植物生物技術(shù)復(fù)習(xí)題-金(共4頁)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上一.名詞解釋：1.植物組織培養(yǎng)：在含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及植物生長(zhǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)離體植物組織（器官或細(xì)胞）并誘導(dǎo)使其長(zhǎng)成完整植株的技術(shù)。 2.細(xì)胞全能性：廣義的細(xì)胞全能性指一個(gè)細(xì)胞發(fā)育成一個(gè)完整有機(jī)個(gè)體的潛能和特性。植物細(xì)胞的全能性指具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞，在適宜的條件下能夠分化發(fā)育成完整植株的潛在能力。 3.外植體：從植株上切離、用于培養(yǎng)的部分或器官稱為外植體。 4.細(xì)胞懸浮培養(yǎng)：將細(xì)胞置于液體培養(yǎng)基中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，稱為懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。 5.莖尖培養(yǎng)：取植物莖尖組織放入培養(yǎng)液中進(jìn)行的無菌培養(yǎng)。 6.花藥培養(yǎng)：將花藥接種到培養(yǎng)基上，使其中的花粉發(fā)育成單倍體植株的過程。 7.感

2、受態(tài)：外植體細(xì)胞培養(yǎng)初期獲得能被誘導(dǎo)形態(tài)發(fā)生的狀態(tài)稱為感受態(tài)。 8.脫分化：指已分化的細(xì)胞在一定條件下恢復(fù)分裂機(jī)能，轉(zhuǎn)變成分生組織細(xì)胞和形成愈傷組織的過程。 9.再分化：指在植物組織培養(yǎng)中，對(duì)處于脫分化狀態(tài)的愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng)，誘導(dǎo)其形成新的植物體的過程。 10.愈傷組織：植物外植體脫分化、經(jīng)過細(xì)胞分裂形成的一團(tuán)無序生長(zhǎng)的薄壁細(xì)胞。 11.器官發(fā)生：指培養(yǎng)細(xì)胞在適宜的誘導(dǎo)培養(yǎng)條件下形成不定芽和不定根等器官，形成完整植物的過程。 12.胚狀體：非合子細(xì)胞經(jīng)過胚胎發(fā)生和發(fā)育形成的胚狀結(jié)構(gòu)。13.褐變：指外植體在培養(yǎng)過程中，自身組織從表面培養(yǎng)基釋放褐色物質(zhì)，以致培養(yǎng)基逐漸變成褐色，外植體也隨之進(jìn)一步變

3、褐而死亡的現(xiàn)象。 14.消毒：指殺死病原微生物、但不一定能殺死細(xì)菌芽孢的方法。 15.滅菌：是指用物理或化學(xué)的方法殺滅全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之達(dá)到無菌保障水平。 16.接種：按無菌操作技術(shù)要求將目的微生物移接到培養(yǎng)基質(zhì)中的過程。 17.初代培養(yǎng)：指在組織培養(yǎng)過程中，最初建立的外植體無菌培養(yǎng)階段。 18.繼代培養(yǎng)：將原有的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到新配制的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)的過程稱為繼代培養(yǎng)。 19.形態(tài)建成：外植體在適宜的培養(yǎng)條件下，經(jīng)脫分化、再分化產(chǎn)生芽和根或者形成胚狀體，發(fā)育成苗或完整植株的過程。 20.體細(xì)胞胚：又叫胚狀體，是指離體培養(yǎng)條件下沒有經(jīng)過受精過程而形成的胚胎類似物。

4、21.胚培養(yǎng)：對(duì)植物成熟胚或幼胚進(jìn)行離體培養(yǎng)，以獲得發(fā)育正常的植株。 22.花粉培養(yǎng)：將花粉粒接種到培養(yǎng)基上，發(fā)育成單倍體植株的過程。 23.看護(hù)培養(yǎng)法：用一塊活躍生長(zhǎng)的愈傷組織來看護(hù)單個(gè)細(xì)胞，促使其生長(zhǎng)和增殖的方法?？烧T導(dǎo)形成單細(xì)胞無性系。24.原生質(zhì)體：去除細(xì)胞壁后的裸露細(xì)胞。 25.原生質(zhì)體融合：指通過人為的方法，使遺傳性狀不同的兩個(gè)細(xì)胞的原生質(zhì)體進(jìn)行融合，借以獲得兼有雙親遺傳性狀的穩(wěn)定重組子的過程。 26.無病毒苗：未被病毒感染，或經(jīng)人工處理去除病毒的植物苗株。 27.人工種子：是將植物離體培養(yǎng)產(chǎn)生的體細(xì)胚包埋在含有營(yíng)養(yǎng)成分和保護(hù)功能的物質(zhì)中，在適宜的條件下發(fā)芽出苗。 28.種質(zhì)：是決

