cobas c 702 工作原理精品課件

1、 1. 1.光學(xué)檢測原理光學(xué)檢測原理 2. ISE2. ISE檢測原理檢測原理 光路圖光路圖 最新 PPT 光學(xué)原理光學(xué)原理當(dāng)光通過溶液時，溶液中不同物質(zhì)會吸收不同波長的光，吸收的越多，透過的越少。溶液中物質(zhì)的濃度與吸收光的強弱（吸光度）呈一定的數(shù)學(xué)關(guān)系。 最新 PPT 朗勃朗勃- -比爾定律比爾定律( (Lambert-Lambert- Beers Law)Beers Law)The Lambert-Beer law 就是溶液中物質(zhì)的濃度與吸光度呈線性關(guān)系A(chǔ) = A = * * c c * * l lc:溶液中測量物質(zhì)的濃度 :摩爾吸光系數(shù)l: 光徑由于由于 and l 都是常量，所以能夠得

2、到 AbsAbs concconc 最新 PPT Lambert- Beers LawLambert- Beers Law（朗勃（朗勃- -比爾定律）比爾定律）如果不知道，就需要計算測量物質(zhì)的定標(biāo)曲線。然后跟據(jù)未知濃度的物質(zhì)的測不知道，就需要計算測量物質(zhì)的定標(biāo)曲線。然后跟據(jù)未知濃度的物質(zhì)的測量吸光度值，結(jié)合定標(biāo)曲線計算該物質(zhì)的濃度，如下圖。量吸光度值，結(jié)合定標(biāo)曲線計算該物質(zhì)的濃度，如下圖。 Concentration (amount of substance)Absorbance (amount of color)40123456706050302010Calibrator/standard

3、(cfas)Unknown sampleC Cobas c obas c 702702 定標(biāo)概念定標(biāo)概念 Lot calibrationLot calibrationReagent lot specificCalibration of a cassette, which is 24 h on board. Newest calibration Newest calibration Calibration to be transferred Calibration (newest、 Lot. Calibration) is transferred to cassette, which does

4、not have any calibration data.Cobas c 702 Cobas c 702 定標(biāo)類型定標(biāo)類型定標(biāo)品定標(biāo)品S1S1小數(shù)點位數(shù)與計算小數(shù)點位數(shù)與計算K K值得關(guān)系值得關(guān)系如果修改了定標(biāo)品如果修改了定標(biāo)品1的小數(shù)點位數(shù)，該注意什么？的小數(shù)點位數(shù)，該注意什么？Cell Blank MeasurementsCell Blank Measurements1.1.Stored Cell Blank Stored Cell Blank ：周保養(yǎng)杯空白數(shù)據(jù)，做為比色杯本底保存在周保養(yǎng)杯空白數(shù)據(jù)，做為比色杯本底保存在系統(tǒng)內(nèi)，每執(zhí)行一次系統(tǒng)內(nèi)，每執(zhí)行一次Cell Blank meas

5、urement ,Cell Blank measurement ,杯空白數(shù)據(jù)自動更新。杯空白數(shù)據(jù)自動更新。2.Passing Cell Blank 2.Passing Cell Blank ：每個比色杯用于分析測量之前進(jìn)行的杯空每個比色杯用于分析測量之前進(jìn)行的杯空白測量，該杯空白數(shù)據(jù)與白測量，該杯空白數(shù)據(jù)與Stored Cell Blank Stored Cell Blank 比較不超過比較不超過0.1ABS 0.1ABS 為合格。為合格。1 1）某個比色杯連續(xù)兩次）某個比色杯連續(xù)兩次Passing Cell Blank Passing Cell Blank 與與Stored Cell Bla

6、nk Stored Cell Blank 超過超過0.1ABS0.1ABS，儀器報，儀器報“Abnormal cell blank (twice) Abnormal cell blank (twice) ”, ,儀器自動啟用該比色杯。儀器自動啟用該比色杯。2 2）連續(xù)）連續(xù)1010個比色杯連續(xù)兩次個比色杯連續(xù)兩次Passing Cell Blank Passing Cell Blank 與與Stored Cell Blank Stored Cell Blank 超過超過0.1ABS0.1ABS，儀器報，儀器報“Abnormal cell blank (ten times) Abnormal c

