動(dòng)物解剖生理實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

1、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)一、顯微鏡的使用、組織切片的顯微觀察實(shí)驗(yàn)二、犬骨骼的觀察、骨骼辨認(rèn)測(cè)試實(shí)驗(yàn)三、血液的凝固實(shí)驗(yàn)四、紅細(xì)胞的脆性試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)五、蛙心活動(dòng)觀察實(shí)驗(yàn)六、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)七、反射弧分析及脊髓反射活動(dòng)觀察實(shí)驗(yàn)八、胃腸運(yùn)動(dòng)觀察和小腸吸收觀察實(shí)驗(yàn)一 顯微鏡的構(gòu)造、使用和保養(yǎng)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私怙@微鏡的基本構(gòu)造，掌握顯微鏡的使用方法和保養(yǎng)方法。材料設(shè)備顯微鏡、組織切片、擦鏡紙等。方法步驟（一）機(jī)械部分1、鏡筒2、物鏡轉(zhuǎn)換器圖 L 1A Olyupus 顯鍛鋌（0IIS 型）鏡石標(biāo)本夾 粗調(diào)節(jié)螺旌 細(xì)調(diào)節(jié)螺旋光源反光勧圖4 M光學(xué)駅微鍛的崗適3、鏡臂4、調(diào)焦器5、載物臺(tái)6、鏡柱7、鏡座（二）光學(xué)系統(tǒng)部分光鏡的光學(xué)系

2、統(tǒng)主要包括物鏡、目鏡和照明裝置（反光鏡、聚光器和光圈等）O1、 目鏡：常見(jiàn)的有5X、10 X和15X（X表示放大倍數(shù)）的目鏡，可根據(jù) 不同的需要選擇使用，最常使用的是10X目鏡。2、 物鏡：常用物鏡的放大倍數(shù)有 10X、40X和100X等幾種。一般將 8X 或10X的物鏡稱(chēng)為 低倍鏡（而將5X以下的叫做放大鏡）；將40X或45X的稱(chēng)為高倍鏡；將90 x或100 x的稱(chēng)為油鏡（這種鏡頭在使用時(shí)需浸在鏡油中）圖1-3物鏡的性能參數(shù)及工作距離C線(xiàn)為蓋玻片的的上表面，10物鏡的工作距離為 7.63mm； 40 物鏡的工作距離為 0.198mm； 10/0.25、40/0.65、100/1.25 表 示

3、鏡頭的放大倍數(shù)和數(shù)字孔徑。 160/0.17表示鏡筒長(zhǎng)度為160mm蓋玻片厚度為 0.17mnr。3、聚光器：調(diào)節(jié)光線(xiàn)的強(qiáng)弱，升高聚光器可使光線(xiàn)增強(qiáng)，反之則光線(xiàn)變?nèi)酢９馊δ芸刂七M(jìn)入聚光器的光束大小的可變光闌。以調(diào)節(jié)光線(xiàn)的強(qiáng)弱。 在光圈的下方常裝有濾光片框，可放置不同顏色的濾光片。4、反光鏡：反光鏡有兩個(gè)面，一面為平面鏡，另一面為凹面鏡，凹面鏡有聚光作用，適于較弱光和散射光下使用，光線(xiàn)較強(qiáng)時(shí)則選用平面鏡。二、光學(xué)顯微鏡的使用方法（-）準(zhǔn)備將顯微鏡平穩(wěn)地放在身前的實(shí)驗(yàn)桌上，略偏左，使鏡臂對(duì)著身體，鏡筒向前。（二）對(duì)光 轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使低倍鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔，轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使低倍鏡前端距載物臺(tái)約1-2厘米的

4、距離。 將光圈放大；讓左眼朝目鏡里注視，同時(shí)用手將反光鏡轉(zhuǎn)向光源；調(diào)節(jié)反光鏡，直至從目鏡里看到一個(gè)白色明亮的圓形視野。（三）低倍鏡觀察 將玻片標(biāo)本放在載物臺(tái)上，使待檢查部分位于通光孔中心，用彈簧夾片壓住載玻片兩端。 兩眼從側(cè)面注視，將物鏡降至距標(biāo)本約0.5厘米時(shí)停止。 用左眼朝目鏡里觀察， 同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，緩慢上升鏡筒，直到視野中出現(xiàn)物 象，再用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)。（四）高倍鏡觀察 先將低倍鏡下找到所需觀察的物象，把要進(jìn)一步放大的部位移到視野正中央。 轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使高倍鏡到位。調(diào)節(jié)反光鏡和光圈，使光照明亮，再微微調(diào)節(jié)細(xì) 調(diào)節(jié)器，直到物象清晰。（五）顯微鏡復(fù)原用擦鏡紙揩凈目鏡和物鏡， 用清潔紗布揩凈