5、定生物遺傳性狀、并將遺傳信息從親代傳遞給子代的遺傳物質(zhì)。(即，一個(gè)物種的基因庫)。 29.種質(zhì)保存：通過自然或人為的技術(shù)措施，保護(hù)種質(zhì)資源，使其不至于流失或滅絕。 30.超低溫保存：在低于80的溫度下保存。通常超低溫保存的介質(zhì)有：超低溫冰箱（-80）、干冰（-79）、液氮（-196），等。 31.體細(xì)胞雜交：又稱體細(xì)胞融合，指將兩個(gè)遺傳性狀不同的體細(xì)胞融合成一個(gè)體細(xì)胞的過程。32.煉苗：煉苗是在保護(hù)地育苗的情況下，采取放風(fēng)、降溫、適當(dāng)控水等措施對(duì)幼苗強(qiáng)行鍛煉的過程，使其定植后能夠迅速適應(yīng)露地的不良環(huán)境條件，縮短緩苗時(shí)間，增強(qiáng)對(duì)低溫、大風(fēng)等的抵抗能力。 33.分子標(biāo)記：以生物體核酸多態(tài)性為基礎(chǔ)的

6、遺傳標(biāo)記。如，nDNA、cpDNA、mtDNA標(biāo)記。 34.RFLP（限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性）：使用限制性DNA內(nèi)切酶消化某個(gè)DNA分子后出現(xiàn)的長(zhǎng)度多樣性。因其具有種質(zhì)特異性而常用作遺傳學(xué)的分子標(biāo)記。35遺傳轉(zhuǎn)化：(植物的遺傳轉(zhuǎn)化)又稱植物轉(zhuǎn)基因,是通過某種途徑或技術(shù)(物理的、化學(xué)的和生物的方法)，將從動(dòng)物、植物、微生物中分離的甚至是人工合成的目的基因?qū)胫参锸荏w細(xì)胞并整合到基因組中，使之在受體細(xì)胞中得以正確表達(dá)和穩(wěn)定遺傳，并且賦予受體植物一個(gè)新的預(yù)期性狀的技術(shù)體系。 36、Ti質(zhì)粒:是存在于根癌農(nóng)桿菌中的一種能夠自我復(fù)制的共價(jià)閉合的dsDNA分子. 37、T-DNA ：（百度）又稱轉(zhuǎn)移DNA，

7、是農(nóng)桿菌Ti(tumor inducing)或Ri(root inducing)質(zhì)粒中的一段DNA序列,可以從農(nóng)桿菌中轉(zhuǎn)移并穩(wěn)定整合到植物核基因組中,已成為植物分子生物學(xué)中廣泛應(yīng)用的遺傳轉(zhuǎn)化載體。38、選擇標(biāo)記基因：是指一些具有解除篩選壓力的基因。 39、報(bào)告基因：是一種編碼易被檢測(cè)的蛋白質(zhì)或酶的基因。 40、卸甲載體：是相對(duì)于天然的毒性Ti質(zhì)粒而言的。結(jié)構(gòu)上，卸甲載體切除了天然Ti質(zhì)粒T-DNA上的致瘤基因和冠癭堿合成酶基因等序列之后，失去致瘤能力的Ti質(zhì)粒，即無毒的Ti質(zhì)粒載體。41、遺傳標(biāo)記 ：是指可穩(wěn)定遺傳、能用肉眼明確觀測(cè)的差異化個(gè)體外部形態(tài)特征。42、SSR：又稱微衛(wèi)星DNA，是一