7、ell blank (ten times) ”, ,儀器自動停下來，不儀器自動停下來，不能進(jìn)行樣本檢測。能進(jìn)行樣本檢測。 （ 哪些情況會報哪些情況會報10X10X？）？）光度計檢查（光度計檢查（Photometer CheckPhotometer Check）：）：包含在日保養(yǎng)維護(hù)組合里，是指包含在日保養(yǎng)維護(hù)組合里，是指第一個比色杯在第一個比色杯在1212個波長的空白吸光度值。（個波長的空白吸光度值。（解讀解讀） 最新 PPT C 702 反應(yīng)順序反應(yīng)順序Cobas c 702 10分鐘反應(yīng)時間共測38個點，測光間隔為16.2秒。兩點終點法兩點終點法R3一點終點法一點終點法兩點速率法兩點速率法

8、速率速率A A法法Last mp1st. mpSample Reag. at R1 timing 1.1.光學(xué)檢測原理光學(xué)檢測原理 2. ISE 2. ISE檢測原理檢測原理 Modular ISE Modular ISE 檢測所需要的電極檢測所需要的電極1 1、ISEISE電極電極RefRef電極電極內(nèi)部充滿 KCL凝膠，外部的 KCL參比液流經(jīng)電極內(nèi)部，管路有微孔與凝膠相通，然后與樣本流混合，提供穩(wěn)定的參比信號RefRef電極在機(jī)穩(wěn)定性：至少電極在機(jī)穩(wěn)定性：至少6 6個月個月2 2、ISEISE電極電極 NaNa電極電極 玻璃膜電極3 3、ISEISE電極電極 K K電極電極 PVC膜電極

9、4 4、ISEISE電極電極 ClCl電極電極 PVC膜電極K K、NaNa、ClCl在機(jī)穩(wěn)定性：在機(jī)穩(wěn)定性：3 3個月或個月或90009000個測試個測試Ref. 參比電極- 每個電極所測得的信號都是相對于參比電極而言的每個電極所測得的信號都是相對于參比電極而言的- 每個離子電極都與參比電極形成回路每個離子電極都與參比電極形成回路- 電動勢電動勢 (EMF): 是指參比電極和離子電極之間的電壓是指參比電極和離子電極之間的電壓鹽橋混合液KCl 樣本- 參比電極提供一個穩(wěn)定的測定信號參比電極提供一個穩(wěn)定的測定信號- 參比電極液使用的是參比電極液使用的是1mol 的的KCl 溶液溶液1. 分注分注

10、550l 的內(nèi)標(biāo)液的內(nèi)標(biāo)液 (IS) 進(jìn)行沖洗進(jìn)行沖洗2. 沖洗完后，真空吸干內(nèi)標(biāo)液沖洗完后，真空吸干內(nèi)標(biāo)液3. 注射器抽取注射器抽取 65l KCl參比電極液通過參比電極形成鹽橋參比電極液通過參比電極形成鹽橋4. 分注分注500l 的的 IS 進(jìn)入進(jìn)入TOWER用于用于1點定標(biāo)點定標(biāo)5. 其中其中300l 的的IS被吸取通過電極進(jìn)行被吸取通過電極進(jìn)行1點定標(biāo)點定標(biāo)6. 真空吸干內(nèi)標(biāo)液真空吸干內(nèi)標(biāo)液TOWER TOWER 內(nèi)剩余的內(nèi)標(biāo)液內(nèi)剩余的內(nèi)標(biāo)液7. 15l 的標(biāo)本被吸入的標(biāo)本被吸入TOWERTOWER內(nèi)內(nèi)8. 450l 的稀釋液被吸入對標(biāo)本進(jìn)行稀釋及混勻的稀釋液被吸入對標(biāo)本進(jìn)行稀釋及混勻