5、鏡體。 再轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，把兩個(gè)物鏡偏 到兩旁，并將鏡筒下降，然后將顯微鏡平穩(wěn)地放入鏡箱內(nèi)保存。實(shí)驗(yàn)二動(dòng)物主要組織的顯微鏡識(shí)別實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆諉螌颖馄缴掀?、單層柱狀上皮、單層立方上皮、疏松結(jié)締組織、骨骼肌、 平滑肌、神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。材料設(shè)備顯微鏡、單層扁平上皮、單層柱狀上皮、單層立方上皮、疏松結(jié)締組織、骨 骼肌、平滑肌、神經(jīng)組織切片及相關(guān)的圖。方法步驟1、取鏡與放置移動(dòng)顯微鏡時(shí)，要一手拿鏡臂，一手托鏡座，將顯微鏡放置在前方桌面上。2、打開(kāi)光源，上升聚光鏡，開(kāi)大孔徑光闌。3、觀察將被檢標(biāo)本置于載物臺(tái)上，用壓片夾夾住，旋轉(zhuǎn)最低倍數(shù)物鏡觀察。調(diào)節(jié)粗調(diào)焦螺旋，使載物臺(tái)緩緩上升，直至物鏡鏡頭接近標(biāo)本。這時(shí)，一

6、邊 使用目鏡觀察，一邊調(diào)節(jié)粗調(diào)焦螺旋使載物臺(tái)下降，直至視野中看到物像為止。移動(dòng)載片位置，使物象處于視野的中心， 此時(shí)再調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)焦螺旋以增加物象 的清晰度，可以調(diào)節(jié)聚光鏡和孔徑光闌，使光線(xiàn)強(qiáng)弱適中，以便于觀察。轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器，換用高倍鏡頭。用細(xì)調(diào)焦螺旋調(diào)節(jié)，換用高倍鏡后，可調(diào) 節(jié)聚光鏡和孔徑光闌以增加亮度。觀察更細(xì)微結(jié)構(gòu)必需使用油鏡時(shí)，則在制片上滴一滴香柏油。 油鏡使用完后，要及時(shí)地用蘸有乙醚的擦鏡紙把油鏡鏡頭擦拭干凈。4. 收顯微鏡關(guān)閉光源；下降聚光鏡；關(guān)閉孔徑光闌；轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器，使之處于最低倍 數(shù)物鏡下。顯微鏡保持清潔。顯微鏡的光學(xué)部分只能用專(zhuān)門(mén)的擦鏡紙擦拭。按實(shí)驗(yàn)室的要求，做好顯微鏡的使

7、用記錄等。實(shí)驗(yàn)結(jié)果1 復(fù)層上皮組織2 平滑肌3.神經(jīng)組織4心肌切片5. 硬骨組織6. 軟骨組織實(shí)驗(yàn)三 犬全身主要骨、關(guān)節(jié)、骨性標(biāo)志的識(shí)別實(shí)驗(yàn)?zāi)康?在犬骨骼標(biāo)本上識(shí)別各部位骨骼及骨性標(biāo)志。材料設(shè)備 犬骨骼標(biāo)本。方法步驟1. 脊柱骨的組成：頸椎、胸椎、腰椎、薦椎、尾椎的形態(tài)與連結(jié)。2. 胸廓的組成：胸椎、肋骨和胸骨。3. 骨盆腔構(gòu)造：背側(cè)薦骨、側(cè)面髖骨、后側(cè)坐骨、腹側(cè)恥骨組成。4. 四肢骨組成及分布：骨骼名稱(chēng)、形態(tài)、關(guān)節(jié)名稱(chēng)、關(guān)節(jié)角度。5. 骨性標(biāo)志：肩胛岡、大結(jié)節(jié)、髖結(jié)節(jié)、大轉(zhuǎn)子、坐骨結(jié)節(jié)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果 繪制犬全身主要骨、關(guān)節(jié)和骨性標(biāo)志的圖示。技能考核 在標(biāo)本和活體上識(shí)別主要骨、關(guān)節(jié)及骨性標(biāo)志。*骨

