健延齡膠囊中大黃素大黃素甲醚含量測定

1、    健延齡膠囊中大黃素大黃素甲醚含量測定王水英李勇軍 提要利用薄層掃描法測定了健延齡膠囊中大黃素、大黃素甲醚的含量。平均回收率分別為99.08%、99.12%；RSD分別為3.094%、2.818%；回歸方程分別為Y=1023.58+5171.65 X、Y=166.19+4952.90 X；相關系數分別為=0.994、=0.996。 關鍵詞健延齡膠囊；大黃素；大黃素甲醚；薄層掃描法 健延齡膠囊由制首烏、熟地黃、珍珠等中藥制成，具有填精髓、養(yǎng)氣血、調臟腑、固本原的功效。君藥何首烏投料量大，為主要滋補中藥。應用薄層掃描法測定主要成分大黃素、大黃素甲醚的含

2、量。該方法重現性好，專屬性強，簡便、可靠。 1儀器和試藥 島津CS-930型雙波長薄層掃描儀；大黃素、大黃素甲醚由中國藥品生物制品檢定所提供；健延齡膠囊由蘇州雷允上制藥廠提供；試劑均為分析純。 2實驗條件的選擇 2.1展開劑的選擇1：何首烏的薄層鑒別可供選用的展開劑較多，經預試兩種展開劑展開效果較好，石油醚(60 )甲酸乙酯甲酸(1551)及正乙烷醋酸乙酯甲酸(30100.5)。因前者的兩個被測成分分離間距較大，便于測定，故本實驗選用前者作為展開劑(展開劑配制后有分層現象，放置30 min，吸取上層液使用)，上行展開，展距為7 cm，展開效果見圖1。 圖1健延齡膠囊的薄層圖譜 1.大黃素甲醚2

3、.大黃素3.對照藥材(何首烏)4.空白對照59樣品 2.2掃描條件的選擇2：=440 nm，SX=3，光斑1.2×1.2 mm2，反射法鋸齒掃描，外標二點法進行定量。 2.3線性關系：精密吸取標準液1 l、2 l、3 l、4 l、5 l、6 l點于同一薄層板，按上述條件展開，掃描，結果見表1。 表1標準品斑點掃描結果 成分 1 l 2 l 3 l 4 l 5 l 6 l 大黃素 4943.150 12318.96 16432.76 23261.21 26549.40 31240.78 大黃素甲醚 4090.836 10340.49 143853.31 20304.64 23873.2

4、5 經數據處理得回歸方程。大黃素Y=1023.58+5171.65 X；=0.994，線性范圍為0.6804.080 g；大黃素甲醚Y=166.19+4952.90 X，=0.996，線性范圍為0.6023.010 g。 3穩(wěn)定性試驗 精密吸取樣品液2 l，點樣，展開，自零h開始間隔一段時間掃描測定，結果見表2。 表2穩(wěn)定性試驗結果 成分 不同時間測定結果 0 min 15 min 30 min 45 min 大黃素 32474.30 32060.72 32669.49 32397.30 大黃素甲醚 14250.60 14058.21 14795.36 14791.74 成分 不同時間測定結果

5、 RSD(%) 60 min 90 min 150 min 210 min 大黃素 32148.48 32135.51 32019.36 31973.46 0.76 大黃素甲醚 14592.24 14452.25 14172.20 14003.29 2.79 4精密度試驗 精密吸取等量樣品液點于同一薄層板上，按上述條件展開，掃描。結果見表3。 表3精密度試驗結果 成分 測定結果 1 2 3 4 大黃素 31485.58 30890.97 32207.47 31873.71 大黃素甲醚 16222.91 16521.76 16355.85 16215.45 成分 測定結果 RSD(%) 5 6

6、7 8 大黃素 31524.91 32350.66 32034.83 32187.54 1.54 大黃素甲醚 15492.06 16392.84 16328.41 15957.19 2.01 5重現性試驗 精密稱取同一批號樣品6份，各約5 g，依法制得供試液，點樣后按上述條件展開，掃描測定，結果見表4。 表4重現性試驗結果(%) 成分 測定結果 RSD 1 2 3 4 5 6 大黃素 1.9778 1.9900 1.9789 2.0095 1.9310 2.0249 1.63 大黃素甲醚 0.9881 1.0092 1.0592 1.0151 0.9625 0.9443 3.23 6回收率試驗

7、 分別精密稱取同一樣品5份，各約2 g，務精密加入大黃素、大黃素甲醚標準品，依法制得供試液，點樣，展開，掃描測定，結果見表5。 表5回收率試驗 成分 測定結果 RSD(%) 1 2 3 4 5 大黃素 加樣量(mg) 0.29 6.31 0.30 0.30 0.33 回收率(%) 96.24 101.55 97.64 98.22 103.74 3.094 平均回收率(%) 99.08 大黃素醚 加樣量(mg) 0.38 0.38 0.38 0.42 0.42 回收率(%) 98.13 99.63 103.81 97.29 96.96 2.188 平均回收率(%) 99.12 7樣品測定 7.1

8、標準溶液的制備：精密稱取大黃素標準品，加甲醇2 ml，使成每ml含0.680 mg的溶液；精密稱取大黃素甲醚標準品，加氯仿2ml，使成每ml含0.602 mg的溶液，備用。一般文獻中大黃素類標準品均用甲醇溶解，但實際操作中大黃素標準品在甲醇中溶解性較好，而大黃素甲醚則不能全溶，但在氯仿中溶解性很好，因不影響測出結果，故選用不同溶劑溶解標準品。 7.2樣品液的制備：取本品20粒，傾內容物，研細，精密稱定5 g，加甲醇100 ml，置90 水浴上回流3 h(用索氏提取器，提取時間以虹吸管中溶液近無色為度)，濾過，濾液回收甲醇，再蒸干，殘渣加水20 ml使溶解，加鹽酸2 ml，置水溶上直火回流30

9、min，以使結合型蒽醌充分水解，立即冷卻，用乙醚萃取5次，依次為50 ml、40 ml、30 ml、20 ml、20 ml。合并乙醚提取液，蒸干，殘渣加氯仿溶解使成1 ml。備用。 7.3測定方法：用微量注射器吸取標準液2 l、4 l，樣品液3 l，分別點于同一以0.3% CMCNa為粘合劑的硅膠H薄層板上，按上述層析、掃描條件，外標二點法計算含量。結果見表6。 表6不同批號含量測定結果() 批號 大黃素 大黃素甲醚 批號 大黃素 大黃素甲醚 920426 2.0093 09020 941024 1.6420 0.7540 930516 2.1507 0.8793 970129 2.0840 0.7993 930520 2.0733 0.8413 970614 1.8713 0.8227 940916 2.2063 0.7253 971208 1.9447 0.9840 941018 1.7920 0.7325 980108 2.1560 1.0100 8小結 采用薄層掃描法測定健延齡膠囊中大黃素、大黃素甲醚的含量，方法簡便且快速。依據含量最低下限一般為10批號樣品的平均含量的80%的原則，那么10批樣品中大黃素平均含量為1.993%，含量限度應該不少于1.5944%；大黃素甲醚平均含量為0.8450%，含量限度不少于0.6760%。 作者單位:(王水英)江蘇