8、類優(yōu)核心序列（通常是1-5個(gè)堿基組成的基序motif進(jìn)行串聯(lián)重復(fù)）和兩端的單拷貝保守側(cè)翼序列構(gòu)成。43植物細(xì)胞工程:指以細(xì)胞為基本單位在體外條件下進(jìn)行培養(yǎng)、繁殖，或人為地使細(xì)胞某些生物學(xué)特性按人們的意愿生產(chǎn)某種物質(zhì)的過程。44植板率：即形成愈傷組織的原生質(zhì)體數(shù)量占所培養(yǎng)原生質(zhì)體總數(shù)的百分比。二.簡(jiǎn)答題：1.植物組織培養(yǎng)技術(shù)主要包括哪些環(huán)節(jié)。答：（1）培養(yǎng)基的配制及滅菌；（2）外植體的選擇及滅菌；（3）外植體的接種及培養(yǎng)；（4）試管苗的馴化與移栽。2.請(qǐng)就一個(gè)植物組織培養(yǎng)室的各功能分區(qū)進(jìn)行分析說明。答：1、儲(chǔ)藏室 2、洗滌室 3、藥品室 4、培養(yǎng)基準(zhǔn)備室 5、接種室 6、培養(yǎng)室 7、顯微觀察室3

9、.簡(jiǎn)述植物組織培養(yǎng)的外植體選擇原則。答：取材季節(jié)；取材部位；發(fā)育年齡；材料大小 選擇優(yōu)良的種質(zhì)選擇健壯的植株選擇最適宜的時(shí)期選取適宜的大小。4.如何對(duì)外植體進(jìn)行表面消毒。答：(1) 將需要的材料用水洗干凈。(2) 表面滅菌：用 75%酒精浸 30-60s 左右。(3) 滅菌劑處理：0.1%升汞 10 分鐘、或在 10%漂白粉上清液中浸泡 10-15 分鐘。(4) 用無菌水沖洗 3-5 次左右。5.簡(jiǎn)述外植體的褐變及其預(yù)防措施。答：（1）褐變是指在組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)材料向培養(yǎng)基中釋放褐色物質(zhì)，致使培養(yǎng)基逐漸變成褐色，培養(yǎng)材料也慢慢變褐而死亡的現(xiàn)象。（2）預(yù)防措施：選擇適宜的外植體及最佳培養(yǎng)基、

10、連續(xù)轉(zhuǎn)移、加抗氧化劑、加活性劑。6.論述植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)在組織培養(yǎng)中的作用，并列舉常見的種類。答：（1）生長(zhǎng)素：用于誘導(dǎo)細(xì)胞的分裂和根的分化，促進(jìn)細(xì)胞分裂和伸長(zhǎng)，促進(jìn)生根等。常見種類有：吲哚乙酸（IAA）、吲哚丁酸(IBA)、苯乙酸（PAA）、4-氯-3-吲哚乙酸（4-Cl-IAA）等。（2）細(xì)胞分裂素：防止器官衰老，打破休眠，促進(jìn)果實(shí)生長(zhǎng)等作用，可誘導(dǎo)芽的產(chǎn)生。常見種類有：激動(dòng)素（KT）、6-芐基腺嘌呤（BA）、玉米素（ZT）等。（3）赤霉素：刺激體細(xì)胞胚生長(zhǎng)發(fā)育成小植株，促進(jìn)少數(shù)植物培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生。常見種類：GA3。（4）多胺和一些生長(zhǎng)抑制劑：多胺對(duì)有些植物的體細(xì)胞胚發(fā)生有促進(jìn)作用。部