8、骼辨認(rèn)測(cè)試實(shí)驗(yàn)三血液凝固實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊匝耗虝r(shí)間作為指標(biāo)，了解對(duì)血液凝固影響的因素，加深對(duì)生理止血過(guò)程的理解。實(shí)驗(yàn)原理血液凝固是一個(gè)酶的有限水解激活過(guò)程，可分為三個(gè)環(huán)節(jié)：（1）凝血酶原激活物的形成；（2）凝血酶原激活為凝血酶；（3）纖維蛋白的形成。在此過(guò)程中有 多種凝血因子和 Ca離子的參與。根據(jù)凝血過(guò)程起動(dòng)時(shí)激活因子來(lái)源不同，可將 血液凝固分為內(nèi)源性激活途徑和外源性激活途徑。內(nèi)源性激活途徑是指參與血液凝固的所有凝血因子在血漿中，外源性激活途徑是指受損的組織中的組織因子進(jìn)入血管后，與血管內(nèi)的凝血因子共同作用而啟動(dòng)的激活過(guò)程。實(shí)驗(yàn)藥品和器材生理鹽水，液狀石蠟、草酸鹽、檸檬酸鹽、肝素（8 U/ml

9、）。注射器，試管6支，小燒杯2個(gè)，試管架，竹簽1束（或細(xì)試管刷），秒表。實(shí)驗(yàn)方法與步驟1. 米血（動(dòng)物不限）。2. 準(zhǔn)備試管。試管1 不加任何處理（對(duì)照管）試管2 用液狀石蠟潤(rùn)滑整個(gè)試管內(nèi)表面試管3 放少許脫脂棉試管4 加草酸鉀12 ml試管5 加檸檬酸鹽12 ml3. 每管加入血液1-2 ml。將多余的血盛于小燒杯中，并不斷用竹簽攪動(dòng)直 至纖維蛋白形成。4記錄凝血時(shí)間每個(gè)試管加血1-2 ml后，即刻開(kāi)始計(jì)時(shí)，每隔壁 15 s傾斜一次，觀察血液是否凝固， 至血液成為凝膠狀不再流動(dòng)為止，記錄所經(jīng)歷的時(shí)間。4、5號(hào)試管加入血液后，用拇指蓋住試管口將試管顛倒兩次，使血液與藥 物混合。5.如果加草酸鉀

10、和檸檬酸鹽的試管不出現(xiàn)血凝，可再向兩管內(nèi)分別加入0.025 mol?L-1的CaCb溶液23滴，觀察血液是否發(fā)生凝固注意事項(xiàng)1. 采血的過(guò)程盡量要快，以減少計(jì)時(shí)的誤差。對(duì)比實(shí)驗(yàn)的采血時(shí)間要緊接 著進(jìn)行。2. 判斷凝血的標(biāo)準(zhǔn)要力求一致。一般以?xún)A斜試管達(dá)45度時(shí)，試管內(nèi)血液不見(jiàn)流動(dòng)為準(zhǔn)。3. 每支試管口徑大小及采血量要相對(duì)一致，不可相差太大。實(shí)驗(yàn)結(jié)果將實(shí)驗(yàn)結(jié)果及各種條件下的凝血時(shí)間，并進(jìn)行比較、分析解釋產(chǎn)生差異的原因。思考題1. 血液凝固的機(jī)制及影響血凝的外界因素？2. 為什么有幾管不凝？為什么有幾管比對(duì)照組管凝血時(shí)間長(zhǎng)？為什么有幾 管比對(duì)照管凝血時(shí)間短？實(shí)驗(yàn)四紅細(xì)胞脆性的測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)測(cè)定紅細(xì)

