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1、選修1 生物技術(shù)實(shí)踐(4)一、選擇題(每小題5分,共35分)1下列關(guān)于影響植物組織培養(yǎng)的因素的敘述不正確的是()。A幼嫩組織較成熟組織易培養(yǎng)成功B給外植體消毒用70%的酒精C接種花藥后一段時(shí)間內(nèi)不需要光照,但幼小植株形成后需要光照D生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素含量之比較高時(shí)有利于芽的分化解析生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素含量之比較高時(shí),有利于根的分化;較低時(shí),有利于芽的分化;二者相當(dāng)時(shí),促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)。答案D2(2011·南通聯(lián)考)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR技術(shù))是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期,循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,其簡(jiǎn)要過(guò)程如右
2、圖所示。下列關(guān)于PCR技術(shù)敘述不正確的是()。APCR技術(shù)是在實(shí)驗(yàn)室中以少量DNA制備大量DNA的技術(shù)B反應(yīng)中新合成的DNA又可以作為下一輪反應(yīng)的模板CPCR技術(shù)中以核糖核苷酸為原料,以指數(shù)方式擴(kuò)增D應(yīng)用PCR技術(shù)與探針雜交技術(shù)可以檢測(cè)基因突變解析PCR技術(shù)是人工合成DNA的方法,原料是脫氧核苷酸而不是核糖核苷酸。答案C3相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的行進(jìn)過(guò)程可表示為下圖中的哪一個(gè)()。解析當(dāng)相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí),相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長(zhǎng),移動(dòng)速度較慢;而相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部,路程較短,移動(dòng)速度快。B項(xiàng)符合。答案B4已知某樣
3、品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子,其分子大小、所帶電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如圖所示,下列有關(guān)該樣品中蛋白質(zhì)的分離的敘述正確的是()。A將樣品裝入透析袋中透析12 h,若分子乙保留在袋內(nèi),則分子丙也保留在袋內(nèi)B若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì),則分子甲移動(dòng)速度最快C若將樣品以2 000 r/min的速度離心10 min,分子戊存在于沉淀中,則分子甲也存在于沉淀中D若用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品中的蛋白質(zhì)分子,則分子甲和分子戊形成的電泳帶相距最遠(yuǎn)解析分子甲的分子量最小,進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道而移動(dòng)速度慢;分子乙留在透析袋內(nèi),說(shuō)明其相對(duì)分子質(zhì)量比較大,分子丙比分子乙相對(duì)分子質(zhì)量大,所以分子丙也留
4、在袋內(nèi);分子戊比分子甲的分子量大,分子甲可能不存在于沉淀物中; SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳中的樣品,其電泳遷移率完全取決于分子的大小,分子量相差越大,形成的電泳帶相距越遠(yuǎn)。答案A5(2012·金考突破卷)下表是植物組織培養(yǎng)時(shí),相關(guān)激素的使用情況及實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下列敘述錯(cuò)誤的是()。激素使用情況實(shí)驗(yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素,后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)使用,且比例適中促進(jìn)愈傷組織的形成同時(shí)使用,且生長(zhǎng)素用量較高有利于根的分化、抑制芽的形成同時(shí)使用,且細(xì)胞分裂素用量較高有利于芽的分化、抑制根的形成A.從表中信息可知,不同激素的使用順序影