11、分生長(zhǎng)抑制劑對(duì)某些植物的試管苗增殖有促進(jìn)作用。7.植物生長(zhǎng)物質(zhì)如何調(diào)控外植體形態(tài)發(fā)生。答：一般使用的濃度為0.1-10 mg/L。要注意種類和濃度，特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值。高，利于根的形成；適中，利于愈傷組織形成；低，利于芽的形成8.植物組織培養(yǎng)后，外植體發(fā)育成形成植株的途徑有哪些。答：(1) 外植體愈傷組織根、芽試管苗 同時(shí)長(zhǎng)芽和根 先長(zhǎng)芽，再長(zhǎng)根 先長(zhǎng)根，再長(zhǎng)芽 (2) 外植體胚狀體試管苗 (3) 外植體根、芽試管苗。9.簡(jiǎn)述熱處理結(jié)合莖尖培養(yǎng)脫病毒的原理。答：病毒和宿主對(duì)高溫的耐受性有差異，在植物受到高溫傷害前殺死病毒或使病毒活性有效鈍化。10.草莓無毒苗的繁殖程序分哪幾步。答：

12、匍匐莖尖外植體消毒莖尖剝離莖尖培養(yǎng)不定芽增殖誘導(dǎo)生根煉苗移植脫毒效果檢測(cè)脫毒苗繁殖。11.目前鑒定脫毒苗脫毒效果的方法有哪些答：1、指示植物鑒定2、血清學(xué)技術(shù)3、電鏡技術(shù)4、核酸雜交及PCR技術(shù)12.闡述試管苗煉苗、移栽、管理的一般技術(shù)過程。答：1.外植體接種，初代培養(yǎng) 2.芽體誘導(dǎo)和增殖 3.誘導(dǎo)生根成苗 4.煉苗移栽13.什么叫污染，污染的原因有哪些，簡(jiǎn)述預(yù)防污染的措施。答：（1）污染：外來物質(zhì)或能量的作用，導(dǎo)致生物體或環(huán)境產(chǎn)生不良效應(yīng)的現(xiàn)象。（2）污染原因：從病源分面主要有細(xì)菌和真菌和兩大類，一是從環(huán)境中引入，二十操作過程中帶入。 （3）預(yù)防措施：(1)減少或防止材料帶菌(2)外植體滅菌

13、要徹底 (3)玻璃器皿和金屬器皿的滅菌 (4)布質(zhì)制品的滅菌(5)無菌室的消毒(6)操作人員一定要嚴(yán)格按照無菌 操作的程序進(jìn)行接種。14.簡(jiǎn)述花粉培養(yǎng)產(chǎn)生植株的可能倍性及其原因。答：由花藥培養(yǎng)產(chǎn)生的花粉植株不僅有單倍體，還有二倍體、三倍體及非整倍體。不同倍性花粉植株的來源是：花粉細(xì)胞核內(nèi)發(fā)生有絲分裂，或畸變可產(chǎn)生二倍體、四倍體?；ǚ奂?xì)胞核分裂并出現(xiàn)核融合，可產(chǎn)生三倍體、五倍體?；ㄋ幈诨蚧ㄋ巸?nèi)部組織（濃氈層）細(xì)胞同時(shí)發(fā)育，產(chǎn)生二倍體。植物種類、接種花藥的花粉發(fā)育時(shí)期、培養(yǎng)基中生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類與濃度均可影響花粉植株的倍性。而花粉植株的發(fā)生途徑、愈傷組織繼代培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)短的影響尤為顯著。一般有花粉胚狀體

14、直接成苗或由第二代愈傷組織分化成苗，單倍體頻率高。此外，隨著愈傷組織繼代次數(shù)、繼代時(shí)間的增加，二倍體的比例也會(huì)增加。15.接種后離體培養(yǎng)物對(duì)光、溫、濕等環(huán)境條件的要求。答：(1) 光照： 愈傷組織的誘導(dǎo)不需光照或弱光， 器官分化需要光照， 一般 1216h/d， 光照度 10005000lx。 (2) 溫度：一般 25±2 (3) 濕度：培養(yǎng)室內(nèi)的濕度要求保持 7080的相對(duì)濕度。16.植物組織培養(yǎng)主要應(yīng)用于哪些方面。答：（一）脫毒及快速繁殖： 1.無病毒苗培育應(yīng)用 2.組織培養(yǎng)快速繁殖 （二）育種研究1、單倍體育種 2、胚培養(yǎng)3、單細(xì)胞培養(yǎng)突變體的選擇與應(yīng)用 4、體細(xì)胞雜交育種 5

