質(zhì)定量蛋白質(zhì)定量測定方法與血清蛋白定量相同測定方法與血清蛋白定量相同滲出液蛋白質(zhì)滲出液蛋白質(zhì) 30g/L ;積液總蛋白;積液總蛋白/血清總蛋白比值血清總蛋白比值 0.5; 漏出液漏出液

34、蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 25g/l ;積液總蛋白;積液總蛋白/血清總蛋白比值血清總蛋白比值0.5; 蛋白質(zhì)如為蛋白質(zhì)如為25-30 g/L ,則難以判明其性質(zhì)(中間型積液),則難以判明其性質(zhì)(中間型積液)692.葡萄糖定量葡萄糖定量測定方法與血清葡萄糖定量相同。測定方法與血清葡萄糖定量相同。漏出液:葡萄糖含量與血糖相近或稍低些。漏出液:葡萄糖含量與血糖相近或稍低些。滲出液:葡萄糖因受細(xì)菌或炎癥細(xì)胞的酵解作用,積液中葡滲出液:葡萄糖因受細(xì)菌或炎癥細(xì)胞的酵解作用,積液中葡 萄糖含量降低萄糖含量降低(2.22mmol/L2.22mmol/L) 參考值:參考值:3.6-5.5mmol/L 化膿性細(xì)菌感染化膿性細(xì)

35、菌感染200U/L,積液,積液LDH/血清血清 LDH比值比值0.6可作為可作為滲出液的指標(biāo)。在各類滲出液中滲出液的指標(biāo)。在各類滲出液中化膿性感染積液化膿性感染積液LDH活性活性癌性癌性結(jié)核性結(jié)核性正常正常。5.腺苷脫氫酶腺苷脫氫酶(adenosine deaminase,ADA):): ADA大于大于45U/L應(yīng)考慮為結(jié)核性,應(yīng)考慮為結(jié)核性,結(jié)核性結(jié)核性 癌性癌性非炎癥性積液非炎癥性積液,當(dāng)抗當(dāng)抗結(jié)核藥物治療有效時,其胸腹炎內(nèi)結(jié)核藥物治療有效時,其胸腹炎內(nèi)ADA也應(yīng)隨之下降,因此也能作為抗結(jié)也應(yīng)隨之下降,因此也能作為抗結(jié)核治療效觀察指標(biāo)。核治療效觀察指標(biāo)。 726.溶菌酶(溶菌酶(lysoz

36、yme,LZM):): 結(jié)核性結(jié)核性積液中溶菌酶含量超過積液中溶菌酶含量超過30mg/L,積液和血清中溶菌酶比值,積液和血清中溶菌酶比值1.0,明顯高于癌性積液、結(jié)締組織病。因此測定積液中溶菌酶對結(jié)核性胸膜炎明顯高于癌性積液、結(jié)締組織病。因此測定積液中溶菌酶對結(jié)核性胸膜炎的診斷有幫助,連續(xù)觀察可估計預(yù)后。的診斷有幫助,連續(xù)觀察可估計預(yù)后。而而癌細(xì)胞不含溶酶體,無癌細(xì)胞不含溶酶體,無LZM產(chǎn)生,產(chǎn)生,故故癌性積液癌性積液LZM無增高無增高。 7。淀粉酶淀粉酶(amylase,AMY):):參考值:參考值:0-300U/L 大多數(shù)大多數(shù)胰腺炎胰腺炎患者其胰腺創(chuàng)傷所致腹腔積液中淀粉酶活性患者其胰腺創(chuàng)

37、傷所致腹腔積液中淀粉酶活性/血清淀粉酶血清淀粉酶 1。當(dāng)當(dāng)食道破裂食道破裂時唾液經(jīng)食道穿孔處流進(jìn)胸腔,此時胸腔積液淀粉酶也升高,時唾液經(jīng)食道穿孔處流進(jìn)胸腔,此時胸腔積液淀粉酶也升高,738、堿性磷酸酶堿性磷酸酶(alkaline phoephatase,ALP):):積液中因腫瘤細(xì)胞釋放大量積液中因腫瘤細(xì)胞釋放大量ALP,使積液,使積液ALP/血清血清ALP比值比值1,而其,而其他性質(zhì)積液他性質(zhì)積液ALP/血清血清ALP比值比值1.0。另外,小腸扭轉(zhuǎn)穿孔患者的腹腔穿刺液中另外,小腸扭轉(zhuǎn)穿孔患者的腹腔穿刺液中ALP活性升高,約為血清活性升高,約為血清ALP的的2倍,發(fā)病倍,發(fā)病2-3小時即升高,

38、并隨病情進(jìn)展而增加。小時即升高,并隨病情進(jìn)展而增加。 74 9、C反應(yīng)性蛋白反應(yīng)性蛋白(C-resctive protein,CRP):): CRP為急性時相反應(yīng)蛋白,可用于漏出液及滲液的鑒為急性時相反應(yīng)蛋白,可用于漏出液及滲液的鑒別判斷。別判斷。CRP10mg/L為滲出為滲出液。液。7510.10.腫瘤標(biāo)志物測定腫瘤標(biāo)志物測定癌胚抗原(癌胚抗原(carcinoembryonicantigencarcinoembryonicantigen,CEA CEA ):當(dāng)積液中:當(dāng)積液中CEA20g/LCEA20g/L,積液積液CEA/CEA/血清血清CEACEA比值比值11時,應(yīng)高度懷疑為癌性積液。時

39、,應(yīng)高度懷疑為癌性積液。甲胎蛋白(甲胎蛋白(alpha-fetoproteinalpha-fetoprotein,AFP AFP ):血清:血清AFPAFP作為原發(fā)性肝癌的標(biāo)志作為原發(fā)性肝癌的標(biāo)志物。腹水中物。腹水中AFPAFP檢測結(jié)果與血清檢測結(jié)果與血清AFPAFP呈正相關(guān)。檢測腹水中呈正相關(guān)。檢測腹水中AFP25g/LAFP25g/L時時對診斷原發(fā)性肝癌引起的腹水是有價值的。對診斷原發(fā)性肝癌引起的腹水是有價值的。CA125:腹水中:腹水中CA1251000u/ml常作為卵巢癌轉(zhuǎn)移的指標(biāo),在胃癌、結(jié)常作為卵巢癌轉(zhuǎn)移的指標(biāo),在胃癌、結(jié)直腸癌、肝癌和胰腺癌中也有較高的陽性檢出率;直腸癌、肝癌和胰腺癌中也有較高的陽性檢出率; CA199是胰腺癌和結(jié)、直腸癌的標(biāo)志物;是胰腺癌和結(jié)、直腸癌的標(biāo)志物;76胸腹水生化檢驗項目 蛋白TP 葡萄糖GLU 脂類 TC 、TG 酶類 LDH ADA AMY ALP CRP 77八、微生物檢查八、微生物檢查如標(biāo)本通過一般性狀如標(biāo)

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