11、胞滲透脆性的方法，理解細(xì)胞外液滲透張力對(duì)維持細(xì)胞正常形 態(tài)與功能的重要性。實(shí)驗(yàn)原理正常紅細(xì)懸浮于等滲的血漿中，若置于高滲溶液內(nèi)， 則紅細(xì)胞會(huì)因失水而皺縮；反之，置于低滲溶液內(nèi)，則水進(jìn)入紅細(xì)胞，使紅細(xì)胞膨脹。如環(huán)境滲透壓繼 續(xù)下降，紅細(xì)胞會(huì)因繼續(xù)膨脹而破裂，釋放血紅蛋白，稱(chēng)之為溶血。紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液具有一定的抵抗力，這一特征稱(chēng)為紅細(xì)胞的滲透脆性。紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液的抵抗力越大，紅細(xì)胞在低滲溶液中越不容易發(fā)生溶血，即紅細(xì)胞 滲透脆性越小。將血液滴入不同的低滲溶液中，可檢查紅細(xì)胞膜對(duì)于低滲溶液抵抗力的大小。開(kāi)始出現(xiàn)溶血現(xiàn)象的低滲溶液濃度，為該血液紅細(xì)胞的 最小抵抗力；出現(xiàn)完全溶血時(shí)的低滲溶液濃度，

12、則為該血液紅細(xì)胞的最大抵抗力。生理學(xué)上將與血漿滲透壓相等的溶液稱(chēng)為等滲溶液；而將能維持紅細(xì)胞正常形態(tài)、大小和懸浮于其中的溶液稱(chēng)為等張溶液。等滲溶液不一定是等張溶液（如1.99%的尿素溶液），但等張溶液一定是等滲溶液。實(shí)驗(yàn)藥品1%肝素，1%氯化鈉溶液，2%氯化鈉溶液，蒸餾水。儀器與器材10 ml小試管，試管架，滴管，1 ml移液管，2 ml移液管。實(shí)驗(yàn)方法與步驟1溶液配制：取11個(gè)小試管，配制出11種不同濃度的氯化鈉低滲溶液。不同濃度的NaCL溶液配制試呂號(hào)試液12345678910111%NaCI/ml1.41.31.21.11.00.90.80.70.60.52%NaCl 2蒸餾水/ml0.

13、60.70.80.91.01.11.21.31.41.50NaCl濃度/%0.70.650.60.550.50.450.40.350.30.2522制備抗凝血：不同動(dòng)物采血方法各有所異，但多采用末梢血，將血滴在有 1%肝素（或檸檬酸鹽）的表面皿上，混勻（1%肝素0.1 ml可抗10 ml血）。3加抗凝血：用滴管吸取抗凝血，在各試管中各加一滴，輕輕搖勻，靜置0.51 ho4觀察結(jié)果：根據(jù)各管中液體顏色和渾濁度的不同，判斷紅細(xì)胞脆性。未發(fā)生溶血的試管： 液體下層為大量紅細(xì)胞沉淀,上層為無(wú)色透明，表明無(wú)紅細(xì)胞破裂。部分紅細(xì)胞溶血的試管:液體下層為紅細(xì)胞沉淀,上層出現(xiàn)透明淡紅（淡紅棕）色，表明部分紅細(xì)

14、胞已經(jīng)破裂，稱(chēng)為不完全溶血。紅細(xì)胞全部溶血的試管:液體完全變成透明紅色,管底無(wú)紅細(xì)胞沉淀，表明紅細(xì)胞完全破裂，稱(chēng)為完全溶血。實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告該實(shí)驗(yàn)動(dòng)物紅細(xì)胞的最小滲透抵抗力和最大滲透抵抗力。將全班的結(jié)果加以統(tǒng)計(jì)，并用平均值土標(biāo)準(zhǔn)差表示。 討論如何通過(guò)滲透脆性特征判斷機(jī)體的健 康狀況。注意事項(xiàng)小試管要干燥，加抗凝血的量要一致，只加一滴。混勻時(shí)，輕輕傾倒12次，減少機(jī)械震動(dòng)，避免人為溶血?？鼓齽┳詈脼楦嗡?，其他抗凝劑可改變?nèi)芤旱臐B透性。配制不同濃度的 NaCI溶液時(shí)應(yīng)力求準(zhǔn)確、 無(wú)誤。NaCI溶液的濃度梯度可根 據(jù)動(dòng)物的實(shí)際情況適當(dāng)進(jìn)行調(diào)整。思考題1紅細(xì)胞的形態(tài)與生理特征有何關(guān)系？2根據(jù)結(jié)果分析血漿晶