15、、轉(zhuǎn)基因育種 （三）藥物及其它生物制劑的工業(yè)化生產(chǎn) 1、通過組織培養(yǎng)藥用植物 2、利用細(xì)胞培養(yǎng)的方法,獲得次生代謝產(chǎn)物,直接生產(chǎn)藥物。（四）建立低溫儲(chǔ)存及種質(zhì)庫，保護(hù)物種。17.無菌操作時(shí)應(yīng)注意哪些事項(xiàng)。答：(1) 在接種 4h 前用甲醛熏蒸接種室； (2) 在接種前 15-20min，打開超凈工作臺(tái)的風(fēng)機(jī)以及臺(tái)上的紫外燈； (3) 接種員先洗凈雙手，在緩沖間換好專用實(shí)驗(yàn)服，并換穿拖鞋等； (4) 上工作臺(tái)后，用酒精棉球擦拭雙手，特別是指甲處。然后 70%酒精噴霧降塵，并擦拭工作臺(tái)面； (5) 接種工具蘸 95%酒精，灼燒； (6) 接種時(shí)將試管斜著，使試管口在酒精燈火焰上轉(zhuǎn)動(dòng)，灼燒數(shù)秒鐘。接

16、完種后，將管口在火焰上再灼 燒數(shù)秒鐘。 (7) 接種時(shí)，接種員雙手不能離開工作臺(tái)，不能說話、走動(dòng)和咳嗽等； (8) 接種完畢后要清理干凈并用酒精擦工作臺(tái)。18.如何配制組織培養(yǎng)用的培養(yǎng)基。答：(1） 配制母液： 一般母液配成比所需濃度高 10-100 倍的濃縮液， 配制時(shí)可分別配成大量元素、 微量元素、 鐵鹽、有機(jī)物和激素類等。 (2) 配制方法： 將母液按順序擺放 取適量的蒸餾水入容器 按需要量依次取母液及生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì) 加入蔗糖（30g/L）溶解 定容 調(diào) PH 值 分裝培養(yǎng)瓶，并加瓊脂(6-10g/L)，封口 高壓滅菌接種19.怎樣進(jìn)行培養(yǎng)基的高壓濕熱滅菌。答：（1）首先將內(nèi)層鍋取出，再向

17、外層鍋內(nèi)加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。（2）放回內(nèi)層鍋，并裝入待滅菌物品。不要裝的太擠，三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸。（3）加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層鍋的排氣槽內(nèi)，蓋好蓋子，以防漏氣。（4）用電爐或煤氣爐加熱，并同時(shí)打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣完全排盡后，關(guān)上排氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當(dāng)鍋內(nèi)溫度升到所需溫度時(shí)，控制熱源，維持溫度至所需時(shí)間。（5）滅菌所需時(shí)間到后，切斷電源，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表的壓力降至零時(shí)，打開排氣閥，打開蓋子，取出滅菌物品。（6）將取出的滅菌培養(yǎng)基放入37溫箱培養(yǎng)24h，經(jīng)檢查若無雜菌生長(zhǎng)，即可待用。

18、20.原生質(zhì)體分離的方法。答：1）機(jī)械分離法 先將細(xì)胞放在高滲溶液中預(yù)處理，待細(xì)胞發(fā)生輕微質(zhì)壁分離、原生質(zhì)體收縮成球形，再用機(jī)械法磨碎細(xì)胞，從傷口處可以釋放出完整的原生質(zhì)體。優(yōu)點(diǎn)： 可避免酶制劑對(duì)原生質(zhì)體的破壞作用。缺點(diǎn)： 獲得完整的原生質(zhì)體的數(shù)量比較少。2）酶解分離法 利用酶的作用去除細(xì)胞壁。常用的細(xì)胞壁降解酶種類：纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶等。優(yōu)點(diǎn)： 可獲得大量的原生質(zhì)體。缺點(diǎn)： 酶制劑中含有核酸酶、蛋白酶、過氧化物酶及酚類物質(zhì)，影響原生質(zhì)體的活力。 21.原生質(zhì)體融合有哪幾種主要方法。答：鹽類融合法；高Ca2+和高PH值融合；聚乙二醇（PEG）融合法；PEG與高Ca2+和高PH值結(jié)合融