5、響植物細(xì)胞的發(fā)育方向B從表中信息可知,不同激素用量比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向C在植物組織培養(yǎng)中,生長(zhǎng)素的主要作用是促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)、分裂和分化D在生長(zhǎng)素存在的情況下,細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)減弱趨勢(shì)解析如先使用生長(zhǎng)素,后使用細(xì)胞分裂素,則有利于細(xì)胞的分裂,但細(xì)胞不分化,表明在生長(zhǎng)素存在的情況下,細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)趨勢(shì),D錯(cuò)誤。答案D6(2011·江蘇南通一模)下列有關(guān)“血紅蛋白提取和分離”的相關(guān)敘述中,正確的是()。A用蒸餾水進(jìn)行紅細(xì)胞的洗滌,其目的是去除細(xì)胞表面雜蛋白B將血紅蛋白溶液進(jìn)行透析,其目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)C血紅蛋白釋放時(shí)加入有機(jī)溶劑,其目的是使血紅蛋白溶于有機(jī)
6、溶劑D整個(gè)過(guò)程不斷用磷酸緩沖液處理,是為了維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)解析紅細(xì)胞的洗滌用的是生理鹽水,其目的是去除血漿蛋白等雜質(zhì),有利于后續(xù)步驟的分離純化;而本實(shí)驗(yàn)中蒸餾水的作用是漲破紅細(xì)胞,使血紅蛋白釋放。將血紅蛋白溶液進(jìn)行透析,其目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。血紅蛋白釋放時(shí)加入有機(jī)溶劑,其目的是溶解細(xì)胞膜。整個(gè)過(guò)程不斷用磷酸緩沖液處理,是為了維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)。答案D7生物產(chǎn)品的分離、純化是現(xiàn)代生物技術(shù)中一種常見的技術(shù)。下列關(guān)于物質(zhì)提取、純化原理的敘述中,不正確的是()。A采用凝膠色譜法分離果膠酶的原理是蛋白質(zhì)分子的相對(duì)分子質(zhì)量不同,在色譜柱中的移動(dòng)速度不同B使用透析法可以去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量
7、較大的雜質(zhì)C電泳法是利用樣品中各種分子帶電性質(zhì)和數(shù)量以及樣品分子大小不同,產(chǎn)生的遷移速度不同而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離D離心法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是不同大小的分子離心時(shí)沉降速度不同解析本題考查有關(guān)物質(zhì)提取、純化的原理,意在考查考生的理解能力。透析的原理是小分子能夠通過(guò)半透膜,利用透析法可以去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。答案B二、非選擇題(共65分)8(10分)(2011·4月北京市宣武區(qū)第一次質(zhì)量檢測(cè))植物組織培養(yǎng)是克隆植物的一種方法,過(guò)程如下圖所示,回答相應(yīng)的問(wèn)題。(1)為了獲得脫毒植株,外植體往往取自植物的花芽、葉芽等處的分生組織,其原因是_。(2)培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
8、外,還需要添加植物激素,其目的是誘導(dǎo)外植體_。(3)在生產(chǎn)實(shí)踐中為獲得大量的細(xì)胞產(chǎn)物,如紫杉醇,可將_放入液體培養(yǎng)基中,經(jīng)機(jī)械作用分散成單個(gè)細(xì)胞,制備成細(xì)胞浮液,再經(jīng)過(guò)_即可獲得大量細(xì)胞。(4)組織培養(yǎng)過(guò)程需要植物生長(zhǎng)和繁殖的最適條件,否則在光學(xué)顯微鏡下可能觀察到發(fā)生_異常 ,進(jìn)而使植物出現(xiàn)遺傳不穩(wěn)定甚至不育。(5)植物組織培養(yǎng)技術(shù)不僅應(yīng)用于花卉和果樹的快速大量繁殖以及脫毒植株的獲取,還廣泛用于_、_、_等育種過(guò)程中。解析剛長(zhǎng)出的莖尖或芽尖還沒(méi)有受到病毒的侵染,因此用這些部位的細(xì)胞做植物組織培養(yǎng)的材料,可以獲得脫毒植株。在植物組織培養(yǎng)時(shí),常用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素來(lái)誘導(dǎo)植物形成愈傷組織,生根發(fā)芽,