15、體滲透壓保持相對(duì)穩(wěn)定的生理學(xué)意義。3輸液時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng)。實(shí)驗(yàn)五蛙心活動(dòng)觀察實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察滴加乙酰膽堿、腎上腺素對(duì)心臟運(yùn)動(dòng)的影響。實(shí)驗(yàn)原理心臟的特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)具有自動(dòng)節(jié)律性，但各部分的自動(dòng)節(jié)律性高低不同。兩棲類(lèi)動(dòng)物的心臟起搏點(diǎn)是靜脈竇（哺乳動(dòng)物的是竇房結(jié)）。正常情況下，靜脈竇（竇 房結(jié)）的自律性最高，能自動(dòng)產(chǎn)生節(jié)律性興奮，并依次傳到心房、房室交界區(qū)、 心室，引起整個(gè)心臟興奮和收縮，因此靜脈竇（竇房結(jié)）是主導(dǎo)整個(gè)心臟興奮和搏動(dòng)的正常部位，被稱(chēng)為正常起搏點(diǎn)；其他部位的自律組織僅起著興奮傳導(dǎo)作用， 故稱(chēng)之為潛在起搏點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)材料蛙或蟾蜍。任氏液、1:10000腎上腺素、1： 10000乙酰膽堿。儀器與器械蛙

16、板，蛙類(lèi)常用手術(shù)器械一套，蛙釘，玻璃分針，秒表，滴管。實(shí)驗(yàn)方法與步驟1. 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備（1）在體蛙心的制備取蛙一只，破壞腦、脊髓后背位固定于蛙板上，左手持鑷子提起胸骨后端的皮膚剪一小口，然后向左、右兩側(cè)鎖骨外側(cè)剪開(kāi)皮膚。把游離的皮膚掀向頭端。 再用鑷子，提起胸骨后方的腹肌，剪開(kāi)一小口后，剪刀伸入胸腔（勿傷及心臟和血管），沿皮膚切口剪開(kāi)胸壁，剪斷左右烏喙骨和鎖骨，使創(chuàng)口呈一倒三角形，充 分暴露心臟部位。持眼科鑷提起心包膜并用眼科剪剪開(kāi)心包膜，暴露心臟（圖5.4-1 ）。W5.1 L槪愴心粧怡皿護(hù)虐附2. 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(1)觀察心臟的結(jié)構(gòu)參照?qǐng)D5.4-1識(shí)別蛙類(lèi)心臟。自心臟腹面可觀察到心室、心房，動(dòng)脈球

17、和主動(dòng)脈。用玻璃分針向前翻轉(zhuǎn)蛙心，暴露心臟背面可觀察 到靜脈竇和心房。記錄每分鐘的收縮次數(shù) (次min-1)，注意它們的跳動(dòng)次序(2) 在靜脈竇上分別滴加 1:10000腎上腺素2滴，記錄每分鐘心臟收縮次數(shù)， 滴加數(shù)滴任氏液，用吸水紙吸干。(3) 再在靜脈竇上滴加1： 10000乙酰膽堿2滴，記錄每分鐘心臟收縮次數(shù), 滴加數(shù)滴任氏液，用吸水紙吸干。實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄并分析各項(xiàng)結(jié)果。思考題1. 正常情況下，兩棲類(lèi)動(dòng)物(或哺乳類(lèi)動(dòng)物)的心臟起搏點(diǎn)是心臟的哪一部 分？它為什么能控制潛在起搏點(diǎn)的活動(dòng)？2. 如何證明兩棲類(lèi)心臟的起搏點(diǎn)是靜脈竇？憎6,呂I it It ft的Elk現(xiàn)科制觀實(shí)驗(yàn)六紅細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)?zāi)?/p>

18、的學(xué)習(xí)、掌握應(yīng)用稀釋法計(jì)數(shù)紅細(xì)胞和白細(xì)胞 的方法。實(shí)驗(yàn)原理血液中血細(xì)胞數(shù)很多，無(wú)法直接計(jì)數(shù)，需要將 血液稀釋到一定倍數(shù)，然后再用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在 顯微鏡下計(jì)數(shù)一定容積的稀釋血液中的紅、白細(xì)胞 數(shù)量，最后將之換算成每升血液中所含的紅、白細(xì) 胞數(shù)。常用的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板是改良式牛鮑爾計(jì)數(shù)板（Neubauer），為優(yōu)質(zhì)厚玻璃制成。每塊計(jì)數(shù)板由H'型凹槽分為兩個(gè)同樣的計(jì)數(shù)池（圖6.5-1）。計(jì)數(shù)池的兩側(cè)各有一個(gè)支持堤,比計(jì)數(shù)池高出0.1 mm計(jì)數(shù)池的長(zhǎng)、寬各3.00 mm平均分成邊長(zhǎng)為1 mm的9個(gè)大格。每個(gè)大格容積為 0.1mm3。在9個(gè)大格中，位于四角的四個(gè)大方格是計(jì)數(shù)白細(xì)胞的區(qū)域，每個(gè)大方格

