五磨飲合四逆散配方顆粒與傳統(tǒng)合煎劑的定性定量比較

1、五磨飲合四逆散配方顆粒與傳統(tǒng)合煎劑的定性定量比較 作者：鄒萍，田祥琴，郭明娟，黃靜，韓英光【摘要】 目的 對(duì)五磨飲合四逆散配方顆粒和傳統(tǒng)合煎劑進(jìn)行定性定量比較。方法 采用薄層層析（）進(jìn)行定性比較和高效液相色譜法（）測定芍藥苷的含量。結(jié)果 結(jié)果顯示，配方顆粒與合煎劑的化學(xué)成分種類相似，但合煎劑的斑點(diǎn)比配方顆粒的斑點(diǎn)更明顯；研究表明，芍藥苷在 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（ ），平均加樣回收率為，（），配方顆粒中芍藥苷含量約為合煎劑的。結(jié)論 傳統(tǒng)合煎劑與配方顆粒兩者的化學(xué)成分基本相同，但芍藥苷含量略有差異。 【關(guān)鍵詞】 五磨飲合四逆散；配方顆粒；芍藥苷；薄層層析；定性；定量 五磨飲合四逆散是五磨飲子和四逆散

2、兩個(gè)方劑的合方。五磨飲子首見于清汪昂醫(yī)方集解，由沉香、木香、檳榔、枳實(shí)、烏藥味中藥組成，功效為破滯降逆，“治暴怒氣厥卒死”。四逆散出自傷寒論，由柴胡、白芍、枳實(shí)、甘草組成，用于治療氣郁證，四肢厥逆。五磨飲合四逆散是在這兩個(gè)方劑的基礎(chǔ)上加減，由沉香、烏藥、木香、枳殼、柴胡、白芍、甘草、薤白、黃連以及肉桂味中藥組成的合方，具有行氣理氣、和表解里、疏肝理脾等功效。 中藥配方顆粒是運(yùn)用現(xiàn)代化科學(xué)技術(shù)將傳統(tǒng)中藥飲片分別提取、濃縮、干燥成的顆粒劑，使用時(shí)按處方劑量取各味配方顆粒，直接加熱水溶解后飲用，具有不需煎煮、方便、快捷、安全、衛(wèi)生等特點(diǎn)，更能適應(yīng)現(xiàn)代社會(huì)快節(jié)奏的生活方式和臨床應(yīng)用的需要。由于配方顆粒

3、與傳統(tǒng)煎劑的水煎方式不同（前者為分煎，而后者為合煎），可能存在提取成分的差異。為了比較兩者之間的異同，本實(shí)驗(yàn)對(duì)五磨飲合四逆散的配方顆粒與合煎劑進(jìn)行了薄層層析（）定性比較和芍藥苷高效液相色譜（）定量比較?，F(xiàn)將實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果報(bào)道如下。 實(shí)驗(yàn)材料 儀器 高效液相色譜儀（日本島津公司）；電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；超聲波清洗器；離心機(jī)（北京醫(yī)療儀器修理廠）。 試藥 芍藥苷對(duì)照品購自中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)：，規(guī)格：；中藥飲片與配方顆粒由深圳三九現(xiàn)代中藥有限公司提供，根據(jù)生產(chǎn)記錄，中藥飲片為同批次配方顆粒生產(chǎn)原材料；乙腈為色譜純，其他試劑為分析純。 方法與結(jié)果 薄層層析定性比較 供試品

4、溶液的制備 按日處方量稱取藥材，加倍量水浸泡 ，煎煮 ，濾過；藥渣再加入倍量水，煎煮 ，濾過；合并兩次濾液，減壓濃縮至 ，即得合煎劑母液。量取母液 ，用石油醚（ ）萃取次，每次 ，分取、合并石油醚層，減壓濃縮至干。殘留物用 甲醇溶解即得供試液。石油醚萃取后的水層，揮去殘留的石油醚后，再用水飽和的正丁醇萃取次，每次 ，分取、合并正丁醇層，減壓濃縮至干，殘留物用 甲醇溶解作為供試液。 按日處方量取相應(yīng)配方顆粒，加入 沸水溶解，作為配方顆粒母液。量取該母液 ，以下按合煎劑供試液制備方法同樣操作，分別制成配方顆粒供試液，。 比較分析 分別取供試液和各 ，點(diǎn)樣于同一硅膠薄層板上，以環(huán)己烷乙酸乙酯（）為展