9、從而形成新的植物體。在植物形成愈傷組織時(shí),此時(shí)很容易發(fā)生細(xì)胞融合,從而使植物發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)或數(shù)目的變異。植物組織培養(yǎng)技術(shù)除了用于微型繁殖、脫毒植株的培育外,還可以用于植物體細(xì)胞雜交、基因工程育種和單倍體育種等多個(gè)方面。答案(1)這些部位很少受到病毒等病原體的侵害(2)脫分化和再分化(3)愈傷組織細(xì)胞分裂(4)染色體結(jié)構(gòu)與數(shù)目(5)植物體細(xì)胞雜交育種基因工程育種單倍體育種9(10分)下面是某研究小組開展的“豬血漿某白蛋白的提取及分子量測(cè)定”研究,請(qǐng)協(xié)助完成有關(guān)問(wèn)題:材料儀器:新鮮豬血、低速冷凍離心機(jī)、透析袋、電泳儀等?;瘜W(xué)試劑:pH為7.4的緩沖液、檸檬酸鈉、奈氏試劑(與NH反應(yīng)出現(xiàn)黃色或紅棕色
10、沉淀)、飽和(NH4)2SO4溶液、生理鹽水等。實(shí)驗(yàn)步驟:(1)樣品獲?。合蛐迈r豬血中加入_,靜置一段時(shí)間后取上層血漿。(2)鹽析法粗提蛋白質(zhì):向血漿中加入一定體積的飽和(NH4)2SO4溶液,使(NH4)2SO4的濃度達(dá)到50%,充分混合后靜置、離心,取沉淀物。向沉淀物中加入適量生理鹽水使之溶解,再向其中加入一定體積的飽和(NH4)2SO4溶液,使(NH4)2SO4的濃度達(dá)到33%,充分混合后靜置、離心,取沉淀物。重復(fù)步驟、23次,最后用生理鹽水將沉淀溶解即得粗提品。鹽析粗提“血漿某白蛋白”的主要原理是_,重復(fù)步驟、的主要目的是_。(3)透析除鹽:將粗提品裝入透析袋,以pH為7.4的緩沖液作
11、透析液,每隔4 h更換一次透析液,每次更換前利用奈氏試劑檢測(cè)透析液中NH的量。利用緩沖液作透析液的目的是_。檢測(cè)中,若觀察到透析液_時(shí),即可終止透析。(4)凝膠色譜法分離:透析后的樣品經(jīng)凝膠柱洗脫,獲得純凈血漿某白蛋白樣品。(5)分子量測(cè)定:化學(xué)物質(zhì)SDS能使蛋白質(zhì)變性,解聚成單條肽鏈。在聚丙烯酰胺凝膠電泳中加入一定量的SDS,電泳遷移率完全取決于肽鏈的分子大小。下圖為本實(shí)驗(yàn)中用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血漿某白蛋白的結(jié)果。根據(jù)電泳結(jié)果,某同學(xué)得出“提取的血漿某白蛋白有兩條肽鏈”的結(jié)論,這種說(shuō)法可靠嗎?理由是_。解析(1)為防止血液凝固,在采血容器中要預(yù)先加入抗凝劑檸檬酸鈉。(2)利用血漿某
12、白蛋白在一定濃度(NH4)2SO4溶液中的溶解度低的特性去除雜蛋白。(3)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、溫度過(guò)高都會(huì)使蛋白質(zhì)發(fā)生變性。(5)電泳的原理是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子的大小、形狀等的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,本實(shí)驗(yàn)只能判斷肽鏈的大小,而不能判斷其條數(shù)。答案(1)(適量的)檸檬酸鈉(2)該血漿白蛋白在50%和33%的(NH4)2SO4溶液中溶解度低除去更多的雜蛋白(3)避免因pH變化對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)造成破壞不出現(xiàn)黃色或紅棕色沉淀(5)不可靠,只能得出提取的血漿某白蛋白含有兩種大小不同的肽鏈,不一定是兩條得分要訣運(yùn)用血紅蛋白的提取和分離的基礎(chǔ)知識(shí),結(jié)合題干提供的“鹽析法粗提蛋白
13、質(zhì)”的信息,分析回答。10(15分)(2010·靖江模擬)在進(jìn)行DNA親子鑒定時(shí),需大量的DNA。PCR技術(shù)(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))可以使樣品DNA擴(kuò)增,獲得大量DNA克隆分子。該技術(shù)的原理是利用DNA的半保留復(fù)制,在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如圖,圖中黑色長(zhǎng)方形是引物)。在很短的時(shí)間內(nèi)將DNA擴(kuò)增幾百萬(wàn)倍甚至幾十億倍,使實(shí)驗(yàn)室所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。(1)圖中的變性、延伸分別是指_、_。(2)假設(shè)PCR反應(yīng)中的DNA模板為P,第一輪循環(huán)的產(chǎn)物2個(gè)子代DNA為N1,第二輪的產(chǎn)物4個(gè)子代DNA為N2,N1、N2中分別含有模板DNA單鏈的DNA分別有_個(gè)、_個(gè)。若繼續(xù)循環(huán),該DN