19、合法；電融合法。22.什么是基因工程?；蚬こ痰幕静襟E。答：（1）基因工程：利用人工的方法，把生物的遺傳物質(zhì)在體外進(jìn)行切割、拼接和重組，獲得重組DNA分子，然后導(dǎo)入宿主細(xì)胞或個(gè)體，使受體的遺傳特性得到修飾或改變的過程。（2）基本步驟：1.目的基因（或片段）的獲?。?.重組載體的構(gòu)建；3. 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；4. 目的基因的檢測(cè)與鑒定。23.植物轉(zhuǎn)基因常用的載體是什么，有哪些主要結(jié)構(gòu)元件。答：克隆載體、表達(dá)載體、測(cè)序載體、質(zhì)粒載體、噬菌體載體、人工染色體載體 1）具有復(fù)制起點(diǎn)2）有若干個(gè)限制酶識(shí)別位點(diǎn)3）具備合適的篩選標(biāo)記4）具備合適的拷貝數(shù)目5）分子量相對(duì)較小6）在細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定性高7）易

20、分離純化作為克隆載體：（1）較高的拷貝數(shù)；（2）具有復(fù)制起點(diǎn)；（3）具有若干限制酶識(shí)別位點(diǎn)；（4）帶有選擇標(biāo)記；（5）較小的相對(duì)分子質(zhì)量。作為表達(dá)載體的條件：（目的基因能在宿主細(xì)胞表達(dá)）(1) 自主復(fù)制；(2) 克隆位點(diǎn)和篩選標(biāo)記；(3) 可受誘導(dǎo)調(diào)控的啟動(dòng)子；(4) 具有終止子；(5) 具有翻譯起始信號(hào)。24.外源基因?qū)胫参锸荏w的方法有哪些。答：（1）生物介導(dǎo)，如農(nóng)桿菌等介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移；（2）物理方法：基因槍法、電擊法、顯微注射法；（3）化學(xué)方法：PEG誘導(dǎo)法、脂質(zhì)體導(dǎo)入法。25.什么是分子標(biāo)記。試列舉幾種常用標(biāo)記的名稱。答：分子標(biāo)記：也稱DNA分子標(biāo)記。本質(zhì)上是指能反映生物個(gè)體或種群間基

21、因組中某種差異特征的DNA片段，是 DNA 水平上遺傳多態(tài)性的直接反映。以生物體核酸多態(tài)性為基礎(chǔ)的遺傳標(biāo)記。如，nDNA、cpDNA、mtDNA標(biāo)記。RFLP、RAPD、 AFLP、 ISSR、 SSR、SRAP、STS、SNP。26.RAPD、RFLP、SSR、ISSR、AFLP、SNP等標(biāo)記的中文名稱及其原理。答：1.RAPD隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（random amplification polymorphism DNA）原理：運(yùn)用 PCR 技術(shù)，以10 nt左右的隨機(jī)寡核苷酸單一引物，擴(kuò)增模板 DNA中引物反向結(jié)合位點(diǎn)之間適宜大小的片段，電泳分離，檢測(cè) DNA 序列多態(tài)性。 2.RFLP

22、 限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（restriction fragment length polymorphism）原理：用限制性內(nèi)切酶消化后的不同個(gè)體的基因組DNA中，含有與探針序列同源的酶切片段在數(shù)量、大小(長(zhǎng)度)上的差異。這種差異，是由于堿基替換、插入、缺失或重復(fù)造成某種限制酶酶切位點(diǎn)的增加或喪失以及酶切位點(diǎn)間DNA片段變化所引起。 3.SSR簡(jiǎn)單重復(fù)序列（simple sequence repeats）原理：SSR的兩翼，多是相對(duì)保守的單拷貝序列。利用SSR兩翼序列設(shè)計(jì)一對(duì)特異引物，然后PCR擴(kuò)增單個(gè)SSR位點(diǎn)，進(jìn)行 SSLP (簡(jiǎn)單序列長(zhǎng)度多態(tài)性) 分析。SSR的多態(tài)性，主要因?yàn)榇?lián)重復(fù)的次數(shù)