5、開劑，展開約 后，取出，晾干，在紫外燈（ ）觀察斑點(diǎn)的數(shù)量及熒光的強(qiáng)弱；然后噴硫酸乙醇液，加熱至顯色，日光下觀察斑點(diǎn)的數(shù)量及色澤的深淺。 另分別取供試液和各 ，點(diǎn)樣于同一硅膠薄層板上，以氯仿甲醇水（）下層為展開劑，展開約 后，取出晾干，噴硫酸乙醇液，加熱至顯色。日光下觀察斑點(diǎn)的數(shù)量及色澤的深淺。 結(jié)果 供試液和的在紫外燈（ ）下顯示，兩者的熒光斑點(diǎn)數(shù)量基本一致，但供試液的斑點(diǎn)比供試液的斑點(diǎn)更明顯；噴硫酸乙醇液加熱顯色后，也顯示了相同的結(jié)果；供試液和的硫酸顯色后，兩者的斑點(diǎn)數(shù)量基本一致，但供試液的斑點(diǎn)比供試液的斑點(diǎn)更明顯。 芍藥苷含量測定 色譜條件 色譜柱：色譜柱（ ， ）；流動(dòng)相：乙腈水（）；

6、檢測波長： ；流速： ；柱溫：室溫。 供試品溶液的制備 精密量取“”項(xiàng)下合煎劑母液 ，減壓濃縮至干后，精密加入乙醇 ，稱質(zhì)量，超聲波震蕩 ，加溶劑補(bǔ)足質(zhì)量，離心（ ） ，精密量取上清液 ，定容至 ，作為合煎劑供試品溶液。另精密量取“”項(xiàng)下配方顆粒母液 ，按合煎劑供試液制備方法同樣操作，制成配方顆粒供試品溶液。 對(duì)照品溶液的制備 精密稱定芍藥苷對(duì)照品 ，用甲醇配制成 的對(duì)照品溶液。 標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性關(guān)系考察 按“”的色譜條件，分別精密吸取對(duì)照品溶液、 ，進(jìn)樣分析，以芍藥苷的絕對(duì)進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。回歸方程為： Y X （ ） 結(jié)果表明芍藥苷在 范圍的線性關(guān)系良好。 陰

7、性實(shí)驗(yàn) 按日處方量取除白芍配方顆粒以外的其他顆粒，按“”項(xiàng)下方法制得陰性對(duì)照溶液，精密吸取陰性對(duì)照溶液 ，按“”的色譜條件進(jìn)行分析。陰性對(duì)照溶液在芍藥苷色譜峰保留時(shí)間附近未見干擾峰，說明所確定的色譜條件可以用于芍藥苷的含量測定。對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性對(duì)照品溶液的色譜圖見圖。 精密度試驗(yàn) 精密吸取芍藥苷對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣次，每次 ，測定峰面積，并計(jì)算其為（），表明儀器精密度良好。 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取芍藥苷對(duì)照品溶液 ，間隔 進(jìn)樣次，重復(fù)進(jìn)樣次，測定峰面積值，計(jì)算其為（），表明芍藥苷溶液在 內(nèi)穩(wěn)定。 重現(xiàn)性試驗(yàn) 精密稱取同一批樣品份，按“”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“”的色譜條件進(jìn)行測定

8、，計(jì)算樣品中芍藥苷含量的為，表明分析方法重現(xiàn)性良好。 加樣回收率試驗(yàn) 精密量取已知芍藥苷含量的樣品份，等量加入對(duì)照品，按“”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“”的色譜條件進(jìn)行測定，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見表。 樣品含量測定 按“”項(xiàng)下方法制備配方顆粒和合煎劑的供試品溶液各份，編號(hào)為、，進(jìn)樣測定，結(jié)果見表。 結(jié)果 配方顆粒和合煎劑中均可測定芍藥苷的含量，但前者中的含量較后者低，約為后者的。 討論 五磨飲合四逆散配方顆粒和合煎劑的比較結(jié)果表明，兩者的脂溶性成分（石油醚萃取液）和水溶性成分（正丁醇萃取）的種類基本相同，但合煎劑顯示斑點(diǎn)的色澤均較配方顆粒更明顯。 本實(shí)驗(yàn)成功的建立了芍藥苷含量的測定方法。并對(duì)方法的精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性等進(jìn)行了考察，結(jié)果顯示該測定條件良好，可以用于五磨飲合四逆散配方顆粒及合煎劑中芍藥苷的含量測定。 采用所建立法分別對(duì)五磨飲合四逆散配方顆粒和合煎劑中芍藥苷的含量進(jìn)行了測定和比較，結(jié)果顯示配方顆粒中芍藥苷的含量比合煎劑中的含量低，約為合煎劑中芍藥苷含量的。 配方顆粒是適應(yīng)現(xiàn)代快節(jié)奏生活方式而出現(xiàn)的，具有使用方便、便于攜帶、衛(wèi)生等優(yōu)點(diǎn)，正逐漸為人們所接受。雖然本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示，五磨飲合四逆散配方顆粒與傳統(tǒng)中藥合煎劑之間的化學(xué)成分種類基本相同，但存在量的差異。但也不能據(jù)此就否認(rèn)配方顆粒，尚需