19、又用單線(xiàn)分為16個(gè)中方格；位于中央的大方格用雙線(xiàn)分成25個(gè)中方格，其中位于正中及四角的5個(gè)中方格是計(jì)數(shù)紅細(xì)胞和血小板的區(qū)域，每個(gè)中方格又用單線(xiàn)分為16個(gè)小方格（圖6.5-2）。實(shí)驗(yàn)對(duì)象動(dòng)物種類(lèi)不限。實(shí)驗(yàn)藥品蒸餾水，75%酒精，95%酉精，乙醚，血細(xì)胞稀釋液。儀器器材顯微鏡，血細(xì)胞記數(shù)板（改良Neubauer），小試管，微量（血紅蛋白）采血管，1 ml、5 ml移液管，玻璃棒，刺血針，干棉球。實(shí)驗(yàn)方法和步驟1. 采血與血液的稀釋?zhuān)河梦⒘浚ㄑt蛋白）采血管吸 20卩I血液，加至有紅細(xì)胞稀釋液（4 ml） 的試管中，吹打幾次，使稀釋液與血液混勻。 這樣使紅細(xì)胞稀釋了 200倍（白細(xì) 胞稀釋20倍）。

20、充池（布血）將蓋玻片的一邊與計(jì)數(shù)池的縱線(xiàn)末端接觸，然后緩慢放下，使蓋玻片平放在計(jì)數(shù)室兩側(cè)的隆起上（這樣可趕走蓋玻片下的空氣），用微量采血管或蘸有紅細(xì)胞懸浮液的玻璃棒靠近蓋玻片的前方邊緣，靠毛細(xì)管作用將紅細(xì)胞懸浮液充入計(jì)數(shù)池。室溫中平放 35分鐘，待細(xì)胞下沉后顯微鏡下計(jì)數(shù)。若計(jì)數(shù)池未被布滿(mǎn) 或過(guò)多以致使蓋玻片浮動(dòng)，或弄到蓋玻片外面都需重新充池（布血）。2. 計(jì)數(shù)：于高倍鏡下計(jì)數(shù)中間大方格內(nèi)四角及中央的5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞總數(shù)。 或四周四個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。 計(jì)數(shù)視野的移動(dòng)路線(xiàn)如圖 6.5-3所示。如果細(xì)胞壓 邊線(xiàn)，則按數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右原則進(jìn)行。 如果各中方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)相差20個(gè)以上（魚(yú)類(lèi)

21、紅細(xì)胞相對(duì)較少不應(yīng)多于 10個(gè)），四周各大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)相 差8個(gè)以上，則說(shuō)明血細(xì)胞分布不均勻，需振蕩稀釋液，重新充池（布血）。3. 計(jì)算：紅細(xì)胞數(shù)L -仁N200 - 10 255 -1= N- 10000N:表示5個(gè)中方格內(nèi)數(shù)得的紅細(xì)胞數(shù)；255 -1 :將五個(gè)中方格紅細(xì)胞數(shù)換算為一個(gè)大方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)；10 :將一個(gè)大方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)換算為1卩I血液內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)。200 :為血液稀釋倍數(shù)。注意事項(xiàng)1、取血操作應(yīng)迅速，以免凝血。2、吸取血液時(shí)，采血管中不得有氣泡，吸血和稀釋液的體積一定要準(zhǔn)確。3、計(jì)數(shù)時(shí)，顯微鏡要放穩(wěn)，載物臺(tái)應(yīng)置水平位，不得傾斜。一般在暗光下計(jì) 數(shù)的效果較好。4、 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板