11、9. 注射器再抽取注射器再抽取 65l KCl65l KCl參比電極液通過參比電極形成鹽橋鹽參比電極液通過參比電極形成鹽橋鹽10. 350l 被稀釋好的樣本被吸收通過電極進(jìn)行檢測被稀釋好的樣本被吸收通過電極進(jìn)行檢測11. 真空吸走剩余的樣本到廢液系統(tǒng)真空吸走剩余的樣本到廢液系統(tǒng) PreparationPreparationInternal StandardInternal StandardSampleSampleISE檢測過程檢測過程由此可知，由此可知，每個標(biāo)本消耗樣每個標(biāo)本消耗樣15ul 、DIL 450ul、REF130UL、IS 550ul（連續(xù)測量）（連續(xù)測量）/1100L（單次測量）

12、（單次測量）ISE ISE 定標(biāo)定標(biāo)在在rack receptionrack reception模式每模式每1010分鐘執(zhí)行一次分鐘執(zhí)行一次or or 檢測標(biāo)本時檢測標(biāo)本時。每24h24h執(zhí)行一次執(zhí)行一次一點定標(biāo)一點定標(biāo)全點定標(biāo)全點定標(biāo)補償內(nèi)部系統(tǒng)的變化Full point calibration:- 電極老化(slop)- 當(dāng)前系統(tǒng)條件或試劑的偏差(offset)- 系統(tǒng)污染導(dǎo)致的電極響應(yīng)速率和攜帶污染1 point calibration:- 在樣本測量之間的IS測量 考慮基于系統(tǒng)的漂移(如: 溫度變化，電極膜的改變)ISE Standard 1 (Low)aqueous ISE Stan

13、dard 2 (High) aqueous ISE Standard 3 (Compensator)protein basedISE Standard 3 (High)CalibratorsCalibratorsS1-LowS1-Low and S2-HighS2-High are measured for Na, KNa, K and ClClS1 - LowS1 - Lowmmol/Lmmol/LS1 HighS1 Highmmol/Lmmol/LNaNa120160K K37ClCl801202 point calibration2 point calibrationInternal s

14、tandard solutionInternal standard solution 每次檢測之前 補償電極相應(yīng)的偏移和改變S1 LowS1 Lowmmol/Immol/IS2 HighS2 Highmmol/Immol/IInternal StandardInternal Standardmmol/I mmol/I NaNa120160140K K375ClCl80120100ISE ISE 的電動勢測量的電動勢測量S1、S2、S3分別測量三次，每次測量取分別測量三次，每次測量取5個點的電動勢，在這個點的電動勢，在這5個點的值中個點的值中會去掉一個最高和一個最低值，取剩下的三個點的平均值作為

15、結(jié)果。會去掉一個最高和一個最低值，取剩下的三個點的平均值作為結(jié)果。如果在這三個值中最大偏差超過以下范圍：Na 0,7 mV K 1,0 mV CI 0,8 mV儀器將產(chǎn)生一個 NOISE的報警。3 73 780 - 12080 - 120120 - 160120 - 160Log Transformation Log Transformation Signal to concentration relationshipSignal to concentration relationship010cEMF1001000Log of concentration)10(.SlopeEMFEMFISS

16、ampleISsampleCvalueCompCTestIS EMFS1 EMFS2 EMFS3 EMFSlopeSlopeIS concS3 concC valueNa-33.6-37.3-30.6-34.153.653.6141138-2K-33.3-45.4-26.1-36.852.452.45.14.37-0.12Cl131.8134.4127.1131.4-41.5-41.592943Raw Data signal as mVCalculated values from std curveISE ISE 定標(biāo)定標(biāo) 定標(biāo)基本信息定標(biāo)基本信息ISE ISE 定標(biāo)定標(biāo) 斜率計算斜率計算Sl

17、opesTargetmV/ decadeMargin mV/ decadeFailed (Slope?)Na+50 - 6845 49.9 45K+50 - 6845 49.9 -3512log121log2log12CSCSEMFSEMFSCSCSEMFSEMFSSlope由以上公式可知，在ISE硬件無故障的情況下，斜率是由S1和S2定標(biāo)品EMF和濃度決定。內(nèi)標(biāo)的計算內(nèi)標(biāo)的計算1 1點定標(biāo)點定標(biāo) 內(nèi)部定標(biāo)在每次定標(biāo)和做每個標(biāo)本前進(jìn)行 . 飄移得到糾正- 電導(dǎo)線的連接電勢變化、 膜、試劑，系統(tǒng)溫度Example NaExample NaIS EMF = -33.6 mVReading from