23、是高度可變的。 4.ISSR簡(jiǎn)單序列重復(fù)間區(qū)（inter- simple sequence repeats）原理利用真核生物基因組廣泛存在的簡(jiǎn)單重復(fù)序列（SSR）來設(shè)計(jì)單一通用 PCR引物，擴(kuò)增位于反向排列的SSR之間的不太大的單拷貝序列，通過電泳檢測(cè)出DNA的多態(tài)性。 5.AFLP擴(kuò)增片斷長(zhǎng)度多態(tài)性 （amplified fragment length polymerphism）原理AFLP標(biāo)記，是基于PCR技術(shù)，選擇性擴(kuò)增基因組DNA的限制性酶切片段，以擴(kuò)增條帶數(shù)量及大小反映基因組DNA的多態(tài)性。 6.SNP單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism）原理

24、主要是指在基因組水平上由單個(gè)核苷酸的變異（轉(zhuǎn)換、顛換）所引起的等位基因序列多態(tài)性。這種差異的發(fā)現(xiàn)，建立在基因組大量測(cè)序或基因芯片基礎(chǔ)之上。屬于第三代分子標(biāo)記技術(shù)。3 填空題二、填空 1物理滅菌包括: 高溫高壓滅菌 ; 干熱滅菌 ; 射線照射滅菌 和 過濾滅菌 。2任意寫出三種常用的培養(yǎng)基： MS, B5, KM8P, N6等 3胚培養(yǎng)的重要用途是克服 種間雜交的不親和性 ,獲得種間或?qū)匍g雜種。4外植體脫分化形成愈傷組織一般經(jīng)歷3個(gè)時(shí)期，分別是： 啟動(dòng)期 ；分裂期 和 形成期 。5胚狀體具有兩個(gè)特點(diǎn)： 二極性 和 與母體植物或外植體的維管束系統(tǒng)無直接連系 。6逆境處理對(duì)某些植物的小孢子胚胎發(fā)生具

25、有誘導(dǎo)作用,任意寫出4種常用的逆境處理方式: 饑餓處理，高溫處理，低溫處理，射線，秋水仙素，重金屬脅迫等 7分離原生質(zhì)體時(shí)果膠酶的作用是 降解胞間聯(lián)絲 。8最常用的誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方式是 PEG 和 電誘導(dǎo) 融合法。9目前聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)常用到的DNA聚合酶是 Taq 酶 。10利用分子標(biāo)記輔助選擇的重要條件是目標(biāo)基因與分子標(biāo)記存在 緊密連鎖（或共分離） 關(guān)系。11種植轉(zhuǎn)基因作物面積最大的4個(gè)國(guó)家分別是 美國(guó) ； 阿根廷 ； 加拿大 和 中國(guó) 。13培養(yǎng)基的成分可以分為三大類，分別是： 無機(jī)營(yíng)養(yǎng)物 ； 有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物 和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì) 。4培養(yǎng)條件下花粉的分裂增殖方式有4種類型，分別是： 營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞發(fā)

26、育途徑 ；生殖細(xì)胞發(fā)育途徑 ； 營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞與生殖細(xì)胞并進(jìn)途徑 和 花粉均等分裂途徑 。15分離原生質(zhì)體時(shí)纖維素酶的作用是 降解細(xì)胞壁的纖維素 。16幼胚培養(yǎng)可以挽救種間雜種胚,但當(dāng)胚體很小時(shí),往往采用 胚珠 培養(yǎng)獲得雜種胚。17常用的原生質(zhì)體培養(yǎng)方法有： 液體淺層培養(yǎng)法 ； 固體平板培養(yǎng)法 和 液固雙層培養(yǎng)法 。18Ti質(zhì)粒的T-DNA致瘤基因主要包括兩類基因，分別是 細(xì)胞分裂素合成 和 生長(zhǎng)素合成 基因。19目前種植面積最大的4種轉(zhuǎn)基因作物是 大豆 ； 棉花 ； 油菜 和 玉米 。20在遺傳轉(zhuǎn)化中，目前廣泛使用的選擇標(biāo)記是 NPTII 基因。21聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）一般分變性、 復(fù)性 和 延伸 。22隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性（RAP