22、洗滌血細(xì)胞計(jì)數(shù)板只能用清水浸泡、漂洗和蒸餾水漂洗，然后以濾紙吸干。實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告該實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的紅細(xì)胞數(shù)和白細(xì)胞數(shù)。并對(duì)全班的結(jié)果加以統(tǒng)計(jì)， 用平均值土標(biāo)準(zhǔn)差表示。思考題1. 稀釋液裝入計(jì)數(shù)板后，為什么要靜止一段時(shí)間才開(kāi)始計(jì)數(shù)？2. 顯微鏡載物臺(tái)為什么應(yīng)置于水平位，而不能傾斜？3. 分析影響計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性的可能因素。實(shí)驗(yàn)七反射弧分析及脊髓反射活動(dòng)觀察實(shí)驗(yàn)?zāi)康?通過(guò)對(duì)脊蛙的屈肌反射的分析，探討反射弧的完整性與反射活動(dòng)的關(guān)系；2以蛙的屈肌反射為指標(biāo)，觀察脊髓反射中樞活動(dòng)的某些基本特征，并分析 它們產(chǎn)生可能的神經(jīng)機(jī)制。實(shí)驗(yàn)原理在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的參與下，機(jī)體對(duì)刺激所產(chǎn)生的適應(yīng)反應(yīng)過(guò)程稱(chēng)為反射。較復(fù)雜的反射需要由中

23、樞神經(jīng)系統(tǒng)較高級(jí)的部位整合才能完成，較簡(jiǎn)單的反射只需通過(guò)中樞神經(jīng)系統(tǒng)較低級(jí)的部位就能完成。將動(dòng)物的高位中樞切除，僅保留脊髓的動(dòng)物稱(chēng)為脊動(dòng)物。此時(shí)動(dòng)物產(chǎn)生的各種反射活動(dòng)為單純的脊髓反射。由于脊髓已失去了高級(jí)中樞的正常調(diào)控，所以反射活動(dòng)比較簡(jiǎn)單， 便于觀察和分析反射過(guò)程的某些特征。反射活動(dòng)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是反射弧。典型的反射弧由感受器、傳入神經(jīng)、神經(jīng)中樞、傳出神經(jīng)和效應(yīng)器五個(gè)部分組成。引起反射的首要條件是反射弧必須保持完整性。反射弧任何一個(gè)環(huán)節(jié)的解剖結(jié)構(gòu)或生理完整性一旦受到破壞，反射活動(dòng)就無(wú)法實(shí)現(xiàn)。完成一個(gè)反射所需要的時(shí)間稱(chēng)為反射時(shí)。反射時(shí)除與刺激強(qiáng)度有關(guān)外，反射時(shí)的長(zhǎng)短與反射弧在中樞交換神經(jīng)元的多少及

24、有無(wú)中樞抑制存在有關(guān)。由于中間神經(jīng)元連結(jié)的方式不同， 反射活動(dòng)的范圍和持續(xù)時(shí)間，反射形成難易程度都不一樣。實(shí)驗(yàn)藥品與器材硫酸溶液（0.1%、0.3%、0.5%、1%）、1%可卡因或普魯卡因。蛙類(lèi)手術(shù)器 械、鐵支柱、玻璃平皿、燒杯（500 ml或搪瓷杯）、小濾紙（約1 cm x 1 cm）、紗布、秒表。實(shí)驗(yàn)方法與步騾1標(biāo)本制備取一只蟾蜍，用粗剪刀由兩側(cè)口裂剪去上方頭顱， 或用探針沿枕骨大孔刺入 腦腔，破壞腦髓，制成脊蟾蜍。將動(dòng)物俯臥位固定在蛙板上， 于右側(cè)大腿背部縱 行剪開(kāi)皮膚，在股二頭肌和半膜肌之間的溝內(nèi)找到坐骨神經(jīng)干，在神經(jīng)干下穿一條細(xì)線(xiàn)備用。將脊蟾蜍懸掛在鐵支柱上。2實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目（1、脊髓反射

25、的基本特征： 騷扒反射 將浸有1%硫酸溶液的小濾紙片貼在蟾蜍的下腹部，可見(jiàn)四肢 向此處騷扒。之后將蟾蜍浸入盛有清水的大燒杯中，洗掉硫酸濾紙片。 屈肌反射和反射時(shí)的測(cè)定：在平皿內(nèi)盛適量的0.1%硫酸溶液，將蟾蜍一側(cè)后肢的一個(gè)腳趾， 浸入硫酸溶液中，同時(shí)按動(dòng)秒表開(kāi)始記錄時(shí)間，當(dāng)屈肌反射一出現(xiàn)立刻停止記時(shí)， 并立即將該足趾浸入大燒杯水中浸洗數(shù)次，然后用紗布擦干。此時(shí)秒表所示時(shí)間為從刺激開(kāi)始到反射出現(xiàn)所經(jīng)歷的時(shí)間，稱(chēng)為反射時(shí)。用上述方法重復(fù)三次，注意每次浸入趾尖的深度要一致，相鄰兩次實(shí)驗(yàn)間隔至少要23 s。三次所測(cè)時(shí)間的平均值即為此反射的反射時(shí)。再用不同的硫酸濃度測(cè)定 反射的反射時(shí)。（2、反射弧的分析