18、 the curve gives a Internal Std concentration of 141Internal StandardInternal StandardISE Calibration curveISE Calibration curveISE ISE 3. Internal standard calculation 內(nèi)標(biāo)液濃度由斜率決定 IS的EMFs 必須在S1和 S2的EMF均值附近 由于IS濃度須用于每次病人結(jié)果計算， 所以更換內(nèi)標(biāo)液后應(yīng)該重新定標(biāo)補償值的計算補償值的計算 現(xiàn)有補償液用完后，將使用S2替代作為S3。 補償值（C. value）在每次結(jié)果計算時自動對結(jié)果

19、進(jìn)行糾正S1 K K+ + : -45.445.4 S2 K K+ + : -26.126.1S3的濃度是由斜率（Slope）t S3 的EMFIS的濃度及電動勢所共同決定的所共同決定的. .ISE ISE 定標(biāo)定標(biāo)補償值的計算補償值的計算ISE ISE 3. Compensation Value CalculationTEST IS.EMF IS.EMF S1 EMF S1 EMF S2 EMF S3 EMF S2 EMF S3 EMF SLOPE IS.CONC. S3 CONC. C.VALUESLOPE IS.CONC. S3 CONC. C.VALUE Na -33.6 -37.3

20、-30.6 -34.1 53.6 141 138138 -2-2 K K -33.3 - -45.4 -26.1 -36.8 52.4 5.1 4.37 4.37 -0.12-0.12 Cl 131.8 134.4 127.1 131.4 -41.5 92 94 94 7 7ISE ISE 3. Compensation Value Calculation)10(.SlopeEMFEMFISSampleISsampleCvalueCompC 定標(biāo)監(jiān)測報告中的補償值是給定的靶值減去測定的濃度值所得 每一個標(biāo)本檢測的結(jié)果都將加上相應(yīng)的補償值，得到最后的標(biāo)本結(jié)果CIS : 內(nèi)標(biāo)液濃度EMFSampl

21、 樣本中特定離子的電壓差EMFIS 內(nèi)標(biāo)液中特定離子的電壓差 ISE check ISE check Na EMF K EMF Cl EMF REF EMF-32.0-34.4132.80.2-32.0-34.4132.70.2-32.0-34.5132.70.2-32.1-34.5132.70.2-32.1-34.5132.80.2-32.0-34.5132.80.1-32.1-34.6132.80.2-32.0-34.6132.80.2-32.0-34.6132.90.2-32.0-34.5132.90.3-32.1-34.5133.00.3-32.1-34.5132.90.3-32.1-

22、34.6132.80.3-32.1-34.6132.80.2-32.1-34.7132.80.2-32.1-34.7132.80.2-32.0-34.8132.90.2-32.1-34.7132.90.2-32.0-34.8132.80.1ISE CHECK 是只檢測是只檢測IS液流液流經(jīng)經(jīng)ISE檢測單元時，各電極的電檢測單元時，各電極的電動，勢，不用動，勢，不用DIL，如右圖。，如右圖。執(zhí)行執(zhí)行ISE Check 了解了解ISE的管的管路狀況路狀況總結(jié)總結(jié)Thank you for your attentionThank you for your attentionRoche Diagnos

23、tics (Shanghai) Limited Shanghai 200031ChinaThis presentation is our intellectual property. Without our written consent, it shall neither be copied in any manner, nor used for manufacturing, nor communicated to third parties.COBAS and LIFE NEEDS ANSWERS are trademarks of Roche9、 人的價值，在招收誘惑的一瞬間被決定。22.2.622.2.6Sunday, February 06, 202210、低頭要有勇氣，抬頭要有低氣。*2/6/2022 9:02:45 PM11、人總是珍惜為得到。22.2.6*Feb-226-Feb-2212、人亂于心，不寬余請。*Sunday, February 06, 202213、生氣是拿別人做錯的事來懲罰自己。22.2.622.2.6*February 6, 202214、抱最大的希望，作最大的努力。2022年2月6日星期日*22.2.615、一個人炫耀什么，說明他內(nèi)心缺少什么。2022年2月*22.2.6*February 6, 20