14、A片段共經(jīng)過(guò)30次循環(huán)后能形成_個(gè)DNA片段。(3)某樣品DNA分子中共含3 000個(gè)堿基對(duì),堿基數(shù)量滿足:,若經(jīng)5次循環(huán),至少需要向試管中加入_個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。(不考慮引物所對(duì)應(yīng)的片段)(4)若圖為第一輪循環(huán)產(chǎn)生的產(chǎn)物。請(qǐng)繪出以a鏈和b鏈為模板經(jīng)PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物。解析(1)變性的實(shí)質(zhì)是DNA雙鏈解旋;延伸的實(shí)質(zhì)是以DNA單鏈為模板,按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成子鏈的過(guò)程。(2)由于PCR原理為DNA雙鏈復(fù)制,其特點(diǎn)是半保留復(fù)制,所以無(wú)論復(fù)制幾次,模板鏈一直存在于2個(gè)DNA分子中。DNA復(fù)制的數(shù)量變化是指數(shù)式增長(zhǎng)方式。(3)由(AT)/(GC)1/2可知ATGC1122,所以A的比例為1/6,
15、在一個(gè)DNA分子中的數(shù)量為3 000×2×(1/6)1 000個(gè),5次循環(huán)的DNA數(shù)為32個(gè),所以以原料合成的DNA數(shù)相當(dāng)于32131個(gè),至少需腺嘌呤脫氧核苷酸為31×1 00031 000個(gè)。(4)畫圖的關(guān)鍵是注意引物A、B的位置和所對(duì)應(yīng)的模板鏈。答案(1)模板DNA雙鏈解旋形成單鏈在DNA聚合酶的作用下,原料脫氧核苷酸聚合形成新的DNA鏈(2)22230(3)31 000(4)如圖11(10分)閱讀下列材料,完成相關(guān)問(wèn)題。胡蘿卜素通常是橘黃色結(jié)晶,化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有機(jī)溶劑,它的化學(xué)分子式中包含多個(gè)碳碳雙鍵,根據(jù)雙鍵的數(shù)目可
16、以將胡蘿卜素劃分為、三類,胡蘿卜素是其中最主要的組成成分。胡蘿卜素具有非常重要的功用:可作為優(yōu)良的食用保健品。可作為禽畜飼料添加劑??勺鳛闋I(yíng)養(yǎng)和著色兩用的食品添加劑等。因此胡蘿卜素的提取及鑒定引起人們很大的興趣。如圖為胡蘿卜素粗品鑒定裝置示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。(1)胡蘿卜素粗品鑒定的方法名稱是_。(2)圖中b的名稱是_。a的作用是_。(3)e為_,對(duì)于e,實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)注意_。(4)f為_,常用_。(5)如果層析液沒(méi)及e會(huì)導(dǎo)致_。解析對(duì)胡蘿卜素粗品進(jìn)行鑒定采用的是紙層析法,其原理是各有機(jī)成分在層析液中的溶解度不同,而導(dǎo)致各成分隨層析液在濾紙上的運(yùn)動(dòng)速度不同,從而使各成分
17、分開。因?qū)游鲆阂讚]發(fā),故應(yīng)在色譜容器上方用玻璃蓋蓋嚴(yán)。在進(jìn)行點(diǎn)樣時(shí),應(yīng)注意點(diǎn)樣要快速細(xì)致,并保持濾紙干燥。層析液深不得超過(guò)濾紙基線,否則點(diǎn)樣處的有機(jī)成分會(huì)溶于層析液中。答案(1)紙層析法(2)色譜容器防止層析液揮發(fā)(3)樣品原點(diǎn)點(diǎn)樣應(yīng)該快速細(xì)致,并保持濾紙干燥(4)溶劑石油醚(5)胡蘿卜素溶解在層析液中,導(dǎo)致鑒定失敗12(20分)檸檬油是植物芳香油中的一種,它是一種廣譜性的殺蟲劑,可殺死蚊子、蒼蠅、蟑螂和臭蟲等傳染疾病的害蟲,以及危害糧食、蔬菜的常見害蟲,包括幼蟲、蛹等,是一種綠色殺蟲劑。(1)檸檬油的揮發(fā)性_,易溶于_,比重比較_。(2)提取檸檬油常用的原料是檸檬花與檸檬果皮,嫩的花朵在蒸餾
18、過(guò)程中,精油易被水蒸氣分子破壞,所以可采用_法。檸檬果皮中精油的提取適宜采用_法,此種方法是通過(guò)_將液相從固液兩相混合物中分離出來(lái),必經(jīng)步驟為:檸檬果皮 水洗浸泡清洗裝料壓榨和噴淋糊狀壓出液高速離心靜置分層分液檸檬精油A是_,目的是_。B是_,目的是_。C過(guò)程為_,目的是_。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中浸泡橘皮后,需用清水洗滌,其目的是_。(3)采用檸檬油作為殺蟲劑,可以解決其他殺蟲劑給人類帶來(lái)的隱患,其突出的優(yōu)點(diǎn)是_、_。(4)從生產(chǎn)綠色食品的要求出發(fā),寫出防治害蟲的三種方法:_、_、_。解析(1)(2)水中蒸餾可能發(fā)生原料的焦糊問(wèn)題,而且可能使某些有效成分高溫水解,凡存在上述問(wèn)題的應(yīng)考慮萃取法或壓榨法。用壓榨法從檸檬果皮中提取檸檬油時(shí),應(yīng)用石灰水充分處理,以提高出油率,防止壓榨時(shí)滑脫等。為了使油與水易分離,還應(yīng)加入小蘇打
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