26、分別將左右后肢趾尖浸入盛有1%硫酸的平皿內(nèi)（深入的范圍一致），雙后 肢是否都有反應(yīng)？實(shí)驗(yàn)完后，將動(dòng)物浸于盛有清水的燒杯內(nèi)洗掉濾紙片和硫酸， 用紗布擦干皮膚。 在左后肢趾關(guān)節(jié)上作一個(gè)環(huán)形皮膚切口，將切口以下的皮膚全部剝除（趾尖皮膚一定要?jiǎng)兂蓛簦?，再?%硫酸溶液浸泡該趾尖，觀察該側(cè)后肢的反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)完后，將動(dòng)物浸于盛有清水的燒杯內(nèi)洗掉濾紙片和硫酸，用紗布擦干皮膚。 將浸有1%硫酸溶液的小濾紙片貼在蛙的左后肢的皮膚上。觀察后肢有何 反應(yīng)?待出現(xiàn)反應(yīng)后，將動(dòng)物浸于盛有清水的燒杯內(nèi)洗掉濾紙片和硫酸，用紗布 擦干皮膚。 提起穿在右側(cè)坐骨神經(jīng)下的細(xì)線(xiàn)，剪斷坐骨神經(jīng)，刺激右后肢趾，觀察有無(wú)反應(yīng)？ 以探針搗毀

27、蟾蜍的脊髓后再重復(fù)上步驟，觀察有何反應(yīng)。注意事項(xiàng)1制備脊蛙時(shí)，顱腦離斷的部位要適當(dāng)，太高因保留部分腦組織而可能出現(xiàn) 自主活動(dòng)，太低又可能影響反射的產(chǎn)生。2用硫酸溶液或浸有硫酸的紙片處理蛙的皮膚后，應(yīng)迅速用自來(lái)水清洗，以 清除皮膚上殘存的硫酸，并用紗布擦干，以保護(hù)皮膚并防止沖淡硫酸溶液。3浸入硫酸溶液部位應(yīng)限于一個(gè)趾尖，每次浸泡范圍應(yīng)一致，切勿浸入太多。實(shí)驗(yàn)結(jié)果1描述各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，探討形成的機(jī)制。2說(shuō)出有反射活動(dòng)時(shí)的反射弧的組成。思考題1右側(cè)坐骨神經(jīng)被剪斷后，動(dòng)物的反射活動(dòng)發(fā)生了什么變化 ？這是損傷了反射 弧的哪一部分？2. 剝?nèi)ブ宏P(guān)節(jié)以下皮膚后，不再出現(xiàn)原有的反射活動(dòng)，為什么？可能出現(xiàn)的問(wèn)題與解釋在測(cè)反射時(shí)時(shí)，有可能出現(xiàn) H2SO4的濃度低，反而反射時(shí)短。（1）隨著實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，標(biāo)本產(chǎn)生了適應(yīng)性，反應(yīng)靈敏性下降，因此濃度增加，反射時(shí)有可能增加。（2）標(biāo)本本身興奮性就很低。實(shí)驗(yàn)八胃腸運(yùn)動(dòng)和小腸吸收觀察實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察胃腸道的各種形式的運(yùn)動(dòng)，以及神經(jīng)和體液因素對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)。了解小腸吸收與內(nèi)容物滲透壓間的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)原理消化道平滑肌具有自動(dòng)節(jié)律性，可以形成多種形式的運(yùn)動(dòng)，主要有：緊張性收縮、蠕動(dòng)、分節(jié)運(yùn)動(dòng)及擺動(dòng)。在整體情況下，消化道平滑肌的運(yùn)動(dòng)受到神經(jīng)和 體液的調(diào)節(jié)。阿托品具有松弛內(nèi)臟平滑肌的作用，可用于治療解除平滑